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单核细胞趋化蛋白-1对大鼠试验性视网膜脱离过程中光感受器细胞凋亡的影响

单核细胞趋化蛋白-1对大鼠试验性视网膜脱离过程中光感受器细胞凋...

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作者：苗刚勇中南大学

学位级别：硕士

目的:1.探讨MCP-1在Brown Norway大鼠试验性视网膜脱离中的表达,及其与视网膜脱离过程中光感受器细胞凋亡的相关性。2.探讨干预脱离的视网膜MCP-1的表达,光感受器细胞凋亡的变化。方法:（1）取37只Brown Norway大鼠右眼建立视网膜脱离模... 详细信息

目的:1.探讨MCP-1在Brown Norway大鼠试验性视网膜脱离中的表达,及其与视网膜脱离过程中光感受器细胞凋亡的相关性。2.探讨干预脱离的视网膜MCP-1的表达,光感受器细胞凋亡的变化。方法:（1）取37只Brown Norway大鼠右眼建立视网膜脱离模型,左眼自身对照。排除因死亡,眼内炎和视网膜出血等不符合视网膜脱离模型标准的大鼠7只。剩余30只大鼠按预处理时间点（1小时,6小时,12小时,24小时和72小时）随机分为五组,每组6只。预定时间点处死大鼠,取出眼球。免疫组化技术检测实验眼与对照眼视网膜外核层MCP-1的表达;TUNEL原位末端标记法检测实验眼与对照眼外核层凋亡细胞阳性表达细胞数。统计软件分析MCP-1与TUNEL表达的相关性。（2）9只Brown Norway大鼠双眼建立视网膜脱离模型后,沿原穿刺口右眼视网膜下注射抗大鼠MCP-1 IgG抗体,左眼注射等容积的PBS。排除因死亡,眼内炎和视网膜出血等不符合视网膜脱离模型标准的大鼠3只。剩余6只大鼠模型建立后72小时处死,剜出眼球,制作石蜡切片,应用TUNEL原位末端标记法计数外核层阳性细胞。统计学方法比较72小时视网膜脱离组,MCP-1干预组和假干预组的外核层凋亡细胞的表达。结果:（1）免疫组化:正常视网膜MCP-1很少表达,点状分布于内核层,外核层和神经节细胞层,每个高倍镜下外核层阳性表达细胞数平均为3.64±1.02。试验性视网膜脱离模型建立1小时、6小时、12小时、24小时和72小时后MCP-1表达主要分布于外核层,内核层与神经节细胞层较少表达,外核层高倍镜下MCP-1阳性表达细胞数分别为10.50±2.82、11.13±3.31、25.23±5.56、37.23±7.15和205.83±15.23,与对照组均有统计学差异。视网膜脱离组之间相互比较,除视网膜脱离1小时和6小时无统计学差异外,其余各组均有显著性差异（P＜0.05）。（2）TUNEL:正常视网膜外核层TUNEL阳性细胞数为2.16±1.33/mm,试验性视网膜脱离模型建立1小时、6小时、12小时、24小时和72小时外核层TUNEL阳性表达细胞数分别为15.30±3.21/mm、25.11±5.31/mm、41.32±7.56/mm、80.23±10.15/mm和425.83±25.23/mm。（3）各组大鼠实验眼视网膜ONL内MCP-1及TUNEL阳性细胞均于RD后1h开始升高,随时间延长表达增加,72小时达到高峰,二者的表达呈显著正相关（r=0.905）。（4）视网膜脱离后72小时MCP-1干预组和PB S假干预组外核层TUNEL阳性表达细胞数为160.24±10.56/mm和430.15±30.42/mm。MCP-1干预组与视网膜脱离组统计学上具有显著性差异（p＜0.05）,而PBS假干预组与视网膜脱离组统计学无显著性差异（p＞0.05）。结论:（1）MCP-1在大鼠试验性视网膜脱离模型建立后1小时即明显表达,随时间延长表达增加,72小时达到高峰。（2）视网膜脱离各时相的MCP-1与TUNEL阳性表达细胞数具有明显正相关。（3）干预脱离的视网膜MCP-1的表达可减少光感受器细胞的凋亡。

关键词：单核细胞趋化蛋白-1 试验性视网膜脱离光感受器细胞凋亡

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