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补肾温阳化瘀方对实验性子宫内膜异位症TRPV1及其致敏因子NGF的影响

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中国中西医结合杂志 2015年第6期35卷 717-723页

作者：陈景伟仝瑞晓杨剑李清雪马惠荣杜惠兰河北中医学院中西医结合学院中西医结合生殖疾病协同创新中心石家庄050200 河北省邯郸市中医院妇科河北056000 河北省优抚医院内科石家庄050051 河北省石家庄市第四医院妇科石家庄050011

目的研究补肾温阳化瘀方对实验性子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)简称内异症,瞬时受体电位辣椒素亚型Ⅰ(transientreceptor potential vanilloid receptor 1,TRPV1)及致敏因子神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的影响,以探讨补肾温阳化瘀方治疗EMT疼痛的作用机制。方法将近交系BALB/c雌性小鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、孕三烯酮组,每组15只。观察各组扭体反应,并采用酶联免疫法(ELISA)检测血清NGF的含量,采用免疫组化SP法及Western blot法检测子宫和异位灶NGF、TRPV1蛋白的表达,采用Real-time PCR方法检测子宫和异位灶NGF、TRPV1 mRNA的表达。结果模型组血清NGF含量显著高于假手术组(P补肾温阳化瘀方可通过降低NGF对TRPV1的上调作用从而发挥抑制EMT疼痛的作用。

关键词：子宫内膜异位症神经生长因子瞬时受体电位辣椒素亚型Ⅰ 补肾温阳化瘀方疼痛

补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症模型小鼠BK/BKB1R、PGF2α水平的影响

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中医杂志 2014年第10期55卷 879-884页

作者：陈景伟杜惠兰仝瑞晓高星田茜华马惠荣马雪莲河北医科大学河北中医学院中西医结合生殖疾病协同创新中心

目的探讨补肾温阳化瘀方干预子宫内膜异位症痛经的作用机制。方法将75只BALB/c雌性小鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组与西药组,每组15只。除假手术组外,其余各组小鼠均采用手术移植法复制子宫内膜异位症痛经模... 详细信息

目的探讨补肾温阳化瘀方干预子宫内膜异位症痛经的作用机制。方法将75只BALB/c雌性小鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组与西药组,每组15只。除假手术组外,其余各组小鼠均采用手术移植法复制子宫内膜异位症痛经模型。造模同时中药高、低剂量组分别每日予补肾温阳化瘀方61.67、15.42g/kg和戊酸雌二醇0.5 mg/kg,西药组每周2次予孕三烯酮0.4 mg/kg和戊酸雌二醇0.5mg/kg。于造模12天腹腔注射缩宫素后观察各组小鼠扭体反应,测量异位灶体积,检测小鼠血清血管舒缓激肽(BK)、前列腺素F2α(PGF2α)含量,免疫组化法和western blotting法检测子宫和异位灶缓激肽B1受体(BKB1R)蛋白表达,RT-PCR法检测子宫和异位灶BKB1R mRNA的表达。结果造模第12天,除假手术组外,其余各组小鼠均成功诱发扭体反应并见异位灶。与模型组比较,中药高剂量组、中药低剂量组与西药组扭体潜伏期均明显延长、扭体次数显著减少、异位灶体积减小(P补肾温阳化瘀方能有效防治子宫内膜异位症,其机制可能与降低血清BK及PGF2α含量、抑制BKB1R蛋白及其mRNA的表达有关。

关键词：子宫内膜异位症缓激肽缓激肽B1受体前列腺素F2α 补肾温阳化瘀方

补肾温阳化瘀方调节SIRT1-FoxO1介导的细胞自噬治疗子宫内膜异位症的机制研究

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中华中医药杂志 2024年第5期39卷 2542-2548页

作者：孟鑫付欣平安铭立刘慧敏马艺鸣陈景伟河北中医药大学中西医结合研究所河北省中西医结合肝肾病证研究重点实验室石家庄050200 河北省中西医结合生殖疾病协同创新中心石家庄050200

目的:探讨SIRT1-FoxO1介导的细胞自噬在子宫内膜异位症(EMs)发展中的机制以及补肾温阳化瘀方治疗EMs的疗效与可能的作用机制。方法:将12Z细胞分为CON组、DMSO组(+同体积DMSO)及EX527组(+SIRT1抑制剂),采用划痕实验检测各组细胞的迁移能... 详细信息

目的:探讨SIRT1-FoxO1介导的细胞自噬在子宫内膜异位症(EMs)发展中的机制以及补肾温阳化瘀方治疗EMs的疗效与可能的作用机制。方法:将12Z细胞分为CON组、DMSO组(+同体积DMSO)及EX527组(+SIRT1抑制剂),采用划痕实验检测各组细胞的迁移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,采用免疫荧光及Western Blot分别检测SIRT1、FoxO1及自噬相关因子蛋白定位及含量表达。将100只大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组、中药+EX527组及EX527组。EMs造模成功后,中药组及中药+EX527组给予补肾温阳化瘀方灌胃,假手术组、模型组及EX527组同体积纯净水灌胃;中药+EX527组、EX527组给予腹腔注射EX527溶剂,其余各组给予腹腔注射同体积0.9%氯化钠溶液,连续3周。免疫组化与Western Blot分别检测SIRT1、FoxO1及自噬相关因子蛋白定位及含量表达。结果:细胞实验中,与CON组或DMSO组比较,EX527组的迁移能力和侵袭能力明显增强,SIRT1水平显著下降(P补肾温阳化瘀方可能通过上调SIRT1,抑制FoxO1介导的自噬,从而起到治疗EMs的作用。

关键词：子宫内膜异位症补肾温阳化瘀方 SIRT1-FoxO1 细胞自噬

补肾温阳化瘀方对肾阳虚血瘀型子宫内膜异位症FoxO1介导的细胞自噬水平的影响

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中国实验动物学报 2021年第4期29卷 417-427页

作者：孟鑫李颖张宇曹璨白羽陈景伟河北中医学院中西医结合学院中西医结合研究所河北省中西医结合肝肾病证研究重点实验室石家庄050200

目的本研究旨在观察补肾温阳化瘀方对大鼠肾阳虚血瘀型子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)模型的治疗作用,并以FoxO1介导的细胞自噬为切入点阐明其治疗EMs的可能作用机制。方法选择SPF级雌性SD大鼠100只,8-10周龄,随机分为假手术组、模... 详细信息

目的本研究旨在观察补肾温阳化瘀方对大鼠肾阳虚血瘀型子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)模型的治疗作用,并以FoxO1介导的细胞自噬为切入点阐明其治疗EMs的可能作用机制。方法选择SPF级雌性SD大鼠100只,8-10周龄,随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组和西药组,每组20只。采用自体移植法结合冰浴复制肾阳虚血瘀型EMs大鼠模型。造模成功后,中药高剂量组和中药低剂量组给予补肾温阳化瘀方颗粒水溶剂灌胃,西药组给予孕三烯酮悬浮液灌胃,假手术组和模型组给予同体积纯净水灌胃,各组连续灌胃3周。给药结束后采用机械性电子测痛仪测定机械痛阈值,计算脏器指数;HE染色观察在位内膜及异位灶的病理形态学改变;免疫组化检测在位内膜及异位灶组织FoxO1、NF-κB、Beclin-1、LC3的蛋白定位表达;RT-PCR检测在位内膜及异位灶FoxO1、NF-κB、Beclin-1、LC3-I及LC3-II mRNA的表达水平;Western Blot测定在位内膜及异位病灶FoxO1、NF-κB、Beclin-1、LC3-I及LC3-II蛋白的表达水平。结果与假手术组相比,模型组FoxO1、NF-κB、Beclin-1、LC3-I及LC3-II蛋白表达及mRNA水平显著升高,差异具有统计学意义(P补肾温阳化瘀方具有改善EMs的作用,这种作用可能与降低FoxO1、NF-κB的表达从而抑制细胞自噬水平有关。

关键词：子宫内膜异位症补肾温阳化瘀方 FoxO1 细胞自噬

补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症模型痛经的影响

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中药药理与临床 2013年第5期29卷 113-116页

作者：陈景伟仝瑞晓李清雪田茜华杜惠兰河北医科大学中西医结合学院石家庄050091 石家庄市第四医院石家庄050011

目的:探讨补肾温阳化瘀方对小鼠子宫内膜异位症痛经模型的作用及对血清E2、PGF2α的影响。方法:实验分为假手术组、模型组、补肾温阳化瘀方61.67g/kg组、补肾温阳化瘀方15.42g/kg组、孕三烯酮组,观察各组扭体反应、异位灶体积,并采用放... 详细信息

目的:探讨补肾温阳化瘀方对小鼠子宫内膜异位症痛经模型的作用及对血清E2、PGF2α的影响。方法:实验分为假手术组、模型组、补肾温阳化瘀方61.67g/kg组、补肾温阳化瘀方15.42g/kg组、孕三烯酮组,观察各组扭体反应、异位灶体积,并采用放射免疫法及ELISA法检测各组血清E2、PGF2α的水平。结果:与模型组相比,补肾温阳化瘀方61.67g/kg组、补肾温阳化瘀方15.42g/kg组、孕三烯酮组扭体次数明显减少,扭体潜伏期明显延长,异位灶体积明显示减小;与假手术组相比,模型组血清中E2、PGF2α含量显著升高,与模型组相比,补肾温阳化瘀方61.67g/kg组、补肾温阳化瘀方15.42g/kg组、孕三烯酮组血清E2水平显著下降,PGF2α水平亦显著下降。本实验补肾温阳化瘀方剂量范围15.42g/kg^61.67g/kg,随着剂量增加,药物效果未见增加,因此15.42g/kg为最佳有效剂量。结论:补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症痛经模型诱发的扭体反应有抑制作用,并且能够降低子宫内膜异位症痛经模型血清E2、PGF2α的含量,推测补肾温阳化瘀方可能通过对E2、PGF2α的影响,缓解内异症痛经的发生,对内异症痛经有一定的保护作用。

关键词：补肾温阳化瘀方子宫内膜异位症痛经雌二醇前列腺素F2α

补肾温阳化瘀方加减联合达菲林治疗子宫腺肌病的临床研究

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补肾温阳化瘀方加减联合达菲林治疗子宫腺肌病的临床研究

作者：郑丽转河北中医学院

学位级别：硕士

目的:观察补肾温阳化瘀方加减联合达菲林治疗子宫腺肌病的临床疗效,并对其有效性及安全性进行评价,充分发挥中西医结合治疗的优势,为本病提供更多的治疗思路。方法:选择2018年6月至2019年11月就诊于河北省中医院妇科门诊的60例符合纳入... 详细信息

目的:观察补肾温阳化瘀方加减联合达菲林治疗子宫腺肌病的临床疗效,并对其有效性及安全性进行评价,充分发挥中西医结合治疗的优势,为本病提供更多的治疗思路。方法:选择2018年6月至2019年11月就诊于河北省中医院妇科门诊的60例符合纳入标准的子宫腺肌病患者。用随机分组的方式,随机分为两组,每组各30例。治疗组予补肾温阳化瘀方加减口服联合达菲林肌注,对照组予达菲林肌注。分别于治疗前和治疗12周后进行盆腔疼痛VAS评分、中医证候积分、焦虑自评量表积分、血清CA-125、子宫体积、盆腔疼痛疗效、中医证候疗效及不良反应发生率进行评价。采用SPSS21.0统计软件将所有数据进行统计分析。结果:1.两组年龄比较:在年龄上两组的差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。2.两组病程比较:在病程上两组的差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。3.盆腔疼痛VAS评分:两组治疗前差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性;两组组内治疗前后对比,差异均有统计学意义(P0.05),具有可比性;两组组内治疗前后对比,差异均有统计学意义(P0.05),具有可比性;两组组内治疗前后对比,差异均有统计学意义(P0.05),具有可比性;两组组内治疗前后对比,差异均有统计学意义(P0.05),具有可比性;两组组内治疗前后对比,差异均有统计学意义(P补肾温阳化瘀方加减联合达菲林治疗子宫腺肌病的临床疗效,可得出以下结论:1.本病的主要病机为肾虚血瘀,治疗以补肾温阳化瘀为大法;2.补肾温阳化瘀方加减联合达菲林可缓解患者慢性盆腔痛症状、改善中医证候、降低血清CA125水平、缩小子宫体积;3.补肾温阳化瘀方加减联合达菲林可改善患者焦虑状态;4.补肾温阳化瘀方加减联合达菲林能有效改善患者的慢性盆腔痛和中医证候;5.补肾温阳化瘀方加减能减少达菲林的不良反应发生。

关键词：补肾温阳化瘀方达菲林肾虚血瘀子宫腺肌病临床研究

补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症大鼠PKC信号通路的影响

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河北中医药学报 2023年第6期38卷 7-10,15页

作者：张英美罗琳牛若冰胡书婵朱晗孙莹贺明河北中医药大学中西医结合学院/河北省中西医结合肝肾病证研究重点实验室石家庄050200 河北省中西医结合生殖疾病协同创新中心石家庄050091

目的:研究补肾温阳化瘀方治疗子宫内膜异位症(EMs)的作用,探讨其调控蛋白激酶C(PKC)信号通路的机制。方法:将50只SPF级8~10周龄雌性SD大鼠随机分为5组,分别为假手术组、模型组、中药低剂量组、中药高剂量组和西药组,每组10只。采用自体... 详细信息

目的:研究补肾温阳化瘀方治疗子宫内膜异位症(EMs)的作用,探讨其调控蛋白激酶C(PKC)信号通路的机制。方法:将50只SPF级8~10周龄雌性SD大鼠随机分为5组,分别为假手术组、模型组、中药低剂量组、中药高剂量组和西药组,每组10只。采用自体移植法复制EMs大鼠模型,造模成功后分别给予补肾温阳化瘀方低、高剂量及孕三烯酮灌胃,假手术和模型组灌胃蒸馏水,连续21 d。HE染色观察在位内膜及异位灶的病理形态改变;Western blot测定在位内膜及异位灶磷酸化蛋白激酶C的α亚型(p-PKCα)、蛋白激酶C的α亚型(PKCα)蛋白的表达水平。结果:模型组在位内膜和异位灶p-PKCα蛋白水平升高;给予补肾温阳化瘀方治疗后,p-PKCα的蛋白表达水平降低(P补肾温阳化瘀方通过抑制PKC信号通路来治疗EMs。

关键词：补肾温阳化瘀方子宫内膜异位症痛经癥瘕不孕 p-PKCα PKCα 信号通路

补肾温阳化瘀方联合地诺孕素治疗肾虚血瘀型子宫腺肌病的临床研究

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河北中医药学报 2023年第2期38卷 26-29页

作者：杨娜李博毕晓涛边文会河北中医学院研究生学院石家庄050091 河北中医学院第一附属医院石家庄050011

目的:探究补肾温阳化瘀方联合地诺孕素(DNG)治疗肾虚血瘀型子宫腺肌病(AM)的临床疗效。方法:将80例肾虚血瘀型AM患者随机分为对照组和治疗组各40例。对照组给予地诺孕素口服,治疗组在对照组基础上加用补肾温阳化瘀方,疗程均为3个周期。... 详细信息

目的:探究补肾温阳化瘀方联合地诺孕素(DNG)治疗肾虚血瘀型子宫腺肌病(AM)的临床疗效。方法:将80例肾虚血瘀型AM患者随机分为对照组和治疗组各40例。对照组给予地诺孕素口服,治疗组在对照组基础上加用补肾温阳化瘀方,疗程均为3个周期。比较2组患者治疗后的痛经疼痛视觉模拟评分表(VAS)评分、中医证候评分、血红蛋白水平、子宫体积、CA125水平及证候疗效。结果:治疗后治疗组证候疗效的总有效率高于对照组(P补肾温阳化瘀方联合DNG治疗肾虚血瘀型AM有较好的临床疗效,可改善患者痛经程度、中医证候,月经量减少,改善贫血状态,缩小子宫体积及降低CA125水平。

关键词：补肾温阳化瘀方子宫腺肌病痛经癥瘕月经过多地诺孕素肾虚血瘀

PGP9.5、NGF在实验性小鼠子宫内膜异位症的表达及补肾温阳化瘀方对其影响

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PGP9.5、NGF在实验性小鼠子宫内膜异位症的表达及补肾温阳化瘀方...

作者：仝瑞晓河北医科大学

学位级别：硕士

目的：子宫内膜异位症(Endometriosis，EMs)，简称内异症，是妇科常见病和多发病。临床多以痛经、不孕、盆腔痛为主症。内异症疼痛严重影响患者的生活质量。已知前列腺素与妇科疼痛的关系密切，近年的研究发现内异症疼痛的发生与神经纤... 详细信息

目的：子宫内膜异位症(Endometriosis，EMs)，简称内异症，是妇科常见病和多发病。临床多以痛经、不孕、盆腔痛为主症。内异症疼痛严重影响患者的生活质量。已知前列腺素与妇科疼痛的关系密切，近年的研究发现内异症疼痛的发生与神经纤维增生密切相关。本研究通过实验动物模型分析神经标记物蛋白基因产物PGP9.5(Protein gene Product9.5,PGP9.5)、神经生长因子NGF(never growth factor,NGF)、前列腺素E2(ProstaglandinE2，PGE2)在内异症子宫内膜组织中的表达，以探讨内异症疼痛发生的部分机制;并对实验性小鼠采用补肾温阳化瘀方进行治疗，探讨补肾温阳化瘀法治疗内异症疼痛的作用机制。方法：选用健康清洁级6～8周龄近交系BALB/c小鼠80只，体重20±2g，术前两天以补佳乐0.5mg/kg灌胃，使手术时小鼠处于统一动情期(阴道涂片为大量无核角化细胞)。随机取65只小鼠参考王艳萍方法复制内异症模型，另外15只作为假手术组。将成功复制的内异症模型的小鼠60只，随机分为4组:模型组;补肾温阳化瘀方高剂量组(61.67g/kg，相当于临床用量20倍)，简称（“高剂量组”）;中药低剂量组(15.42g/kg，相当于临床用量5倍)，简称（“低剂量组”）;孕三烯酮组(0.42mg/kg，相当于临床用量10倍)。假手术组正常清洁饲养。术后1～12天采用补佳乐(0.5mg/kg)联合缩宫素(2U/只)建立痛经模型，同时给药。给药方案如下：假手术组给予纯净水灌胃1ml/100g，每日2次;模型组：上午纯净水灌胃1ml/100g，下午灌胃补佳乐;高剂量组：上午灌胃6.17g/ml浓缩液，下午灌胃补佳乐;低剂量组：上午灌胃1.54g/ml浓缩液，下午灌胃补佳乐;孕三烯酮组：每周2次上午灌胃孕三烯酮混悬液，其余时间上午给予纯净水灌胃，每天下午灌胃补佳乐;第12天末次给补佳乐后1小时，腹腔注射缩宫素2U/只(0.2ml)，诱发扭体反应，假手术组腹腔注射生理盐水0.2ml/只。扭体观察半小时，结束后断头处死，无菌操作剖腹取出异位内膜组织、在位子宫内膜组织，假手术组取子宫内膜组织，部分组织用4%多聚甲醛固定用于免疫组织化学染色，部分组织立即置于液氮中后转入-80℃冰箱用于Western-blotting及Real time PCR检测，部分组织匀浆取上清液用于酶联免疫法检测。结果:1扭体反应除假手术组外，各组均发生扭体反应，扭体发生率100%。高剂量组、低剂量组、孕三烯酮组扭体潜伏期明显延长，与模型组相比，差异有统计学意义(均为P0.05)。2PGP9.5表达2.1免疫组化法检测PGP9.5蛋白表达异位内膜表达：PGP9.5蛋白阳性主要表达于异位内膜间质细胞的胞浆中。模型组PGP9.5蛋白表达高于各治疗组（均P0.05）。在位子宫内膜：PGP9.5蛋白阳性主要表达于在位内膜腺体细胞的胞浆中。模型组PGP9.5蛋白表达高于假手术组（P0.05）。2.2Western-blotting检测PGP9.5蛋白表达异位内膜表达：模型组PGP9.5蛋白表达高于各治疗组（均P0.05）。在位子宫内膜：模型组PGP9.5蛋白表达高于假手术组（P0.05）。2.3Real time PCR检测PGP9.5mRNA的表达异位内膜表达：模型组PGP9.5mRNA的表达高于各治疗组（均P0.05）;高剂量组低于低剂量组（P0.05);高剂量组低于低剂量组(P<0.01)。3NGF

关键词：子宫内膜异位症疼痛神经生长因子(NGF) 蛋白基因产物9.5(PGP9.5) 前列腺素E2(PGE2) 补肾温阳化瘀方中药