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MCt1在预测肝细胞癌患者预后中的作用研究

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南京医科大学学报（自然科学版） 2022年第2期42卷 184-188,210页

作者：韩晟周锦仁邵青戴新征古鉴南京医科大学第一附属医院肝胆中心中国医学科学院肝移植重点实验室江苏南京210029

目的:探讨乳酸转运载体单羧酸转运蛋白1(monocarboxylate transporter 1,MCt1)在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者预后预测中的应用价值及相应的调控机制。方法:筛选临床HCC患者行肝切除后的组织标本,通过比较与癌旁组织... 详细信息

目的:探讨乳酸转运载体单羧酸转运蛋白1(monocarboxylate transporter 1,MCt1)在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者预后预测中的应用价值及相应的调控机制。方法:筛选临床HCC患者行肝切除后的组织标本,通过比较与癌旁组织的表达差异区分MCt1高表达组与低表达组;研究不同组患者外周血免疫细胞分型与活化情况,以及肿瘤免疫浸润情况。回顾性分析43例HCC手术患者乳酸和MCt1高表达与低表达组的生存与复发差异。结果:MCt1高表达组与低表达组相比,外周血免疫细胞分型无明显差异,但CD4+t细胞更易在乳酸刺激下转化为treg(调节型t)细胞;乳酸环境下,MCt1高表达组treg细胞具有明显升高的代谢水平;病理标本分析发现MCt1高表达组具有较低的炎性细胞浸润和较高的免疫抑制因子转录水平(Foxp3、CtLA4、IL-10)。回顾较早手术患者分析后显示,肿瘤内乳酸表达水平与患者预后无明显相关性,而MCt1高表达组预后和复发水平明显差于MCt1低表达组。结论:MCt1表达水平对HCC患者具备很好的预测价值,MCt1-treg相关通路可能作为新的肝癌诊断、治疗、预后评估靶点。

关键词：单羧酸转运蛋白1 肝细胞癌调节型t细胞

免疫原性HER2突变体蛋白对小鼠t细胞亚群分化的影响

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中国药科大学学报 2018年第1期49卷 102-108页

作者：宁宏宇江涛张瑞何羽姚文兵田浤中国药科大学江苏省生物药物成药性研究重点实验室南京210009 中国药科大学生命科学与技术学院南京210009

为了考察蛋白质中定点引入对硝基苯丙氨酸后对t细胞分化的影响,以人表皮生长因子受体2(HER2)胞外区为模型分子,利用实验室前期构建的工程菌表达了定点引入对硝基苯丙氨酸的HER2突变体。用含对硝基苯丙氨酸的HER2突变体免疫小鼠,分析其... 详细信息

为了考察蛋白质中定点引入对硝基苯丙氨酸后对t细胞分化的影响,以人表皮生长因子受体2(HER2)胞外区为模型分子,利用实验室前期构建的工程菌表达了定点引入对硝基苯丙氨酸的HER2突变体。用含对硝基苯丙氨酸的HER2突变体免疫小鼠,分析其对小鼠t细胞亚群分化的影响。研究结果显示,对硝基苯丙氨酸的引入显著增强了HER2的免疫原性,免疫5周后,突变体免疫组的小鼠体内抗HER2抗体滴度明显高于PBS组和原型免疫组的小鼠;流式细胞术检测结果显示,小鼠淋巴结内tfh细胞比例从4%上升至8%,而treg细胞比例从5%下降至1%;Qt-PCR分析结果显示,tfh细胞关键转录因子Bcl-6的mRNA水平提高了2倍,而treg细胞关键转录因子FOXP3的mRNA水平明显降低;ELISA法检测血清中tfh细胞效应因子IL-21的含量从4 pg/m L上升至28 pg/m L。上述研究结果证实,含有对硝基苯丙氨酸的HER2突变体可以通过激活tfh细胞分化而引起高效免疫应答。

关键词：免疫原性氨基酸 HER2 滤泡辅助性t细胞调节型t细胞细胞分化

葛根素对牙周炎大鼠th17/treg细胞免疫平衡及相关转录因子表达的影响

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昆明医科大学学报 2022年第11期43卷 36-43页

作者：詹乐马瑞堉万妮莫礼文陈荟颖张黎海南医学院口腔医学院海南海口570102 兰州大学口腔医学院甘肃兰州730000

目的探究葛根素对牙周炎大鼠辅助性t细胞17(t helper cell 17,th17)/调节性t细胞(Regulatory t cell,treg)免疫平衡及相关转录因子的影响。方法采用分离牙龈、丝线结扎配合龈下注射大肠杆菌内毒素(ELPS)法建立大鼠牙周炎模型。将大鼠随... 详细信息

目的探究葛根素对牙周炎大鼠辅助性t细胞17(t helper cell 17,th17)/调节性t细胞(Regulatory t cell,treg)免疫平衡及相关转录因子的影响。方法采用分离牙龈、丝线结扎配合龈下注射大肠杆菌内毒素(ELPS)法建立大鼠牙周炎模型。将大鼠随机分为正常对照组(A组)、牙周炎模型组(B组)、200 mg/(kg·d)葛根素组(C组)。HE染色观察牙周组织病理形态学变化。通过Micro-Ct对骨生物学参数定量分析牙槽骨吸收情况。流式细胞术、免疫印迹法(western blot,WB)分别检测牙周组织中th17、treg细胞比例、白介素-17(IL-17)、视黄酸相关孤儿受体(RORγt)、IL-10、叉头状转录因子-3(Foxp3)蛋白表达。结果HE染色中葛根素组大鼠牙根部可见明显新生骨细胞增生,牙周膜可见少量炎症细胞聚集,牙槽骨结构较整齐。Micro-Ct显示治疗组大鼠牙槽骨较模型组骨量略有下降,骨质量及强度有所上升。流式细胞术检测全血细胞发现葛根素组的tH17、treg细胞比例均下降,且tH17/treg的细胞比例也下降。IL-10、Foxp3在葛根素组蛋白表达量上调,而IL-17、RORγt在葛根素组蛋白表达量下调,差异有统计学意义(P调节th17/treg细胞及相关转录因子的表达,使th17/treg细胞免疫平衡轴往有利于牙周组织愈合方向发展,其作用机制可能与葛根素有效调节th17/treg细胞免疫平衡轴有关。

关键词：葛根素牙周炎大鼠辅助型t细胞调节型t细胞

慢性阻塞性肺疾病急性加重继发肺真菌感染患者辅助性t细胞17/调节性t细胞及细胞因子改变

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包头医学 2022年第2期46卷 16-18页

作者：魏杰陈兰燕杨西强洛阳市中医院肺病科河南洛阳471003

目的:探讨AECOPD患者继发肺真菌感染患者外周血th17/treg及血清细胞因子改变。方法:选择本院呼吸内科2018年1月~2020年3月收治的AECOPD患者85例,根据治疗期间是否发生真菌感染分为感染组(n=27)和非感染组(n=58),采用流式细胞术检测患者... 详细信息

目的:探讨AECOPD患者继发肺真菌感染患者外周血th17/treg及血清细胞因子改变。方法:选择本院呼吸内科2018年1月~2020年3月收治的AECOPD患者85例,根据治疗期间是否发生真菌感染分为感染组(n=27)和非感染组(n=58),采用流式细胞术检测患者外周血中th17、treg细胞水平,采用酶联免疫吸附法检测两组患者血清中白介素-17(IL-17)、白介素-23(IL-23)、干扰素-γ(IFN-γ)、转化生长因子-β(tGF-β)水平。结果:27例AECOPD合并真菌感染患者送检痰标本共检出病原菌29株,其中白色假丝酵母菌19株,占65.52%,热带假丝酵母菌3株,占10.34%,近平滑假丝酵母菌3株,占10.34%,曲霉菌2株,占6.90%。感染组患者th17、th17/treg水平高于非感染组,treg低于非感染组,IL-17、IL-23水平高于非感染,IFN-γ、tGF-β水平低于非感染组(P细胞及细胞因子水平总体差异具有统计学意义(Pth17、th17/treg、IL-17、IL-23水平增加,treg、IFN-γ、tGF-β水平降低(Pth17/treg失衡在AECOPD患者发生肺真菌感染过程中发挥重要作用,有望成为治疗靶点。

关键词：慢性阻塞性肺疾病急性加重肺真菌感染调节型t细胞辅助型t细胞17

宫颈癌患者人乳头瘤病毒感染和HSP70表达及treg细胞分布研究

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中华医院感染学杂志 2020年第5期30卷 729-733页

作者：段智李代强陈辉许奇美李贞长沙市第一医院病理科湖南长沙410005 中南大学湘雅附二医院病理科湖南长沙410011

目的探究不同宫颈癌患者人乳头瘤病毒(HPV)感染和热休克蛋白(HSP)70表达及调节型t细胞(treg)分布情况.方法选择2015年1月-2018年12月长沙市第一医院行手术切除的宫颈癌患者80例为病例组,同期健康体检妇女30名为对照组,采用HPV基因分型... 详细信息

目的探究不同宫颈癌患者人乳头瘤病毒(HPV)感染和热休克蛋白(HSP)70表达及调节型t细胞(treg)分布情况.方法选择2015年1月-2018年12月长沙市第一医院行手术切除的宫颈癌患者80例为病例组,同期健康体检妇女30名为对照组,采用HPV基因分型芯片试剂盒行芯片杂交,检查感染情况及基因分型;提取样本RNA,逆转录后行聚合酶链反应(PCR),记录HSP70相对表达量;采用流式细胞仪检测treg细胞水平;采用酶联免疫法检测血清白细胞介素-7(IL-7)、IL-23、转化生长因子-β(tGF-β)水平.结果80例宫颈癌患者中检出HPV感染76例,检出HPV总阳性率95.00%,其中,鳞癌HPV阳性率为95.74%,腺癌为91.30%,腺鳞癌、透明细胞癌均为100%.共检出9种HPV基因型,分别为HPV16、18、31、33、45、56、58、59、73,均为高危型感染,其中,HPV16检出率(75.00%)最高、其次为HPV18的18.75%;HPV双重感染检出9例,检出率11.25%(9/80).鳞癌、腺癌、腺鳞癌、透明细胞癌宫颈组织中的HSP70表达水平高于对照组,CD4+IL17+th17及CD4+CD25+Foxp3+treg、th17/treg及IL-7、IL-23、tGF-β水平均高于对照组,差异均有统计学意义(Pth17/treg失衡,临床监测上述指标对宫颈癌的诊断治疗提供重要参考价值.

关键词：宫颈癌热休克蛋白70 调节型t细胞人乳头瘤病毒

老年糖尿病患者口腔颌面部感染病原菌特点及th17/treg细胞免疫变化

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中华医院感染学杂志 2021年第1期31卷 15-18页

作者：韩琴黄祥妹陈玉玲徐爱红陈兴强三亚市人民医院老年病科海南亚572000 海南医学院第一附属医院内镜诊疗室海南海口570102 三亚市人民医院供应室海南亚572000 三亚市人民医院肾内科海南亚572000

目的探讨老年糖尿病患者口腔颌面部间隙感染(oral and maxillofacial space infection,OMSI)病原学特点及辅助性t细胞17(th17)/调节性t细胞(treg)细胞免疫的变化。方法选择三亚市人民医院老年科2017年1月-2019年3月收治的老年糖尿病患者... 详细信息

目的探讨老年糖尿病患者口腔颌面部间隙感染(oral and maxillofacial space infection,OMSI)病原学特点及辅助性t细胞17(th17)/调节性t细胞(treg)细胞免疫的变化。方法选择三亚市人民医院老年科2017年1月-2019年3月收治的老年糖尿病患者142例作为研究对象,根据患者是否发生OMSI分为感染组82例及非感染组60例。分析感染患者病原菌分布及耐药性,分别采用流式细胞术及酶联免疫吸附法检测两组患者外周血中th17/treg及白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)、干扰素-γ(IFN-γ)和转化生长因子-β(tGF-β)水平。结果感染患者临床标本共检出病原菌87株,其中革兰阳性菌57株,占65.52%,革兰阴性菌30株,占34.48%;检出的主要革兰阳性菌对头孢曲松、头孢噻肟、头孢唑林和氨苄西林耐药率较高;检出的主要革兰阴性菌对左氧氟沙星、环丙沙星、庆大霉素耐药率较高;感染组th17(17.52±2.18)%、th17/treg(3.01±0.24)、IL-17(65.67±18.24)pg/ml、IL-23(42.08±11.39)pg/ml均高于对照组(均Ptreg(5.83±1.06)%、IFN-γ(18.89±5.22)pg/ml、tGF-β水平(23.24±6.01)pg/ml均低于对照组(Pth17/treg失衡,th17细胞及促炎细胞因子表达升高,treg细胞及抑炎细胞因子表达降低。

关键词：糖尿病口腔颌面部感染耐药特征辅助型t细胞17 调节型t细胞

狼疮性肾炎并肺部感染循环miR-155与th1/th2、th17/treg细胞因子水平及预后的关系

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中华医院感染学杂志 2021年第7期31卷 991-995页

作者：易志钢张李刚张春天王丽芳张卜汪汉东黄石市爱康医院肾病内科湖北黄石435000

目的探讨狼疮性肾炎并肺部感染患者循环miR-155水平与辅助型t细胞1/2(th1/2)及辅助型t细胞17(th17)/调节型t细胞(treg)细胞因子水平及预后的关系。方法选择黄石市爱康医院肾病内科2015年5月-2019年3月收治的狼疮性肾炎住院期间肺部感染... 详细信息

目的探讨狼疮性肾炎并肺部感染患者循环miR-155水平与辅助型t细胞1/2(th1/2)及辅助型t细胞17(th17)/调节型t细胞(treg)细胞因子水平及预后的关系。方法选择黄石市爱康医院肾病内科2015年5月-2019年3月收治的狼疮性肾炎住院期间肺部感染患者50例作为感染组,选择同期收治的狼疮性肾炎未合并肺部感染患者50例作为非感染组,对感染组病原分布特点进行调查;采用荧光定量聚合酶链式扩增反应检测外周血中miR-155相对表达量,采用酶联免疫吸附法检测th1细胞因子:干扰素-γ(IFN-γ),th2细胞因子:白介素-4(IL-4),th17细胞因子:白介素-17(IL-17),treg细胞因子:β-转化生长因子(tGF-β)水平;采用受试者工作特征曲线对miR-155对于狼疮性肾炎并肺部感染的预后价值进行评价。结果 50例感染组患者呼吸道标本共检出病原41株,其中革兰阳性菌24株,占58.54%,革兰阴性菌15株,占36.59%,真菌2株,占4.88%;感染组患者外周血中miR-155相对表达及血清中IFN-γ、IL-4、IL-17、tGF-β水平高于非感染组(PtGF-β水平越高(Pth1/th2、th17/treg炎症通路的方式参与狼疮性肾炎患者的肺部感染免疫过程,监测其水平对于判断患者预后具有一定价值。

关键词：狼疮性肾炎肺部感染 miR-155 辅助型t细胞调节型t细胞

电针足三里对AA模型大鼠外周血及PP结CD4+、CD8+t细胞亚群及tregs细胞的影响

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电针足三里对AA模型大鼠外周血及PP结CD4+、CD8+T细胞亚群及Tregs...

作者：李劲松北京中医药大学

学位级别：硕士

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)为世界性的难治性重大疾病之一具有较高致残率,严重威胁人类健康。迄今为止,临床上仍缺乏有效控制病情发展的治疗方案、预防措施及治疗药物。中医学将其归入痹病范畴,针灸对于RA临床疗效显著,... 详细信息

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)为世界性的难治性重大疾病之一具有较高致残率,严重威胁人类健康。迄今为止,临床上仍缺乏有效控制病情发展的治疗方案、预防措施及治疗药物。中医学将其归入痹病范畴,针灸对于RA临床疗效显著,已成为中医临床治疗痹病的有效方法和重要治疗手段之一。但是目前对于类风湿性关节炎的研究多集中于临床方面,对于针灸改善类风湿性关节炎的机理研究较少。基于以上考虑,我们设计该实验,借以探讨针灸对于AA模型大鼠免疫细胞的影响。我们采用完全弗氏佐剂诱导SD大鼠作为类风湿性关节炎模型(AA模型),选取足三里作为刺激点,对AA模型大鼠进行电针刺激,观察不同组别大鼠关节炎指数、踝肿胀度、外周血t细胞亚群、肠道PP结数量及tregs细胞以及相关免疫因子的变化情况,探讨针刺治疗RA的作用机理。选用雄性SD大鼠30只,随机平均分为3组：正常组、模型组、电针组。模型组、针刺组于大鼠足底肉垫处注射完全弗氏佐剂0.1ml/只,于造模第8日起针刺组每72小时进行电针刺激,并评价各组大鼠关节炎指数、踝肿胀度,刺激13次后处死取材。采用HE染色法,光镜下观察踝关节病理损伤情况;采用流式细胞术检测全血中CD4+、CD8+t细胞和PP结中tregs细胞的数量;用ELISA酶联免疫法测定血清中tNF-a、IL-1、IL-10含量。结论：1电针足三里对于AA模型大鼠的症状具有改善作用,且急性期较为明显。2电针足三里对于AA模型大鼠外周血CD4+D25+tregs细胞具有调节作用。3电针足三里能够升高AA模型大鼠慢性期外周血CD8+t细胞的含量,降低CD4+/CD8+比值。4电针足三里对于肠道粘膜免疫(pp结)及pp结内CD4+CD25+tregs无影响。5电针足三里能够降低tNF-α、IL-1含量,升高IL-10的含量。

关键词：电针调节型t细胞足三里

窄谱中波紫外线对人角质形成细胞趋化因子CCL22表达的调控作用及其机制研究

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窄谱中波紫外线对人角质形成细胞趋化因子CCL22表达的调控作用及...

作者：王延婷第四军医大学

学位级别：硕士

白癜风(vitiligo)是一种累及皮肤和黏膜的损容性皮肤病,特征性表现为局限性或泛发性脱色斑,病理上表现为皮损中具有功能的黑素细胞减少或消失。大量研究表明,白癜风的发生发展是遗传、环境与免疫共同作用的结果。白癜风患者外周血中CD4+... 详细信息

白癜风(vitiligo)是一种累及皮肤和黏膜的损容性皮肤病,特征性表现为局限性或泛发性脱色斑,病理上表现为皮损中具有功能的黑素细胞减少或消失。大量研究表明,白癜风的发生发展是遗传、环境与免疫共同作用的结果。白癜风患者外周血中CD4+、CD8+t细胞数量及比率异常,且CD4+t淋巴细胞HLA-DR表达显著增加,增殖和黏附能力均显著增强,并检测到循环皮肤归巢的黑素细胞特异性毒性杀伤性t细胞(CtL),提示t细胞免疫应答参与白癜风的发生、发展。CD4+CD25+调节型t细胞(Regulatory t cells,treg细胞)是一种具有免疫抑制功能的t细胞亚群,它在维持机体免疫自稳和免疫耐受过程中发挥重要作用。研究发现,白癜风患者外周血及皮损中treg细胞数量下降,且患者皮损周的CD4+t细胞和CD8+t细胞对treg反应性均降低,表明白癜风患者存在treg细胞功能受损。最近在白癜风动物模型研究发现,通过过继转移treg细胞,或以CCL22基因枪诱导treg细胞向皮肤迁移,以雷帕霉素诱导treg细胞功能活性增强,均可减缓白癜风局部th1型免疫应答,促进白癜风复色,提示增强treg细胞皮肤迁移或提高其功能活性是治疗白癜风的关键。目前临床上尚无特效白癜风治疗方法,窄谱中波紫外线(narrow band-ultraviolet B,NB-UVB)因其疗效显著且副作用小而广泛应用。关于NB-UVB治疗皮肤病的作用机制,尚不完全清楚。以往有研究报道,NB-UVB照射皮肤可诱导多种趋化因子表达,从而调节免疫细胞在皮肤组织的定居及迁移,但NB-UVN是否参与调控treg细胞及其具体机制尚不清楚。目的:本研究拟在体外细胞水平,观察NB-UVB对角质形成细胞分泌趋化因子CCL22的影响,并进一步探讨其具体机制,从而明确NB-UVB治疗是否起到诱导treg细胞向皮肤迁移的作用。方法:1.HaCat细胞予以不同剂量NB-UVB(0、100、200、400 mJ/cm2)照射,在不同时间点收集细胞裂解液及上清,采用Rt-PCR、Western Blot及ELISA等方法检测CCL22的表达及分泌情况;2.HaCat细胞予以不同剂量NB-UVB(0、100、200、400 mJ/cm2)照射,采用Western Blot筛选可能参与CCL22表达的信号通路;3.以NF-κB抑制剂PDtC预处理HaCat细胞后进行NB-UVB照射,收集细胞裂解液及上清,采用Rt-PCR、Western Blot及ELISA等方法检测CCL22 mRNA表达及分泌情况。结果:1.NB-UVB照射后HaCat细胞CCL22 mRNA表达水平显著升高,并呈现NB-UVB剂量依赖性;ELISA检测证实NB-UVB照射后CCL22分泌水平呈时间依赖方式显著上调;2.HaCat细胞经NB-UVB照射后2小时,随着NB-UVB照射剂量增强,磷酸化的NF-κB p65水平显著升高,同时CCL22蛋白表达水平也呈现上调趋势;3.NF-κB p65特异抑制剂PDtC预处理HaCat细胞显著降低NB-UVB诱导的CCL22 mRNA及分泌水平。结论:通过本课题研究,我们首次明确NB-UVB可通过活化NF-κB信号促进角质形成细胞表达分泌趋化因子CCL22,可能促进treg细胞向皮肤迁移,从而抑制皮损局部自身免疫反应,促进白癜风临床治疗。

关键词：窄谱中波紫外线(NB-UVB) 人角质形成细胞调节型t细胞 CCL22