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肽核酸抑制HBV抗原表达的研究

中华实验和临床病毒学杂志 2005年第4期19卷 398-400页

作者：陈士俊杜文军刘跃进徐伟蒋雪梅山东省济南市传染病医院 250021

肽核酸(Peptide Nucleic Acids,PNAs),是20世纪90年代初发现的新型DNA/RNA同类物,是一类人工合成的用蛋白质骨架代替核酸中的磷酸核糖骨架而形成的新型分子,由于它拥有诸多DNA/RNA不具有的优点,因此具有非常广泛的生物学效应.本研究的... 详细信息

肽核酸(Peptide Nucleic Acids,PNAs),是20世纪90年代初发现的新型DNA/RNA同类物,是一类人工合成的用蛋白质骨架代替核酸中的磷酸核糖骨架而形成的新型分子,由于它拥有诸多DNA/RNA不具有的优点,因此具有非常广泛的生物学效应.本研究的主要目的就是研究PNA片段对HBV抗原系统的抑制,从而筛选高抗原抑制率的PNA片段,为进一步研制有效的抗病毒药物提供依据。

关键词： HBV抗原肽核酸表达的研究酸抑制 20世纪90年代药物提供依据生物学效应人工合成抗原系统 RNA

PC12细胞缺氧培养后DNA损伤和修复相关基因表达的研究

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中国康复医学杂志 2005年第3期20卷 169-171页

作者：徐广润张东君张旻方思羽张苏明华中科技大学同济医学院同济医院神经内科山东大学齐鲁医院神经内科济南250012

目的:探讨PC12细胞缺氧后细胞凋亡与DNA损伤和修复的关系,进一步阐明缺氧导致PC12细胞凋亡的机制。方法:采用TUNEL法,结合应用流式细胞术观察PC12细胞缺氧培养不同时间点细胞凋亡现象,以及DNA损伤修复相关基因表达的改变。结果:在缺氧0... 详细信息

目的:探讨PC12细胞缺氧后细胞凋亡与DNA损伤和修复的关系,进一步阐明缺氧导致PC12细胞凋亡的机制。方法:采用TUNEL法,结合应用流式细胞术观察PC12细胞缺氧培养不同时间点细胞凋亡现象,以及DNA损伤修复相关基因表达的改变。结果:在缺氧0.5h时,开始出现凋亡细胞,此时P53、P21waf1/cip1蛋白表达也开始增高,GADD45蛋白表达达到高峰(P表达最高(P表达则明显下降(P表达均减弱。结论:PC12细胞缺氧早期(0.5—1h),主要出现凋亡为主的细胞死亡,伴随着DNA损伤相关基因表达的动态改变,提示缺氧后PC12细胞凋亡部分是由于DNA损伤严重,损伤不能及时修复所致。

关键词：缺氧培养修复相关基因表达的研究 PC12细胞凋亡相关基因表达 GADD45 DNA损伤修复 P21蛋白表达 TUNEL法细胞凋亡现象细胞缺氧凋亡细胞流式细胞术不同时间结合应用细胞死亡动态改变 P53 出现高峰

脑梗死患者外周血淋巴细胞神经营养因子及受体mRNA和相关蛋白质产物表达的研究

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中风与神经疾病杂志 2006年第4期23卷 490-492页

作者：方琪董万利张正春袁霞蒋建华倪健强苏州大学附属第一医院神经内科江苏苏州215006

神经营养因子（NTF）是一组特殊的蛋白质和肽类分子，当神经细胞受损伤时，可引起不同种类的神经营养因子释放，从而参与脑损伤的内源性保护过程。本研究通过利用外周血淋巴细胞神经营养因子及受体mRNA和相关蛋白质产物表达来反映脑梗... 详细信息

神经营养因子（NTF）是一组特殊的蛋白质和肽类分子，当神经细胞受损伤时，可引起不同种类的神经营养因子释放，从而参与脑损伤的内源性保护过程。本研究通过利用外周血淋巴细胞神经营养因子及受体mRNA和相关蛋白质产物表达来反映脑梗死后脑内神经营养因子变化，从而得出其表达是否与病灶体积及病情程度具有相关性的结论。

关键词：神经营养因子外周血淋巴细胞受体mRNA 蛋白质产物脑梗死患者表达的研究内源性保护相关蛋白质

RNA干扰体外抑制肝癌细胞端粒逆转酶基因表达的研究

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中华检验医学杂志 2005年第4期28卷 423-425页

作者：黄文方张鹏辉刘华涂植光杨明清四川省医学科学院四川省人民医院检验科成都610072 重庆医科大学检验系

目的利用小片段干扰RNA(siRNA)在肝癌细胞内诱导RNA干扰(RNAi),抑制端粒逆转录酶(hTERT)基因表达,在体外进行RNAi对肝癌治疗的试验研究。方法构建针对hTERT基因的siRNA(siRNAhTERT),转导入肝癌细胞7721,在瘤细胞内诱导RNAi,采用流式细... 详细信息

目的利用小片段干扰RNA(siRNA)在肝癌细胞内诱导RNA干扰(RNAi),抑制端粒逆转录酶(hTERT)基因表达,在体外进行RNAi对肝癌治疗的试验研究。方法构建针对hTERT基因的siRNA(siRNAhTERT),转导入肝癌细胞7721,在瘤细胞内诱导RNAi,采用流式细胞分析、逆转录聚合酶链反应(RTPCR)法、免疫组化等技术检测siRNA处理前后细胞增殖及hTERT基因表达变化。结果siRNAhTERT对肝癌细胞生长抑制率达37.5%;细胞周期中S期细胞明显减少,G1/G0期细胞显著增加;hTERT基因的mRNA表达由99.4%下调到53.1%,其蛋白表达由86.3%下调到46.6%。结论RNAi在体外明显抑制了肝癌细胞中hTERT基因的表达和瘤细胞增殖。

关键词： RNA干扰肝癌细胞表达的研究体外抑制 hTERT基因酶基因逆转录聚合酶链反应细胞生长抑制率端粒逆转录酶 RNAi 流式细胞分析基因表达变化 mRNA表达细胞增殖 siRNA G0期细胞试验研究肝癌治疗技术检测免疫组化

蛋白酶体抑制剂MG132对姜黄素诱导K562和Raji细胞HDAC1、P300表达的研究

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中华血液学杂志 2005年第12期26卷 751-753页

作者：陈卫华陈燕崔国惠华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所武汉430022

近年来的研究显示泛素-蛋白酶体通路在细胞组蛋白乙酰化、去乙酰化的调控中发挥了重要的作用.有研究报道姜黄素可抑制肿瘤细胞增殖[1],影响细胞周期[2],姜黄素可通过调节组蛋白乙酰化、去乙酰化而发挥其作用[3].我们通过探讨姜黄素和蛋... 详细信息

近年来的研究显示泛素-蛋白酶体通路在细胞组蛋白乙酰化、去乙酰化的调控中发挥了重要的作用.有研究报道姜黄素可抑制肿瘤细胞增殖[1],影响细胞周期[2],姜黄素可通过调节组蛋白乙酰化、去乙酰化而发挥其作用[3].我们通过探讨姜黄素和蛋白酶抑制剂MG132联含姜黄素作用K562细胞、Raji细胞对组蛋白乙酰化酶(HDAC1)、P300蛋白的影响进一步明确了姜黄素发挥作用是否是通过泛素-蛋白酶体通路。

关键词：蛋白酶体抑制剂 Raji细胞 K562细胞 P300 姜黄素 HDAC1 表达的研究泛素-蛋白酶体通路组蛋白乙酰化酶肿瘤细胞增殖

维甲酸诱导大鼠肛门直肠畸形胚胎中RARmRNA表达的研究

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中华小儿外科杂志 2005年第5期26卷 256-259页

作者：郭俊斌张志波王练英高红中国医科大学第二医院小儿外科沈阳110004

目的探讨胚胎发育中维甲酸诱导的RARmRNA表达异常与肛门直肠畸形发生之间的相关性。方法利用全反维甲酸(ATRA)诱导大鼠产生肛门直肠畸形胚胎,用RTPCR法测定妊娠11、12、13、14、15、16d时大鼠胚胎尾侧部分的RARmRNA表达模式并且与对照组... 详细信息

目的探讨胚胎发育中维甲酸诱导的RARmRNA表达异常与肛门直肠畸形发生之间的相关性。方法利用全反维甲酸(ATRA)诱导大鼠产生肛门直肠畸形胚胎,用RTPCR法测定妊娠11、12、13、14、15、16d时大鼠胚胎尾侧部分的RARmRNA表达模式并且与对照组中RARmRNA表达模式进行对比。结果实验组中80%胚胎具有肛门直肠畸形,对照组未见明显畸形。实验组中RARαmRNA表达水平在妊娠11、12、13、15d时低于对照组,表达曲线的高峰出现时间晚于对照组,实验组中RARβmRNA表达水平在妊娠12、14d时低于对照组,而RARγmRNA表达水平在实验组中与对照组中并无明显差异。结论ATRA可诱导胚胎发育过程中RARmRNA异常表达,它可能在妊娠11～13d这一尾侧区域发育最关键时段通过抑制RARα的表达启动并最终导致肛门直肠畸形及其伴发畸形的发生。

关键词：畸形胚胎诱导大鼠表达的研究 mRNA表达肛门直肠畸形 RT-PCR法胚胎发育过程表达模式 RARα 对照组维甲酸诱导全反维甲酸实验组畸形发生表达异常大鼠胚胎出现时间异常表达 ATRA 妊娠相关性水平

激活态雪旺细胞生长相关蛋白43 mRNA表达的研究

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中华骨科杂志 2005年第6期25卷 372-374页

作者：劳杰蒋良福顾玉东复旦大学华山医院上海市手外科研究所复旦大学华山医院手外科上海200040

目的分析激活态雪旺细胞较正常雪旺细胞生长相关蛋白43(growthassociatiopnrotein43,GAP43)的基因表达变化。方法选取10只SD大鼠,将大鼠右上肢正中神经在腋部切断,预变性,1周后取1cm长正中神经采用双酶消化法获取雪旺细胞并进行激活得... 详细信息

目的分析激活态雪旺细胞较正常雪旺细胞生长相关蛋白43(growthassociatiopnrotein43,GAP43)的基因表达变化。方法选取10只SD大鼠,将大鼠右上肢正中神经在腋部切断,预变性,1周后取1cm长正中神经采用双酶消化法获取雪旺细胞并进行激活得到激活态雪旺细胞;取左上肢正常正中神经经双酶消化法获取正常态雪旺细胞作为对照。自雪旺细胞提取mRNA,应用rt-PCR的方法扩增GAP43基因,取PCR产物行1%琼脂糖凝胶电泳,用低浓度的绿色荧光核酸胶染剂染色,测量荧光强度,计算目标基因和内标基因(GAPDH)PCR产物的荧光强度比值,以配对t检验比较实验组和对照组结果。结果激活态雪旺细胞GAP43PCR产物荧光强度比值较正常雪旺细胞明显增高,差异有统计学意义(P=0.003)。表明激活态雪旺细胞较对照组正常雪旺细胞GAP43mRNA表达明显增多。结论激活态雪旺细胞GAP43的基因表达较正常雪旺细胞增强,这可能是其促进神经再生的重要机制。

关键词：激活态雪旺细胞生长相关蛋白表达的研究 PCR产物 protein 琼脂糖凝胶电泳双酶消化法基因表达变化正中神经荧光强度 mRNA表达 P43基因 SD大鼠细胞提取目标基因神经再生对照组右上肢预变性左上肢低浓度实验组

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神经母细胞瘤中酪氨酸激酶受体表达的研究

中华小儿外科杂志 2005年第4期26卷 175-179页

作者：荣道建张锦华李心元李爱敏李旭张继红中国医科大学附属第二医院小儿外科沈阳110004 中国医科大学附属第二医院血液研究室沈阳110004

目的　探讨神经母细胞瘤(NB)中酪氨酸激酶受体(TRKs)的表达及其意义。方法　采用SABC免疫组化技术半定量检测40例NB及其相关肿瘤中TrkA、TrkB及TrkC受体的表达水平。结果　TrkA受体只在肿瘤组织的NB细胞中表达,而该受体的表达水平与NB... 详细信息

目的　探讨神经母细胞瘤(NB)中酪氨酸激酶受体(TRKs)的表达及其意义。方法　采用SABC免疫组化技术半定量检测40例NB及其相关肿瘤中TrkA、TrkB及TrkC受体的表达水平。结果　TrkA受体只在肿瘤组织的NB细胞中表达,而该受体的表达水平与NB肿瘤的较低分期及良好性预后呈现正向性相关(P表达,但该受体的表达水平与NB肿瘤的分期和预后之间则无明显的相关性(P>0.05)。TrkC受体主要在肿瘤组织的NB细胞中表达,而在分化成熟性NB细胞中通常伴有TrkA受体的共同性表达,但该受体的表达水平与NB肿瘤的分期和预后之间亦无明显的相关性(P>0.05)。结论　采用免疫组化技术可以半定量检测酪氨酸激酶受体的表达水平,而这些受体的表达状况对神经母细胞瘤患儿的肿瘤分期和预后评估具有重要的临床意义。

关键词：酪氨酸激酶受体神经母细胞瘤表达的研究免疫组化技术 TrkA受体半定量检测 NB细胞 TrkB受体 TrkC 肿瘤组织相关肿瘤 SABC 梭形细胞临床意义预后评估肿瘤分期表达状况相关性水平其意义表达及共同性成熟性

肾癌相关蛋白G250 mRNA在肾细胞癌中表达的研究

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中华泌尿外科杂志 2005年第7期26卷 440-442页

作者：陈海蛟叶传忠张立王国民张永康复旦大学附属中山医院泌尿外科上海200032

目的探讨肾癌相关蛋白G250mRNA在肾细胞癌(RCC)中的表达及其临床意义。方法采用RTPCR方法检测7例正常肾组织和33例RCC组织中G250mRNA的表达。33例RCC中透明细胞癌28例,非透明细胞癌5例;T18例、T213例、T312例;G111例、G215例、G37例。结... 详细信息

目的探讨肾癌相关蛋白G250mRNA在肾细胞癌(RCC)中的表达及其临床意义。方法采用RTPCR方法检测7例正常肾组织和33例RCC组织中G250mRNA的表达。33例RCC中透明细胞癌28例,非透明细胞癌5例;T18例、T213例、T312例;G111例、G215例、G37例。结果33例RCC组织中G250mRNA表达阳性28例(84.8%),7例正常组织G250表达均为阴性,2组间差异有统计学意义(P表达率高于非透明细胞癌[96.4%(27/28)和20.0%(1/5),P表达量分别为0.32±0.21、0.41±0.16、0.38±0.14,表达量与临床分期无相关性(P>0.05)。G1、G2、G3RCCG250mRNA表达量分别为0.48±0.32、0.23±0.16、0.11±0.11,表达量与病理分级呈负相关(P表达与RCC恶性程度有相关性,有望成为RCC诊断及预后判断的指标。

关键词：癌相关蛋白肾细胞癌表达的研究 mRNA表达量肾透明细胞癌组织 RCC PCR方法临床意义正常组织临床分期病理分级恶性程度预后判断相关性表达及肾组织统计学组间差表达率负相关 T3 G2 G3