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维生素D、辅助性t淋巴细胞17和调节性T淋巴细胞及相关细胞因子在多发性硬化青少年患者中的变化及其意义

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中华实用儿科临床杂志 2021年第14期36卷 1098-1101页

作者：刘迎春裴利宏新乡医学院护理学院河南新乡453003 新乡医学院第一附属医院检验科河南新乡453100

目的探讨外周血维生素D、辅助性t淋巴细胞17(th17细胞)和调节性T淋巴细胞(treg细胞)表达率以及血清中肿瘤坏死因子-α(tNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平在多发性硬化(MS)青少年患者发病机制中的作用。方法选取2010年1月至2020年1... 详细信息

目的探讨外周血维生素D、辅助性t淋巴细胞17(th17细胞)和调节性T淋巴细胞(treg细胞)表达率以及血清中肿瘤坏死因子-α(tNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平在多发性硬化(MS)青少年患者发病机制中的作用。方法选取2010年1月至2020年12月新乡医学院第一附属医院儿科确诊为MS的38例青少年患者作为MS组,同期的38名年龄及体质量指数相匹配的健康者作为健康对照组。采用液相色谱仪检测MS青少年患者(MS组)与健康对照者(健康对照组)外周血25-羟基维生素D3[25-(OH)D3]水平,流式细胞术检测其th17细胞和treg细胞的表达率,免疫荧光法检测血清中tNF-α、MCP-1水平。采用SPSS 22.0统计学软件分析MS组与健康对照组上述指标之间的差异及各指标间的相关性。结果MS组与健康对照组相比,外周血25-(OH)D3水平差异无统计学意义(P>0.05);th17细胞表达率明显高于健康对照组[(3.02±0.20)%比(1.99±0.16)%,t=12.03,Ptreg细胞表达率明显低于健康对照组[(4.63±0.77)%比(5.10±0.90)%,t=14.65,Pth17/treg细胞的比值明显高于健康对照组(0.25±0.07比0.17±0.05,t=16.89,PtNF-α、MCP-1水平均高于健康对照组[(26.13±5.98)ng/L比(24.45±3.01)ng/L;(122.26±37.71)ng/L比(87.95±17.66)ng/L,t=1.986、47.650,均P性;疾病复发或进展期患儿tNF-α、MCP-1水平均高于疾病缓解稳定期患儿[(17.49±3.94)ng/L比(14.45±3.81)ng/L;(90.42±23.06)ng/L比(77.55±20.56)ng/L,t=1.990、2.472,均Pth17细胞的表达率与其外周血中tNF-α、MCP-1水平均呈正相关(r=0.478、0.442,均Ptreg细胞的表达率与其外周血中的tNF-α、MCP-1水平均呈负相关(r=-0.318、-0.356,均Pth17细胞和treg细胞可能参与MS青少年患者发病的免疫病理机制;相关细胞因子的变化可能参与th17细胞和treg细胞变化的调控及炎症反应;th17细胞、treg细胞及相关细胞因子变化可能在MS的发生、发展、复发进展中起重要免疫病理机制作用。

关键词：维生素D 辅助性t淋巴细胞17 调节性T淋巴细胞多发性硬化细胞因子

外阴硬化性苔藓患者外阴组织Foxp3表达及外周血CD4^+CD25^+CD127^low调节性T淋巴细胞数量的变化及意义

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中华妇产科杂志 2020年第8期55卷 544-548页

作者：王琳易金玲陈海燕刘雁林沈艳丽新疆医科大学第五附属医院妇科乌鲁木齐830011

目的探讨外阴硬化性苔藓(VLS)患者外阴组织Foxp3表达及外周血CD4^+CD25^+CD127^low调节性T淋巴细胞(treg)数量的变化及意义。方法选取2016年8月至2018年12月新疆医科大学第五附属医院确诊的VLS患者15例(VLS组,并根据外阴活检部位分为皮... 详细信息

目的探讨外阴硬化性苔藓(VLS)患者外阴组织Foxp3表达及外周血CD4^+CD25^+CD127^low调节性T淋巴细胞(treg)数量的变化及意义。方法选取2016年8月至2018年12月新疆医科大学第五附属医院确诊的VLS患者15例(VLS组,并根据外阴活检部位分为皮损组和皮损旁组),选择同期外阴修复手术者10例(外阴对照组)和健康体检者15例(外周血对照组)分别作为外阴组织和外周血的相应对照。亚硫酸氢钠基因测序法检测外阴组织Foxp3基因启动子区的甲基化率,蛋白印迹法检测外阴组织Foxp3、DNMt1、DNMt3b蛋白的表达水平,并分析各组蛋白的表达水平与甲基化率的相关性。流式细胞仪检测外周血CD4^+CD25^+CD127^low treg数量。结果与外阴对照组比较,Foxp3蛋白的表达水平皮损组和皮损旁组均显著下降(分别为0.58±0.05、0.32±0.05、0.42±0.06;Pt1和DNMt3b蛋白的表达水平皮损组显著升高(分别为0.52±0.10、0.39±0.04;P0.05);10个CpG位点中,CpG1(皮损旁组)、CpG9(皮损组)、CpG4及CpG10(皮损旁组和皮损组)甲基化率均高于外阴对照组(Pt1蛋白的表达水平无关(P>0.05);皮损组、皮损旁组Foxp3与DNMt1蛋白的表达水平均有相关性(r=0.375,P=0.032;r=-0.665,P=0.007),而与DNMt3b蛋白的表达水平无相关(P>0.05)。VLS组患者外周血CD4^+CD25^+CD127^low treg数量明显下降[VLS组和外周血对照组分别为(6.8±1.5)%、(8.3±1.7)%;Ptreg数量减少或抑制功能异常,可导致VLS发生,这可能有部分甲基化的因素,可能与DNMt1表达上调有关。外周血CD4^+CD25^+CD127^low treg数量下降可能是VLS的发病原因之一。

关键词：调节性T淋巴细胞外阴硬化性苔藓 CD127 修复手术附属医院新疆医科大学外阴局部 DNMt1

过敏性紫癜并幽门螺杆菌感染患儿辅助性t淋巴细胞/调节性T淋巴细胞失衡的研究

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中华实用儿科临床杂志 2020年第22期35卷 1703-1707页

作者：杨晓庆郭文兴骆媚芬林宝花谷松磊沈彤厦门大学附属妇女儿童医院厦门市妇幼保健院儿内科361003

目的探讨过敏性紫癜(HSP)并幽门螺杆菌(HP)感染患儿辅助性t淋巴细胞17(th17细胞)、调节性T淋巴细胞(treg细胞)及相关细胞因子白细胞介素(IL)-17、IL-6的表达意义。方法选择2017年1月至2018年12月在厦门市妇幼保健院儿科住院并首次诊断为... 详细信息

目的探讨过敏性紫癜(HSP)并幽门螺杆菌(HP)感染患儿辅助性t淋巴细胞17(th17细胞)、调节性T淋巴细胞(treg细胞)及相关细胞因子白细胞介素(IL)-17、IL-6的表达意义。方法选择2017年1月至2018年12月在厦门市妇幼保健院儿科住院并首次诊断为HSP急性期患儿和/或HP感染患儿作为研究对象,包括HSP-HP患儿15例(HSP-HP组)、HSP患儿26例(HSP组)、HP患儿21例(HP组);选取同期同年龄健康体检儿童20例作为健康对照组,应用流式细胞分析法检测外周血th17细胞、treg细胞的比例,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-17、IL-6水平,分析和比较各组检测结果。结果1.与健康对照组[th17(1.42±0.63)%、IL-17(302.96±82.83)ng/L、IL-6(7.81±2.04)ng/L、treg(2.31±0.83)%]比较,HSP-HP组[th17(2.79±0.78)%、IL-17(552.16±121.13)ng/L、IL-6(12.36±6.55)ng/L、treg(1.35±0.49)%]、HSP组[th17(2.04±0.77)%、IL-17(506.39±113.62)ng/L、IL-6(11.82±5.01)ng/L、treg(1.13±0.86)%]、HP组[th17(2.08±0.86)%、IL-17(483.14±121.77)ng/L、IL-6(10.19±3.87)ng/L、treg(1.09±0.65)%]患儿th17细胞比例、IL-17、IL-6水平均明显升高,差异均有统计学意义(F=5.271、13.113、6.692,均Ptreg细胞比例明显下降,差异有统计学意义(F=6.983,Pth17细胞比例、IL-17水平均高于HSP组及HP组患儿,差异均有统计学意义(均Pth17细胞比例、IL-17水平差异均无统计学意义(均P>0.05);HSP-HP组、HSP组、HP组患儿组间比较treg细胞比例、IL-6水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论th17/treg表达失衡参与HSP-HP、HSP、HP的发病过程,th17细胞及其相关细胞因子IL-17水平高表达在HSP-HP患儿中更为突出。

关键词：过敏性紫癜幽门螺杆菌儿童辅助性t淋巴细胞17 调节性T淋巴细胞

慢性乙型肝炎患者肠源性内毒素血症与外周血调节性T淋巴细胞的关系

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中华肝脏病杂志 2017年第8期25卷 630-632页

作者：李红王建红郝彦琴赵龙凤韩德五山西医科大学第一医院感染病科太原030001 太原市传染病院 030012 山西医科大学太原030001

调节性T淋巴细胞（treg）是体内具有免疫抑制功能的CD4＋t淋巴细胞亚群，可分泌白细胞介素10（IL-10）、转化生长因子D（tGFD）等抑制性细胞因子，能抑制其他免疫细胞的活化、增殖及发挥效应。近年国内外研究报道，HBV感染慢性化与体内... 详细信息

调节性T淋巴细胞（treg）是体内具有免疫抑制功能的CD4＋t淋巴细胞亚群，可分泌白细胞介素10（IL-10）、转化生长因子D（tGFD）等抑制性细胞因子，能抑制其他免疫细胞的活化、增殖及发挥效应。近年国内外研究报道，HBV感染慢性化与体内存在的treg细胞异常有关，进而导致HBV特异性细胞免疫反应低下，病毒难以清除。

关键词：肝炎,乙型,慢性肠源性内毒素血症调节性T淋巴细胞

白细胞介素-35和辅助性t淋巴细胞17/调节性T淋巴细胞在正常妊娠期母体外周血中的表达

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中国妇幼保健 2023年第11期38卷 2076-2080页

作者：胡学亭魏红李玉娟刘义帅庄文玉于北凯潍坊市中医院检验科山东潍坊261041

目的检测抑制性细胞因子白细胞介素-35(IL-35)、调节性T淋巴细胞(treg)及辅助性t淋巴细胞17(th17)在女性妊娠期、非妊娠期及不明原因复发性自然流产(URSA)患者中的表达水平,探讨IL-35在维持妊娠母胎免疫耐受中的作用。方法选择2018年3月... 详细信息

目的检测抑制性细胞因子白细胞介素-35(IL-35)、调节性T淋巴细胞(treg)及辅助性t淋巴细胞17(th17)在女性妊娠期、非妊娠期及不明原因复发性自然流产(URSA)患者中的表达水平,探讨IL-35在维持妊娠母胎免疫耐受中的作用。方法选择2018年3月—2019年9月就诊于潍坊市中医院妇产科门诊的既往无流产史的正常健康妊娠女性90例,不明原因复发性自然流产患者30例,选取同一时期的非妊娠期育龄健康女性30例,按照妊娠周数将妊娠期分为3组,其中妊娠早期组30例、妊娠中期组30例及妊娠晚期组30例。采用酶联免疫吸附试验测定其外周血中IL-35、IL-17的表达水平;流式细胞技术测定辅助性t细胞17(th17)、调节性t细胞(treg)的表达,并计算th17/treg比值。结果妊娠早期、妊娠中期及妊娠晚期女性IL-35表达均显著高于非妊娠女性和URSA患者(均P性自然流产患者(P性自然流产比较,妊娠期各组女性th17细胞比例表达明显降低(均Ptreg细胞比例表达明显升高(均Pth17/treg细胞比值显著下降(均P性比较,IL-17、th17细胞比例、treg细胞比例及th17/treg细值比例表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论IL-35在健康妊娠女性中表达增加,th17/treg细胞比值降低有利于维持妊娠期母胎免疫耐受,二者可能共同参与了妊娠早期母胎免疫耐受的的建立与维持。

关键词：妊娠免疫耐受白细胞介素-35 白细胞介素-17 调节性T淋巴细胞辅助性t淋巴细胞17

Lumina B型乳腺癌与肿瘤浸润叉状头/翅膀状螺旋转录因子+调节性T淋巴细胞和CD8+细胞毒性t淋巴细胞预后的关系

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中华实验外科杂志 2019年第11期36卷 1975-1977页

作者：彭功玲王龙强李强江学庆华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院甲状腺乳腺外科武汉430014

目的检测叉状头/翅膀状螺旋转录因子(FoxP3)和CD8在Lumina B型乳腺癌组织的表达,探讨FoxP3+调节性T淋巴细胞(treg)和CD8+细胞毒性t淋巴细胞(CtL)与Lumina B型乳腺癌患者预后之间的关系。方法免疫组织化学方法检测乳腺癌组织石蜡切片中Fo... 详细信息

目的检测叉状头/翅膀状螺旋转录因子(FoxP3)和CD8在Lumina B型乳腺癌组织的表达,探讨FoxP3+调节性T淋巴细胞(treg)和CD8+细胞毒性t淋巴细胞(CtL)与Lumina B型乳腺癌患者预后之间的关系。方法免疫组织化学方法检测乳腺癌组织石蜡切片中FoxP3和CD8在肿瘤间质的表达量;独立样本t检验分析FoxP3和CD8的表达水平与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结状态、组织病理分级的关系。Kaplan-Meier Log-rank法分析CD8和FoxP3的表达与乳腺癌患者总体生存率和无病生存率的关系。结果CD8的高表达与肿瘤病灶≤2 cm、淋巴结转移阴性以及较低的病理分级(Ⅰ/Ⅱ级)有关(P2 cm、淋巴结转移阳性有关(PtL与良好预后有关,而肿瘤浸润的FoxP3+treg与不良预后明显相关。

关键词：乳腺浸润性导管癌肿瘤浸润淋巴细胞调节性T淋巴细胞细胞毒性t淋巴细胞叉状头/翅膀状螺旋转录因子 CD8

恒河猴外周血调节性T淋巴细胞的分离纯化及鉴定

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中国修复重建外科杂志 2012年第10期26卷 1237-1241页

作者：张爽金熙程汉佳何斯荣陈又南龙丹单娟曾力王成世程惊秋陆燕蓉四川大学华西医院卫生部移植科学与移植免疫重点实验室成都610041 四川大学生命科学学院

目的建立恒河猴外周血CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(regulatory t cells,tregs)快速有效的分离纯化方法。方法 4～5岁健康恒河猴10只,雌性4只,雄性6只,体重5～8 kg;于大隐静脉抽取外周血,每只抽取8 mL。密度梯度离心法分离外周血单个核细胞... 详细信息

目的建立恒河猴外周血CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(regulatory t cells,tregs)快速有效的分离纯化方法。方法 4～5岁健康恒河猴10只,雌性4只,雄性6只,体重5～8 kg;于大隐静脉抽取外周血,每只抽取8 mL。密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),分别采用非人灵长类tregs分离试剂盒的生物素标记的混合抗体和磁珠标记的抗生物素抗体阴性分选,以及大鼠抗人CD4-活化蛋白C(activatedprotein C,APC)和抗APC多选试剂盒中的磁珠标记的抗APC抗体阳性分选出CD4+t淋巴细胞,比较两种方法获得细胞的得率、活性及纯度;选择得率、活性和纯度较高的分选方法获得的CD4+t淋巴细胞,用磁珠标记的抗人CD25抗体进行阳性分选,获得CD4+CD25+tregs,流式细胞仪检测纯度、活性及FoxP3表达水平,以及tregs对刀豆蛋白(concanavalinA,ConA)刺激的自体CD4+CD25-效应性t淋巴细胞(effective t cells,teffs)增殖的抑制功能。结果 CD4+t淋巴细胞阳性分选和阴性分选后,细胞活性均达95%左右,差异无统计学意义(P>0.05),但阳性分选后CD4+t淋巴细胞得率和纯度均显著高于阴性分选(Ptregs分选采用阳性分选法获得的CD4+t淋巴细胞。经双阳性分选收集的目的细胞中CD4+CD25+tregs占76.2%±8.6%,活细胞比例为93.3%±4.7%,FoxP3阳性细胞比例为74.2%±6.9%。混合培养后tregs均对ConA刺激的teffs的增殖有抑制作用。结论免疫磁珠双阳性分选法能有效分选出恒河猴外周血中有功能的CD4+CD25+tregs。

关键词：调节性T淋巴细胞效应性t淋巴细胞免疫磁珠分选淋巴细胞分离恒河猴

反复种植失败患者的外周血th17/调节性T淋巴细胞的失衡情况

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广西医学 2022年第15期44卷 1705-1710页

作者：黄千贻江莉李柳铭吴惠梅李慕军广西医科大学第一附属医院生殖医学研究中心广西南宁市530021

目的探讨反复种植失败(RIF)患者外周血th17/调节性T淋巴细胞(treg)的失衡情况。方法纳入26例RIF患者(RIF组)和27例非妊娠期且生育功能正常的女性(对照组)。于月经周期的增殖晚期,检测两组外周血单核淋巴细胞中叉头状/翅膀状螺旋转录因子... 详细信息

目的探讨反复种植失败(RIF)患者外周血th17/调节性T淋巴细胞(treg)的失衡情况。方法纳入26例RIF患者(RIF组)和27例非妊娠期且生育功能正常的女性(对照组)。于月经周期的增殖晚期,检测两组外周血单核淋巴细胞中叉头状/翅膀状螺旋转录因子P3(FOXP3)与视黄酸受体相关孤儿受体γt(RORγt)的mRNA表达量,以及CD4~+IL-17A~+th17/CD4~+t淋巴细胞比值和CD4~+CD25~+FOXP3~+treg/CD4~+t淋巴细胞比值;并检测两组血清转化生长因子β1(tGF-β1)、白细胞介素(IL)-10、IL-6、IL-17A、IL-23蛋白水平。结果RIF组CD4~+IL-17A~+th17/CD4~+t淋巴细胞比值及RORγt mRNA表达量均高于对照组,而CD4~+CD25~+FOXP3~+treg/CD4~+t淋巴细胞比值及FOXP3 mRNA表达量均低于对照组(均PtGF-β1和IL-10水平均低于对照组,IL-6、IL-17A和IL-23水平均高于对照组(均Ptreg及相关细胞因子在RIF患者外周血表达降低并伴有活性减弱,而th17及相关细胞转录因子的表达增高且活性增强;RIF患者机体存在th17偏移,th17/treg失衡可能是RIF的发病机制之一。

关键词：反复种植失败胚胎移植辅助性t淋巴细胞17 调节性T淋巴细胞免疫失衡

低氧诱导因子-1α信号活化在川崎病患儿th17／调节性T淋巴细胞失衡中的作用

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中华实用儿科临床杂志 2016年第21期31卷 1622-1626页

作者：梅洁花王勤温鹏强徐明国齐中香刘琮李成荣王国兵遵义医学院深圳市儿童医院儿科研究所深圳518038 南方医科大学附属深圳市妇幼保健院中心实验室深圳518028 518038深圳市儿童医院儿科研究所

目的探讨低氧诱导因子-1α（HIF-1α）信号活化在川崎病（KD）患儿thl7／调节性T淋巴细胞（treg）失衡机制中的作用。方法急性期KD患儿36例，健康对照组32例。KD患儿分别于IVIG治疗前、后直接取血备检。采用流式细胞术检测thl7细胞、tre... 详细信息

目的探讨低氧诱导因子-1α（HIF-1α）信号活化在川崎病（KD）患儿thl7／调节性T淋巴细胞（treg）失衡机制中的作用。方法急性期KD患儿36例，健康对照组32例。KD患儿分别于IVIG治疗前、后直接取血备检。采用流式细胞术检测thl7细胞、treg比例及叉头蛋白P3（Foxp3）、IL-10、IL-17A、HIF-1理、磷酸化信号转导和转录活化因子3（pStAt3）蛋白表达水平；实时荧光定量PCR检测CD4＋t淋巴细胞toll样受体4（tLR4）、髓样分化因子88（MyD88）、受体相互作用蛋白1（RIP1）、IL-17A、RAR相关孤儿受体1t（RORγt）、p300mRNA表达；免疫共沉淀一定量PCR及免疫印迹法检测外周血CD4细胞IL-17A基因组蛋白H3乙酰化、Foxp3蛋白泛素化水平；ELISA检测血浆中IL．1B、IL-6、IL．21、IL-23、tNF-α水平。结果1．急性期KD患儿th17细胞比例及IL-17A表达显著上升（t=7．62、9．60，P均〈0．05），treg细胞比例及转录因子Foxp3、IL-10表达明显降低（t=5．72、6．82、5．83，P均〈0．05），th17／treg细胞比值远高于健康对照组（t=12．21，P〈0．05），经静脉用丙种球蛋白（IVIG）治疗后均有明显恢复（t=6．28、8．30、4．75、5．02、3．95、9．39，P均〈0．05）。2．急性期KD患儿CD4＋t细胞IL．17A基因组蛋白H3乙酰化水平及Foxp3蛋白泛素化水平显著上升[H3：（7．32±2．53）％比（2．60±1．08）％；Foxp3：（42．94±15．91）％比（11．01±3．60）％，t=10．20、11．71，P〈0．05]，HIF-1α、RO脚t及p300表达亦明显高于健康对照组（t=6．02、6．92、6．01，P均〈0．05），经IVIG治疗后均显著降低[H3：（4．63±2．07）％比（7．32±2．07）％；Foxp3：（26．37±11．58）％比（42．94±15．91）％；t=4．94、5．05、3．40、5．31、4．29，P均〈0．05]。其中，HIF-1理表达与IL-17A基因组蛋白H3乙酰化水平、Foxp3蛋白泛素化水平呈正相关（r=0．65、0．52，P均〈0．05）。3．急性期KD患儿血浆炎性细胞因子IL-1B、IL-6、IL-21、IL-23、tNF-α水平及tLR4表达显著增高（t=11．00、15．18、7．21、11．09、9．09、3．84，P均〈0．05），其下游信号分子MyD88、pStAt3、RIP1表达亦明显高于健康对照组（t=10．07、5．41、8．13，P均〈0．05），经IVIG治疗后均显著降低（t=7．81、10．59、4．70、6．73、6．49、3．03、6．50、3．63、5．22，P均〈0．05）。结论HIF-1d信号异常活化可能是导致急性期KD患儿th17／treg细胞失衡的重要因素之一。

关键词：川崎病低氧诱导因子-1α 辅助性t淋巴细胞调节性T淋巴细胞失衡