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西方蜜蜂RBP1基因的克隆及mRNA表达分析

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昆虫学报 2017年第12期60卷 1403-1410页

作者：胡弯弯李淑云曾志将颜伟玉王子龙江西农业大学蜜蜂研究所南昌330045 赣州农业学校江西赣州341100

【目的】RBP1是一种参与黑腹果蝇Drosophila melanogaster性别决定基因doublesex(dsx)premRNA选择性剪接的重要剪接因子。本研究旨在克隆RBP1基因在西方蜜蜂Apis mellifera中的同源基因AmRBP1,分析其结构域及其在西方蜜蜂性别决定初期... 详细信息

【目的】RBP1是一种参与黑腹果蝇Drosophila melanogaster性别决定基因doublesex(dsx)premRNA选择性剪接的重要剪接因子。本研究旨在克隆RBP1基因在西方蜜蜂Apis mellifera中的同源基因AmRBP1,分析其结构域及其在西方蜜蜂性别决定初期胚胎和幼虫不同发育阶段中的表达模式,以期为研究该基因是否参与蜜蜂性别决定奠定基础。【方法】基于NCBI中提交的西方蜜蜂基因数据库和转录组数据库,利用黑腹果蝇rbp1对数据库进行同源检索获得RBP1的转录组序列,并设计引物进行PCR扩增克隆AmRBP1基因,利用生物信息学软件对其进行核酸及氨基酸序列分析。采用半定量RT-PCR技术分析该基因在西方蜜蜂胚胎及幼虫期的表达模式。【结果】由序列比对分析可知,西方蜜蜂AmRBP1基因的pre-mRNA含有3种不同的选择性剪切形式。通过设计不同的引物,克隆得到3种成熟的mRNA序列,分别命名为AmRBP1-R1(Gen Bank登录号:KY404154)、AmRBP1-R2(Gen Bank登录号:KY404155)和AmRBP1-R3(Gen Bank登录号:KY404156);mRNA长度分别为696,790和771 nt,编码的蛋白大小分别为130,166和162 aa;结构域分析发现AmRBP1的3种选择性剪切形式具有相同的结构域,氨基端含有一个RRM结构域,羧基端含有一个RS结构域。同源性分析表明,西方蜜蜂AmRBP1与丽蝇蛹集金小蜂Nasonia vitripennis、红火蚁Solenopsis invicta、埃及伊蚊Aedes aegypti、黑腹果蝇D.melanogaster、家蚕Bombyx mori、家蝇Musca domestica和中华按蚊Anopheles sinensis RBP1蛋白氨基酸序列一致性分别为96.97%,94.20%,84.85%,81.48%,80.28%,78.15%和69.23%。半定量RT-PCR结果表明,AmRBP1基因的3种剪切形式(AmRBP1-R1-3)在西方蜜蜂胚胎和幼虫各时期均有表达,无雌特异性或雄特异性表达的剪切形式。【结论】西方蜜蜂AmRBP1可能是一种SR家族剪切因子,其有可能参与调控基因表达的特定剪切,但其是否参与doublesex(dsx)基因pre-mRNA的性别特异性剪切需要进一步研究。

关键词：西方蜜蜂基因克隆表达分析性别决定选择性剪切

西方蜜蜂的放蜂密度对东方蜜蜂采集行为的影响

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云南农业大学学报（自然科学版） 2021年第1期36卷 82-90页

作者：任晓晓孟柏达赵文正龚雪阳陈新兰黄永权周丹银董坤云南农业大学动物科学技术学院东方蜜蜂研究所云南高校蜜蜂资源可持续利用工程中心云南昆明650201 贵州省农业科学院蚕业研究所贵州贵阳550006 云南省罗平县蜂业基地项目中心云南罗平655800

【目的】在云南省罗平县油菜花期,比较西方蜜蜂不同放蜂密度下东方蜜蜂采集行为的变化,以期从食物资源竞争的角度为合理保护中国本土蜂种和维持植物群落结构及其稳定性提供科学依据。【方法】调查九龙镇和大水井乡主干道上的西方蜜蜂放... 详细信息

【目的】在云南省罗平县油菜花期,比较西方蜜蜂不同放蜂密度下东方蜜蜂采集行为的变化,以期从食物资源竞争的角度为合理保护中国本土蜂种和维持植物群落结构及其稳定性提供科学依据。【方法】调查九龙镇和大水井乡主干道上的西方蜜蜂放蜂密度,根据放蜂密度选择6个试验点放置供试东方蜜蜂蜂群;观测试验点农田、山林两种生境中访花的东方蜜蜂和西方蜜蜂数量以及东方蜜蜂访花频率、单花采集停留时间;调查试验点周围3 km内的显花植物种类,采集植物花粉与东方蜜蜂花粉团,计算蜂花粉团中不同花粉的比例;分析西方蜜蜂不同放蜂密度对东方蜜蜂采集行为和粉源植物利用的影响。【结果】油菜盛花期,山林中访花的东方蜜蜂数量比例大于农田样方;油菜末花期,西方蜜蜂蜂场大量撤离后,农田样方中访花的东方蜜蜂数量比例明显增加;农田样方中东方蜜蜂的平均访花频率与其周围3 km范围内的西方蜜蜂数量(密度)呈显著的正相关关系,单花采集停留时间与其周围3 km范围内的西方蜜蜂数量(密度)呈显著的负相关关系;山林生境中西方蜜蜂放蜂密度大的试验点,东方蜜蜂的访花频率高,单花采集停留时间短;各试验点东方蜜蜂采集的花粉团总数量与其周围3 km范围内的西方蜜蜂数量(密度)呈负相关关系;油菜花期东方蜜蜂采食零星粉源植物花粉的比例与其周围3 km范围内的西方蜜蜂数量(密度)呈显著的正相关关系。【结论】西方蜜蜂放蜂密度对东方蜜蜂的采集行为有显著影响,且西方蜜蜂放蜂密度越大,东方蜜蜂的食物生态位越偏离农田中的大宗蜜源(油菜),其采集区域朝着山林转移的趋势越明显。

关键词：西方蜜蜂东方蜜蜂采集行为粉源植物

西方蜜蜂不同级型王浆主蛋白MRJP8基因的表达差异

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昆虫学报 2014年第1期57卷 1-7页

作者：李江红梁庆环陈大福梁勤福建农林大学蜂学学院福州350002

【目的】王浆主蛋白在蜜蜂的级型分化中具有重要的功能。为探究mrjp8在西方蜜蜂Apis mellifera不同级型的表达模式及功能差异。【方法】利用荧光定量PCR技术对西方蜜蜂工蜂、雄蜂和蜂王不同发育时期和不同组织的mrjp8表达水平进行检测... 详细信息

【目的】王浆主蛋白在蜜蜂的级型分化中具有重要的功能。为探究mrjp8在西方蜜蜂Apis mellifera不同级型的表达模式及功能差异。【方法】利用荧光定量PCR技术对西方蜜蜂工蜂、雄蜂和蜂王不同发育时期和不同组织的mrjp8表达水平进行检测。【结果】工蜂体内mrjp8在9日龄前后的毒腺组织内特异性高表达,为参照基因表达量的上万倍,在其他发育时期和组织的表达量则明显较低,其表达具有明显的时空特异性;在雄蜂体内其表达量与对照相当;在蜂王体内表达量可达参照的近1 000倍,没有组织特异性。【结论】mrjp8的这种表达模式提示其在工蜂防御及维系蜂王长寿命方面有积极作用,这为进一步研究该基因乃至整个王浆蛋白基因家族的进化和功能分化提供了依据。

关键词：西方蜜蜂级型王浆主蛋白表达模式荧光定量PCR

2009—2013年中国西方蜜蜂蜂群损失情况调查分析

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生态学报 2016年第10期36卷 3005-3012页

作者：刘之光陈超郭海坤吕丽萍石巍中国农业科学院蜜蜂研究所北京100093 农业部授粉昆虫生物学重点开发实验室北京100093 全国畜牧总站北京100125

近年,欧洲和北美地区相继出现蜜蜂蜂群崩溃(Colony Collapse Disorder,CCD)现象,蜂业科学家在世界范围内开展蜜蜂蜂群损失情况调查与分析。基于此,探讨近4年我国主要西方蜜蜂饲养省份蜂群损失情况,并对损失量、损失原因进行分析。研究... 详细信息

近年,欧洲和北美地区相继出现蜜蜂蜂群崩溃(Colony Collapse Disorder,CCD)现象,蜂业科学家在世界范围内开展蜜蜂蜂群损失情况调查与分析。基于此,探讨近4年我国主要西方蜜蜂饲养省份蜂群损失情况,并对损失量、损失原因进行分析。研究采用欧盟政府间合作框架(COST)下项目—Co Loss(Prevention of honey bee COlony LOSSes)项目组提供的国际统一的标准调查表格,利用R语言在RStudio环境下开展全部的统计分析工作,采用广义线性混合模型分析调查数据的相关性及因变量为非正态分布的非独立数据。调查我国12个主要西方蜜蜂饲养省份的蜂群越冬死亡损失情况。2009—2013年蜂群平均损失率为8.9%,损失比例同比低于欧洲和北美国家和地区的蜂群损失率,在可接受范围内。利用广义线性混合模型分析,显著影响蜜蜂蜂群损失的因素有:巢脾使用时间及蜂王因素。我国蜂群损失率较低,大部分损失症状不属于CCD。CCD现象在我国尚未确认发生。加强蜂螨及其他病害的防治工作,增加更新巢脾频率,监控蜂王在蜂群中的表现及增加换王次数等可以有效控制蜂群越冬损失率。结果对明确我国蜂群是否受蜜蜂蜂群崩溃症状现象影响提出了明确的解释,对蜂群损失的防控提供重要的指导建议。

关键词：西方蜜蜂蜂群损失率蜜蜂蜂群崩溃症状中国

西方蜜蜂食用茶多酚后对3种蜜蜂报警信息素成分的触角电位反应

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云南农业大学学报（自然科学版） 2021年第1期36卷 183-187页

作者：王媛董坤龚志文李源谭垦云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201 中国科学院西双版纳热带植物园热带森林生态重点实验室云南勐腊666303

【目的】研究西方蜜蜂采集蜂食用茶多酚溶液后,对3种报警信息素成分的触角电位反应,为探讨茶多酚在神经生物学中的作用提供参考和科学依据。【方法】以西方蜜蜂为试验对象,按照长效和短效确定2个作用时间饲喂其不同质量浓度的茶多酚溶... 详细信息

【目的】研究西方蜜蜂采集蜂食用茶多酚溶液后,对3种报警信息素成分的触角电位反应,为探讨茶多酚在神经生物学中的作用提供参考和科学依据。【方法】以西方蜜蜂为试验对象,按照长效和短效确定2个作用时间饲喂其不同质量浓度的茶多酚溶液后采用触角电位(EAG)技术检测蜜蜂对3种报警信息素乙酸异戊酯(IPA)、乙酸辛酯(OA)和乙酸苄酯(BA)的EAG反应。【结果】茶多酚长效作用比短效作用更能增强采集蜂对3种报警信息素成分的EAG反应;茶多酚短效作用的蜜蜂对OA的EAG反应比IPA小,但长效作用的蜜蜂对OA的EAG反应比IPA强;在3种报警信息素成分中,蜜蜂对BA的EAG反应最强。【结论】蜜蜂在茶多酚干预下对不同报警信息素成分的敏感性会发生明显变化,表明茶多酚可增强蜜蜂的防御能力。

关键词：西方蜜蜂茶多酚蜜蜂报警信息素触角电位

西方蜜蜂肌动蛋白基因启动子的克隆与序列分析

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山东农业大学学报(自然科学版) 2008年第2期39卷 255-258页

作者：王伟胥保华孙亮先山东农业大学动物科技学院泉州师范学院模式生物研究中心

为研究适合蜜蜂转基因需要的启动子,利用生物信息学知识和现有的生物信息资源,在NCBI数据库查询了西方蜜蜂肌动蛋白基因的编码序列,与西方蜜蜂基因组对比后,克隆、分析了西方蜜蜂肌动蛋白基因序列,该肌动蛋白基因有起始密码子(strart co... 详细信息

为研究适合蜜蜂转基因需要的启动子,利用生物信息学知识和现有的生物信息资源,在NCBI数据库查询了西方蜜蜂肌动蛋白基因的编码序列,与西方蜜蜂基因组对比后,克隆、分析了西方蜜蜂肌动蛋白基因序列,该肌动蛋白基因有起始密码子(strart codon)ATG、开放阅读框(ORF)、终止密码子(stop codon)TAA、TATA框(-32bp)、CAAT框(-69 bp)和ployA(+1396 bp),这些都符合真核生物基因的一般特点,是一个较完整的基因。成功克隆了该启动子。

关键词：西方蜜蜂肌动蛋白基因启动子克隆分析

2021年辽宁省西方蜜蜂生产现状与趋势分析

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蜜蜂杂志 2022年第2期42卷 37-39页

作者：刘景玉徐士磊张大利辽宁省抚顺县农业发展服务中心辽宁省畜牧业发展中心

2021年，辽宁省西方蜜蜂的蜂群数量有所增加，蜂蜜除椴树蜜外，总体现状较好，但蜂产品价格仍维持在较低价位，蜂群的价格也大幅下降。从未来发展趋势看，预计蜂产品销售难度会加大，价格依然在低价位徘徊。蜂蜜生产不确定性增大，蜂群... 详细信息

2021年，辽宁省西方蜜蜂的蜂群数量有所增加，蜂蜜除椴树蜜外，总体现状较好，但蜂产品价格仍维持在较低价位，蜂群的价格也大幅下降。从未来发展趋势看，预计蜂产品销售难度会加大，价格依然在低价位徘徊。蜂蜜生产不确定性增大，蜂群销售仍有困难。建议广大蜂农广开渠道，开辟新的销售市场，并加强蜜蜂授粉服务。

关键词：辽宁省西方蜜蜂生产现状未来趋势建议

西方蜜蜂对东方蜜蜂采集行为及食物资源利用的影响

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应用昆虫学报 2019年第5期56卷 1070-1078页

作者：孟柏达任晓晓龚雪阳陈新兰胡晓玲卿卓李林庶周丹银董坤云南高校蜜蜂资源可持续利用工程中心云南农业大学东方蜜蜂研究所云南农业大学动物科学技术学院昆明650201 贵州省农业科学院蚕业研究所贵阳550006 腾冲市畜牧工作站腾冲679199

【目的】在云南省腾冲市界头镇油菜花期,比较西方蜜蜂Apis mellifera L.不同放蜂密度下东方蜜蜂Apis cerana F.采集行为和对食物资源利用的变化,以期从食物资源竞争的角度为合理保护我国本土蜂种和维持植物群落结构及其稳定性提供科学... 详细信息

【目的】在云南省腾冲市界头镇油菜花期,比较西方蜜蜂Apis mellifera L.不同放蜂密度下东方蜜蜂Apis cerana F.采集行为和对食物资源利用的变化,以期从食物资源竞争的角度为合理保护我国本土蜂种和维持植物群落结构及其稳定性提供科学依据。【方法】以界头镇为研究区域,在油菜花期根据西方蜜蜂的蜂场分布、蜂群数量及放蜂密度,确定了三个样点两种生境,观察西方蜜蜂不同放蜂密度下对东方蜜蜂的采集行为、访花频率、单花采集停留时间及粉源植物利用的影响。【结果】在农田生境中,西方蜜蜂放蜂密度最大的沙坝地试验点东方蜜蜂的访花频率最高(14.93朵/min),单花采集停留时间最短(1.96 s/朵),采集油菜花粉的数量比例最低(37%),采集花粉的种类最多(11种植物),与放蜂密度最小的新庄试验点相比,上述指标差异均显著。在山林生境中,西方蜜蜂放蜂密度最小的新庄试验点,东方蜜蜂的访花频率最低(8.48朵/min),单花采集停留时间最长(4.55 s/朵),采集油菜花粉的数量比例最高(33%),采集花粉的种类最少(8种植物),与放蜂密度最大的沙坝地试验点相比,上述指标差异均显著。【结论】在两种生境下,西方蜜蜂放蜂密度对东方蜜蜂采集行为和粉源植物利用均有显著影响,西方蜜蜂放蜂密度越大,东方蜜蜂对大宗蜜源植物(油菜)花粉的采集量越少,其采集区域由农田向山林转移的趋势越明显。

关键词：西方蜜蜂东方蜜蜂种间竞争采集行为粉源植物

西方蜜蜂和兰州熊蜂在设施桃园的访花偏好性比较

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昆虫学报 2015年第12期58卷 1315-1321页

作者：周志勇张红梁铖邹宇董捷袁晓龙黄家兴安建东中国农业科学院蜜蜂研究所农业部授粉昆虫生物学重点开放实验室

【目的】为了比较西方蜜蜂Apis mellifera和兰州熊蜂Bombus lantschouensis在设施桃园内对不同时期桃花的访花偏好性、以及这种偏好性与花粉活力和采集花粉花蜜之间的关系。【方法】记录2种蜂在温室桃园内访问早期花、中期花和晚期花的... 详细信息

【目的】为了比较西方蜜蜂Apis mellifera和兰州熊蜂Bombus lantschouensis在设施桃园内对不同时期桃花的访花偏好性、以及这种偏好性与花粉活力和采集花粉花蜜之间的关系。【方法】记录2种蜂在温室桃园内访问早期花、中期花和晚期花的比例,测定桃花不同时期的花粉活力以及2种蜂携带的花粉活力,观察2种蜂采集花蜜和采集花粉的成功率,统计2种蜂访花过程中桃花所处的枝条数及植株数。【结果】桃花不同时期的花粉活力差异显著,早期花花药未开裂,花粉未释放,中期花花粉活力（58.3%）显著高于晚期花花粉活力（34.2%）（P〈0.01）;西方蜜蜂更加偏好访问中期花,对中期花的访问率高达75.3%,显著高于兰州熊蜂对中期花的访问率（49.2%）（P〈0.01）;西方蜜蜂携带的花粉活力（92.1%）显著高于兰州熊蜂携带的花粉活力（72.9%）,但是西方蜜蜂采集花粉和采集花蜜的成功率均低于兰州熊蜂（P〈0.01）;在访问一定数量的桃花过程中,兰州熊蜂在设施桃园内访问的枝条数和植株数较多,分布范围较广（P〈0.01）。【结论】和兰州熊蜂相比,西方蜜蜂对活力花粉的辨别能力更强,更加偏好访问花粉活力较高的花朵,这种偏好性导致其采集花粉花蜜的成功率降低。

关键词：西方蜜蜂兰州熊蜂桃花传粉访问偏好性花期花粉活力