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PD-1 ScFv溶瘤病毒对卵巢癌裸鼠模型免疫活性、肿瘤生长及存活率的影响

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免疫学杂志 2022年第10期38卷 854-861页

作者：黄山鹰唐国玲胡海燕刘剀罗智华曾薇薇帅振虹刘植华深圳市妇幼保健院妇科 518000

目的探讨程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)单链抗体(ScFv)溶瘤病毒对卵巢癌裸鼠模型免疫活性、肿瘤生长及存活率的影响。方法C57BL/6小鼠右前腋下注射SKOV-3细胞构建卵巢癌裸鼠模型,分别以0、5×10^(5)PFU、1×10^(6)PFU、5×10^(6)PFU、1×10... 详细信息

目的探讨程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)单链抗体(ScFv)溶瘤病毒对卵巢癌裸鼠模型免疫活性、肿瘤生长及存活率的影响。方法C57BL/6小鼠右前腋下注射SKOV-3细胞构建卵巢癌裸鼠模型,分别以0、5×10^(5)PFU、1×10^(6)PFU、5×10^(6)PFU、1×10^(7)PFU、5×10^(7)PFU、1×10^(8)PFU滴度的PD-1 ScFv溶瘤病毒瘤内注射,检测小鼠肿瘤体积,筛选最佳作用滴度。构建好的卵巢癌模型裸鼠随机分为模型组、PD-1抗体组、单独溶瘤病毒组、PD-1 ScFv溶瘤病毒组,每组8只,再选8只小鼠右前腋下注射等量细胞培养液作为对照组。测定小鼠脾指数、胸腺指数及肿瘤体积;流式细胞实验检测小鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4^(+)、CD8^(+)比例与CD4^(+)/CD8^(+)比值;以酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒检测小鼠血清白细胞介素(IL)-2、IL-10、γ-干扰素(IFN-γ)水平;检测小鼠外周血白细胞比例;CCK-8实验检测小鼠产生的特异性抗肿瘤细胞杀伤率;检测各组小鼠存活率。结果与对照组比较,模型组小鼠脾指数与胸腺指数、CD4^(+)比例与CD4^(+)/CD8^(+)比值、IFN-γ与IL-2水平、外周血白细胞比例、特异性抗肿瘤细胞杀伤率、存活率降低(P模型组比较,PD-1 ScFv溶瘤病毒组、单独溶瘤病毒组、PD-1抗体组小鼠脾指数与胸腺指数、CD4^(+)比例与CD4^(+)/CD8^(+)比值、IFN-γ与IL-2水平、外周血白细胞比例、特异性抗肿瘤细胞杀伤率、存活率均升高(P裸鼠免疫功能,促进特异性抗肿瘤细胞产生,并增强其对癌细胞杀伤力,抑制肿瘤生长,相比单独应用PD-1抗体或溶瘤病毒疗效能更强。

关键词：程序性死亡受体1单链抗体溶瘤病毒卵巢癌裸鼠模型免疫活性

Bcl-2反义核酸治疗Burkitt’s淋巴瘤裸鼠模型的研究

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北京大学学报（自然科学版） 2004年第4期40卷 513-517页

作者：兰小鹏吕联煌林景娟陈英玉林振兴福建省血液病研究所福州350001 南京军区福州总医院全军医学检验中心

为了探讨Bcl 2反义核酸治疗Burkitt’s淋巴瘤 (BL)的疗效 ,将不含EB病毒的人类BL的细胞株—CA4 6移植到BAB C裸鼠体内 ,建立BL裸鼠模型 ,并将荷瘤裸鼠随机分为反义治疗 (A组 )、无义对照 (B组 )和空白对照 (C组 ) 3个组 ,每组 5只。A组... 详细信息

为了探讨Bcl 2反义核酸治疗Burkitt’s淋巴瘤 (BL)的疗效 ,将不含EB病毒的人类BL的细胞株—CA4 6移植到BAB C裸鼠体内 ,建立BL裸鼠模型 ,并将荷瘤裸鼠随机分为反义治疗 (A组 )、无义对照 (B组 )和空白对照 (C组 ) 3个组 ,每组 5只。A组注射Bcl 2反义核酸 ,B组注射无义寡核苷酸 ,C组不注射任何制剂 ;治疗剂量为 5mg·kg-1 ·d-1 ,给药方式为瘤内局部注射 ,每天注射 1次 ,连续给药 1 5d。结果显示 :A组肿瘤的生长明显受到抑制 ,其中 1只裸鼠的肿瘤消失 ,其余 4只的瘤块明显小于B组和C组。A组对C组的肿瘤抑制率为 89.5 % ;A组对B组的肿瘤抑制率为83.3% ,2者的抑制率无显著差异 (p >0 .0 5 ) ;而B组对C组的抑制率为 36 .9%与前 2者的抑制率差异非常显著 (p <0 .0 1 )。说明Bcl

关键词： Bcl-2反义核酸治疗 Burkitt’S淋巴瘤裸鼠模型 CA-46

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人单核细胞白血病多器官浸润裸鼠模型的建立

癌症 2006年第10期25卷 1307-1310页

作者：李振江陈子兴岑建农路军何军苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所苏州大学附属第一医院病理科江苏苏州215006

背景与目的:急性白血病常伴有髓外多器官的浸润,髓外复发为白血病患者的一种复发形式,而白血病细胞浸润机制并未完全阐明。本文通过建立人单核细胞白血病裸鼠多器官浸润模型,为对其机制进行研究提供模型基础。方法:对4和6周龄的BALB/c... 详细信息

背景与目的:急性白血病常伴有髓外多器官的浸润,髓外复发为白血病患者的一种复发形式,而白血病细胞浸润机制并未完全阐明。本文通过建立人单核细胞白血病裸鼠多器官浸润模型,为对其机制进行研究提供模型基础。方法:对4和6周龄的BALB/c裸鼠进行切脾(splenectomy),环磷酰胺腹腔注射(cytoxanintraperitonealinjection)及全身亚致死剂量辐照(sublethalirradiation)等预处理(SCI)后,经尾静脉接种5×106或1×107个人单核细胞白血病SHI-1细胞,应用RT-PCR、组织病理切片、免疫组织化学以及流式细胞术等检测裸鼠各脏器中SHI-1细胞浸润生长情况。结果:SHI-1细胞可植入经预处理的裸鼠体内,检测发现各组裸鼠全身多脏器如肝、肺、肾、睾丸均可受累,并可于体表及体内多部位形成淡绿色的肿块。4周龄裸鼠可于多部位如胃、头颅、椎体、纵隔内、骨骼上形成肿块,并于骨髓中可检测到人CD45阳性细胞,平均为2.85%;而6周龄组仅于少部分脏器形成肿块,骨髓中不能检测到人CD45阳性细胞。结论:人单核细胞白血病细胞株SHI-1能在经SCI预处理的裸鼠体内形成白血病及多器官浸润模型,可作为研究白血病及髓外浸润的一种有用工具。

关键词：白血病,单核细胞裸鼠模型髓外浸润

VEGF在人子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义

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南方医科大学学报 2008年第5期28卷 816-819页

作者：杨芳马颖何援利南方医科大学珠江医院妇产科广东广州510282

目的建立人子宫内膜异位症(EMs)裸鼠模型,检测血管内皮生长因子(VEGF)在正常在位内膜及裸鼠异位内膜的表达,探讨其在EMs发生发展中的作用。方法分别采用皮下种植和腹腔注射的方法,建立EMs裸鼠模型,光镜下观察异位病灶的形态学特点,并采... 详细信息

目的建立人子宫内膜异位症(EMs)裸鼠模型,检测血管内皮生长因子(VEGF)在正常在位内膜及裸鼠异位内膜的表达,探讨其在EMs发生发展中的作用。方法分别采用皮下种植和腹腔注射的方法,建立EMs裸鼠模型,光镜下观察异位病灶的形态学特点,并采用免疫组化法检测正常在位内膜及裸鼠异位内膜中VEGF蛋白表达水平。结果实验裸鼠共20只,皮下种植组10只,8只成模,腹腔注射组10只,7只成模,异位病灶在光镜下呈现增生期特点;正常在位内膜10例,VEGF蛋白在异位内膜中的表达有增多趋势(t=2.632,P裸鼠皮下种植及腹腔注射模型,检测到VEGF表达较正常在位内膜增多,该模型可用于进行人EMs血管生成及抗血管生成治疗的研究模型。

关键词：子宫内膜异位症裸鼠模型血管内皮生长因子血管生成

Avastin对胃癌裸鼠原位移植模型血管生成的影响

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癌症 2006年第9期25卷 1076-1081页

作者：王宁王斌王雅杰第二军医大学附属长海医院肿瘤科上海200433 第二军医大学附属东方肝胆外科医院病理科上海200433

背景与目的:血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)和肿瘤的生长和转移密切相关,本实验通过VEGF单克隆抗体Avastin联合或不联合氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU),对人类胃癌裸鼠原位种植模型的肿瘤生长和转移进行干预治... 详细信息

背景与目的:血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)和肿瘤的生长和转移密切相关,本实验通过VEGF单克隆抗体Avastin联合或不联合氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU),对人类胃癌裸鼠原位种植模型的肿瘤生长和转移进行干预治疗,从而探讨Avastin对胃癌生长、转移和血管生成的抑制作用。方法:应用原位移植方法建立裸鼠胃癌转移模型,术后10天将裸鼠随机分为4组:对照组、5-FU单药组、Avastin单药组和联合用药组。经过6周的治疗,对裸鼠原位肿瘤的瘤重、抑瘤率、肿瘤微血管密度、凋亡指数以及肝脏转移灶进行检测和分析。结果:和对照组相比,5-FU单药组、Avastin单药组和联合用药组原位移植肿瘤重量明显降低,抑瘤率分别为37.52%,58.76%和98.51%。微血管密度Avastin单药组和联合用药组均比对照组明显减少(8.40±1.26和7.20±1.23vs15.30±1.06),而5-FU组与对照组之间没有显著的差别;Avastin单药组和联合用药组的凋亡指数比对照组明显升高[(11.50±1.58)%和(13.60±1.35)%vs(4.70±1.70)%]。联合应用Avastin和5-FU对肝脏转移灶具有明显的抑制作用,而其他3组的抑制肝转移效果没有明显的差别。结论:抗VEGF抗体Avastin通过抑制肿瘤新生血管的生成而诱导胃癌细胞凋亡,进而显著抑制裸鼠原位肿瘤的生长。联合应用Avastin和5-FU不仅对原位肿瘤的生长抑制最为明显,而且对肝脏转移有显著的抑制作用。因此,联合应用Avastin和传统的细胞毒化疗药物对胃癌的治疗效果更显著。

关键词：血管生成血管生成抑制剂 Avastin VEGF 胃肿瘤裸鼠模型

人前列腺癌骨转移裸鼠移植模型的建立及其循环肿瘤细胞的特性

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中国实验动物学报 2016年第1期24卷 14-19页

作者：张彩勤张海赵勇白冰刘佩娟师长宏第四军医大学实验动物中心西安710032

目的利用裸鼠移植模型研究雄激素阻断对人前列腺癌骨转移发生的影响,并初步探索肿瘤转移过程中循环肿瘤细胞(CTCs)的生物学特性。方法将40只裸鼠随机平分为两组,一组裸鼠手术切除睾丸以阻断雄激素的分泌,另一组为正常对照。心脏注射绿... 详细信息

目的利用裸鼠移植模型研究雄激素阻断对人前列腺癌骨转移发生的影响,并初步探索肿瘤转移过程中循环肿瘤细胞(CTCs)的生物学特性。方法将40只裸鼠随机平分为两组,一组裸鼠手术切除睾丸以阻断雄激素的分泌,另一组为正常对照。心脏注射绿色荧光蛋白和荧光素酶双标的人前列腺癌细胞PC3-Luc-GFP,剂量为每只1×106/50μL,制备实验用骨转移模型。通过小动物活体成像系统检测人前列腺癌骨转移模型的建立;将发现转移的骨组织切片进行HE染色分析,并分离转移模型中CTCs,通过Western blot检测CTC中转移相关分子RANKL和TOPK的表达。结果成功建立了前列腺癌骨转移模型,切除睾丸组的骨转移发生率为2/13(15.38%),而正常对照组的骨转移发生率为5/14(35.71%);再次重复裸鼠移植模型的建立,合并两次动物实验结果得出:切除睾丸组的骨转移发生率为3/26(11.54%),而正常对照组的骨转移发生率为10/27(37.04%),两组间差异有显著性(P裸鼠移植模型中阻断雄激素能显著降低前列腺癌骨转移的发生率。CTC的转移能力高于原始的前列腺癌细胞。

关键词：前列腺癌骨转移模型裸鼠模型睾丸切除循环肿瘤细胞

二步法预定位技术对荷人肝癌裸鼠模型的MR免疫成像研究

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中华放射学杂志 2005年第4期39卷 357-361页

作者：许乙凯刘岘叶靖第一军医大学南方医院影像中心广州510515

目的利用生物素亲和素系统(biotin avidinsystem,BAS)的靶向定位效应和生物放大作用,提高MR分子免疫成像的敏感性。方法制备生物素化抗人肝癌细胞单克隆抗体HAb18并测定其生物素化程度及抗原结合活性。20只荷人肝细胞癌裸鼠分为3组,二... 详细信息

目的利用生物素亲和素系统(biotin avidinsystem,BAS)的靶向定位效应和生物放大作用,提高MR分子免疫成像的敏感性。方法制备生物素化抗人肝癌细胞单克隆抗体HAb18并测定其生物素化程度及抗原结合活性。20只荷人肝细胞癌裸鼠分为3组,二步法预定位组8只,先静脉注射生物素化单克隆抗体600μg,24h后再给予钆喷替酸葡甲胺链霉亲和素(Gd DTPA streptavidin,Gd DTPA SA);HAb18单克隆抗体Gd DTPA组6只,经尾静脉注射Gd DTPA HAb18;Gd DTPA对照组6只,静脉注射Gd DTPA。对实验动物行MR扫描,测量SET1WI平扫及增强后10、30、60min及3、6、12、24、48h图像内肿瘤的信号强度,绘制信号强度时间曲线,并计算肿瘤强化率及对比度噪声比(contrast to noiseratio,CNR)。结果HAb18单克隆抗体经生物素化后,每个抗体分子平均可结合20个分子生物素,其抗原结合活性约为91%。二步法预定位组内,肿瘤信号强度缓慢升高,增强后第6小时,肿瘤的强化率、CNR达到最大值,与其他两组相比较差异有统计学意义。48h后,肿瘤的强化仍肉眼可辨。单克隆抗体组内,肿瘤表现为缓慢轻度强化,增强后24h的强化率达13.5%,肿瘤信号强度、CNR与平扫比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。Gd DTPA对照组内,肿瘤表现为快进快出特点的强化特点。结论二步法预定位技?

关键词：预定位技术二步法成像研究裸鼠模型生物素-亲和素系统单克隆抗体 HAb18 抗原结合活性钆喷替酸葡甲胺强度-时间曲线 DTPA 生物素化 system 信号强度对比度噪声比人肝癌细胞人肝细胞癌链霉亲和素尾静脉注射分子生物素

内皮抑素在人子宫内膜异位症裸鼠模型中的治疗作用

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广东医学 2008年第5期29卷 722-724页

作者：杨芳何援利马颖南方医科大学珠江医院妇产科广州510282

目的建立人子宫内膜异位症(内异症)裸鼠模型,探讨内皮抑素治疗内异症的作用。方法采用皮下种植方法,建立内异症裸鼠模型,光镜下观察异位病灶的形态学特点,采用免疫组化法检测内皮抑素的不同给药方法裸鼠异位内膜中血管内皮生长因子(VEGF... 详细信息

目的建立人子宫内膜异位症(内异症)裸鼠模型,探讨内皮抑素治疗内异症的作用。方法采用皮下种植方法,建立内异症裸鼠模型,光镜下观察异位病灶的形态学特点,采用免疫组化法检测内皮抑素的不同给药方法裸鼠异位内膜中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平。结果实验裸鼠共25只,20只成模,以内皮抑素按2mg/(kg.d)分别自尾静脉注射(静脉注射组8只)及局部注射(局部注射组7只),对照组注射5只(局部注射)同体积PBS,比较3组异位病灶VEGF的表达。注射内皮抑素的两组异位病灶的VEGF表达均明显降低,差异均有显著性(P裸鼠皮下种植模型,通过不同给药途径内皮抑素对内异症裸鼠异位内膜VEGF分泌的抑制、局部给药效果好于全身用药,给今后内皮抑素应用于临床治疗子宫内膜异位症提供了实验依据。

关键词：子宫内膜异位症裸鼠模型血管内皮生长因子内皮抑素

人原发性小肠恶性黑色素瘤裸鼠原位移植高转移模型的建立

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中华肿瘤杂志 2008年第12期30卷 885-890页

作者：脱朝伟张宁刘秋珍杨波王明耀解放军第二0二医院肿瘤超微病理研究室沈阳110003 解放军第二0二医院普通肝胆外科沈阳110003 辽宁省肿瘤医院病理科

目的建立人原发性小肠恶性黑色素瘤裸小鼠原位移植高转移模型。方法将手术切除的人原发性小肠恶性黑色素瘤原发灶和肝转移灶新鲜瘤组织块分别植入裸鼠小肠黏膜层内，观察原位移植的成瘤率、移植瘤的侵袭性和转移率，并进行形态学、流式... 详细信息

目的建立人原发性小肠恶性黑色素瘤裸小鼠原位移植高转移模型。方法将手术切除的人原发性小肠恶性黑色素瘤原发灶和肝转移灶新鲜瘤组织块分别植入裸鼠小肠黏膜层内，观察原位移植的成瘤率、移植瘤的侵袭性和转移率，并进行形态学、流式细胞分析和染色体核型分析。结果人小肠恶性黑色素瘤原发灶和肝转移灶新鲜组织均移植成功，建成人原发性小肠（原发灶）恶性黑色素瘤裸鼠原位移植高转移模型（HSIM-0602）和人原发性小肠（肝转移灶）恶性黑色素瘤裸鼠原位移植肝转移模型（HSIM-0603）。HSIM-0602和HSIM-0603模型分别传至21代和23代，共移植裸鼠227只，其肿瘤移植生长率和液氮冻存复苏成活率均为100％。HSIM-0602模型肝转移率为65．7％，肺转移率为84．8％，淋巴结转移率为63.8％。HSIM-0603模型肝转移率为100％，肺转移率为46．7％，淋巴结转移率为71．3％。移植瘤组织病理学为小肠高度恶性黑色素瘤。免疫组织化学显示，S-100蛋白和HMB-45均为阳性表达。电镜下，瘤细胞浆内可见大量的黑色素小体，也可见黑色素复合体。HSIM-0602模型移植瘤细胞DNA指数为1．59±0．07，HSIM-0603模型移植瘤细胞DNA指数为1．71±0．12，均为异倍体。染色体核型分析显示，HSIM-0602模型移植瘤细胞染色体数为55～57条，HSIM-0603模型移植瘤细胞染色体数为57～59条。结论HSIM-0602和HSIM-0603模型是成功的人原发性小肠恶性黑色素瘤裸鼠原位移植自发性高转移模型，完整地模拟了人原发性小肠恶性黑色素瘤患者的自然临床病理过程，为研究原发性小肠恶性黑色素瘤转移生物学和抗转移治疗提供了理想的动物模型。

关键词：小肠肿瘤恶性黑色素瘤肿瘤移植肿瘤转移裸鼠模型