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小鼠脾脏淋巴细胞体外培养前后细胞表面标记物CD3、CD4、CD44、CD62L的变化

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中国免疫学杂志 2016年第11期32卷 1607-1609页

作者：李艳春赵丽娜张献宇乔红梅吉林大学第一医院小儿呼吸一科长春130021 吉林大学中日联谊医院甲状腺外科长春130033 吉林大学中日联谊医院手足外科长春130033

目的:探讨体外培养小鼠脾脏淋巴细胞后,细胞表面标记物CD3、CD4、CD44、CD62L的变化。方法:用淋巴细胞分离液分离小鼠脾脏淋巴细胞,37℃细胞孵箱中体外培养3 d后,向细胞中加入流式抗体Mouse CD3e PE-CY7、Mouse CD4FITC、Mouse CD44 PE... 详细信息

目的:探讨体外培养小鼠脾脏淋巴细胞后,细胞表面标记物CD3、CD4、CD44、CD62L的变化。方法:用淋巴细胞分离液分离小鼠脾脏淋巴细胞,37℃细胞孵箱中体外培养3 d后,向细胞中加入流式抗体Mouse CD3e PE-CY7、Mouse CD4FITC、Mouse CD44 PE、Mouse CD62L APC,同时设阴性对照,应用流式细胞仪检测细胞表面标记物CD3、CD4、CD44、CD62L的水平。结果:小鼠脾脏淋巴细胞分离后直接做流式检测,CD3^+CD4^+细胞占19.09%,其中98.61%的细胞为CD44^+,68.71%为CD62L^+。体外培养后CD3^+CD4^+细胞占8.96%,其中71.82%为CD44^+,11.27%为CD62L^+。哮喘小鼠脾脏淋巴细胞分离后直接做流式检测,CD3^+CD4^+细胞占20.33%,其中97.72%的细胞为CD44^+,75.74%为CD62L^+。体外培养后CD3^+CD4^+细胞占7.2%,CD44阳性细胞占58.21%,CD62L阳性细胞仅占2.77%。结论:小鼠脾脏淋巴细胞体外培养后,细胞表面标记物CD44和CD62L发生巨大变化,CD62L呈现明显下调趋势,接近消失,CD44也有下调。

关键词：表面标记物小鼠淋巴细胞

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牛上皮细胞中有效表面标记物的筛选

动物医学进展 2019年第7期40卷 77-82页

作者：王燕琴王易之智宇内蒙古集宁师范学院内蒙古乌兰察布012000 西北农林科技大学陕西杨凌712000 内蒙古自治区农牧业科学院内蒙古呼和浩特010051

动物上皮细胞容易被多种病毒感染,上皮细胞表面标记物的检测可以作为表征上皮细胞状态的一种手段,但是大多数上皮细胞表面标记物也会在上皮来源的肿瘤细胞中表达。为了选择高效、独特的上皮标记物,采用蛋白质印迹法和间接免疫荧光技术,... 详细信息

动物上皮细胞容易被多种病毒感染,上皮细胞表面标记物的检测可以作为表征上皮细胞状态的一种手段,但是大多数上皮细胞表面标记物也会在上皮来源的肿瘤细胞中表达。为了选择高效、独特的上皮标记物,采用蛋白质印迹法和间接免疫荧光技术,在牛肾上皮细胞(KE)、舌上皮细胞(TE)、甲状腺上皮细胞(TYE)以及A549细胞和SW480细胞中,检测了AE3(basic cytokeratin)、AE5(CK3/2p)、CK7、LH1(CK1/10)、EMA(epithelial membrane antigen)、DesmoplakinⅠ/Ⅱ(DSPⅠ/Ⅱ)、E-cadherin和ZO1(zona occludens-1)等8种上皮标记物的表达。结果显示,与阴性对照相比,AE3、AE5、CK7、EMA及DSPⅠ/Ⅱ在上皮细胞和上皮细胞来源的A549、SW480肿瘤细胞中表达良好;E-cadherin仅在上皮细胞中表达;LH1(CK1/10)和ZO1在所有被检测的细胞中都没有表达。结果表明,AE3、AE5、CK7、EMA及DSPⅠ/Ⅱ可以作为有效的上皮细胞及上皮来源的肿瘤细胞标记物,E-cadherin可以作为特异性的上皮细胞标记物。

关键词：上皮细胞肿瘤细胞表面标记物间接免疫荧光细胞角蛋白细胞紧密连接

细菌感染时新生儿CD4^+T细胞表面标记物的表达

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上海第二医科大学学报 2003年第B10期23卷 9-11,120页

作者：朱建幸李玉峰朱晓东沈铮陈同辛上海第二医科大学新华医院儿内科上海儿童医学中心上海200092 上海第二医科大学新华医院临床检验中心上海市儿科研究所

目的研究新生儿CD4^+T细胞在细菌感染时的作用及作为临床应用感染性证据的可能性。方法应用流式细胞仪和单克隆抗体,分别测定19例正常足月新生儿和17例细菌感染足月新生儿治疗前后其CD4^+T细胞表面的白介素-2受体α链(CD25)、β链(CD1... 详细信息

目的研究新生儿CD4^+T细胞在细菌感染时的作用及作为临床应用感染性证据的可能性。方法应用流式细胞仪和单克隆抗体,分别测定19例正常足月新生儿和17例细菌感染足月新生儿治疗前后其CD4^+T细胞表面的白介素-2受体α链(CD25)、β链(CD122)、γ链(CD132)和CD154的表达情况。结果 CD25、CD122、CD132和CD154在正常新生儿CD4^+T细胞上的表达较低,分别为(3.84±3.61)％、(0.74±0.53)％、(12.70±8.54)％和(1.08±1.04)％,其在细菌感染组新生儿CD4^+T细胞上的表达分别为(9.89±9.66)％、(5.79±11.14)％、(21.78±11.34)％和(6.69±7.87)％,较正常新生儿组明显升高(P0.05)。结论正常新生儿CD4^+T细胞的CD25、CD122、CD132和CD154表达较低,在细菌感染时表达上调,可作为新生儿细菌感染诊断的参考指标。

关键词：细菌感染新生儿 CD4^+T细胞表面标记物表达

溶血磷脂促人脐带间充质干细胞增殖的机理及对表面标记物表达影响

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溶血磷脂促人脐带间充质干细胞增殖的机理及对表面标记物表达影响

作者：赵宏伟内蒙古大学

学位级别：硕士

间充质干细胞(MSCs)是一类具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞,可分化成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等。在细胞治疗及组织工程等方面显示出巨大的应用前景。人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)因其免疫原性低,获取方便,不涉及伦理问题... 详细信息

间充质干细胞(MSCs)是一类具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞,可分化成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等。在细胞治疗及组织工程等方面显示出巨大的应用前景。人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)因其免疫原性低,获取方便,不涉及伦理问题的优点已成为干细胞治疗研究热点。然而,制约hUC-MSCs临床应用的一个关键问题是如何获取足够数量的细胞满足临床治疗需要。目前研究提示,溶血磷脂(Lysophospholipids, LPs)中两个重要成员—鞘氨醇-1-磷酸(Sphingosine-1-phosphate, S1P)和溶血磷脂酸(Lysophosphatidic acid,LPA),具有促细胞增殖作用。但对hUC-MSCs的促增殖作用和分化及其机制方面却未见报导。所以,该研究对S1P、LPA是否促进hUC-MSCs增殖并维持表面标记物表达及机制进行了深入研究。为解决hUC-MSCs慢周期性提供一种研究思路,促进hUC-MSCs在细胞治疗及组织工程中的应用;对无血清培养基的开发也有潜在的应用价值。本研究用MTT法证实了S1P、LPA对hUC-MSCs具有促增殖作用,并确定了其具体信号通路,其中Real time PCR检测hUC-MSCs中溶血磷脂受体表达。探讨受体拮抗剂、Gi蛋白、ERK抑制剂处理对S1P、LPA诱导hUC-MSCs增殖影响。采用蛋白印迹技术检测ERK1/2磷酸化。流式细胞术检测hUC-MSCs表面标记物表达情况。结果显示,S1P、LPA均能促进hUC-MSCs增殖且呈剂量依赖性。在hUC-MSCs中优势表达S1PR1-3。S1PR1/3拮抗剂完全抑制而S1PR3拮抗剂部分抑制S1P诱导hUC-MSCs增殖、S1PR2拮抗剂对此没有明显影响。LPAR1/3拮抗剂完全抑制LPA诱导hUC-MSCs增殖。Western blot显示S1P、LPA均能促进hUC-MSCs中ERK1/2磷酸化。Gi蛋白、ERK抑制剂完全抑制S1P、LPA诱导hUC-MSCs增殖及ERK1/2磷酸化,而PI3K抑制剂对S1P诱导hUC-MSCs增殖没有明显作用。流式细胞仪检测发现S1P、LPA对hUC-MSCs表面标记物表达没有明显影响。结论：S1P、LPA具有促进hUC-MSCs增殖作用,S1P是通过S1PR1/3、Gi偶联蛋白并进一步活化ERK1/2信号通路促进hUC-MSCs增殖。LPA通过LPAR1、Gi偶联蛋白及ERK1/2信号通路促进hUC-MSCs增殖。S1P、LPA对表面标记物表达均没有明显影响,表明可以维持hUC-MSCs的多潜能性(不分化)。该研究对于hUC-MSCs的临床应用和无血清培养基开发均有潜在的应用价值。

关键词：人脐带间充质干细胞增殖表面标记物溶血磷脂受体信号通路

同方学位论文库评论

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肿瘤干细胞表面标记物的研究进展

中华临床医师杂志（电子版） 2010年第11期4卷 109-111页

作者：巩艳青辛钟成郭应禄北京大学第一医院男科中心国家泌尿男性生殖系肿瘤研究中心 100034

近几十年来恶性肿瘤的治疗取得了很大进步，但是在常规治疗后肿瘤的复发与转移仍然是现今需要面对的严峻问题。肿瘤干细胞假说是近年来提出的一种新理论，假说认为肿瘤由肿瘤干细胞和一般肿瘤细胞组成（肿瘤的异质性），肿瘤干细胞是存... 详细信息

近几十年来恶性肿瘤的治疗取得了很大进步，但是在常规治疗后肿瘤的复发与转移仍然是现今需要面对的严峻问题。肿瘤干细胞假说是近年来提出的一种新理论，假说认为肿瘤由肿瘤干细胞和一般肿瘤细胞组成（肿瘤的异质性），肿瘤干细胞是存在于肿瘤组织中的极少的具有自我更新、不定潜能性并促使肿瘤形成的细胞，是形成不同分化程度的肿瘤和肿瘤不断生长扩散的根源。肿瘤干细胞理论促使研究人员重新审视肿瘤起始、发展和治疗中抗药性的原因，并为肿瘤的早期诊断、治疗及预后判断提供了新的思路。

关键词：肿瘤干细胞表面标记物常规治疗干细胞理论恶性肿瘤细胞组成自我更新肿瘤组织

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云南半细毛羊毛囊干细胞表面标记物的鉴定

中国草食动物科学 2014年第1期34卷 5-7页

作者：李东江权国波杨红远吕春荣洪琼花云南省畜牧兽医科学院昆明650224

设计8对引物(CK14、CK15、CK19、CD34、CD271、CD200、nestin和β1),分别扩增云南半细毛羊成纤维细胞和毛囊干细胞表面标记物。结果表明:在成纤维细胞中CK19和β1表现为阳性,而在毛囊干细胞中CK14、CK19和β1表现为阳性,其他标记物的表... 详细信息

设计8对引物(CK14、CK15、CK19、CD34、CD271、CD200、nestin和β1),分别扩增云南半细毛羊成纤维细胞和毛囊干细胞表面标记物。结果表明:在成纤维细胞中CK19和β1表现为阳性,而在毛囊干细胞中CK14、CK19和β1表现为阳性,其他标记物的表达都为阴性。因此,CK14可以作为鉴定云南半细毛羊毛囊干细胞的表面标记物之一。

关键词：云南半细毛羊毛囊干细胞表面标记物

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牙周韧带细胞的表型分化及其表面标记物

国外医学（口腔医学分册） 2003年第4期30卷 280-282页

作者：峰煜周彬王贻宁施斌武汉大学口腔医学院

体外培养的未经克隆化的牙周韧带细胞是具有多种细胞表型的细胞群。按照细胞的分化潜能,可分为成纤维细胞表型和成骨样细胞表型。其中,成骨样细胞表型又可分为成牙骨质细胞表型和成骨细胞表型。笔者就牙周韧带细胞不同细胞表型的表面标... 详细信息

体外培养的未经克隆化的牙周韧带细胞是具有多种细胞表型的细胞群。按照细胞的分化潜能,可分为成纤维细胞表型和成骨样细胞表型。其中,成骨样细胞表型又可分为成牙骨质细胞表型和成骨细胞表型。笔者就牙周韧带细胞不同细胞表型的表面标记物(surface marker)、表型分化的影响因素以及细胞克隆在表型研究中的应用作一综述。

关键词：牙周韧带细胞表型分化表面标记物调控机制细胞克隆

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实体瘤干细胞特异性表面标记物的研究进展

口腔颌面外科杂志 2009年第1期19卷 53-56页

作者：王开康非吾朱炎同济大学附属口腔医院口腔颌面外科上海200072

20世纪60、70年代,许多学者就已找到实体肿瘤干细胞存在的实验依据：实体肿瘤细胞存在异质性,只有小部分细胞有克隆形成的能力。Hamburger等发现,只有1/1000～1/5000的肺癌、卵巢癌肿瘤细胞可以在体外软琼脂上形成克隆。1983年,Selby和K... 详细信息

20世纪60、70年代,许多学者就已找到实体肿瘤干细胞存在的实验依据：实体肿瘤细胞存在异质性,只有小部分细胞有克隆形成的能力。Hamburger等发现,只有1/1000～1/5000的肺癌、卵巢癌肿瘤细胞可以在体外软琼脂上形成克隆。1983年,Selby和Kondo等分别提出了肿瘤干细胞的假说，Sell和Pierce（1994）将“干细胞”概念引人实体肿瘤的发病机制研究，

关键词：肿瘤干细胞干细胞表面标记物

溶血磷脂酸对人脐带源间充质干细胞增殖及表面标记物表达的影响

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溶血磷脂酸对人脐带源间充质干细胞增殖及表面标记物表达的影响