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mGluR1在单眼形觉剥夺弱视大鼠视皮质17区的表达及神经元超微结构观察

mGluR1在单眼形觉剥夺弱视大鼠视皮质17区的表达及神经元超微结构...

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作者：王宗青新乡医学院

学位级别：硕士

目的研究视觉形成关键期内单眼形觉剥夺弱视大鼠视皮质17区中mGluR1的表达规律及神经元超微结构变化,为临床上揭示弱视的病理机制及防治提供理论依据。方法建立大鼠单眼形觉剥夺弱视模型,经图形视觉诱发电位(PVEP)检测证实造模成功后,... 详细信息

目的研究视觉形成关键期内单眼形觉剥夺弱视大鼠视皮质17区中mGluR1的表达规律及神经元超微结构变化,为临床上揭示弱视的病理机制及防治提供理论依据。方法建立大鼠单眼形觉剥夺弱视模型,经图形视觉诱发电位(PVEP)检测证实造模成功后,与正常对照组大鼠一起灌注、固定、取材,所得标本分为弱视眼对侧大脑组(EG)、弱视眼同侧大脑组(CG)和正常对照大脑组(NG)。三组分别做石蜡切片,脱蜡后进行尼氏染色,分组对比并定位分层,然后做免疫组织化学染色和电镜观察,摄像显微镜分层照相,计算机图像分析系统进行图像分析,SPSS11.5统计软件进行方差分析。结果①PVEP检测结果:经PVEP检测后可见,与正常组大鼠眼和实验组未形觉剥夺眼PVEP相比,实验组形觉剥夺眼PVEP的P波潜时延长、波幅降低,差异有显著性(P0.05)。大鼠单眼形觉剥夺弱视模型造模成功。②尼氏染色切片尼氏小体清晰可见,视皮质六层结构分层明显,三组间相同层次对比未见明显区别。③免疫组织化学染色结果:弱视眼对侧大脑视皮质17区Ⅳ层(EG)与正常对照大脑视皮质17区Ⅳ层(NG)和弱视眼同侧大脑视皮质17区Ⅳ层(CG)相比,mGluR1阳性着色积分光度和神经元数密度减少,差异有显著性意义(P视眼对侧大脑视皮质17区Ⅳ层(EG)可见部分神经元胞质轻度水肿,线粒体嵴和膜融合或消失,排列紊乱,粗面内质网脱颗粒现象明显,核膜皱缩。正常对照大脑视皮质17区Ⅳ层(NG)和弱视眼同侧大脑视皮质17区Ⅳ层(CG)神经元胞核正常,核膜完整,线粒体嵴规则,高尔基体发达,粗面内质网发达。结论①单眼形觉剥夺弱视大鼠弱视眼对侧大脑视皮质17区Ⅳ层(EG)mGluR1的表达与正常相比减少。②弱视眼对侧大脑视皮质17区Ⅳ层(EG)部分神经元发生形态改变,可能与视觉神经冲动传入减少致神经元萎缩所致。③形觉剥夺致视觉神经冲动传入减少,视皮质17区Ⅳ层mGluR1表达减少,突触发生塑性变化,致神经元发生萎缩可能是弱视发病机理之一。

关键词：形觉剥夺弱视 mGluR1 视皮质17区突触可塑性

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单眼剥夺大鼠视17区及外侧膝状体中生长相关蛋白（GAP-43）的表达及其意义

单眼剥夺大鼠视17区及外侧膝状体中生长相关蛋白（GAP-43）的表达...

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作者：庄建福福建医科大学

学位级别：硕士

目的：研究生长相关蛋白(GAP-43)在正常大鼠和视觉剥夺性大鼠视皮层及外侧膝状体中的表达情况，为探讨视觉发育可塑性提供分子基础，为临床寻找有效预防和治疗弱视的方法提供参考依据。方法：缝合2周龄大鼠单侧眼睑30天，切取外侧膝状... 详细信息

目的：研究生长相关蛋白(GAP-43)在正常大鼠和视觉剥夺性大鼠视皮层及外侧膝状体中的表达情况，为探讨视觉发育可塑性提供分子基础，为临床寻找有效预防和治疗弱视的方法提供参考依据。方法：缝合2周龄大鼠单侧眼睑30天，切取外侧膝状体和视皮质17区，应用免疫细胞化学SP法技术染色和计算机图像分析GAP-43在正常和单眼剥夺组大鼠外侧膝状体和视皮质17区的表达及变化。结果：1、GAP-43在正常大鼠视觉系统表达主要见于外侧膝状体全层和视皮质17区Ⅱ—Ⅵ层神经元胞膜中，呈环状或点状棕黄色免疫阳性反应;2、在敏感期内剥夺眼对侧外侧膝状体和视皮质17区GAP-43表达的免疫阳性神经元染色变淡(P＜0.05)，且免疫阳性神经元数目减少(P＜0.05)。结论：单眼剥夺大鼠视觉系统外侧膝状体和视皮质17区GAP-43表达均降低，提示GAP-43在视觉系统的作用可能是弱视发生的分子生物学基础之一。单眼剥夺性大鼠视觉系统GAP-43表达降低可能是由于剥夺眼视觉系统神经元在发育敏感期内长期视觉剥夺效应使其在双眼竞争突触位点时处于劣势，表达GAP-43的能力降低。

关键词： GAP-43 动物模型单眼剥夺大鼠外侧膝状体视皮质17区

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左旋多巴甲酯对剥夺性弱视猫的改善作用

左旋多巴甲酯对剥夺性弱视猫的改善作用

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作者：黎荣广西医科大学

学位级别：硕士

目的：弱视的发生对儿童视力影响很大，若不采取及时的治疗将会导致终身视力缺陷。目前国内外临床上多采用左旋多巴(L-dopa)治疗弱视，文献报道其已取得了一定的成功。然而，左旋多巴治疗存在外周副作用较大、耐受性差、药效波动等缺点... 详细信息

目的：弱视的发生对儿童视力影响很大，若不采取及时的治疗将会导致终身视力缺陷。目前国内外临床上多采用左旋多巴(L-dopa)治疗弱视，文献报道其已取得了一定的成功。然而，左旋多巴治疗存在外周副作用较大、耐受性差、药效波动等缺点。鉴于早期实验，本课题组已经合成新型的左旋多巴衍生物左旋多巴甲酯(LDME)。本研究的目的是观察不同剂量的LDME对剥夺性弱视猫模型的影响，评价其治疗弱视的主要药效学作用，并探讨LDME的可能作用机制。方法：初生家养幼猫(2-4wk)30只随机分为6组(每组5只)：左旋多巴甲酯高剂量组(LDME)、中剂量组(LDME)、低剂量组(LDMEL)、阳性药L-dopa对照组、正常对照组(NC)、弱视模型对照组(AM)。除了正常组外，于4 wk时参照Hubel经典实验方法对各组幼猫进行麻醉后的左眼单纯上下睑缝合建立剥夺性弱视。12周后经图形视觉诱发电位(P-VEP)确定形成弱视后,灌胃给与左旋多巴甲酯20, 40, 80 mg·kg，阳性对照组给与左旋多巴40 mg·kg，正常对照组及模型组均给与等量生理盐水。每天一次持续30天。 ①应用图形视觉诱发电位(P-VEP)研究左旋多巴甲酯对各组猫视皮质电生理的影响;②进行HE染色、Nissl染色和透射电镜观察左旋多巴甲酯给药组猫视皮质17区形态学的变化;③TUNEL检测法观察视皮质17区神经细胞的凋亡情况;④免疫组织化学法检测视皮质17区中神经生长因子(NGF)、c-Fos的表达;⑤Western-blot法检测视皮质17区中NGF、c-Fos蛋白的表达。⑥荧光定量PCR (FQ-PCR)法检测视皮质17区中c-fos mRNA的表达。结果： 1、视觉电生理研究 P-VEP结果显示，弱视模型组(AC)中剥夺眼表现为波幅值明显降低及P100值潜时延长的特征，与同侧正常对照眼比较，差异具有统计学意义(P视模型组比较，药物治疗各组弱视眼P100值潜时逐渐缩短，其中LDMEH最为明显，差异有统计学意义(p视眼振幅有不同程度的升高，有显著性差异(p视猫弱视眼的信号传导功能。 2、视皮质17区的形态学研究弱视模型组(AC)视皮层17区的神经元形态表现为解剖和生理上的损伤。而经L-dopa和LDME治疗后，各组视皮层17区的神经元逐渐修复和再生，表现为Nissl小体和神经细胞数量的增加。 3、LDME对弱视猫模型视皮质17区细胞凋亡表达的影响弱视模型组中，神经元细胞发生了严重的DNA链断裂情况，表现为TUNEL阳性细胞数量较多。与模型对照组比较，给药各组的视皮层17区神经元凋亡细胞计数均有不同程度的减少。其中LDMEH表现出明显的抗凋亡的作用，差异有统计学意义(P视眼视皮质17区神经细胞有着一定程度的逆转细胞凋亡作用，差异均有统计学意义(P视猫模型视皮质17区神经生长因子(NGF)表达的影响与弱视模型组比较，治疗各组(包括阳性对照组、左旋多巴甲酯高、中、低剂量组)NGF免疫阳性细胞数量在各层有所增加，层间的差异有统计学意义(P视模型组NGF蛋白的表达明显少于其他各组(P视猫模型视皮质17区c-fos mRNA表达的影响 FQ-PCR表明，正常组猫视皮层c-fos mRNA表达水平活跃。与正常对照组相比较，弱视模型组弱视猫视皮层c-fos mRNA表达水平明显下调，差异有显著性(P视模型组相比，治疗各组(包括L-dopa和LDME)c-fos mRNA表达水平逐渐上调，差异有统计学意义(P视猫模型视皮质17区c-Fos蛋白表达的影响弱视对照组视皮层17区中c-Fos阳性细胞较少表达，与正常组比较其密度明显降低，差别有统计意义(P视对照组，差异有统计学意义(P视模型组c-Fos蛋白的表达明显少于其他各组(P<0.01)。而各治疗组

关键词：剥夺性弱视猫视皮质17区视觉诱发电位细胞凋亡神经生长因子 c-fos c-Fos蛋白神经再生

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左旋多巴甲酯对剥夺性弱视猫的作用

左旋多巴甲酯对剥夺性弱视猫的作用

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第十一届全国青年药学工作者最新科研成果交流会

作者：黎荣梁韬林兴张士军李勇文黄仁彬广西医科大学药学院

目的:观察左旋多巴甲酯对剥夺性弱视猫模型视皮质17区神经细胞凋亡情况以及c-fos表达的作用,探讨左旋多巴甲酯治疗弱视的机制。方法:健康的幼猫随机分组:正常对照组（NC）、模型对照组（MC）、阳性对照组（PC）及左旋多巴甲酯高（LDMEH... 详细信息

目的:观察左旋多巴甲酯对剥夺性弱视猫模型视皮质17区神经细胞凋亡情况以及c-fos表达的作用,探讨左旋多巴甲酯治疗弱视的机制。方法:健康的幼猫随机分组:正常对照组（NC）、模型对照组（MC）、阳性对照组（PC）及左旋多巴甲酯高（LDMEH）、中（LDMEM）、低剂量组（LDMEL）,每组5只。参照Hubel[1]经典实验方法对幼猫进行左眼单纯上下睑缝合诱导剥夺性弱视,12周后打开缝合眼并开始给药,每天灌胃左旋多巴甲酯20mg/kg,40mg/kg,80mg/kg,阳性组为左旋多巴40mg/kg,正常组与模型组为等剂量生理盐水,每天一次持续30天。进行TUNEL检测法观察视皮质神经细胞的凋亡情况,经RT-PCR检测视皮质17区神经细胞中c-fos的表达情况。结果:与模型对照组比较,给药组视皮质17区中的细胞凋亡数量有明显降低,而c-fosmRNA则显著的上调（P＜0.01）。结论:左旋多巴甲酯对弱视诱发的视皮质17区中神经细胞有抗凋亡作用以及增加内源性c-fos的表达来改善剥夺性弱视的功能障碍。

关键词：左旋多巴甲酯剥夺性弱视细胞凋亡 c-fos 视皮质17区

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左旋多巴甲酯对剥夺性弱视猫的作用

左旋多巴甲酯对剥夺性弱视猫的作用

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2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周

作者：黎荣梁韬林兴张士军李勇文黄仁彬广西医科大学药学院

目的:观察左旋多巴甲酯对剥夺性弱视猫模型视皮质17区神经细胞凋亡情况以及c-fos表达的作用,探讨左旋多巴甲酯治疗弱视的机制。方法 :健康的幼猫随机分组:正常对照组(NC)、模型对照组(MC)、阳性对照组(PC)及左旋多巴甲酯高(LDMEH)、中(L... 详细信息

目的:观察左旋多巴甲酯对剥夺性弱视猫模型视皮质17区神经细胞凋亡情况以及c-fos表达的作用,探讨左旋多巴甲酯治疗弱视的机制。方法 :健康的幼猫随机分组:正常对照组(NC)、模型对照组(MC)、阳性对照组(PC)及左旋多巴甲酯高(LDMEH)、中(LDMEM)、低剂量组(LDMEL),每组5只。参照Hubel[1]经典实验方法对幼猫进行左眼单纯上下睑缝合诱导剥夺性弱视,12周后打开缝合眼并开始给药,每天灌胃左旋多巴甲酯20mg/kg,40mg/kg,80mg/kg,阳性组为左旋多巴40mg/kg,正常组与模型组为等剂量生理盐水,每天一次持续30天。进行TUNEL检测法观察视皮质神经细胞的凋亡情况,经RT-PCR检测视皮质17区神经细胞中c-fos的表达情况。结果 :与模型对照组比较,给药组视皮质17区中的细胞凋亡数量有明显降低,而c-fos mRNA则显著的上调(P视诱发的视皮质17区中神经细胞有抗凋亡作用以及增加内源性c-fos的表达来改善剥夺性弱视的功能障碍。

关键词：左旋多巴甲酯剥夺性弱视细胞凋亡 c-fos 视皮质17区

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