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桃褐腐病拮抗酵母菌的筛选及防治机理

微生物学通报 2024年

作者：侯亚倩张晓红张澍赵雅婷陈双建段国锋山西农业大学园艺学院山西农业大学果树研究所

【背景】桃褐腐病是一种危害严重的病害，能对桃产业造成巨大的经济损失。【目的】为了明确山西省太谷区桃褐腐病的主要致病菌，并筛选出对桃褐腐病有明显生防效果的拮抗酵母菌。【方法】从有症状的“脆玉”桃果实中分离出引起桃采后褐... 详细信息

【背景】桃褐腐病是一种危害严重的病害，能对桃产业造成巨大的经济损失。【目的】为了明确山西省太谷区桃褐腐病的主要致病菌，并筛选出对桃褐腐病有明显生防效果的拮抗酵母菌。【方法】从有症状的“脆玉”桃果实中分离出引起桃采后褐腐病的真菌，通过形态特征、致病性试验和分子鉴定对其进行鉴定；采用体外和体内试验筛选拮抗酵母菌，利用形态学、生理生化和分子生物学方法对拮抗酵母菌进行鉴定；此外，通过测定防御相关酶活性指标，评价拮抗酵母菌处理对桃果实腐烂抗病性的影响。【结果】美澳型核果链核盘菌(Monilinia fructicola)是山西省太谷区桃褐腐病的致病菌，筛选获得的最优拮抗酵母菌株HYA-4.1为异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus)，对M. fructicola的菌丝抑制率达78.31%，可以诱导桃果内抗氧化酶活性的增高，显著抑制桃褐腐病。【结论】研究揭示了桃褐腐病的致病菌，并筛选出抑菌效果显著的拮抗酵母，为生防菌的筛选及应用提供参考。

关键词：桃异常威克汉姆酵母褐腐病诱导抗病性生防酵母

阿拉伯半乳聚糖处理对青脆李果实褐腐菌的抑制效果及其诱导抗病性机理

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食品与发酵工业 2024年

作者：袁田刘莹刘玲韩赛影张婷婷郑安祺明建邓丽莉食品科学与工程国家级实验教学示范中心(西南大学) 西南大学食品科学学院

通过诱导果实抗病性控制果实采后病害是减少果实采后损失的重要手段。为研究阿拉伯半乳聚糖（arabinogalactan， AG）处理对采后青脆李果实褐腐病的抑制效果及其与果实抗病性的关系，实验研究了AG对褐腐病原菌（Monilinia fructicola）... 详细信息

通过诱导果实抗病性控制果实采后病害是减少果实采后损失的重要手段。为研究阿拉伯半乳聚糖（arabinogalactan， AG）处理对采后青脆李果实褐腐病的抑制效果及其与果实抗病性的关系，实验研究了AG对褐腐病原菌（Monilinia fructicola）的直接抑制作用，以及异孔损伤接种及AG浸泡处理对青脆李果实褐腐病的控制效果，并通过测定青脆李果实酚酸含量、抗病相关酶活性及其相关基因表达量，初步阐明其提高青脆李果实抗病性的可能原因。结果表明，AG对M. fructicola的生长无抑制作用；AG处理后青脆李果实的发病率、病斑直径及自然发病率均显著低于对照（P＜0.05）；此外，AG处理显著提高青脆李果实酚酸含量，过氧化物酶、多酚氧化酶、β-1，3-葡聚糖酶、几丁质酶活性及过氧化物酶、几丁质酶、病程相关蛋白相关基因表达量。综上所述，AG处理通过提高抗病相关基因表达量，调控抗病相关酶活性及酚酸的积累，进而提高青脆李果实对褐腐病的抗病性。

关键词：青脆李阿拉伯半乳聚糖褐腐病诱导抗病性采后病害

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青脆李褐腐病原菌鉴定及其防治药剂的筛选

山西农业大学学报(自然科学版) 2024年

作者：雷霁卿石银娜黄梦琳王瑞贵阳学院食品科学与工程学院

[目的]明确青脆李褐腐病病原菌、分析病原菌致病力并筛选防治药剂，为青脆李褐腐病防控提供理论依据。[方法]按照柯赫氏法则分离纯化病原菌，通过形态学观察，多基因位点联合分析鉴定病原菌，通过致病性测定及聚类分析研究病原菌致病力... 详细信息

[目的]明确青脆李褐腐病病原菌、分析病原菌致病力并筛选防治药剂，为青脆李褐腐病防控提供理论依据。[方法]按照柯赫氏法则分离纯化病原菌，通过形态学观察，多基因位点联合分析鉴定病原菌，通过致病性测定及聚类分析研究病原菌致病力差异。[结果]分离获得青脆李褐腐病原菌8株，形态学鉴定显示8株菌为Monilinia spp.，构建系统发育树鉴定8株菌均为Monilinia fructicola；致病力测定显示，病原菌株病斑直径统计学差异显著，接种LZ-7果实病斑直径最小（16.950 0±1.102 8 mm），接种LZ-13果实病斑直径最大（31.405 0±1.767 5 mm）；聚类分析将8株病原菌致病力分为3组：LZ-7为弱致病力菌株、LZ-2/8/3/16/14为中致病力菌株、LZ10/13为强致病力菌株。选取致病力最强菌株LZ-13进行化学防治药剂筛选，按照EC50由低到高排依次为代森锰锌腐霉利。[结论]青脆李褐腐病病原菌为Monilinia fructicola，同种Monilinia fructicola病原菌不同菌株间存在致病力差异，代森锰锌及戊唑醇室内毒力EC50均小于1μg·ml-1。

关键词：青脆李褐腐病病原菌致病力

基于国家果树种质南京桃资源圃的桃褐腐病抗性评价

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中国农业科学 2022年第15期55卷 3018-3063页

作者：沈志军田雨蔡志翔徐子媛严娟孙朦马瑞娟俞明亮江苏省农业科学院果树研究所/江苏省园艺作物遗传改良重点实验室南京六合中等专业学校扬州大学园艺与植物保护学院

【目的】褐腐病是危害桃果实的最严重病害之一，在采收前后造成大量果实损失，开展桃褐腐病抗性的系统鉴定评价，筛选抗性资源，为褐腐病抗性育种的亲本选配提供遗传资源，是解决栽培品种褐腐病抗性不强的长久之策。【方法】2018—2021... 详细信息

【目的】褐腐病是危害桃果实的最严重病害之一，在采收前后造成大量果实损失，开展桃褐腐病抗性的系统鉴定评价，筛选抗性资源，为褐腐病抗性育种的亲本选配提供遗传资源，是解决栽培品种褐腐病抗性不强的长久之策。【方法】2018—2021年，以国家果树种质南京桃资源圃的种质资源为试材，采收8.0—8.5成熟度的果实，无损接种616份，有损接种505份，观测无损接种的病果率每天增加百分比(%)和有损接种的病斑直径扩展速率(cm·d-1)，以平均值和0.5标准差建立9级抗性评价体系，比较不同种质类型、果实类型、来源地的褐腐病抗性，并分析抗性指标与其他果实性状的相关性。【结果】无损接种病果率每天增加百分比为(11.22±5.96)%，变异系数为35.48，基于此指标建立的9级抗性评价体系中，抗性1级(21.64%)39份。无损接种病斑直径扩展速率为(1.71±0.21)cm·d-1，变异系数为0.18，基于此指标的9级评价体系中，1级(2.46 cm·d-1)26份。无损接种病果率每天增加百分比(y)与有损接种病斑扩展速率(x)的回归为关系为y=6.2073x(R~2=0.1839)，线性程度较低。分组均值比较发现中国桃野生资源相对具有较强的褐腐病抗性，是抗性资源挖掘的重点。无损接种病果率每天增加百分比与有损接种病斑扩展速率2个指标均与果实带皮硬度(r=-0.234)和去皮硬度(r=-0.240)呈极显著负相关，与单果重(r=0.427)和着色程度(r=0.319)呈极显著正相关，但相关系数较低。【结论】分别建立了基于无损接种病果率每天增加百分比(%)和有损接种病斑直径扩展速率(cm·d-1)的褐腐病抗性9级评价体系；筛选出抗侵染能力较强的种质资源10份，抗扩展能力较强的种质资源11份。

关键词：桃种质资源褐腐病评价体系抗性种质

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苹果果实褐腐病病原菌分离鉴定

西北农业学报 2023年第3期32卷 488-494页

作者：吕昭龙蒋晶晶李继平翟艳青惠娜娜王立马生彪郑果漆永红王森山甘肃省农业科学院植物保护研究所兰州730070 甘肃农业大学植物保护学院兰州730070 农业部天水作物有害生物科学观测试验站甘肃天水741299

为明确甘肃省静宁县苹果果实褐腐病病原菌种类,对采自该地区苹果果实褐腐病病原菌种类进行鉴定。通过组织分离法将菌株分离纯化后,采用柯赫氏法则进行致病性验证,结合形态学特征和内转录间隔区基因(Internal Transcribed Spacer,ITS)、... 详细信息

为明确甘肃省静宁县苹果果实褐腐病病原菌种类,对采自该地区苹果果实褐腐病病原菌种类进行鉴定。通过组织分离法将菌株分离纯化后,采用柯赫氏法则进行致病性验证,结合形态学特征和内转录间隔区基因(Internal Transcribed Spacer,ITS)、β-微管蛋白基因(β-Tubulin,TUB2)和Laccase(Lcc2)多基因的系统发育分析以及常规PCR测定对分离菌株进行鉴定。结果表明,分离菌株为云南链核盘菌(Monilia yunnanensis),可同时侵染不同品种果实,致病性结果显示对‘秦冠’‘富士’‘新红星’有致病性,而对‘嘎啦’致病性较弱。

关键词：苹果云南链核盘菌褐腐病

挥发性有机化合物对桃果实采后褐腐病控制及感官品质的影响

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浙江大学学报(农业与生命科学版) 2023年

作者：李志昊林斯茵高颖杨灿蒋丹张波浙江大学山东(临沂)现代农业研究院浙江大学农业与生物技术学院果实品质生物学实验室/浙江省园艺植物整合生物学研究与应用重点实验室

桃果实采后贮藏物流过程易受到果生链核盘菌（Monilinia fructicola）的侵染，导致褐腐病发生和品质劣变，有关挥发性有机化合物（volatile organic compound, VOC）对褐腐病的调控效果尚不清楚。本研究分析了成熟桃果实主要VOC物质对... 详细信息

桃果实采后贮藏物流过程易受到果生链核盘菌（Monilinia fructicola）的侵染，导致褐腐病发生和品质劣变，有关挥发性有机化合物（volatile organic compound, VOC）对褐腐病的调控效果尚不清楚。本研究分析了成熟桃果实主要VOC物质对果生链核盘菌的抑菌效应，结果发现，香芹酚、反-2-己烯醛等12种VOC物质可以显著抑制病原菌在培养基上的生长。进一步开展上述VOC物质对桃果实采后褐腐病的调控效应研究，结果表明，VOC物质的熏蒸处理可以有效抑制果生链核盘菌的生长，延缓褐腐病发生，其中以挥发性醛类物质的抑制效果较好。采用25μL/L反-2-己烯醛熏蒸处理，可以显著抑制果生链核盘菌生长，减轻褐腐病症状，同时不影响果实外观、硬度、可溶性固形物和芳香品质指标，有效维持桃果实采后贮藏过程的商品性。本研究认为反-2-己烯醛具有开发为植物源抑菌剂的潜力，服务桃果实供应链的品质保障。

关键词：挥发性有机化合物抑菌活性桃果实褐腐病果生链核盘菌

巫山脆李褐腐病病原菌鉴定及1-MCP对其的防治效果

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西南农业学报 2023年第1期36卷 84-90页

作者：张倩倩何兴兴熊金梁彭梦云黄明刘仁鹏关文强天津商业大学生物技术与食品科学学院/天津市食品生物技术重点实验室天津300134 重庆市巫山县果品产业发展中心重庆巫山404716

【目的】鉴定巫山脆李褐腐病病原菌,并通过体内实验(in vivo)探究保鲜剂1-甲基环丙烯(1-methylcyclopropene,1-MCP)对其的抑制效果,为巫山脆李采后病害防治提供理论依据。【方法】根据柯赫氏法则对采集到的发病果实进行病原菌的分离、... 详细信息

【目的】鉴定巫山脆李褐腐病病原菌,并通过体内实验(in vivo)探究保鲜剂1-甲基环丙烯(1-methylcyclopropene,1-MCP)对其的抑制效果,为巫山脆李采后病害防治提供理论依据。【方法】根据柯赫氏法则对采集到的发病果实进行病原菌的分离、鉴定及致病性的测定,并将分离纯化得到的褐腐病病原菌采用损伤接种菌饼的方法接种到脆李果实上,探究1-MCP处理对巫山脆李不同时期接种褐腐病的抑制效果及果实硬度的影响。【结果】通过病原菌形态学特征观察、真菌通用引物ITS1和ITS4结合PCR技术,鉴定出引起脆李褐腐病的病原菌为美澳型核果链核盘菌(Monilinia fructicola)。1-MCP处理可显著降低(P褐腐病的脆李果实的发病率并抑制病斑直径的扩展;25℃条件下,1-MCP处理对不同时期损伤接种脆李果实褐腐病的抑制作用不显著,仅能维持在24 h内;病原菌在25℃贮藏条件下对脆李的致病性强于4℃贮藏条件;常温、低温条件下,1-MCP处理均可有效延缓脆李果实硬度的下降。【结论】明确引起巫山脆李采后褐腐病的病原菌为美澳型核果链核盘菌。1-MCP结合4℃贮藏处理可有效抑制脆李在采后贮藏期间的褐腐病发病率和病斑直径的扩展,并有效维持果实硬度。本研究为巫山脆李采后贮藏过程中褐腐病的发生和防治提供了理论依据。

关键词：脆李褐腐病病原菌鉴定 1-甲基环丙烯

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甘油抑制桃果实采后褐腐病的作用研究

甘油抑制桃果实采后褐腐病的作用研究

作者：沈诗山东农业大学

学位级别：硕士

桃果实因美味和营养价值高而成为最受欢迎的水果之一。然而,由于桃果实组织柔软、果皮薄,在采后贮藏过程中容易受到褐腐菌、根霉菌和灰霉菌感染产生褐腐病、软腐病和灰霉病等病害,其中褐腐病是桃果实收获后最具破坏性的病害。目前,桃果... 详细信息

桃果实因美味和营养价值高而成为最受欢迎的水果之一。然而,由于桃果实组织柔软、果皮薄,在采后贮藏过程中容易受到褐腐菌、根霉菌和灰霉菌感染产生褐腐病、软腐病和灰霉病等病害,其中褐腐病是桃果实收获后最具破坏性的病害。目前,桃果实采后真菌病害的防治很大程度上依赖于化学杀菌剂,但化学杀菌剂的过度使用造成了环境污染、食品存在安全隐患和病原体耐药性提高等问题。因此,有必要探索安全广谱、高效简便的桃果实防腐保鲜方法,以满足人们对高质量生活的追求。甘油属于可生物降解的糖醇,无毒、无害、环保、可食用,在水中的溶解指数高,吸湿性强,具有较高的安全性。近几年的研究表明,甘油参与植物生长和抗病过程,但是其在采后果蔬病害控制中的作用还不清楚。本研究采用甘油溶液喷洒处理采后桃果实后接种褐腐菌,调查甘油处理对桃果实褐腐病的抑制效果,并从离体抑菌和诱导桃果实抗病性两个方面探究甘油的抗病机理。主要研究结果如下:（1）以中华寿桃为试材,通过人工接菌试验筛选甘油的最佳使用浓度并对甘油处理后不同的接菌时间进行了考察,发现5%（v/v）浓度的甘油结合0.02%Silwet L-77表面活性剂喷施桃果实,在22°C下可以延迟果实发病时间12 h,即使在96 h,发病率仍然显著低于对照,因此,5%（v/v）浓度为甘油最佳使用浓度。甘油处理后24 h接种褐腐菌的病斑扩展速率最慢,因此,推测甘油处理后可能诱导果实提高抗病性。在实际应用中推荐使用5%浓度的甘油对桃果实进行喷施处理。（2）对甘油的抑菌性能进行初步研究,分别使用1%、2%、3%、4%、5%和6%（v/v）的甘油对褐腐菌菌丝和孢子进行处理,处理后对菌斑直径和孢子萌发率进行测定,发现甘油处理不会降低褐腐菌菌斑直径和孢子萌发率,说明甘油对褐腐菌没有直接抑制或杀灭作用。（3）用5%的甘油处理桃果实后24 h接种M.fructicola,发现甘油处理能明显提高桃果中抗氧化相关酶苯丙氨酸解氨酶（PAL）、过氧化物酶（POD）和超氧化物歧化酶（SOD）活性,但是过氧化氢酶（CAT）活性与对照相比没有显著差异（P＞0.05）,而且甘油处理降低了超氧阴离子和过氧化氢含量,提高了桃果实抗氧化能力,有利于抑制桃果实病斑的扩展。另外,发现甘油处理减少了丙二醛（MDA）的水平、可溶性固形物和酸度的消耗,使果实的硬度下降变慢,能够延缓桃果实的软化,减少膜脂过氧化。（4）考察了5%浓度的甘油处理后果实几丁质酶（CHI）和β-1,3-葡聚糖酶（GNS）活性变化,利用荧光定量PCR方法测定了CHI、GNS、病程相关蛋白1基因（PR1）、病程相关蛋白1非表达子基因（NPR1）的相对表达量,发现5%甘油处理可以提高果实CHI和GNS活性及CHI和GNS的基因表达量。同时诱导了系统获得抗病性（SAR）的标志性基因PR1和NPR1的表达。另外,5%浓度的甘油处理还提高了果实内水杨酸（SA）的水平,说明甘油处理可能通过SAR诱导了桃果实抗病性提高。（5）5%浓度的甘油处理后,果实内与G3P合成有关的两个关键酶甘油激酶（GLI1）和甘油三磷酸脱氢酶（GPDH）基因的相对表达量显著升高,油酸水平下降,接菌后果实饱和脂肪酸棕榈酸和硬脂酸以及不饱和脂肪酸亚麻酸和亚油酸含量均有显著升高,说明5%浓度的外施甘油可以通过影响甘油三磷酸（G3P）合成的关键酶和基因的表达水平调控G3P的合成,外源甘油渗入果实后在果实体内转化为G3P,G3P进入到桃果实质体内可以与C18:1反应生成磷脂类化合物,进而可以减少油酸（C18:1）的含量,从而进一步触发防御信号,增强桃果实的抗病反应。

关键词：桃果实褐腐病甘油诱导抗病性甘油三磷酸

李果实褐腐病病原菌产生细胞壁降解酶条件优化及其致病机理

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食品科学 2017年第20期38卷 12-19页

作者：张婕凡先芳姚世响邓丽莉曾凯芳西南大学食品科学学院重庆400715 重庆市特色食品工程技术研究中心重庆400715

研究李果实褐腐病病原菌产生细胞壁降解酶的种类及其产酶最佳条件,并探讨其导致果实发病的作用机制。以Monilinia fructicola为研究菌株,通过单因素试验和正交试验优化M.fructicola产生细胞壁降解酶条件;通过损伤接种粗酶液,研究其对李... 详细信息

研究李果实褐腐病病原菌产生细胞壁降解酶的种类及其产酶最佳条件,并探讨其导致果实发病的作用机制。以Monilinia fructicola为研究菌株,通过单因素试验和正交试验优化M.fructicola产生细胞壁降解酶条件;通过损伤接种粗酶液,研究其对李果实的致病作用。结果表明:M.fructicola产细胞壁降解酶的最佳条件为:培养时间6 d、培养基pH 6.0、碳源为3.5%蔗糖、氮源为2.5%硝酸钾;粗酶液处理能够导致李果实发生褐腐病,同时引起果实多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(pectin methylgalacturonase,PMG)活力的上升,使果实原果胶物质转化为可溶性果胶,同时造成其纤维素含量下降,加速果实的软化腐烂进程。

关键词：褐腐病细胞壁降解酶李果实致病机理