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负载褐藻多酚的麦醇溶蛋白纳米递送体系的制备及特性研究

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食品与发酵工业 2022年第5期48卷 136-141页

作者：赵建波姜海鑫吴慧彬孙继帅段孟霞俞珊庞杰吴春华福建农林大学食品科学学院福建福州350000

褐藻多酚(phlorotannins, PT)是一种天然的抗氧化剂,但其稳定性差。采用反溶剂法构建负载PT的麦醇溶蛋白纳米粒子(phlorotannins-loaded gliadin nanoparticles, GPNPs),探究麦醇溶蛋白与PT不同质量比对GPNPs纳米递送体系结构及特性的... 详细信息

褐藻多酚(phlorotannins, PT)是一种天然的抗氧化剂,但其稳定性差。采用反溶剂法构建负载PT的麦醇溶蛋白纳米粒子(phlorotannins-loaded gliadin nanoparticles, GPNPs),探究麦醇溶蛋白与PT不同质量比对GPNPs纳米递送体系结构及特性的影响。结果表明,当麦醇溶蛋白与PT质量比为1∶0.3时,粒径、分散指数、ζ电位值为(166.97±2.60)nm,(0.34±0.01),(13.90±0.07)mV。透射电子显微镜(transmission electron microscope, TEM)表明GPNPs呈类球形或圆球形粒子。GPNPs的包埋率、承载率随着PT的比例增加而增大,GPNPs包埋率的最大值为71.7%。傅立叶变换红外吸收光谱结果显示麦醇溶蛋白和PT的特征峰在GPNGs中发生了红移和蓝移,表明两者之间产生了氢键、疏水相互作用等作用力。模拟体外消化实验结果发现GPNPs都有控释的效果,但其突释行为随着PT的质量比增加而增大。GPNPs可以改善PT在生产加工、运输和消化吸收中降解和损失,是一种极具潜力的纳米递送系统。

关键词：褐藻多酚麦醇溶蛋白纳米粒子反溶剂法控释

海带褐藻多酚对绿烂海带表面分离的一株细菌的抑菌效果研究

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海洋与湖沼 2022年第2期53卷 346-351页

作者：李静逄少军苏丽李晓东中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室山东青岛266071 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋生物学与生物技术功能实验室山东青岛266071 中国科学院海洋大科学研究中心山东青岛266071

海带苗绿烂病暴发严重威胁海带养殖生产,给海带养殖业造成巨大经济损失。研究发现,海带中的多酚化合物可以抵御海带病害初期病原体侵入。为研究多酚对绿烂海带表面附生菌的抑菌效果,在病烂部位分离出一株细菌,通过16s rRNA基因测序的方... 详细信息

海带苗绿烂病暴发严重威胁海带养殖生产,给海带养殖业造成巨大经济损失。研究发现,海带中的多酚化合物可以抵御海带病害初期病原体侵入。为研究多酚对绿烂海带表面附生菌的抑菌效果,在病烂部位分离出一株细菌,通过16s rRNA基因测序的方法,证实该细菌为小孔芽孢杆菌(Bacillus foraminis)。进一步以健康海带为原料提取多酚,利用平板生长抑制法,以哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)和溶藻弧菌(Vibrioalginolyticus)作为对照,分析多酚对小孔芽胞杆菌的抑菌效果。结果显示褐藻多酚在接种了哈维氏弧菌和溶藻弧菌的培养基上产生了不同大小的抑菌圈,而在接种有小孔芽孢杆菌的培养基上未产生抑菌圈,表明多酚对小孔芽胞杆菌无抑菌效应。此项研究为海带多酚抑菌作用提供了参考,同时对了解海带病害暴发及开展海带病害防治工作具有重要意义。

关键词：海带绿烂病褐藻多酚抑菌活性

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褐藻多酚对晚期糖基化终产物的抑制作用研究

食品安全质量检测学报 2022年第3期13卷 805-810页

作者：张宇臣魏福朱莹傅振坤王娅浪袁高峰孙海燕浙江海洋大学食品与药学学院舟山316022

目的研究褐藻多酚对晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)生成的抑制作用及其机制。方法建立牛血清蛋白与葡萄糖体外模拟体系及食品热加工鱼肉肠模型,以不同浓度褐藻多酚为抑制剂,研究其对AGEs生成的抑制作用;通过... 详细信息

目的研究褐藻多酚对晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)生成的抑制作用及其机制。方法建立牛血清蛋白与葡萄糖体外模拟体系及食品热加工鱼肉肠模型,以不同浓度褐藻多酚为抑制剂,研究其对AGEs生成的抑制作用;通过分析模拟体系中赖氨酸和葡萄糖含量、蛋白质巯基水平及葡萄糖与牛血清蛋白的交联作用,阐明褐藻多酚对AGEs生成抑制作用机制。结果褐藻多酚对荧光性AGEs具有显著的抑制作用,100μg/g褐藻多酚反应36 h,对模拟体系AGEs生成抑制率达30.33%,50μg/mL褐藻多酚对鱼肉肠AGEs生成抑制率达41.91%。褐藻多酚处理后,模拟体系中赖氨酸和葡萄糖含量、蛋白质巯基水平显著高于对照组(P褐藻多酚可能通过与赖氨酸残基反应、保护蛋白质巯基或抑制葡萄糖与牛血清蛋白交联作用等抑制AGEs生成。

关键词：晚期糖基化终产物褐藻多酚抑制作用鱼肉肠

褐藻多酚提取物的成分鉴定及对体外瘤胃不饱和脂肪酸生物氢化的影响

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褐藻多酚提取物的成分鉴定及对体外瘤胃不饱和脂肪酸生物氢化的影...

作者：陈誉华扬州大学

学位级别：硕士

反刍动物产品中饱和脂肪酸(Saturated Fatty Acid,SFA)含量的增加往往会带来心血管疾病的发生,这是饲料不饱和脂肪酸(Unsaturated Fatty Acid,UFA)在动物瘤胃内发生生物氢化导致。因此,如何抑制生物氢化成为当下研究重点。已有研究发现... 详细信息

反刍动物产品中饱和脂肪酸(Saturated Fatty Acid,SFA)含量的增加往往会带来心血管疾病的发生,这是饲料不饱和脂肪酸(Unsaturated Fatty Acid,UFA)在动物瘤胃内发生生物氢化导致。因此,如何抑制生物氢化成为当下研究重点。已有研究发现单宁能够抑制动物体内脂肪酸氢化,调控畜产品中脂肪酸构成。褐藻多酚(Phlorotannins,PT)又名间苯酚单宁,基本结构为间苯三酚,只存在于海洋褐藻中。研究表明褐藻多酚对提高动物生产性能,调节微生物菌群具有积极作用。基于此我们预测褐藻多酚能够调控瘤胃微生物来抑制氢化。因此本文通过马尾藻提取褐藻多酚,明确其成分构成,并通过体外发酵法研究褐藻多酚对瘤胃发酵以及瘤胃脂肪酸氢化的影响。(1)采用浸提法对粉碎后的马尾藻进行提取,获得褐藻多酚粗提物后通过Sephadex LH-20葡聚糖凝胶进行纯化,冻干后获得褐藻多酚提取物。后使用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)法分离提取物,以间苯三酚为标准品进行定量,再通过非靶性搜库匹配其余物质,从而对提取物达到定性定量。结果表明:提取物色谱图共出现5个峰,停留时间(RT)分别为0.93、1.74、2.71、12.26、34.15,根据数据库匹配,该5个峰对应的物质分别为:间苯三酚(Phloroglucinol)、扁桃酸(2,4,5-Trimethoxybenzoic Acid)、对羟基苯甲酸(P-Hydroxybenzoic Acid)、锌醇(Zinniol)以及别孕烯醇酮(Allopregnanolone);且提取物中间苯三酚含量为91.26%。(2)通过体外法探究添加不同水平(125、250、500 μgPT·mL-1)褐藻多酚提取物对奶牛瘤胃体外发酵和主要瘤胃细菌含量的影响,并筛选出体外最适添加量。结果表明:体外添加120、250以及500μgPT·ml的褐藻多酚提取物能够显著降低瘤胃pH值、NH3-N浓度(P褐藻多酚的最适添加量为 125 μg·ml。(3)采用体外法探究添加褐藻多酚提取物对瘤胃发酵、微生物区系以及UFA的影响,并试图揭示褐藻多酚提取物调控生物氢化的微生物途径。结果发现日粮添加1.7%褐藻多酚能够显著提高饲料消化率、UFA、MUFA以及PUFA的含量(P褐藻多酚的添加显著提高了门水平 Firmicutes、Proteobacteria、Fibrobacterota 等的相对丰度(P＜0.05),以及属水平中PrevotellaceaeCG-001、PrevotellaceaeCG-003以及p-251-o5 的相对丰度(P＜0.05)。结论:从马尾藻中获得的褐藻多酚提取物主要成分为间苯三酚、扁桃酸、对羟基苯甲酸、锌醇、别孕烯醇酮,其中间苯三酚含量为91.26%。褐藻多酚提取物的添加能够提高体外饲料消化率,抑制蛋白质分解,能够通过调控瘤胃菌群使生物氢化不完全,增加UFA的含量,减少SFA含量。

关键词：褐藻多酚生物氢化体外发酵成分鉴定微生物

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褐藻多酚抗金黄色葡萄球菌效果的研究

褐藻多酚抗金黄色葡萄球菌效果的研究

作者：魏元浩扬州大学

学位级别：硕士

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.aureus）感染奶牛后易引发炎症从而造成经济损失。目前生产中主要使用抗生素来抑制S.aureus的生长以及其引发的炎症,但S.aureus耐药菌株和抗生素残留等问题的出现,使抗生素的抑制作用产生局限... 详细信息

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.aureus）感染奶牛后易引发炎症从而造成经济损失。目前生产中主要使用抗生素来抑制S.aureus的生长以及其引发的炎症,但S.aureus耐药菌株和抗生素残留等问题的出现,使抗生素的抑制作用产生局限性。为寻找新的抑制S.aureus的物质,研究者将研究方向聚集在了植物提取物中,其中,研究发现褐藻中提取的褐藻多酚（Phlorotannins,PT）具有良好的抑菌和抗炎等活性。本文使用马尾藻（Scagassum,SS）提取褐藻多酚,并通过体外和体内模型试验来探究褐藻多酚对S.aureus的抑制效果以及对S.aureus引发炎症的调节作用。（1）分别采用80%乙醇萃取法和Sephadex LH-20葡聚糖凝胶对马尾藻进行提取和纯化,得到褐藻多酚,并用Folin-Ciocalteu法测定总多酚含量,通过使用褐藻多酚对S.aureus进行抑菌水平测定试验、细菌增殖、生物膜形成以及胞外蛋白浓度测定试验,探究褐藻多酚对S.aureus的抑制效果和抑制机制。结果显示,提取纯化的相对褐藻多酚含量为92%左右,其对S.aureus的最小抑菌浓度为150 μg/mL,最小杀菌浓度为750 μg/mL;与对照组相比,添加褐藻多酚150、300、450、600和750μg/mL在前9 h时均能极显著抑制S.aureus的增殖（P＜0.01）,培养12 h时,450、600和750μg/mL褐藻多酚能显著抑制增殖（P＜0.05）,培养24h时,750 μg/mL极显著抑制了S.aureus的增殖（P＜0.01）,其它组无显著影响（P＞0.05）,在0～3 h、3～6 h时间段内,150、300、450、600和750 μg/mL组的增殖率极显著降低（P＜0.01）,说明在此时间段内S.aureus增殖缓慢;150、300、450、600和750 μg/mL均可以显著抑制S.aureus生物膜的形成（P＜0.05）;300、450、600和750μg/mL褐藻多酚可以显著提高细菌胞外蛋白含量（P＜0.05）。（2）采用体外细胞和细菌培养技术,研究褐藻多酚对BMECs和对S.aureus感染的BMECs的活性影响,以及褐藻多酚对S.aureus粘附侵袭BMECs和炎症因子表达的影响。结果显示150和300μg/mL时显著的提高了 BMECs的活性（P＜0.05）,750、900和1050 μg/mL时BMECs的活性显著降低（P＜0.05）,450和600 μg/mL对细胞活性没有影响（P＞0.05）;150、300、450和600μg/mL褐藻多酚可以显著提高S.aureus感染的BMECs的活性（P＜0.05）;300和450μg/mL褐藻多酚可以显著降低S.aureus对BMECs的粘附和侵袭（P＜0.05）;S.aureus感染BMECs后显著提高IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-8mRNA 的表达（P＜0.05）,加入300μg/mL 褐藻多酚后 IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-αmRNA 的表达显著下降（P＜0.05）。（3）通过建立S.aureus诱导的小鼠乳腺炎症模型,探究褐藻多酚对S.aureus诱导的炎症的调节作用。试验结果表明:S.aureus感染乳腺组织后能够造成腺泡组织结构不完整,腺泡壁损伤,出现大量炎性细胞浸润,组织内细菌负荷数和MPO活性显著增加（P＜0.05）,IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA的表达量显著升高（P＜0.05）,添加300 μg/mL褐藻多酚后腺泡壁结构完整,炎性细胞浸润减少,组织内细菌负荷数显著下降（P＜0.05）,IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA的表达量显著下降（P＜0.05）;感染S.aureus后血清中GSH-PX活性显著降低,T-NOS活性和NO含量显著增加（P＜0.05）,添加300μg/mL褐藻多酚后GSH-PX活力显著增加（P＜0.05）,T-NOS活力和NO含量显著下降（P＜0.05）。结论:马尾藻经过80%乙醇浸提和Sephadex LH-20纯化得到92%的褐藻多酚,300 μg/mL褐藻多酚能够抑制S.aureus的增殖和保护S.aureus感染的奶牛乳腺上皮细胞,并且对S.aureus诱导的小鼠乳腺炎症具有调节作用。

关键词：褐藻多酚乳腺炎模型金黄色葡萄球菌乳腺上皮细胞

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马尾藻多酚对大肠杆菌的抑制效果研究

饲料工业 2024年第13期45卷 77-82页

作者：王星星潘旻蒋慧管彤黄倩倩扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225000

试验旨在探究马尾藻多酚对大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)的抑菌活性。采用乙醇浸提法和葡聚糖凝胶柱层析法对马尾藻中的褐藻多酚进行提取纯化,通过测定褐藻多酚对E.coli的抑菌水平、最小抑菌浓度、最小杀菌浓度,以及对其增殖曲线... 详细信息

试验旨在探究马尾藻多酚对大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)的抑菌活性。采用乙醇浸提法和葡聚糖凝胶柱层析法对马尾藻中的褐藻多酚进行提取纯化,通过测定褐藻多酚对E.coli的抑菌水平、最小抑菌浓度、最小杀菌浓度,以及对其增殖曲线、生物膜形成的影响,研究褐藻多酚对E.coli的抑制效果。结果表明:提取纯化的多酚含量为848mg/g,其对E.coli的最小抑菌浓度(MIC)为4 mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)为16 mg/mL;与对照组相比,经2 MIC、1 MIC褐藻多酚处理的大肠杆菌生长明显受到抑制,1/2 MIC褐藻多酚处理组抑菌效果降低,4 MIC褐藻多酚处理组完全抑制了E.coli的生长,其中添加褐藻多酚的各组在2~8 h内均能极显著抑制细菌增殖(P褐藻多酚浓度为4~16 mg/mL时可以显著抑制生物膜的形成(P褐藻多酚对E.coli有明显的抑制作用。

关键词：马尾藻褐藻多酚提取纯化大肠杆菌抑菌活性

负载褐藻多酚的丝素蛋白GBR生物膜制备及其性能的体外实验研究

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安徽医科大学学报 2023年第6期58卷 885-890页

作者：陈文泽邹多宏安徽医科大学口腔医学院安徽医科大学附属口腔医院安徽省口腔疾病研究重点实验室合肥230032 上海交通大学口腔医学院上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔外科上海市口腔医学重点实验室上海200001

目的通过制备负载褐藻多酚(PT)的双层丝素蛋白(SF)膜,测试其力学性能、生物相容性及其对成骨分化的影响,研究其作为引导骨再生屏障膜的可能性。方法将不同脱胶时间处理后的SF溶液通过溶液浇筑技术、定向冷冻技术以及冷冻干燥技术处理后... 详细信息

目的通过制备负载褐藻多酚(PT)的双层丝素蛋白(SF)膜,测试其力学性能、生物相容性及其对成骨分化的影响,研究其作为引导骨再生屏障膜的可能性。方法将不同脱胶时间处理后的SF溶液通过溶液浇筑技术、定向冷冻技术以及冷冻干燥技术处理后制备成SF双层膜,采用力学万能试验机测定湿态条件下各组膜样品(n=5)的抗拉强度。取抗拉强度最大的SF双层膜所对应的SF溶液重新制备膜样品,用扫描电镜观察其微观结构。通过在粗糙面负载PT制备PT-SF双层膜,使用傅里叶红外光谱仪分析PT与SF双层膜的相互作用。利用扫描电镜观察人牙槽骨来源的骨髓间充质干细胞(hABMSCs)在粗糙面的黏附情况,通过CCK-8及活死细胞染色探究PT-SF双层膜的生物相容性。用qRT-PCR法、ALP染色和茜素红染色检测各组hABMSCs的成骨向分化情况。结果由脱胶时间为30 min的SF溶液制备出的SF双层膜的抗拉强度最大,达(3.293±0.1228)MPa。SF双层膜的光滑面致密光滑,粗糙面呈纵向有序的疏松多孔结构。褐藻多酚通过氢键、疏水作用力等方式负载到SF双层膜的粗糙面上,空白组、SF组及PT-SF组之间的CCK-8及活死细胞染色结果均无明显差异,且与空白组和SF组相比PT-SF促进了hABMSCs的成骨向分化。结论PT-SF双层膜兼具良好的机械性能和生物学性能,可在一定程度上促进hABMSCs的成骨向分化。该研究成功制备了PT-SF双层膜。

关键词：褐藻多酚丝素蛋白复合膜定向冷冻成骨分化

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褐藻多酚对低温火腿肠品质的影响

肉类研究 2023年第11期37卷 42-49页

作者：张晨王伟吴昊解万翠李红燕董秀芳青岛科技大学海洋科学与生物工程学院山东青岛266042 临沂金锣文瑞食品有限公司山东临沂276036 大理大学公共卫生学院云南大理671000

以添加0.02%、0.10%褐藻多酚(phlorotannins,PT)的低温火腿肠为研究对象,以不添加PT的低温火腿肠作为对照组,探究其在加速性贮藏实验条件(32、37℃)下贮藏期间的品质变化,并预测保质期。结果表明,PT可以提高低温火腿肠的感官品质,有效... 详细信息

以添加0.02%、0.10%褐藻多酚(phlorotannins,PT)的低温火腿肠为研究对象,以不添加PT的低温火腿肠作为对照组,探究其在加速性贮藏实验条件(32、37℃)下贮藏期间的品质变化,并预测保质期。结果表明,PT可以提高低温火腿肠的感官品质,有效抑制低温火腿肠菌落总数、硫代巴比妥酸反应产物(thiobarbituric acid reactive substance,TBARs)值的增长。与0.02%PT组相比,0.10%PT组抑制效果更佳。电子鼻W1W、W2W、W1S、W2S传感器信号响应值增强,其中硫化物减少,醇类、醛酮类化合物增加。贮藏最后1 d,对照组、0.02%PT组、0.10%PT组在贮藏温度37℃时,W1W最大响应值分别为7.996 0、7.466 8、7.423 4;32℃时分别为8.212 9、7.409 9、7.383 7。以菌落总数为劣变指标,通过化学动力模型推算3组低温火腿肠的Q5(温度相差5℃时货架寿命的比值)为1.5,在4℃下对照组、0.02%PT组、0.10%PT组保质期分别为87、116、145 d。

关键词：褐藻多酚低温火腿肠品质变化加速贮藏性实验

全缘马尾藻褐藻多酚的抗氧化和抗肿瘤细胞增殖作用研究

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现代食品科技 2013年第4期29卷 702-705页

作者：卢虹玉刘义吉宏武邵海艳广东海洋大学水产品深加工广东普通高校重点实验室广东湛江524088 广东医学院广东天然药物研究与开发实验室广东湛江524023

检测全缘马尾藻褐藻多酚提取物（IPTs）的抗氧化和抗肿瘤细胞增殖作用。通过萃取和超滤获得4种IPTs提取物-IPTa1、IPTa2、IPTe1和IPTe2，总酚含量分别为1．16、0．6、0．25和0．34mg没食子酸（GA）／g海藻干基，1．5mg／L时的总抗氧化... 详细信息

检测全缘马尾藻褐藻多酚提取物（IPTs）的抗氧化和抗肿瘤细胞增殖作用。通过萃取和超滤获得4种IPTs提取物-IPTa1、IPTa2、IPTe1和IPTe2，总酚含量分别为1．16、0．6、0．25和0．34mg没食子酸（GA）／g海藻干基，1．5mg／L时的总抗氧化能力（TCA）分别相当于1．724、1．379、1．833、0．695mg／L的Fe2＋还原能力；MTT结果显示，4．4μg／mL时，4种IPTs提取物作用sw579细胞24h、48h、72h后，除了IFTa2外，IPTa1、IPTe1和IPTe2均以时间依赖方式显著抑制肿瘤细胞的生长；0．3125--5μg／mL浓度范围内，IPTa1和Igre1的抑制率与作用时间和浓度呈正相关，最高抑制率达90％以上。

关键词：全缘马尾藻褐藻多酚总抗氧化能力抗增殖