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辐射诱导树突状细胞促进Treg分化及肺上皮间充质转化

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军事医学 2018年第7期42卷 502-506页

作者：孙泽文梁鑫郗停停贺琦多杨陟华王易龙顾永清潘秀颉朱茂祥广东药科大学研究生院广州510000 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京100850 解放军总医院北京100853

目的探讨树突状细胞经60Co-γ射线照射后激活调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Treg)的能力,以及在Treg诱导的上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法免疫磁珠分选的小鼠CD4+CD25-常规T细胞(conventional T cells,Tcon)与60Co-γ线照射(6 Gy)后的树突状细胞共培养,72 h后采用流式术检测CD4+CD25+Treg细胞的比例。通过磁珠分选后的Treg与小鼠肺上皮细胞系MLE-12共培养72 h后取MLE-12细胞,免疫荧光和Western印迹技术检测上皮标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和细胞表面蛋白C(prosurfactant protein C,Spc)以及间充质标志蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin,N-cad)和波形蛋白(vimentin)的表达。结果免疫磁珠法分选小鼠脾Treg比例>90%,效果良好;树突状细胞照后抗原提呈功能增强,能显著诱导Tcon分化为Treg; Western印迹和免疫荧光实验证明,Treg能明显促进上皮标志E-cad和Spc表达下调,间充质标志N-cad和vimentin表达升高。结论树突状细胞照射后能显著诱导Treg分化,而Treg能明显诱导肺上皮细胞发生EMT。

关键词：辐射电离抗原提呈 T淋巴细胞调节性上皮间充质转化钙黏着糖蛋白肺纤维化

下调Foxp3基因表达对人调节性T细胞功能的影响

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中华医学杂志 2011年第30期91卷 2124-2128页

作者：孙磊易寿南陈丽山东大学齐鲁医院内分泌科济南250012

目的利用RNA干扰技术下调Foxp3表达，观察其对人CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）表型及功能的影响。方法利用Foxp3siRNA转染人CD4^＋CD25^＋Treg，荧光显微镜和流式细胞仪（FACS）检测转染效率，实时定量PCR和Western印迹分别鉴定Foxp... 详细信息

目的利用RNA干扰技术下调Foxp3表达，观察其对人CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）表型及功能的影响。方法利用Foxp3siRNA转染人CD4^＋CD25^＋Treg，荧光显微镜和流式细胞仪（FACS）检测转染效率，实时定量PCR和Western印迹分别鉴定Foxp3基因及Treg功能相关基因表达、Foxp3蛋白表达，细胞增殖实验检测Treg抑制功能，FACS测Treg表型标记，ELISA检测细胞因子表达。结果Foxp3siRNA转染人CD4^＋CD25^＋Treg效率为68％，与对照组相比，转染后的细胞Foxp3基因下调了61．4％（P〈0．01），Foxp3蛋白表达较低，Treg功能相关基因和主要表型标记也较对照组有改变，差异有统计学意义。功能试验提示无论是在异种还是同种抗原刺激的淋巴细胞反应中，Foxp3 siRNA转染的Treg与对照组相比，对效应性T细胞的抑制作用较弱（异种抗原组83％比48％，P〈0．05；同种抗原组65％比28％，P〈0．01），且主要抑制性和效应性细胞因子的表达下降，差异有统计学意义。结论Foxp3是人天然Treg维持其抑制性功能的核心细胞内标志。

关键词：叉头转录因子类 RNA 小分子干扰 T淋巴细胞调节性

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分泌颗粒酶B的调节性B细胞研究进展

中华风湿病学杂志 2016年第8期20卷 564-566页

作者：徐丽玲胡凡磊苏茵北京大学人民医院风湿免疫科 100044

传统观念认为，B细胞主要通过抗原递呈、分泌抗体及合成炎性细胞因子等方式启动和活化自身免疫系统，在抗感染或疾病发生发展中发挥重要作用。

关键词：分泌抗体 B细胞颗粒酶B 调节性自身免疫系统炎性细胞因子传统观念抗原递呈

调节性T淋巴细胞在移植免疫耐受领域的临床应用研究

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中华器官移植杂志 2009年第12期30卷 709-712页

作者：石炳毅中国人民解放军第三0九医院全军器官移植中心北京100091

CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T淋巴细胞（Treg）是一类具有免疫调节功能的T淋巴细胞亚群，其免疫抑制功能成为近年来免疫学领域研究的重要内容。Treg不仅在维持机体免疫自稳方面发挥关键的作用，而且在移植后诱导和维持免疫耐受方面的... 详细信息

CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T淋巴细胞（Treg）是一类具有免疫调节功能的T淋巴细胞亚群，其免疫抑制功能成为近年来免疫学领域研究的重要内容。Treg不仅在维持机体免疫自稳方面发挥关键的作用，而且在移植后诱导和维持免疫耐受方面的作用也越来越受到人们的重视。随着新型免疫抑制剂的不断开发和应用，大部分早期出现的移植物功能丧失和急性排斥反应得到了控制。

关键词： T淋巴细胞亚群移植免疫耐受调节性临床应用新型免疫抑制剂免疫调节功能免疫抑制功能急性排斥反应

非霍奇金淋巴瘤患者外周血调节性T细胞检测的临床意义

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肿瘤 2010年第10期30卷 886-889页

作者：曾晓颖李开春韩韬杨博陈燕唐曦施展陈玺王静文复旦大学附属华东医院肿瘤科上海200040 复旦大学新培晶分子医学中心上海200032 复旦大学附属华东医院病理科上海200040

目的:检测非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma,NHL)患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(regu-latory Tcell,Treg)比例的变化,初步分析其在肿瘤免疫调节中的作用及临床意义。方法:采用FCM法检测42例NHL患者化疗前后外周血中CD4... 详细信息

目的:检测非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma,NHL)患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(regu-latory Tcell,Treg)比例的变化,初步分析其在肿瘤免疫调节中的作用及临床意义。方法:采用FCM法检测42例NHL患者化疗前后外周血中CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25+Foxp3+/CD4+T细胞比例的变化,并与28例健康对照进行比较。结果:NHL患者化疗前外周血中CD4+CD25+/CD4+T细胞的比例为(20.71±4.22)%,CD4+CD25+Foxp3+/CD4+T细胞的比例为(4.45±1.52)%,均明显高于健康对照(P<0.01)。化疗后,NHL患者外周血中CD4+CD25+/CD4+T细胞的比例为(11.32±3.13)%,CD4+CD25+Foxp3+/CD4+T细胞的比例为(2.27±1.07)%,均较化疗前明显降低(P<0.05);但仍高于健康对照,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:NHL患者外周血Treg比例升高,可能引起机体免疫抑制,并推测与NHL患者的发病相关。

关键词：非霍奇金淋巴瘤 NHL患者外周血调节性细胞检测临床意义 peripheral blood T cells analysis detection CD4+ Foxp3+ 化疗后健康统计学意义免疫抑制免疫调节 Treg FCM法肿瘤

替比夫定对慢性乙型肝炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞动态变化的影响及其临床意义

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中华肝脏病杂志 2008年第12期16卷 885-888页

作者：潘修成杨帆陈明傅涓涓郭忠胜张言超孙莉莉徐州医学院附属医院感染病科

目的探讨替比夫定抗病毒治疗过程中慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血CD4CD25’调节性T细胞（Tregs）比例的变化及其临床意义。方法选取给予替比夫定抗病毒治疗的CHB患者36例,在治疗前及治疗后3、6、9个月时,分别以流式细胞仪检测外周血Tr... 详细信息

目的探讨替比夫定抗病毒治疗过程中慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血CD4CD25’调节性T细胞（Tregs）比例的变化及其临床意义。方法选取给予替比夫定抗病毒治疗的CHB患者36例,在治疗前及治疗后3、6、9个月时,分别以流式细胞仪检测外周血Tregs比例(以CD4CD25T细胞作为Tregs),荧光定量PCR检测血清HBV DNA水平,酶联免疫吸附法检测HBV标志物,全自动生化分析仪检测ALT水平。结果CHB患者外周血Tregs比例明显高于对照组（p0.05）。治疗3、6、9个月时,HBeAg阴转率分别为11.1%、19.4%、25.0%,其中7例（19.4%）发生HBeAg血清学转换者在治疗3、6个月时Tregs比例均已降至正常人水平。结论替比夫定抗病毒治疗过程中,能降低CHB患者外周血Tregs比例,治疗早期Tregs比例下降的患者HBeAg血清学转换率更高。

关键词：肝炎乙型慢性 T淋巴细胞调节性替比夫定

大蒜新素抑制小鼠巨细胞病毒感染诱导调节性T细胞扩增的体外研究

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中华医学杂志 2010年第28期90卷 1995-1998页

作者：李亚男王慧刘兴楼董永绥方峰华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科武汉430030 吉林大学第一医院儿内一科

目的在细胞水平研究大蒜新素对小鼠巨细胞病毒（MCMV）感染鼠胚肺成纤维细胞（MEF）诱导调节性T细胞（Treg）异常扩增的抑制作用。方法建立MEF和T淋巴细胞的共培养体系，采用MEF对大蒜新素的最大耐受浓度（MTC）处理MCMV感染的MEF3d后... 详细信息

目的在细胞水平研究大蒜新素对小鼠巨细胞病毒（MCMV）感染鼠胚肺成纤维细胞（MEF）诱导调节性T细胞（Treg）异常扩增的抑制作用。方法建立MEF和T淋巴细胞的共培养体系，采用MEF对大蒜新素的最大耐受浓度（MTC）处理MCMV感染的MEF3d后，再用实时定量PCR检测T细胞中叉头蛋白3（Foxp3）mRNA表达水平，流式细胞术检测效应性T细胞亚群杀伤性T细胞Ⅰ型（Tcl）、杀伤性T细胞Ⅱ型（Tc2）、辅助性T细胞Ⅰ型（Thl）和辅助性T细胞Ⅱ型（Th2）的百分比，双抗体夹心酶联免疫吸附法检测共培养体系中白细胞介素10（IL）-10和转化生长因子（TGF）-β的蛋白表达，标准蚀斑法检测共培养体系中的病毒负荷量，并与安慰剂组进行统计学分析比较。结果MEF对大蒜新素的MTC浓度为9．83μg／ml。MTC浓度的大蒜新素可部分拮抗MCMV诱导的Foxp3基因表达上调（87±5比114±8，P〈0．01）；分别上调Tc1、Tc2和Th1百分比至（12．42±1．23）％、（4．28±0．56）％、（13．25±0．68）％，与安慰剂组[（6．85±0．92）％、（2．34±0．42）％、（9．32±0．86）％]比较差异均有统计学意义（均P〈0．01）；使IL-10和TGF-β蛋白表达水平分别降至（29．98±3．15）pg／ml和（3．48±0．23）ng／ml，均显著低于安慰剂组水平[（38．21±4．02）pg／ml和（5．31±0．59）ng／ml，均P〈0．05]；同时将体系中的病毒负荷量由（6．79±0．39）降至（5．03±0．08）（均P〈0．01）。结论大蒜新素在体外可通过抑制Treg途径来增强抗病毒免疫。

关键词：鼠巨细胞病毒 T淋巴细胞调节性大蒜新素

银屑病调节性T细胞的功能异常及STAT3通路调控机制研究

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中华皮肤科杂志 2016年第4期49卷 232-237页

作者：杨璐婷李冰张倩党二乐王刚第四军医大学西京皮肤医院西安710032

目的研究银屑病患者外周血调节性T细胞（Treg）的功能，探讨与功能异常相关的STAT3信号通路机制。方法寻常性银屑病患者81例，银屑病面积和严重度指数（PASI）评分10～30，均为慢性斑块状。对照组46例，为健康献血者。采用流式细胞仪检... 详细信息

目的研究银屑病患者外周血调节性T细胞（Treg）的功能，探讨与功能异常相关的STAT3信号通路机制。方法寻常性银屑病患者81例，银屑病面积和严重度指数（PASI）评分10～30，均为慢性斑块状。对照组46例，为健康献血者。采用流式细胞仪检测外周血中Treg细胞的比例，用体外淋巴细胞混合培养方法检测银屑病患者和健康人外周血中Treg细胞的增殖活性及对效应性T细胞（Tresp）的抑制功能，用流式细胞仪及qRT—PCR检测Treg细胞中磷酸化STAT3的比例及分泌促炎因子干扰素γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子a（TNF—a）、白细胞介素17（IL-17）的水平。最后，用STAT3通路抑制剂StatticV处理银屑病患者Treg细胞，观察其增殖及抑制功能的恢复及分泌促炎因子的变化。结果银屑病患者组外周血Treg细胞数量（6．437％±0．186％）与对照组（6．812％±0．241％）比较差异无统计学意义（t=1．224，P〉0．05），但银屑病患者组外周血Treg细胞增殖活性及对Tresp细胞的抑制功能明显降低，磷酸化STAT3表达水平显著升高，分泌促炎因子IFN-γ、TNF—d、IL-17的水平显著升高（均P〈0．05）。经50肌蜀几StatticV作用后，银屑病患者Treg细胞对Tresp抑制率为61．670％±4．640％，未处理组为28．820％±11．490％，两组差异有统计学意义（P〈0．05）；50μg／LStatticV作用后，促炎因子IFN-ⅥTNF-a、IL-17mRNA表达量（2-△△Q）分别为1．654±0．879、0．850±0．705、0．572±O．135，均显著低于未处理组（分别为23．350±6．721、4．847±1．525、3．095±0．650），差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论银屑病患者Treg细胞对Tresp细胞的负向调控功能降低，其机制与STAT3信号通路异常活化有关，抑制STAT3通路的活化有可能一定程度地恢复Treg细胞功能。

关键词：银屑病 T淋巴细胞调节性 STAT3转录因子干扰素γ 肿瘤坏死因子a 白细胞介素17 Stattic V

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调节性T细胞免疫治疗策略

中国医药生物技术 2015年第1期10卷 53-58页

作者：王平章马大龙北京大学医学部免疫学系北京大学人类疾病基因研究中心 100191

调节性免疫细胞（regulatory immune cell）通常是指发挥免疫抑制作用的多种类型免疫细胞，其中目前公认最为重要的是 FOXP3＋调节性 T细胞（Treg）[1]。鉴于 FOXP3＋ Treg的发现及其在免疫系统中重要地位的确立，使得 Treg的研究成为... 详细信息

调节性免疫细胞（regulatory immune cell）通常是指发挥免疫抑制作用的多种类型免疫细胞，其中目前公认最为重要的是 FOXP3＋调节性 T细胞（Treg）[1]。鉴于 FOXP3＋ Treg的发现及其在免疫系统中重要地位的确立，使得 Treg的研究成为当今最活跃的领域之一，并掀起了其在转化医学研究中的热潮。根据发育来源，Treg 可分为自然调节性 Treg（natural Treg，nTreg）和诱导性或适应性 Treg （induced/adaptive Treg，iTreg/aTreg）；前者直接由胸腺细胞经历阴性和阳性选择发育而来，后者在外周组织器官中由 FOXP3-T细胞或 CD45RA-FOXP3loT细胞在 TGF-β等诱导下转化而来。

关键词：调节性细胞免疫治疗免疫抑制作用免疫细胞 TGF-β T细胞 cell 免疫系统