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缺血预适应和后适应的触发因子研究进展

海军医学杂志 2008年第2期29卷 171-173页

作者：孙强韩翠红孙学军第二军医大学潜水医学教研室上海200433

预适应和后适应是心肌保护领域的热点,预适应是在20年前被发现的,由于预适应在实际应用方面存在不足,最近几年人们开始关注后适应的研究。随着对预适应和后适应研究的深入,人们逐渐发现,这两种适应存在许多共同的分子过程,特别是在早期... 详细信息

预适应和后适应是心肌保护领域的热点,预适应是在20年前被发现的,由于预适应在实际应用方面存在不足,最近几年人们开始关注后适应的研究。随着对预适应和后适应研究的深入,人们逐渐发现,这两种适应存在许多共同的分子过程,特别是在早期触发分子方面,两者几乎完全一致,本文就心肌缺血预适应和后适应的触发因子做一简单回顾。

关键词：缺血预适应后适应触发因子

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启动肉猪生长基因表达的锌触发因子

中国饲料 1996年第20期 22-22页

作者：周国顺

人CC趋化因子配体17重组蛋白的原核表达、纯化及趋化活性分析

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中国生物制品学杂志 2020年第10期33卷 1128-1133,1142页

作者：曹拓魏准彭湘明广州市红十字会医院暨南大学医学院附属广州红十字会医院检验科广东广州510220 深圳北京大学香港科技大学医学中心生物医学研究所广东深圳518036

目的原核表达人CC趋化因子配体17(CC chemokine ligand 17,CCL17)重组蛋白,纯化并分析其趋化活性。方法根据GenBank中登录的人CCL17基因序列(NM002987.2)设计特异性引物,扩增人静脉全血CCL17基因,将其PCR产物与pCold-TFM载体连接构建重... 详细信息

目的原核表达人CC趋化因子配体17(CC chemokine ligand 17,CCL17)重组蛋白,纯化并分析其趋化活性。方法根据GenBank中登录的人CCL17基因序列(NM002987.2)设计特异性引物,扩增人静脉全血CCL17基因,将其PCR产物与pCold-TFM载体连接构建重组表达质粒pCold-TFM-CCL17,转化至*** BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达;表达产物经镍亲和层析,酶切移除融合蛋白的6×His-TF标签后,进行离子交换亲和层析纯化;凝胶过滤层析分析其聚合特性,分光光度法分析蛋白浓度,应用表达CCL17受体的Hut78细胞进行趋化试验。结果经双酶切及测序鉴定证明,重组表达质粒pCold-TFM-CCL17构建正确;融合蛋白以可溶性形式表达;纯化的人CCL17重组蛋白相对分子质量约为11000,纯度达95%以上,其蛋白峰呈均匀、对称的单个色谱峰,色谱峰面积占总曲线面积95%以上,蛋白表达量≥6 mg/L,其可趋化Hut78细胞发生迁移。结论成功表达了可溶性、高纯度、高产量、具备一定趋化活性的人CCL17重组蛋白,为其工业化生产及科研应用提供了参考。

关键词：人CC趋化因子配体17基因原核细胞基因表达纯化趋化活性分子伴侣触发因子

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细菌脂肪氧合酶酶学性质分析及表达优化

食品与发酵工业 2020年第19期46卷 1-8页

作者：庞翠萍刘松周景文张国强李江华粮食发酵工艺与技术国家工程实验室(江南大学) 江苏无锡214122 江南大学生物工程学院江苏无锡214122

脂肪氧合酶(lipoxygenase,LOX)是一类含有非血红素铁的双加氧酶,在食品、医药和化工等行业具有广泛应用。利用Escherichia coli BL21(DE3)重组表达来源于Pseudomonas aeruginosa和Burkholderia thailandensis的脂肪氧合酶PaLOX、BtLOX,并对其酶学性质进行比较分析。通过对酶学性质分析发现:PaLOX、BtLOX的最适反应温度分别为25和35℃;最适反应pH分别为7.0和7.5。PaLOX的K_(cat)/K_m较BtLOX高16.7倍,展现出更好的开发应用潜力。为优化PaLOX的可溶性表达,采取了2种优化策略:首先利用乳糖作为诱导剂代替异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG),使胞内酶活力提高了1.53倍,可溶表达水平提高了2.41倍;进一步与触发因子(triggering factor,TF)融合表达,TF-PaLOX酶活力提高了1.85倍,可溶表达水平提高3.19倍。该研究通过分析细菌来源脂肪氧合酶酶学性质及优化表达条件,为脂肪氧合酶的高效生产及应用提供了重要参考。

关键词：脂肪氧合酶酶学性质可溶表达触发因子

基因共表达对人源LysoPLD异源可溶性表达、纯化及酶学性质的影响

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食品工业科技 2021年第7期42卷 102-109页

作者：马文君滕琳王培培卫宏远郑春阳天津大学天津300350 天津强微特生物科技有限公司天津300384 守正创新生物科技(天津)有限公司天津300384

目的:为实现人源溶血磷脂酶D(LysoPLD)的原核异源可溶性表达。方法:通过NCBI检索,确定人源LysoPLD基因序列(GenBank:L46720.1)。采用密码子优化后的序列,克隆至pET-28a表达载体中,采用共表达麦芽糖结合蛋白融合标签(MBP)和共表达促蛋白... 详细信息

目的:为实现人源溶血磷脂酶D(LysoPLD)的原核异源可溶性表达。方法:通过NCBI检索,确定人源LysoPLD基因序列(GenBank:L46720.1)。采用密码子优化后的序列,克隆至pET-28a表达载体中,采用共表达麦芽糖结合蛋白融合标签(MBP)和共表达促蛋白正确折叠分子伴侣触发因子Trigger factor(tig)两种方式提高LysoPLD蛋白在大肠杆菌中的异源可溶性表达,建立对应蛋白的纯化工艺包括离子柱纯化,硫酸铵盐析,疏水柱纯化,淀粉树脂柱(Amylose Resin)纯化,分离纯化获得的重组酶,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定蛋白纯度,以对羟基棕榈酸酯为底物对比两种蛋白的酶学性质。结果:成功构建载体pET28a-MBP-LysoPLD和pET28a-pTF16-LysoPLD,并获得工程菌BL21(DE3)-pET28a-MBP-LysoPLD和BL21(DE3)-pET28a-pTf16-LysoPLD。BL21(DE3)-pET28a-MBP-LysoPLD经0.6 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)低温诱导过夜可获得上清表达的MBP-LysoPLD蛋白;BL21(DE3)-pET28a-pTf16-LysoPLD在含有0.5μg/mL L-Arabinose的LB培养基中培养,经0.1 mmol/L IPTG低温诱导表达,可获得可溶性表达的LysoPLD蛋白,经纯化,酶纯度可大于80%。以对羟基棕榈酸酯为底物,对比两种方法得到的蛋白的酶学性质,发现二者催化反应的最适温度、最适pH、最适Ca2+浓度、比酶活基本一致。结论:两种基因共表达方式都可实现人源LysoPLD的在大肠杆菌中的可溶性表达,且酶学性质基本相同。

关键词：人源溶血磷脂酶D 异源可溶性表达麦芽糖结合蛋白融合标签触发因子酶学性质

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地质灾害危险性评价因子与权重分析研究

城市与减灾 2014年第5期 40-43页

作者：汪洁李丽荆青青姚维岭王斌中国国土资源航空物探遥感中心方正国际软件(北京)有限公司

多年来我国在空间技术减灾领域做了大量的研究和应用工作,在自然灾害预警、灾害监测以及评估等方面取得了可观的进步。地质灾害危险性评价研究正逐渐形成地质灾害监测、预警和预报系统研究的组成部分。地质灾害危险性评价研究中一项重... 详细信息

多年来我国在空间技术减灾领域做了大量的研究和应用工作,在自然灾害预警、灾害监测以及评估等方面取得了可观的进步。地质灾害危险性评价研究正逐渐形成地质灾害监测、预警和预报系统研究的组成部分。地质灾害危险性评价研究中一项重要的工作就是因子选取和权重确定。控制地质灾害发生的因素主要分为主控因子和触发因子两类。主控因子为地质灾害发育的基础条件,为地质灾害的发育、发生、发展提供了物质条件;触发因子为地质灾害的发育、发生、发展提供了动力。

关键词：地质灾害危险性权重分析评价因子地质灾害监测危险性评价灾害预警触发因子主控因子

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太湖入湖河流水质指标的年变化规律

南京林业大学学报（自然科学版） 2007年第6期31卷 121-124页

作者：许梅任瑞丽刘茂松南京大学生命科学学院江苏南京210093

对位于太湖西部宜兴市大浦镇的一条入湖河流水质的年变化规律进行了分析。结果表明：（1）河道全年总氮含量监测值均劣于Ⅴ类水指标，其他水质指标相当于Ⅱ～Ⅳ类水水质，水体的富营养化主要体现为总氮含量的超标；（2）除TN、TP，其余... 详细信息

对位于太湖西部宜兴市大浦镇的一条入湖河流水质的年变化规律进行了分析。结果表明：（1）河道全年总氮含量监测值均劣于Ⅴ类水指标，其他水质指标相当于Ⅱ～Ⅳ类水水质，水体的富营养化主要体现为总氮含量的超标；（2）除TN、TP，其余水质指标在植物的生长季均劣于非生长季；（3）水体中BOD5、CODMn、Chla含量的变化主要受温度的影响，温度变化是水体有机质含量变化的触发因子；（4）降雨量与水体TP含量呈显著正相关，但对其他水质指标影响较小，说明水体生态过程对TP的影响相对较小，TN等指标更易受水体生态过程的影响。

关键词：河流富营养化触发因子季节变化太湖

2012年春末昆明大暴雨的中尺度对流系统特征分析

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气象 2018年第11期44卷 1391-1403页

作者：梁红丽王曼李湘云南省气象台昆明650034 云南省气象科学研究所昆明650034

利用常规气象观测资料、NCEP/NCAR逐6 h1°×1°再分析资料、FY-2E红外云图TBB资料、昆明C波段多普勒雷达探测资料,结合中尺度数值模式的模拟结果,分析了2012年5月24日晚昆明大暴雨期间中尺度对流系统演变特征及形成机理。结果表明,此... 详细信息

利用常规气象观测资料、NCEP/NCAR逐6 h1°×1°再分析资料、FY-2E红外云图TBB资料、昆明C波段多普勒雷达探测资料,结合中尺度数值模式的模拟结果,分析了2012年5月24日晚昆明大暴雨期间中尺度对流系统演变特征及形成机理。结果表明,此次大暴雨是在高低空系统最佳配置下产生的。降水峰值出现时,低层增暖湿,从地面到500 hPa呈显著的对流性不稳定层结,700～500 hPa垂直风切变达14 m·s^(-1)。纬向结构上,暴雨中心低层东风增强,300 hPa以下纬向风辐合,中心强度为-28×10^(-5)s^(-1),150hPa以下上升气流中心强度为21 m·s^(-1),近地面水汽通量辐合为-20×10^(-5) g·hPa^(-1)·s^(-1)·cm^(-2);经向上,暴雨中心500 hPa以下南风风速辐合,上升气流增强,强度与纬向一致,低层水汽通量辐合中心强度为-30×10^(-5)g·hPa^(-1)·s^(-1)·cm^(-2),强于纬向水汽通量辐合。此外大暴雨中地形对南风的强迫也是显著的,抬升速度在0.4～1.0m·s^(-1)。这次强降水分为初始、加强、回落和衰减四个阶段,昆明近地层浅薄冷空气加强时,引发其东侧对流单体移向昆明,强降水发生;然后南风出现脉动,局地湿层增厚和垂直风切变加大,促使对流单体两度增强并出现降水峰值;第三次峰值则是弱南风脉动及对流单体合并所造成,由于移入的单体较之原地发展的单体弱得多,原地单体作用的降水峰值也明显小于前面两次。对流降水回波属于暖云性质的热带低质心降水回波。

关键词：局地大暴雨 γ中尺度对流系统结构特征触发因子地形

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大地震临震预测的研究进展

地学前缘 2001年第2期8卷 217-223页

作者：任振球李均之曾小苹中国气象科学研究院北京100081 北京工业大学北京100022 中国地震局地球物理研究所北京100081

短临地震预报尤其是临震预报 ,是当今国内外公认的世界性科学难点。文章综述了中国科学家从多学科交叉和内外因耦合的科学途径 ,已在大地震临震信号方面获得了次声波异常、地应力突跳、虎皮鹦鹉跳跃异常、地电和地磁异常、卫星红外异常... 详细信息

短临地震预报尤其是临震预报 ,是当今国内外公认的世界性科学难点。文章综述了中国科学家从多学科交叉和内外因耦合的科学途径 ,已在大地震临震信号方面获得了次声波异常、地应力突跳、虎皮鹦鹉跳跃异常、地电和地磁异常、卫星红外异常、重力高频脉冲等临震预测的手段。笔者通过典型分析和普查对比各种地球物理因子和各种天文因子可能影响的整体研究 ,找到了大地震临震的主要触发因子———以月亮为主的非经典引潮力共振的异常叠加。在此基础上 ,采取内外因耦合的途径和方法 ,在 6a多来联合进行的临震预测内部试验表明 ,地震三要素均基本正确的成功率已达40 %。最后 ,还对临震预报问题提出了一些看法。

关键词：临震预测临震信号触发因子地震预报次声波异常地应力地磁地电