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谷氨酸转运体GLAST在小鼠视网膜兴奋性损伤后的表达

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谷氨酸转运体GLAST在小鼠视网膜兴奋性损伤后的表达

作者：张彬青岛大学

学位级别：硕士

目的：本实验在NMDA(N-甲基-D天门冬氨酸)所致小鼠视网膜兴奋性损伤中,观察谷氨酸转运体GLAST的蛋白表达量和mRNA随时间表达量的变化,探讨GLAST对神经节细胞凋亡的作用。方法：本实验采用健康清洁级4-8周龄C57BL/6J小鼠共54只,雌雄各半... 详细信息

目的：本实验在NMDA(N-甲基-D天门冬氨酸)所致小鼠视网膜兴奋性损伤中,观察谷氨酸转运体GLAST的蛋白表达量和mRNA随时间表达量的变化,探讨GLAST对神经节细胞凋亡的作用。方法：本实验采用健康清洁级4-8周龄C57BL/6J小鼠共54只,雌雄各半,体重约20-30g,随机分成A、B、C三组,A组6只为正常对照组,B、C为实验组各24只,其中B组为NMDA兴奋性损伤组,C组为空白对照组。B组、C组于造模后6h、24h、3d和7d四个时间点处死。处死前对每组小鼠进行暗适应,至少暗适应6小时,然后进行视网膜电生理(ERG)检查。ERG操作完毕处死动物,取每只小鼠左眼眼球做病理切片,进行HE染色、免疫组织化学及TUNEL凋亡细胞染色,右眼眼球取完整视网膜用Taqman荧光定量RT-PCR法检测视网膜中谷氨酸转运体GLASTmRNA随时间表达变化,以及与正常组比较表达差异。结果1、HE染色：(1) NMDA兴奋性损伤组：造模后6h,与正常对照组比较未见明显差异,造模后24h,视网膜的神经节细胞层开始出现凋亡形态细胞,3d凋亡细胞增多并且神经节细胞数目逐渐减少,7d兴奋性损伤组神经节细胞的数目更少,而且内丛状层变薄,与正常组比较差异有统计学意义(P0.05)。 2、视网膜电生理(ERG)检查：造模后3、7天,(1)NMDA实验组：与正常对照组比较,在标准混合反应中b波波幅显著下降,差异显著有统计学意义(P0.05)。 3、TUNEL凋亡细胞染色：(1)NMDA实验组：四组神经节细胞层都可以见到红染的凋亡细胞,24h组凋亡细胞数量最多,与正常组比较差异有统计学意义(P0.05)。 4、免疫组织化学：三组中都能见到GLAST蛋白的表达,正常组与PBS组可见GALST蛋白分布在视网膜全层,且主要分布在内外丛状层。NMDA组：四个时间点GLAST蛋白表达都明显减少。3、7d组能见到GALST蛋白在内丛状层、神经节细胞层的浓度要明显高于其他各层。 5、Taqman法荧光定量RT-PCR:(1)NMDA组：与正常组比较GLAST的mRNA表达显著下调,差异具有统计学意义(P神经节细胞存活率也下降,这说明GALST表达减少可能加重了神经节细胞的损伤。 3、GLAST蛋白表达发生了位置的重新分布,可能是一种自我保护的代偿机制。

关键词：谷氨酸谷氨酸转运体 GLAST 视神经保护神经节细胞

转基因视网膜神经节细胞系RGC-5的研究进展

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眼科研究 2006年第5期24卷 553-556页

作者：杜秀娟刘金华广西医科大学第一附属医院眼科南宁530021

为研究青光眼性视网膜神经节细胞(RGCs)损害的细胞和分子机制,多种细胞培养模型已经建立,但是转基因的视网膜神经节细胞RGC-5细胞系在国内未见报道。RGC-5细胞系是应用鼠视网膜细胞通过转染技术建立的,除了其形态和电生理特性与RGCs有... 详细信息

为研究青光眼性视网膜神经节细胞(RGCs)损害的细胞和分子机制,多种细胞培养模型已经建立,但是转基因的视网膜神经节细胞RGC-5细胞系在国内未见报道。RGC-5细胞系是应用鼠视网膜细胞通过转染技术建立的,除了其形态和电生理特性与RGCs有所不同外,细胞的生长条件以及细胞膜或者细胞内表达的物质与RGCs一致。应用RGC-5细胞系已经建立了多种凋亡模型,研究发现这些模型的细胞在凋亡时的基因变化以及对神经保护剂的反应都与RGCs一致。因此加强对RGC-5的研究和应用,对进一步阐明RGCs的损伤和保护机制将非常有意义。现就这个细胞系的建立及已做的相关研究做一综述。

关键词： RGC-5细胞系转基因视网膜神经节细胞细胞培养视神经保护

银杏叶胶囊对原发性闭角型青光眼术后视野保护作用的随机双盲安慰剂对照多中心临床研究

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银杏叶胶囊对原发性闭角型青光眼术后视野保护作用的随机双盲安慰...

作者：张日新成都中医药大学

学位级别：硕士

目的：以视野作为主要疗效指标,评价银杏叶胶囊对原发性闭角型青光眼手术后眼压控制患者视野的影响,并探讨其视功能保护的作用机制。方法：采用随机、双盲、安慰剂对照的多中心临床研究方法,纳入眼压控制的原发性急性闭角型青光眼术后患... 详细信息

目的：以视野作为主要疗效指标,评价银杏叶胶囊对原发性闭角型青光眼手术后眼压控制患者视野的影响,并探讨其视功能保护的作用机制。方法：采用随机、双盲、安慰剂对照的多中心临床研究方法,纳入眼压控制的原发性急性闭角型青光眼术后患者,分层随机分为治疗组和对照组,治疗组口服银杏叶胶囊,对照组口服安慰剂,连续用药6个月,每月复诊1次。治疗前及每次复诊均进行矫正视力、眼压和其他眼科常规检查,视野在治疗前、治疗3个月和治疗6个月各检查一次,HRT在治疗前和治疗6个月各进行一次检查。以视野为主要为疗效指标,并结合HRT检测结果,观察银杏叶胶囊对急性闭角型青光眼术后的干预作用。分析视野时,除了对视野平均缺损(MD)、平均视敏感度(MS)、缺损方差(LV)进行统计外,还结合视网膜神经纤维层走行将所得到的视野结果划分为10个区域,分别计算每个区域的MD值,并对其进行分析。结果：本试验共纳入研究病例141例,其中银杏叶胶囊组70例,安慰剂组71例。视野检查,治疗3、6个月后,银杏叶组MD分别下降0.73±3.26dB和1.13±2.65dB,治疗6个月后和治疗前相比差异有统计学意义(P=0.001),安慰剂组分别下降0.13±2.97dB和-0.02±3.85dB,治疗前后比较差异无统计学意义(P>0.05)。分区MD比较,治疗3个月和6个月后,银杏叶组各区域MD均有下降,其中区域4、6、7治疗6个月后同治疗前比较差异有统计学意义(P0.05);治疗6个月后,区域4、6、7MD治疗前后差值两组间比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗过程中未发生与治疗相关的临床意义的安全性问题。结论：银杏叶胶囊可以改善原发性闭角青光眼手术后眼压控制患者的视野,表明其具有一定的视神经保护作用。

关键词：原发性闭角型青光眼视神经保护银杏叶胶囊临床研究多中心

脂肪干细胞玻璃体腔移植对大鼠青光眼模型视网膜神经节细胞的保护作用

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脂肪干细胞玻璃体腔移植对大鼠青光眼模型视网膜神经节细胞的保护...

作者：丁建峰青岛大学

学位级别：硕士

目的:研究脂肪干细胞玻璃体腔注射对大鼠青光眼模型的视网膜神经节细胞的保护作用,并初步探讨可能的机制。方法:培养脂肪干细胞,培养至P4接近单层融合时,收集并调整细胞密度备用。将大鼠分为四组:青光眼干细胞组、青光眼对照组、正常眼... 详细信息

目的:研究脂肪干细胞玻璃体腔注射对大鼠青光眼模型的视网膜神经节细胞的保护作用,并初步探讨可能的机制。方法:培养脂肪干细胞,培养至P4接近单层融合时,收集并调整细胞密度备用。将大鼠分为四组:青光眼干细胞组、青光眼对照组、正常眼压干细胞组和正常眼压对照组,采用烙闭表层巩膜静脉的方法制备大鼠青光眼模型,均以右眼为操作眼,青光眼干细胞组、青光眼对照组行造模手术,正常眼压干细胞组、正常眼压对照组行假手术操作。手术操作3周时,三组均行玻璃体腔注射操作,青光眼干细胞组注射物为5×105 ADSCs悬浮液6?L,青光眼对照组注射物为DMEM液6?L,正常眼压对照组注射物为5×105 ADSCs悬浮液6?L,正常眼压对照组注射物DMEM液6?L。分别测量并记录术前、术后1周、2周、3周、4周、5周、6周眼压。实验完成后将动物处死,随机摘取眼球,分别进行冰冻切片HE染色、免疫荧光染色处理,并进行q RT-PCR检测BDNF m RNA表达量。结果:造模后1周,模型眼相对于假手术眼,IOP平均升高10.9±2.1mm Hg,并能在预定实验时间6周内保持这一水平。而在对各组进行移植操作后,青光眼干细胞组的IOP降低水平在移植操作后1、2、3周时均显著高于青光眼对照组(p神经节细胞数明显减少,青光眼对照组较青光眼干细胞组减少更明显。除正常眼压两组间外,其他各组间在400倍荧光显微镜下RGC计数差异均具有统计学意义,计数:青光眼对照组正常眼压干细胞组>青光眼对照组>正常眼压对照组。结论:脂肪干细胞玻璃体腔移植对大鼠青光眼模型视网膜神经节细胞具有保护作用,可能通过降低眼压和增多BDNF等途径发挥保护作用。

关键词：脂肪干细胞青光眼视神经保护动物模型视网膜神经节细胞

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青光眼的免疫学研究进展

青光眼的免疫学研究进展

作者：刘春宵河北医科大学

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青光眼是一组以特征性视神经萎缩为表现的神经变性疾病,最终结果是丧失视野,这是神经节细胞轴突变性的直接表现。视网膜神经节细胞损伤变性,最终死亡方式是凋亡。近三十年来,众多学者从免疫学角度出发研究青光眼的发病机制,并取得很大... 详细信息

青光眼是一组以特征性视神经萎缩为表现的神经变性疾病,最终结果是丧失视野,这是神经节细胞轴突变性的直接表现。视网膜神经节细胞损伤变性,最终死亡方式是凋亡。近三十年来,众多学者从免疫学角度出发研究青光眼的发病机制,并取得很大进展。分子免疫学研究发现,青光眼患者血清及眼部组织中抗视神经等的抗体显著高于正常人;HLA复合体也可能与青光眼的免疫发展有关;细胞因子的表达异常可导致免疫调节紊乱。细胞免疫学研究发现,T细胞在青光眼发病中起着免疫保护及损伤两方面作用;红细胞免疫在青光眼患者血流动力学方面起一定作用;胶质细胞对青光眼中视网膜神经节细胞的死亡起着免疫调节作用。同时,免疫治疗措施的研究也取得了较大进展。特异性免疫,如疫苗的研究已被应用到视神经保护实验中。而非特异性免疫,如谷氨酸拮抗剂、钙离子通道阻滞剂、抗氧化剂及凋亡抑制剂等对减少青光眼视网膜神经节细胞丢失有一定作用;其它治疗方法,如热休克蛋白、中药、心理干预等对青光眼视神经保护也有一定好处。青光眼发病是多因素共同作用的结果,其发病机制至今尚未完全明了。免疫学研究为我们提供了新的研究思路。体液免疫及细胞免疫在青光眼中起着免疫调节作用。在此研究基础上,免疫制剂将有望在临床中成为青光眼视神经保护的重要途径。

关键词：青光眼免疫学治疗视神经保护视网膜神经节细胞

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青光眼药物治疗进展

内蒙古医科大学学报 2019年第S1期41卷 271-277页

作者：邰雪申颖内蒙古医科大学内蒙古呼和浩特010050 内蒙古医科大学附属医院近视眼激光治疗中心 010050

目前青光眼位列世界范围内致盲性疾病前三位,严重威胁人们的生存质量。公认的主要危险因素是病理性眼压升高,致使营养物质无法进行正常输送,造成局部组织及视网膜缺血缺氧,各类细胞器水肿、变性,导致视神经在各种不利因素下进行性萎缩,... 详细信息

目前青光眼位列世界范围内致盲性疾病前三位,严重威胁人们的生存质量。公认的主要危险因素是病理性眼压升高,致使营养物质无法进行正常输送,造成局部组织及视网膜缺血缺氧,各类细胞器水肿、变性,导致视神经在各种不利因素下进行性萎缩,视野逐渐缺损甚至失明。目前主要治疗方法是药物和手术。现根据国内外相关文献资料,对青光眼药物治疗和手术前后的药物辅助治疗进行总结和综述。

关键词：青光眼药物治疗视神经保护

GAP-43与受损后视网膜神经节细胞存活和再生关系的研究进展

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国际眼科纵览 2012年第3期36卷 172-177页

作者：王瑞红侯世科吴志鸿武警总医院眼科北京100039 武警后勤学院附属医院

生长相关蛋白-43（growth—associated protein-43，GAP-43）作为神经细胞膜上的一种特异性磷酸蛋白质，主要表达于生长、分化和再生的轴突末端及突触前膜，与视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells，RGC）的发育、突触可塑性、受... 详细信息

生长相关蛋白-43（growth—associated protein-43，GAP-43）作为神经细胞膜上的一种特异性磷酸蛋白质，主要表达于生长、分化和再生的轴突末端及突触前膜，与视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells，RGC）的发育、突触可塑性、受损后细胞存活和轴突再生有密切的关系，但其促进RGC存活和轴突再生的具体机制却并未完全阐明。深入了解其生理作用和表达调控机制，将有助于理解RGC存活和轴突再生的全过程，在促进视神经再生的研究及临床治疗中起到重要作用。

关键词： GAP43 视网膜神经节细胞视神经保护

补肾活血中药对大鼠慢性高眼压模型视网膜PI3K/AKt通路Bcl2及Bad的影响

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中医眼耳鼻喉杂志 2017年第4期7卷 206-211页

作者：张静李翔汪伟刘红佶李祥玉李华宏王泰田梦瑶杨凤娇成都中医药大学附属医院四川成都610072 杨凌示范区医院陕西咸阳712100 西南医科大学附属中医医院四川泸州646000 成都中医药大学四川成都610075

目的观察补肾活血中药对大鼠慢性高眼压模型视网膜Bcl2及Bad的干预作用,探讨其作用机理。方法选取30只SD大鼠,随机分为对照组、给药组及模型组,每组各10只。采用烙闭巩膜上静脉方法制作慢性高眼压大鼠动物模型,每组连续灌胃8周后处死大... 详细信息

目的观察补肾活血中药对大鼠慢性高眼压模型视网膜Bcl2及Bad的干预作用,探讨其作用机理。方法选取30只SD大鼠,随机分为对照组、给药组及模型组,每组各10只。采用烙闭巩膜上静脉方法制作慢性高眼压大鼠动物模型,每组连续灌胃8周后处死大鼠,观察补肾活血法对EIOP大鼠眼压、视网膜神经节细胞超微结构和视网膜Bcl2、Bad表达的影响。结果SD大鼠造模后即刻直至造模后8周与造模前眼压相比均升高,有统计学差异(均P0.05);造模后8周,给药组Bcl2阳性表达最高,与对照组和模型组相比,差异有统计学意义(均P保护SD大鼠慢性EIOP模型视功能,主要表现为:上调Bcl2的表达、下调Bad的表达、降低眼压及改善RGCs超微结构。

关键词：青光眼补肾活血中药视网膜大鼠慢性高眼压模型视神经保护 Bad Bcl2

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大麻素及其在抗青光眼方面的作用

国际眼科纵览 2006年第4期30卷 281-284页

作者：陈丽张德秀西安交通大学医学院第一附属医院眼科级研究生***

目前青光眼的治疗主要是控制眼压和保护视神经,而大麻素有降低眼压和保护视神经的潜在作用,有可能成为抗青光眼的药物。

关键词：大麻素青光眼眼压视神经保护