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NCSTN基因沉默对HaCaT细胞增殖分化的影响

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中华皮肤科杂志 2020年第9期53卷 704-709页

作者：张婉璐张媛媛吴英达程萍李文锐徐浩翔王宝玺何艳艳李诚让中国医学科学院北京协和医学院皮肤病医院皮肤科南京210042 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院皮肤科北京100144 蚌埠医学院第一附属医院皮肤科安徽233004

目的检测NCSTN基因稳定沉默的人永生化角质形成细胞(HaCaT)增殖活性及相关分化蛋白的改变,初步探索反常性痤疮发病的可能机制。方法构建慢病毒介导shRNA沉默NCSTN基因的HaCaT细胞模型(shRNA组),转染空载慢病毒的HaCaT细胞作为阴性对照组... 详细信息

目的检测NCSTN基因稳定沉默的人永生化角质形成细胞(HaCaT)增殖活性及相关分化蛋白的改变,初步探索反常性痤疮发病的可能机制。方法构建慢病毒介导shRNA沉默NCSTN基因的HaCaT细胞模型(shRNA组),转染空载慢病毒的HaCaT细胞作为阴性对照组,实时定量PCR和Western印迹法检测NCSTN基因的沉默效率。CCK8法检测HaCaT细胞增殖活性,实时定量PCR和Western印迹法检测HaCaT细胞角蛋白(CK1、CK5、CK7、CK10、CK14、CK16、CK17、CK18、CK19、CK20)及其他分化分子(内披蛋白、兜甲蛋白)mRNA和蛋白的表达。两组计量资料的比较采用两独立样本t检验。结果shRNA组NCSTN mRNA及蛋白表达(0.42±0.19、0.30±0.07)均显著低于阴性对照组(1.00±0.34、1.00±0.26;t=5.196、2.637,P蛋白表达显著下调(t=3.787、3.817,P蛋白表达明显降低(t=2.904,P<0.05)。结论稳定沉默NCSTN基因表达会引起HaCaT细胞异常增殖分化,为后续探究NCSTN基因突变引起反常性痤疮提供新思路。

关键词：化脓性汗腺炎基因沉默角蛋白细胞细胞增殖细胞分化角蛋白质类 HaCaT细胞 NCSTN基因

流式细胞术在非造血系统肿瘤骨髓侵犯检测中的价值

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中华检验医学杂志 2011年第2期34卷 141-146页

作者：王卉于鑫彭吉润童春容伍平李燕燕康蕊孙慧鹏北京市道培医院特殊诊断中心北京100049 北京大学人民医院肝胆外科中心北京100049

目的探讨流式细胞术在识别CK阳性和阴性非造血系统肿瘤骨髓侵犯中的价值。方法选取代表10种常见人类上皮来源肿瘤的26个细胞系和1种人淋巴瘤细胞系、1种T淋巴母细胞白血病细胞系，均购自美国标准生物品收藏中心。选择2009年7月至2010... 详细信息

目的探讨流式细胞术在识别CK阳性和阴性非造血系统肿瘤骨髓侵犯中的价值。方法选取代表10种常见人类上皮来源肿瘤的26个细胞系和1种人淋巴瘤细胞系、1种T淋巴母细胞白血病细胞系，均购自美国标准生物品收藏中心。选择2009年7月至2010年6月北京市道培医院5份非造血系统肿瘤患者、15份血液系统肿瘤患者、15份移植后骨髓恢复正常的对照组患者骨髓标本。复苏冻存的各细胞系，传代培养至细胞进入对数生长期。破膜后使用胞浆CK—FITC抗体做荧光标记，进行四色流式细胞术检测，分析肿瘤细胞CK表达率。骨髓标本按照我室常规四色直接免疫荧光标记法做胞膜和胞浆染色，通过系别标志和幼稚细胞标志，以及CK表达情况，根据2008年世界卫生组织诊断标准做出相应诊断或者排除造血系统肿瘤。结果所有上皮来源的肿瘤细胞系均不同程度表达CK，平均CK表达率为81．1％，而淋巴系统肿瘤细胞系均不表达CK。2例上皮来源肿瘤均表达CK，其中1例甲状腺癌病例CK表达率为100．0％，1例肺癌病例CK表达率为98．2％。血液系统肿瘤和对照组骨髓标本均不表达CK，分别表达相应的血液学标志：如CD45，和系别标志，或者CD138和胞浆轻链。3份非上皮来源的非造血系统肿瘤骨髓标本均不表达CK。CK阳性或阴性的非造血系统肿瘤不表达造血细胞标志：如CD45、HLA—ABC、HLA—DRDPDQ，不表达特异性系别标志。而CK阳性可能有助于提示上皮来源肿瘤的诊断。结论使用流式细胞术检测造血细胞标志和CK可以有效排除CD45，阴性的造血系统肿瘤，检测CK阳性和阴性非造血系统肿瘤骨髓侵犯。

关键词：肿瘤,腺和上皮骨髓肿瘤肿瘤侵润角蛋白质类流式细胞术

前列腺术后犬前列腺部尿道再上皮化修复的实验观察

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中华医学杂志 2013年第4期93卷 261-264页

作者：罗光恒罗蕾杨秀书刘军孙兆林夏术阶贵州省人民医院泌尿外科贵州550002 上海交通大学泌尿外科研究所

目的观察前列腺术后犬前列腺部尿道再上皮化的修复过程，并探讨基底层细胞角蛋白（CK）34（CK3413E12）细胞在再上皮化过程中的作用。方法选择15只老年家犬行2-μm激光前列腺汽化切除术，分别于术后3、7、14d序贯取材，采用免疫组织化... 详细信息

目的观察前列腺术后犬前列腺部尿道再上皮化的修复过程，并探讨基底层细胞角蛋白（CK）34（CK3413E12）细胞在再上皮化过程中的作用。方法选择15只老年家犬行2-μm激光前列腺汽化切除术，分别于术后3、7、14d序贯取材，采用免疫组织化学染色法检测前列腺部尿道上皮细胞CK34、前列腺特异抗原（PSA）表达水平。结果术后3d手术创面未见CK34阳性表达细胞；术后7d可见连接成片的CK34阳性细胞覆盖手术创面，且这些细胞与残余前列腺组织连续；术后14d新生尿道上皮的基底细胞层阳性表达CK34。正常或增生的前列腺组织可见前列腺腺泡、腺管上皮胞质PSA阳性，前列腺部尿道上皮PSA表达阴性。术后14d再生的前列腺部尿路上皮的PSA均为阴性表达。结论前列腺组织是前列腺增生症术后前列腺尿道再上皮化的重要组织，而CK34阳性的基底细胞可能是这一修复过程的主要细胞。

关键词：前列腺尿道上皮角蛋白质类

非小细胞肺癌患者外周血中BJ—TSA-9、CK19、Pre-proGRP mRNA的表达及联合检测的意义

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中华医学杂志 2010年第28期90卷 1958-1962页

作者：曲怡梅廖国清刘鹏辉王红梅刘蕾李亮亮解国清解放军第三0九医院肿瘤科北京100091 北京大学医学部免疫系

目的研究非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血中肿瘤特异性抗原9（BJ-TSA-9）、细胞角蛋白19（CKl9）、胃泌素释放肽前体（Pre-proGRP）mRNA的表达及其联合检测的临床意义。方法选取2006年1月至2007年3月解放军第三0九医院收治的120例NSCL... 详细信息

目的研究非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血中肿瘤特异性抗原9（BJ-TSA-9）、细胞角蛋白19（CKl9）、胃泌素释放肽前体（Pre-proGRP）mRNA的表达及其联合检测的临床意义。方法选取2006年1月至2007年3月解放军第三0九医院收治的120例NSCLC患者、106例肺良性疾病患者及80名健康志愿者，采用巢式PCR技术检测外周血BJ-TSA-9、CKl9、Pre-proGRP mRNA的表达；结合NSCLC患者的病理结果、肿瘤类型、临床分期对检测结果的敏感度、特异度进行统计学分析，绘制ROC曲线；同时分析此3项指标与患者预后的相关性。结果BJ—TSA-9、CK19、Pre-proGRP mRNA在NSCLC患者中的表达阳性率分别为56．7％、57．5％、35．0％，明显高于肺良性病变组（0．9％、6．6％、5．7％）和健康对照组（0、3．8％、0，均P〈0．05）。ROC曲线提示联合检测3个基因的敏感度为84．3％，特异度为94．6％。单因素分析提示疾病分期、东方协作肿瘤组织（ECOG）体力状态评分、3个基因表达的个数与总生存期相关（X^2=67．928、95．981、60．285，均P=0．000）。多因素分析提示疾病分期、ECOG评分、3个基因表达个数是独立预后指标（HR=2．866、4．251、1．845，均P=0．000）。结论BJ-TSA-9、CKl9、Pre-proGRP mRNA可作为检测NSCLC患者外周血微转移的标记物，联合检测有助于提高准确性。

关键词：癌非小细胞肺聚合酶链反应角蛋白质类胃泌素释放肽

角蛋白在中耳胆脂瘤病理过程中的作用及研究进展

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2019年第11期54卷 870-874页

作者：冯奕思司瑜张志钢中山大学孙逸仙纪念医院耳鼻咽喉头颈外科广州510120

角蛋白(keratin)是上皮细胞中间丝细胞骨架的主要成分,具有保护上皮细胞完整性以及维护其正常功能的作用。角蛋白的不同表达可导致上皮不同的增殖及分化状态,故可作为上皮角质形成细胞增殖、分化和迁移改变的标记。中耳胆脂瘤是常见的... 详细信息

角蛋白(keratin)是上皮细胞中间丝细胞骨架的主要成分,具有保护上皮细胞完整性以及维护其正常功能的作用。角蛋白的不同表达可导致上皮不同的增殖及分化状态,故可作为上皮角质形成细胞增殖、分化和迁移改变的标记。中耳胆脂瘤是常见的耳科疾病之一,病理上主要表现为角质化鳞状上皮过度增殖、角蛋白碎片堆积,具有过度增殖和侵袭破骨的特征。本文回顾近年来中耳胆脂瘤与角蛋白相关的研究进展,从"增殖"和"破骨"两方面来阐释角蛋白在中耳胆脂瘤病理生理过程中可能的作用,同时探讨存在的问题、展望未来的研究方向。

关键词：角蛋白质类胆脂瘤,中耳细胞增殖骨质吸收

关节炎抗体在幼年特发性关节炎早期分型诊断及预后评估中的意义

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中华检验医学杂志 2019年第9期42卷 752-756页

作者：李胜男赖建铭黄小兰柳媛吴凤岐周志轩苏改秀北京市首都儿科研究所附属儿童医院风湿免疫科北京100020 北京市首都儿科研究所附属儿童医院中心试验室北京100020

目的探讨抗角蛋白抗体(AKA)、抗核周因子(APF)及抗环瓜氨酸肽抗体(ACPA)3种关节炎抗体在幼年特发性关节炎(JIA)的早期分型诊断意义,以及其与预后的关系。方法采用回顾性研究收集2013年12月至2016年6月首都儿科研究所附属儿童医院住院诊... 详细信息

目的探讨抗角蛋白抗体(AKA)、抗核周因子(APF)及抗环瓜氨酸肽抗体(ACPA)3种关节炎抗体在幼年特发性关节炎(JIA)的早期分型诊断意义,以及其与预后的关系。方法采用回顾性研究收集2013年12月至2016年6月首都儿科研究所附属儿童医院住院诊断为JIA,治疗并随访超过1年的患儿144例,其中男66例(46%),女78例(54%),诊断时年龄1岁5个月至15岁9个月。在诊断初期,进行AKA、ACPA、APF、TNFα等指标的检测。应用卡方检验或Fisher精确检验比较不同亚型之间3种抗体的阳性率;并分别应用Mann-Whitney非参数检验以及卡方检验或Fisher精确检验分析抗体阳性组与抗体阴性组之间预后的差异。结果144例患儿中,全身型49例(34%);多关节炎型28例(19.4%);少关节炎型61例(42.3%);附着点炎相关型6例(4.2%)。诊断初期检测3种抗体,任一抗体或联合抗体阳性者共52例(36.1%),其中AKA阳性者14例(9.7%),ACPA阳性者44例(30.6%),APF阳性者12例(8.3%)。ACPA、AKA、APF3种抗体阳性检出率在不同亚型之间对比,差异有统计学意义(χ^2分别为33.863、26.860、14.395,P分别为<0.01、<0.01、<0.05);多关节炎型3种抗体阳性检出率均高于全身型及少关节炎型;非全身型患儿95例中,抗体阳性组诊断初期细胞因子TNFα水平高于抗体阴性组(Z=4.785,P<0.01);144例患者随访1年,抗体阳性组与抗体阴性组相比,应用生物制剂治疗者(50%vs25%)以及关节畸形者(17.3%vs2.2%)、重要关节(髋关节及中轴关节)受累者(59.6%vs14.1%)例数明显增多,差异有统计学意义(χ^2分别为9.249、10.875、32.392,P均为<0.01);同时,抗体阳性组患儿受累关节数(7.07±3.85)个明显多于抗体阴性组患儿(2.31±1.64)个(F=63.822,P<0.01)。结论AKA、APF及ACPA这3种关节炎抗体是JIA早期分型诊断的重要血清学依据,并可能与JIA患儿预后相关。

关键词：关节炎,青少年角蛋白质类自身抗体抗体,抗核抗瓜氨酸化蛋白抗体早期诊断预后

银屑病患者皮损在阿维A治疗前后角蛋白10、14、17的变化

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中华皮肤科杂志 2008年第11期41卷 719-722页

作者：马敬李玉平李萍闫华冯世军四荣联河北省沧州市中心医院皮肤科 061001 河北医科大学第二医院皮肤科

目的探讨角蛋白10、14、17（K10、K14、K17）在阿维A治疗前后银屑病皮损中的表达。方法免疫组化法检测30例中、重度斑块状银屑病患者经阿维A治疗前后皮损中K10、K14、K17的表达情况。并观察患者病情变化与各角蛋白指标含量之间的相互关... 详细信息

目的探讨角蛋白10、14、17（K10、K14、K17）在阿维A治疗前后银屑病皮损中的表达。方法免疫组化法检测30例中、重度斑块状银屑病患者经阿维A治疗前后皮损中K10、K14、K17的表达情况。并观察患者病情变化与各角蛋白指标含量之间的相互关系。结果①银屑病患者治疗前皮损中K14、K17阳性面积率明显增加，而K10阳性面积率下调；阿维A治疗后K14、K17阳性面积率明显降低（P〈0．01），K10阳性面积率明显增加（P〈0．01），但与正常人对照组比较差异仍有统计学意义（P〈0．01）。②治疗后患者的PASI评分与治疗前比较显著下降（P〈0．01）。③治疗前后K17、K14、K10的变化与疾病的过程及严重程度有一定关系。结论系统应用阿维A可改变银屑病皮损中K14、K17、K10的表达，但改变程度并不总与临床表现的改善程度相一致。

关键词：银屑病阿维A 角蛋白质类

肺癌18F-FDG PET/CT代谢特征与肿瘤标志物的相关性

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中国医学影像学杂志 2020年第5期28卷 343-348页

作者：王慧春王玉斌崔兰兰陈晓红虎维东甘肃省人民医院PET/CT中心甘肃兰州730000 甘肃省人民医院呼吸科甘肃兰州730000

目的分析肺癌原发灶的18F-FDG PET/CT代谢参数与血清肿瘤标志物的关系,以及两者在Ⅰa~Ⅲa期与Ⅲb~Ⅳb期肺癌中的差异。资料与方法回顾性分析97例行18F-FDG PET/CT检查的初诊肺癌患者,测量原发灶直径、最大标准化摄取值(SUVmax)、代谢体... 详细信息

目的分析肺癌原发灶的18F-FDG PET/CT代谢参数与血清肿瘤标志物的关系,以及两者在Ⅰa~Ⅲa期与Ⅲb~Ⅳb期肺癌中的差异。资料与方法回顾性分析97例行18F-FDG PET/CT检查的初诊肺癌患者,测量原发灶直径、最大标准化摄取值(SUVmax)、代谢体积(MTV)与病灶糖酵解总量(TLG),检测肺癌血清标志物癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCCA)、胃泌素释放肽前体(Pro-GRP)。以PET/CT分期结果为主要依据,综合患者临床资料进行TNM分期。根据病理类型分组,比较各组代谢参数的差异、各参数与肿瘤标志物的相关性以及不同分期中各指标的差异。结果鳞癌患者SUVmax、MTV、TLG均显著高于腺癌,差异有统计学意义(P0.05)。腺癌患者原发灶直径、MTV、TLG与血清CEA(r=0.449、0.452、0.422,P0.05)。与鳞癌和SCLC不同,腺癌患者Ⅰa~Ⅲa期与Ⅲb~Ⅳb期原发灶直径、MTV、TLG、CEA及CYFRA21-1差异均有统计学意义(P类型的差异而不同。腺癌与鳞癌的非SUVmax代谢参数直径、MTV、TLG与血清肿瘤标志物具有一定的相关性。腺癌的非SUVmax代谢参数及血清CEA、CYFRA21-1水平是影响分期的危险因素。

关键词：肺肿瘤正电子发射断层显像计算机体层摄影术正电子发射断层显像术体层摄影术,X线计算机氟脱氧葡萄糖F18 癌胚抗原角蛋白质类抗原,肿瘤磷酸丙酮酸水合酶胃泌素释放肽病理学,外科

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表皮干细胞的生物学标记物

中国组织工程研究 2013年第36期17卷 6527-6532页

作者：郝飞张玲吴岩内蒙古医科大学内蒙古自治区呼和浩特市010050 包头市中心医院内蒙古自治区包头市014040

背景:大面积烧伤、严重创伤后皮肤缺损的修复问题一直以来是急待突破的临床技术瓶颈。随着组织工程时代的到来,表皮干细胞越来越多的被应用于组织工程、细胞替代治疗及基因工程等科技领域,因此其分离、鉴定成为备受关注的研究热点。目的... 详细信息

背景:大面积烧伤、严重创伤后皮肤缺损的修复问题一直以来是急待突破的临床技术瓶颈。随着组织工程时代的到来,表皮干细胞越来越多的被应用于组织工程、细胞替代治疗及基因工程等科技领域,因此其分离、鉴定成为备受关注的研究热点。目的:综述国内外关于表皮干细胞生物学标记的研究进展。方法:计算机检索中国生物医学文献数据库、中文科技期刊全文数据库、中文学术期刊全文数据库及PubMed、EMbase数据库有关表皮干细胞特异性标志物的文章,检索词为"表皮干细胞,整合素,角蛋白,P63,CD71,连接蛋白43,端粒酶,血管紧张素转化酶,烟酸己可碱,Epidermal stem cells,integrin,keratin,P63,CD71,telomerase,ACE,cx43,Hoechst"。排除较陈旧的理论观点以及重复性研究。结果与结论:最后纳入40篇文献。结果显示,表皮干细胞在皮肤组织工程中的应用为皮肤缺损修复的组织来源带来了曙光,研究发现表皮干细胞分布在毛囊隆突部和表皮的基底层,然而整个基底细胞中只有约4%的细胞是干细胞,因此正确分离、培养、鉴定表皮肤干细胞成为关键问题,由此表皮干细胞特异性标记物的相关研究成为热点。目前在表皮干细胞的生物学标记物方面已取得多方面的进展,迄今为止,尚未能找到一种绝对、公认的表皮干细胞标记物。研究主要集中在整合素、角蛋白、P63、CD71、连接蛋白43、端粒酶等方面,另外近年来烟酸己可碱、CD90、CD98、CD200在表皮干细胞的生物学标记物研究领域有所报道。研究发现每一种标记物都有其缺陷及不足之处,目前在表皮干细胞研究领域里仍有很多问题急待解决。

关键词：干细胞表皮整合素类角蛋白质类连接蛋白43