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大亚湾裸甲藻种群的季节变化与环境条件的关系

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生态学报 2001年第11期21卷 1825-1832页

作者：王朝晖陈菊芳徐宁齐雨藻暨南大学水生生物研究所广州510632

研究了大亚湾 1 997年 7月至 1 998年 6月裸甲藻种群季节变化及其与环境因子的关系。裸甲藻在大亚湾主要出现在 4～ 5月份 ,并在 4月至 5月份出现了 4个密度高峰 ,最高密度可达每毫升 996个细胞 ,6月至 9月份偶有出现 ,1 0月至2月份则... 详细信息

研究了大亚湾 1 997年 7月至 1 998年 6月裸甲藻种群季节变化及其与环境因子的关系。裸甲藻在大亚湾主要出现在 4～ 5月份 ,并在 4月至 5月份出现了 4个密度高峰 ,最高密度可达每毫升 996个细胞 ,6月至 9月份偶有出现 ,1 0月至2月份则未出现。裸甲藻高密度出现的温度、盐度范围分别为 2 5～ 3 0℃和 2 4‰～ 3 2‰。裸甲藻在大亚湾的出现及 4、5月份的密度高峰与水温的季节变化密切相关 ,3月份水温存在一个急升期 ,水温由 3月初的 1 5 .5℃以下上升至 3月底的2 3 .5℃左右 ,为裸甲藻种群密度的急剧增长提供了合适的温度条件。大亚湾盐度的季节波动较小 ,与裸甲藻种群的季节变化无关。大亚湾氮、磷、硅等营养物质含量丰富 ,不存在营养元素缺乏 ,但高密度的裸甲藻种群仅在氮、磷含量及氮磷比分别为 5 0～ 1 0 0μg/L、5～ 2 0μg/L和 5～ 3 0范围内出现 ,氮、磷、硅

关键词：裸甲藻大亚湾南海种群动态季节环境条件赤潮

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光亮裸甲藻的生长特征研究

厦门大学学报（自然科学版） 1994年第4期33卷 525-531页

作者：林元烧厦门大学海洋学系福建厦门

在实验室条件下获得光亮裸甲藻的最大生长率Ｋ＿（ｍａｘ）为１．８４（第２天），指数生长时期的Ｋ值为０．９（第６天），第９天后，当细胞密度达３．６×１０￣３ｃｅｌｌｓ／ｍｌ时，Ｋ趋近于０。在Ｆ～Ｆ４培养液中，这种甲藻的细... 详细信息

在实验室条件下获得光亮裸甲藻的最大生长率Ｋ＿（ｍａｘ）为１．８４（第２天），指数生长时期的Ｋ值为０．９（第６天），第９天后，当细胞密度达３．６×１０￣３ｃｅｌｌｓ／ｍｌ时，Ｋ趋近于０。在Ｆ～Ｆ４培养液中，这种甲藻的细胞密度和生长率差别不大，Ｆ／８～Ｆ／６４培养液中的藻细胞密度和生长率在第４或第５天后明显下降，这显然与培养液中的营养盐馈乏有关。

关键词：裸甲藻生长率甲藻

一株分离自胶州湾的裸甲藻形态相似种的分子系统学研究

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海洋学报 2011年第1期33卷 153-162页

作者：朱霞甄毓于志刚中国海洋大学海洋生命学院山东青岛266003 中国海洋大学环境科学与工程学院海洋环境与生态教育部重点实验室山东青岛266100 中国海洋大学化学化工学院海洋化学理论与工程技术教育部重点实验室山东青岛266100

对一株分离自胶州湾的裸甲藻形态相似种(Gymnodinium ***)进行了分子水平的分类鉴定。提取基因组DNA后扩增核糖体小亚基和转录间隔区序列,经纯化、克隆并测序。将获得的序列分别进行Blastn同源性分析,并下载相关序列构建系统进化树,结... 详细信息

对一株分离自胶州湾的裸甲藻形态相似种(Gymnodinium ***)进行了分子水平的分类鉴定。提取基因组DNA后扩增核糖体小亚基和转录间隔区序列,经纯化、克隆并测序。将获得的序列分别进行Blastn同源性分析,并下载相关序列构建系统进化树,结果表明,该藻与共生藻(Symbiodinium)亲缘关系较近,而与裸甲藻(Gymnodinium)等其他甲藻亲缘关系较远,因此初步鉴定该藻为一种共生藻。用核糖体小亚基和转录间隔区序列分别对共生藻属构建系统进化树,分析各类群之间的关系,初步鉴定本藻属于共生藻属E类群。该藻分离自胶州湾,在f/2培养液中生长良好,表明胶州湾可能存在营自由生活的共生藻。

关键词：核糖体DNA(rDNA) 转录间隔区裸甲藻共生藻

利用rDNA和ITS序列对1株裸甲藻的初步鉴定

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中国海洋大学学报（自然科学版） 2004年第1期34卷 75-83页

作者：苟万里刘东艳甄毓辛泽毓李荣秀于志刚中国科学院上海生命科学研究院上海生物工程研究中心上海200233 中国海洋大学海洋生命科学院山东青岛266003 中国海洋大学化学化工学院山东青岛266003

测定了 1株分离自青岛胶州湾海水样品、从形态上初步确定为裸甲藻属 (Gymnodiniumsp,编号为 GYN- 1 5)的核糖体基因 (r DNA)和转录单元内间隔区 (Internal Transcribed Spacer,ITS)序列 ,并利用该序列对该藻进行了初步鉴定。测定的序列... 详细信息

测定了 1株分离自青岛胶州湾海水样品、从形态上初步确定为裸甲藻属 (Gymnodiniumsp,编号为 GYN- 1 5)的核糖体基因 (r DNA)和转录单元内间隔区 (Internal Transcribed Spacer,ITS)序列 ,并利用该序列对该藻进行了初步鉴定。测定的序列长 2 658bp,涵盖了小亚基 (smallsubunit,SSU) r DNA基因 3'端 1 747bp,ITS1 - 5.8S r DNA- ITS2全长和大亚基 (large subunit,LSU) r DNA基因 5'端 337bp。同源性分析该序列发现 GYN- 1 5与共生甲藻属 (Symbiodinium)中的 2个种 (Symbiodinium californium和 Gymnodinium varians)的对应序列具有很高的相似性 ;3株藻的各段 r DNA和 ITS序列的相似性均为 99%以上 ;以 SSU r DNA序列中的 3个可变区 (V1 +V2 +V3)和邻接法构建的系统树表明 ,GYN- 1 5与 ***和 ***构成 1个独立的新的子类群 ,该子类群属于共生甲藻属 ,而与各种裸甲藻的亲缘关系较远。根据这些结果可将GYN- 1 5初步鉴定为属于共生甲藻属。鉴于 GYN- 1 5和其它 2个种所构成的分支明显与 5个已知的子类群 (A,B,C,D,E)不同 ,因此将该分支命名为子类群 F。

关键词： rDNA ITS序列裸甲藻序列相似性系统树共生甲藻浮游植物

微小亚历山大藻及裸甲藻对黑鲷早期发育影响的比较

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2010年第5期36卷 585-590页

作者：蒋玫伦凤霞夏培艳黄师林李磊中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业重点开放实验室上海200090 上海市水文总站上海200232 上海海洋大学海洋科学学院上海201306 国家海洋二所浙江杭州310012

采用静水实验法,温度为(20.2±2.0)℃,并保持实验用水溶解氧为饱和溶氧的60%,分别用微小亚历山大藻和裸甲藻的藻液与过滤海水按一定比例混合稀释成约30 000、15 000和7 500 cell·mL-13个浓度组,同时以过滤海水为对照组,每一个浓度组设... 详细信息

采用静水实验法,温度为(20.2±2.0)℃,并保持实验用水溶解氧为饱和溶氧的60%,分别用微小亚历山大藻和裸甲藻的藻液与过滤海水按一定比例混合稀释成约30 000、15 000和7 500 cell·mL-13个浓度组,同时以过滤海水为对照组,每一个浓度组设3个平行样本,对人工养殖的黑鲷鱼卵和仔鱼进行毒性比较实验.结果表明:鱼卵孵化对微小亚历山大藻和裸甲藻2种藻液的胁迫均较为敏感,且微小亚历山大藻的毒性作用较裸甲藻弱;2种藻液对仔鱼96 h-LC50全长和体质量增长均产生一定的抑制作用,但仔鱼对裸甲藻液的敏感性更强;2种藻液对仔鱼ATPase的酶活性抑制作用差异明显,但裸甲藻的抑制作用更为突出.说明裸甲藻对黑鲷鱼卵和仔鱼的生长发育影响明显高于微小亚历山大藻.

关键词：微小亚历山大藻裸甲藻早期发育黑鲷 ATPase

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大亚湾裸甲藻种群动态及其关键调控因子

生态环境学报 2011年第3期20卷 505-510页

作者：赖海燕徐宁段舜山暨南大学水生生物研究中心//热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心广东广州510632

2008年1—12月对大亚湾养殖海域裸甲藻种群动态和主要环境因子进行了周年调查。结果表明,大亚湾海域裸甲藻类群以直径约为16～22μm的小型裸甲藻(Gymnodinium sp.)为主,另外米氏凯伦藻(Karenia mikimotoi)、链状裸甲藻(Gymnodnium caten... 详细信息

2008年1—12月对大亚湾养殖海域裸甲藻种群动态和主要环境因子进行了周年调查。结果表明,大亚湾海域裸甲藻类群以直径约为16～22μm的小型裸甲藻(Gymnodinium sp.)为主,另外米氏凯伦藻(Karenia mikimotoi)、链状裸甲藻(Gymnodnium catenatum)和血红哈卡藻(Akashiwo sanguinea)也有少量出现。裸甲藻种群密度呈现出明显的季节性变化特征:5月出现裸甲藻密度高峰,全年最大密度达到903 ***-1,秋冬季节密度最小。不同站位裸甲藻密度也具有明显的空间分布差异,养殖及近岸海域密度普遍高于外海对照区。相关性分析结果表明,裸甲藻密度的关键调控因子包括温度、化学需氧量(COD)、可溶性有机氮(DON)和尿素浓度。裸甲藻高密度、高频率出现的温度范围在24～26℃,DON和尿素的质量浓度范围分别为N 156.38～187μg·L-1和N 17.4～38.9μg·L-1。在温度适宜的条件下,尿素等有机氮含量的增加可能成为裸甲藻赤潮的触发因子。

关键词：裸甲藻种群动态大亚湾环境因子有机氮

裸甲藻溶藻细菌的筛选及其胞外抑藻活性物质的分离鉴定

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裸甲藻溶藻细菌的筛选及其胞外抑藻活性物质的分离鉴定

作者：刘娟南京农业大学

学位级别：硕士

在适宜的条件下,一些藻类能够急剧增加或聚集,海水中藻细胞密度锐增,使水体颜色改变,并有可能造成海洋生物死亡,这就是所谓的赤潮(red tide)现象。除了微藻外,其他一些单细胞浮游生物也能够形成赤潮。海洋水体富营养化是导致赤潮的直接... 详细信息

在适宜的条件下,一些藻类能够急剧增加或聚集,海水中藻细胞密度锐增,使水体颜色改变,并有可能造成海洋生物死亡,这就是所谓的赤潮(red tide)现象。除了微藻外,其他一些单细胞浮游生物也能够形成赤潮。海洋水体富营养化是导致赤潮的直接原因。国内外对赤潮的研究已持续几十年,前人在采用物理、化学和其他生物学方法治理赤潮不甚理想的状况下,利用微生物进行生物控藻引起了人们的极大关注目前,溶藻微生物主要包括：溶藻细菌、溶藻放线菌、溶藻真菌、噬藻体、原生动物。是最具潜力的生物控制方法之一。溶藻细菌(Algicidal bacteria)是指以直接或间接方式抑制或杀死藻类、溶解藻细胞的细菌统称。1924年溶藻细菌首次被发现微藻中的裸甲藻,是南方海域赤潮爆发多见报道的一种优势藻种。裸甲藻属甲藻门,是单细胞微藻,是水生动物的饵料,大量繁殖使水体在阳光的照射下反映出红棕色,但过量生长则形成对水产有害的“赤潮”。而且能够产生多种毒素,使鱼虾贝类死亡等,对人体亦有危害。国内外对裸甲藻引起的赤潮研究相对较少。本研究依次从中国莱州湾、胶州湾以及海南三亚市红沙港等海域采集水样,采用液体感染法,即将划线分离的单菌落菌液与裸甲藻培养物共培养,最终从海南三亚市红沙港海域分离到两株对裸甲藻(Gymnodinium sp.)有明显抑制效果的海洋细菌HSB01和HSB07.且细菌HSB07比HSB07抑藻效果更强。通过对两株菌的形态观察、分子和生理生化特征鉴定,得出HSB01是葡萄球菌属,HSB07是盐单胞菌属。通过发酵两株菌并分离细菌菌体与胞外代谢物,然后分别与裸甲藻共培养试验,发现HSB07用乙酸乙酯萃取的发酵物粗提物表现出相对明显的抑藻作用。对细菌HSB07进行20L LB海水培养基规模发酵,得到14g粗提物。经硅胶柱层析、薄层层析得到两个组分B和C。将适量组分B和C以DMSO(二甲基亚砜)溶解,同样采用液体感染法,即将DMSO溶解的组分B和c分别与裸甲藻培养物共培养,发现组分B具有显著的抑藻作用,组分c亦具有一定的抑藻作用。组分B和c进一步进行凝胶柱层析、液相分析与分离,从组分c分离得到一个纯组分,即为组分#12。对组分#12采用核磁共振和质谱分析鉴定,确定其分子量为414。具体结构还需进一步分析鉴定。鉴于20L规模发酵得到的生物量不够理想,因而对细菌HSB07的发酵条件进行了优化。参考20L规模发酵条件28℃、pH7.5、盐度为3、发酵时间24-48h。以发酵液的pH、盐度和发酵时间三个因素作为影响胞外活性物质含量的主要参数。各因素选取3个水平进行正交实验,选用L9(34)正交表设计实验。将发酵好的细菌发酵液高速离心(6500rpm)10min,分离得到上层细菌胞外代谢物和下层菌体,收集上层液。向120m1藻培物中加入15m1细菌胞外代谢物与藻共培养,以溶藻率作为评价发酵条件的指标。主要实验结果如下：1.裸甲藻溶藻菌的筛选、鉴定1)从海南三亚红沙岗水样中共分离出7株细菌,其中2株细菌表现出明显的抑藻作用,分别标记为HSBO1、 HSB07.抑藻试验再验证并进行差异显著性检验得知：细菌HSBO1和HSB07均具有较强的抑藻作用,且细菌HSB07比HSBO1抑藻作用更强。2)对2株溶藻细菌进行分子鉴定：16SrDNA测序,与Genbank中已知序列BLAST,结合生理生化特征分析,结果表明：细菌HSBO1、HSB07分别属于葡萄球菌属(Staphylococcus sp.)、盐单胞菌属(Halomonas sp.);Genbank号分别为KC832320、 KC832321。3)对2株溶藻细菌的菌落进行形态观察：细菌HSBO1呈浅黄色,菌落小而圆,表面凸起,粉质,边缘光滑;细菌HSB07透明,菌落较大而圆,湿润黏粘而不易被挑起,边缘不太光滑。电镜观察可知两株菌均无鞭毛。2.裸甲藻溶藻菌的抑藻特性1)在裸甲藻生长的第14天,即藻对数生长期末期,分别加入两株菌液,经差异显著性检验得出：加入HSB07菌液的藻培物一开始即与自然生长的藻培物藻密度存在显著差异,Sig值小于0.05;而加入HSBO1菌液的藻培物一开始与自然生长的藻培物藻密度差异不显著,Sig值为0.27>0.05,在接下来共培养期间,才表现出显著差异。这表明两株菌HSBO1、HSB07都能明显地抑制裸甲藻的生长。在藻对数生长期末期分别加入两菌培养液,都能加速藻由对数生长末期进入衰退期,且HSB07作用更明显。2)对细菌HSBO1、HSB07(?)抑藻特性进行研究,发现这两株菌的抑藻因子均不是细菌菌体,而是分泌的次级代谢产物,即间接抑藻。3.裸甲藻溶藻

关键词：溶藻细菌裸甲藻抑制效应生物活性

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一株裸甲藻类似种的形态和系统进化分析

科学通报 2008年第3期53卷 299-305页

作者：陈国福王广策张春云周百成中国科学院海洋研究所哈尔滨工业大学海洋学院(威海) 威海264209 天津科技大学海洋科学与工程学院天津100022 哈尔滨工业大学海洋学院(威海)

对一株裸甲藻(Gymnodinium)类似种进行光学显微镜和扫描电子显微镜观察,并PCR扩增了转录内间隔区(含5.8S rDNA)和核糖体大亚基D1-D2区,对获得的序列进行Blastn同源分析,探讨了该藻与裸甲藻及其他裸甲藻形态类似种,包括凯伦藻(Karenia)... 详细信息

对一株裸甲藻(Gymnodinium)类似种进行光学显微镜和扫描电子显微镜观察,并PCR扩增了转录内间隔区(含5.8S rDNA)和核糖体大亚基D1-D2区,对获得的序列进行Blastn同源分析,探讨了该藻与裸甲藻及其他裸甲藻形态类似种,包括凯伦藻(Karenia)、旋沟藻(Gyrodinium)、下沟藻(Karlodinium)和共生甲藻(Symbiodinium)的进化关系,以对该藻进行初步鉴定.光学显微镜观察表明,该藻具有裸甲藻的一些典型形态特征,如细胞左旋运动、具有上下壳和横沟等;在扫描电子显微镜下能看到细胞的2根运动鞭毛.序列同源检索和进化(包括ITS和LSU树)分析均表明,该藻与共生甲藻亲缘关系较近,而与裸甲藻及其他相关甲藻的进化关系较远,因此可初步鉴定该藻为一种共生甲藻.该藻分离自赤潮水域,提示共生甲藻引发赤潮暴发的可能.

关键词：赤潮裸甲藻 ITS LSU 鉴定共生甲藻

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羟基杀灭赤潮裸甲藻研究

海洋环境科学 2004年第1期23卷 64-66页

作者：周晓见白敏冬邓淑芳董克兵邢琳大连海事大学环境工程研究所辽宁大连116026

羟基自由基水溶液杀灭赤潮微生物裸甲藻的实验。海水羟基比值浓度达到0.68mg/L时,裸甲藻、细菌从0.89×104/mL、5.2×105/mL减少到低于检测方法的低限值;羟基水溶液比值浓度达到0.6mg/L时,微生物的叶绿素a、类胡萝卜素含量均低于检测方... 详细信息

羟基自由基水溶液杀灭赤潮微生物裸甲藻的实验。海水羟基比值浓度达到0.68mg/L时,裸甲藻、细菌从0.89×104/mL、5.2×105/mL减少到低于检测方法的低限值;羟基水溶液比值浓度达到0.6mg/L时,微生物的叶绿素a、类胡萝卜素含量均低于检测方法的最低限值。实验数据表明羟基是治理赤潮的绿色有效方法。

关键词：羟基自由基水溶液赤潮微生物叶绿素类胡萝卜素细菌裸甲藻赤潮治理除藻药剂