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补肾活血化痰开窍方对耳鸣大鼠耳蜗螺旋神经节神经元5-HT1B、2C受体表达的影响

听力学及言语疾病杂志 2018年第4期26卷 414-418页

作者：孙勤国罗蒙江波郭乃燕张贤梅徐鸿婕牟艳杰吕琨杨倩武汉大学附属同仁医院(武汉市第三医院)中医科武汉430060 湖北中医药大学

目的探讨补肾活血化痰开窍方对耳鸣大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neurons,SGN)中5羟色胺(serotonin,5-HT)1B、2C受体的表达及意义。方法 60只健康SPF级雄性大鼠随机分为正常组10只(生理盐水组),耳鸣模型组50只(采用水杨酸... 详细信息

目的探讨补肾活血化痰开窍方对耳鸣大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neurons,SGN)中5羟色胺(serotonin,5-HT)1B、2C受体的表达及意义。方法 60只健康SPF级雄性大鼠随机分为正常组10只(生理盐水组),耳鸣模型组50只(采用水杨酸钠腹腔注射联合"饮水抑制"大鼠行为学实验方法建立大鼠耳鸣模型),耳鸣模型组造模成功后再分为水杨酸钠组10只、中药组30只(补肾活血化痰开窍方低、中、高剂量组各10只)、西药组(卡马西平组)10只,除水杨酸钠组给予生理盐水灌胃外,各组给予相应药物干预8周,造模成功后运用免疫组化法检测各组耳蜗SGN中5-HT1B、2C受体的表达。结果耳鸣造模成功并给予相应药物干预8周后,各组大鼠耳蜗SGN中均有5-HT1B、2C受体的表达,与生理盐水组相比,水杨酸钠组中5-HT1B表达减少,5-HT2C表达明显增多;与水杨酸钠组相比,中药各剂量组耳蜗SGN中5-HT1B表达增多,2C表达均明显降低。结论耳鸣大鼠耳蜗SGN中的5-HT1B受体表达减少、5-HT2C表达增加,应用补肾活血化痰开窍方后5-HT1B表达增多而5H2C表达降低,产生了拮抗作用,该方可能应用于耳鸣的治疗。

关键词：补肾活血化痰开窍方耳蜗螺旋神经节神经元 5羟色胺1B、2C受体耳鸣

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补肾活血化痰开窍方对大鼠耳鸣模型作用机制的实验研究

补肾活血化痰开窍方对大鼠耳鸣模型作用机制的实验研究

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作者：罗蒙湖北中医药大学

学位级别：硕士

研究目的:观察补肾活血化痰开窍方对耳鸣大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(Spiral Ganglion Neurons,SGN)中5羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)1B、2C受体的表达及意义,分析耳鸣大鼠血清中钙(Ca)、磷(P)、铁(Fe)、皮质醇(Cortisol)、多巴胺(Dopamine)、环磷酸腺苷(cAMP),环磷酸鸟苷(cGMP),cAMP/cGMP比值的变化,探讨补肾活血化痰开窍方改善耳鸣大鼠的症状及抗耳鸣的效果和作用机制。研究方法:选用SPF级SD雄性大鼠60只,体重250(±50)g,采用水杨酸钠腹腔注射大鼠联合“饮水抑制”大鼠行为学实验建立大鼠耳鸣模型,大鼠随机分为正常组10只(生理盐水组),模型组50只(水杨酸钠组),模型组造模成功后再分为中药组(补肾活血化痰开窍方低、中、高剂量组)各10只,西药组(卡马西平(5H-二苯并[b,f]氮杂卓-5-甲酰胺)组)10只,中药低、中、高剂量组大鼠给予补肾活血化痰开窍方(剂量分别5.5,11,22 g·kg·d)灌胃,西药组大鼠给予卡马西平(剂量为5mg·kg·d)灌胃,模型组和正常组大鼠给予2mL生理盐水灌胃,每天1次,治疗连续8周。采用免疫组化法检测耳蜗SGN中5-HT1B、2C在耳鸣大鼠的表达情况,取外周血,其中钙、磷、铁用全自动生化仪测量,血浆皮质醇、多巴胺、cAMP、cGMP用酶联免疫法(Elisa Kit)测定,分析补肾活血化痰开窍方对耳鸣大鼠血清中钙(Ca)、磷(P)、铁(Fe)、皮质醇(Cortisol)、多巴胺(Dopamine)、环磷酸腺苷(cAMP),环磷酸鸟苷(cGMP),cAMP/cGMP比值的变化。研究结果:(1)一般情况:给予相应药物干预8周后,中药组尤其是中药高剂量组大鼠体重较模型组明显增加,摄食增多,毛发光亮,活动灵敏,模型组体重明显减轻,精神萎靡,日常活动减少,毛发较为暗淡,摄食、饮水均较中药组减少。(2)“饮水抑制”实验中,与正常组相比,模型组平均噪声反射消退期明显减少,造模成功,其中10只为对照组,44只造模成功,成功率为88%。(3)耳鸣造模成功给予相应药物干预8周后,大鼠耳蜗SGN中有5-HT1B、2C的表达,与正常组相比,模型组中5-HT1B减少,2C明显增多。与模型组相比,西药组、中药各剂量组耳蜗SGN中5-HT1B表达增多,2C均明显降低。(4)耳鸣造模成功给予相应药物干预8周后,与正常组相比,模型组中血清钙、铁含量下降,磷含量增高。血浆皮质醇、多巴胺含量下降,cAMP含量降低,cGMP含量增加,cAMP/cGMP比值降低(均P补肾活血化痰开窍方可有效缓解大鼠耳鸣,其机制可能与增加耳鸣大鼠耳蜗SGN中5-HT1B受体含量,降低5-HT2C受体含量有关;同时补肾活血化痰开窍方提高了耳鸣大鼠血清中钙、铁,血浆皮质醇、多巴胺及cAMP含量、cAMP/cGMP比值,降低了血清磷及cGMP含量,可能是改善耳鸣的血液学相关证据。

关键词：补肾活血化痰开窍方水杨酸钠耳鸣模型耳蜗螺旋神经节神经元 5-HT1B、2C 血液学

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补肾活血化痰开窍方对耳鸣大鼠耳蜗螺旋神经节神经元NMDA受体亚型表达的影响

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广州中医药大学学报 2018年第1期35卷 129-134页

作者：孙勤国罗蒙江波张贤梅徐鸿婕牟艳杰吕琨杨倩武汉大学附属同仁医院/武汉市第三医院湖北武汉430060 湖北中医药大学湖北武汉430060

【目的】观察补肾活血化痰开窍方对耳鸣大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(SGN)中N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚型1、2A、2B(NR1、NR2A、NR2B)表达的影响,并探讨其作用机制,以期为临床应用补肾活血化痰开窍方治疗耳鸣提供实验依据。【方法】将6... 详细信息

【目的】观察补肾活血化痰开窍方对耳鸣大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(SGN)中N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚型1、2A、2B(NR1、NR2A、NR2B)表达的影响,并探讨其作用机制,以期为临床应用补肾活血化痰开窍方治疗耳鸣提供实验依据。【方法】将60只大鼠随机分为正常组,模型组,中药低、中、高剂量组,西药组6组,每组10只。采用大鼠腹腔注射水杨酸钠联合"饮水抑制"法建立大鼠耳鸣模型。造模成功后,中药低、中、高剂量组给予补肾活血化痰开窍方(剂量分别为5.5、11、22 g·kg-1·d-1)灌胃,西药组给予卡马西平(剂量为5 mg·kg-1·d-1)灌胃,模型组和正常组给予2 m L生理盐水灌胃,每天1次,连续治疗8周。采用免疫印迹法和实时定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测其耳蜗SGN中NR1、NR2A、NR2B在耳鸣大鼠的表达情况。【结果】与正常组比较,模型组NR1、NR2A、NR2B在模型组中表达升高,差异具有统计学意义(均P补肾活血化痰开窍方可有效缓解大鼠耳鸣,其机制可能与降低耳鸣大鼠耳蜗SGN中增高的NMDA受体亚型NR1、NR2A、NR2B表达有关。

关键词：补肾活血化痰开窍方耳蜗螺旋神经节神经元 NMDA NR1 NR2A NR2B 耳鸣疾病模型动物大鼠

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补肾活血化痰开窍方对耳鸣模型大鼠血液肾虚相关指标的影响

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广州中医药大学学报 2018年第5期35卷 866-870页

作者：江波吕琨罗蒙孙勤国武汉大学附属同仁医院/武汉市第三医院湖北武汉430060

【目的】探讨补肾活血化痰开窍方对耳鸣模型大鼠肾虚相关指标的影响。【方法】将60只大鼠随机分为正常组,模型组,中药低、中、高剂量组,西药组,每组10只。除正常组外,其余组别大鼠采用水杨酸钠腹腔注射联合"饮水抑制"大鼠行为学实验复... 详细信息

【目的】探讨补肾活血化痰开窍方对耳鸣模型大鼠肾虚相关指标的影响。【方法】将60只大鼠随机分为正常组,模型组,中药低、中、高剂量组,西药组,每组10只。除正常组外,其余组别大鼠采用水杨酸钠腹腔注射联合"饮水抑制"大鼠行为学实验复制耳鸣模型。造模成功后,正常组、模型组大鼠给予2 m L生理盐水灌胃;中药低、中、高剂量组给予补肾活血化痰开窍方(剂量分别为5.5、11、22 g·kg^(-1)·d·^(-1))灌胃;西药组大鼠给予卡马西平(剂量为5 mg·kg^(-1)·d·^(-1))灌胃。每天1次,持续给药8周。采用全自动生化仪测量大鼠血清钙、磷、铁,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血浆多巴胺、皮质醇、环磷酸腺苷(c AMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)。【结果】造模成功率为88%。与正常组比较,模型组大鼠血液中钙、铁、皮质醇、多巴胺、cAMP含量,cAMP/cGMP比值下降,磷、cGMP含量增加(均P补肾活血化痰开窍方可改善耳鸣大鼠肾虚相关指标。

关键词：补肾活血化痰开窍方耳鸣肾虚微量元素皮质醇多巴胺环磷酸腺苷环磷酸鸟苷疾病模型,动物大鼠

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