检索结果-南通市图书馆

作者：解传奇山西医科大学

学位级别：硕士

目的:本实验通过将骨髓间充质干细胞移植入实验性自身免疫性葡萄膜炎鼠血液内,观察对葡萄膜炎病情的影响,并分析其对活体内免疫机制的调节作用,以期能为MSCs在葡萄膜炎的临床治疗提供可靠的理论依据和实验基础。方法:(1)骨髓间充质干细... 详细信息

目的:本实验通过将骨髓间充质干细胞移植入实验性自身免疫性葡萄膜炎鼠血液内,观察对葡萄膜炎病情的影响,并分析其对活体内免疫机制的调节作用,以期能为MSCs在葡萄膜炎的临床治疗提供可靠的理论依据和实验基础。方法:(1)骨髓间充质干细胞的培养和鉴定大鼠颈椎脱臼处死,无菌条件下取股骨,用DMEM冲出骨髓,以5×106/ml的细胞密度接种于培养瓶中,加入DMEM培养,每隔3～4 d换液一次。当细胞生长至约90%融合时,用0.25%胰酶室温下消化,按1∶2比例传代接种。反复传代扩增直至第三代。应用FACScan流式细胞仪检测细胞表面抗原(CD45、CD71、CD44和CD105)的表达。最后用PBS液制成细胞悬液,其细胞数为2×106/ml,备用。(2)试验动物分组和葡萄膜炎大鼠模型的建立将18只Lewis大鼠随机分为模型对照组、骨髓间充质干细胞干预组和正常组,每组6只。将浓度为1mg/ml的HS-AgP35溶液与完全福氏佐剂等体积混合,取0.2ml分别注射至Lewis大鼠双侧后足垫内进行免疫。7天后相同抗原剂量行第二次免疫建造大鼠葡萄膜炎模型。(3)骨髓间充质干细胞的移植造模当日将1ml骨髓间充质干细胞悬液经尾静脉注射干预组大鼠体内,观察时间为2周。(4)EAU临床观察于第一次注射抗原后每日托品酰胺散瞳三组大鼠双眼,进行眼前节和眼底检查,详细记录三组大鼠临床表现,参照Caspi临床分级。(5)组织病理学处理于第二次免疫后7天处死大鼠,摘取大鼠眼球置于4%多聚甲醛中固定,常规酒精梯度固定脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,连续4μm厚切片,HE染色。光学显微镜下观察大鼠视网膜组织结构,比较三组大鼠组织病理学分级。(6)IFN-γ的检测抽取各组动物外周血2mL,离心取血清,双抗体夹心法测三组大鼠血清内IFN-γ的含量。结果:①经过反复传代获得的第三代的骨髓间充质干细胞贴壁生长,细胞呈梭性。流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达:CD44(+)、CD45(-)、CD71(+)和CD105(+)②模型对照组EAU大鼠的临床分级:1级1只(16.67%)、2级1只(16.67%)、3级3只(50%)、4级1只(16.67%),骨髓间充质干细胞干预组EAU大鼠的临床分级为:0级2只(33.33%)、0.5级3只(50%)、1级1只(16.67%),与模型对照组相比显著降低(P=0.028)。③模型对照组EAU大鼠的组织病理学分级为:3级4只(66.67%)、4级2只(33.33%),干预组EAU大鼠的组织病理学分级为:0级1只(16.67%)、0.5级4只(66.67%)、1级1只(16.67%),两组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。④实验干预组动物外周血中IFN-γ水平下降,与模型对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论:①MSCs细胞悬液注射组大鼠EAU临床表现和组织病理学改变明显轻于对照组,说明骨髓间充质干细胞能够减轻大鼠葡萄膜炎病变程度,改善大鼠葡萄膜炎病情;②MSCs细胞悬液注射组的血清内炎性因子INF-γ水平明显低于模型对照组,可见骨髓间充质干细胞能够抑制致敏T淋巴细胞分泌INF-γ,减轻对组织的损害。

关键词：骨髓间充质干细胞实验性自身免疫性葡萄膜炎视网膜可溶性抗原 INFγ

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S-抗原及其研究现状

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检验医学教育 2006年第2期13卷 41-43页

作者：李丽胡波仝佳江苏大学医学技术学院医学检验2002年级江苏镇江212001 江苏大学医学技术学院免疫学教研室江苏镇江212001

视网膜可溶性抗原(s-Ag)具有致葡萄膜炎(EAU)的作用,近年来随着对s-Ag的深入研究,其氮基酸组成、功能、作用机制及其制备方法已基本搞清楚,从而为EAU模型的建立奠定了良好的基础。

关键词：视网膜可溶性抗原葡萄膜炎氨基酸模型

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