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食管癌患者外周血补体抑制水平的检测

肿瘤防治研究 1998年第6期25卷 438-440页

作者：梁峰刘慧荣魏书庆乔常欣山西太钢职工总医院太原030003 山西医科大学太原030003

采用一种灵敏的补体溶血抑制实验，测定了51例食管病变及37例健康人血清中的补体抑制水平。结果显示，正常对照组与食管良性病变组之间，血清补体抑制水平差异不显著；食管癌组的补体抑制水平明显高于健康人及食管良性病变组；同正常组... 详细信息

采用一种灵敏的补体溶血抑制实验，测定了51例食管病变及37例健康人血清中的补体抑制水平。结果显示，正常对照组与食管良性病变组之间，血清补体抑制水平差异不显著；食管癌组的补体抑制水平明显高于健康人及食管良性病变组；同正常组比较，不同病期食管癌患者血清补体抑制率均明显升高。因此认为，血清中补体抑制水平的升高，有可能是肿瘤病人产生免疫抑制的原因之一。

关键词：补体抑制肿瘤免疫食管肿瘤

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补体抑制抗体与HIVgp41结合

湖北民族学院学报（医学版） 1994年第2期11卷 95-96页

作者： HidvqiT 叶本善

激活补体经典途径是HIV包膜跨膜蛋白gp41的固有特性。作者证实,gp41置于正常血清中孵育后,其结合特异性抗体的能力显著下降。为研究其机制,将重组gp41(rgp41)预先吸附在固相系统中,发现补体能抑制抗原抗体的相互作用。固相rgp41、补体... 详细信息

激活补体经典途径是HIV包膜跨膜蛋白gp41的固有特性。作者证实,gp41置于正常血清中孵育后,其结合特异性抗体的能力显著下降。为研究其机制,将重组gp41(rgp41)预先吸附在固相系统中,发现补体能抑制抗原抗体的相互作用。固相rgp41、补体、抗体三者相互作用导致补体蛋白的增加及结合抗体的减少。这一发现说明,结合于gp41免疫显性表位的抗体与补体竞争gp41表面的同一位点。

关键词： HIVgp41 补体抑制多克隆抗体抑制作用免疫显性表位激活补体经典途径固有特性特异性抗体 ELISA反应

人精浆的补体抑制活性与抗精子免疫不育的关系

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中国计划生育学杂志 1998年第6期6卷 258-260页

作者：刘慧荣邵谭梁峰郑振群乔常欣山西医科大学生殖免疫研究室太原030001 山西省太钢职工总医院

用免疫溶血试验测定178例正常精浆及104例抗精子抗体阳性精浆的补体抑制水平,结果发现所有标本都具有补体抑制活性。抗精子抗体阳性不育组和流产组精浆对补体的抑制作用明显低于正常对照组和抗精子抗体阳性生育组(P<0.01)。提示,精浆补... 详细信息

用免疫溶血试验测定178例正常精浆及104例抗精子抗体阳性精浆的补体抑制水平,结果发现所有标本都具有补体抑制活性。抗精子抗体阳性不育组和流产组精浆对补体的抑制作用明显低于正常对照组和抗精子抗体阳性生育组(P补体抑制活性的降低可能是免疫不育症及自然流产的相关因素之一。

关键词：精浆补体抑制抗精子抗体不育症

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抑制补体对内毒素致急性肺损伤的保护作用

重庆医学 2010年第16期39卷 2095-2097,I0001页

作者：李敏张程张湘燕贵州省人民医院呼吸内科

目的探讨抑制补体对内毒素致急性肺损伤的保护作用。方法采用眼镜蛇毒因子（CVF）去除补体。以脂多糖（LPS）造成大鼠急性肺损伤。将40只健康雄性SD大鼠随机分为LPS损伤组、3个不同时间CVF组和生理盐水对照组。通过大鼠尾静脉注射5mg/kg... 详细信息

目的探讨抑制补体对内毒素致急性肺损伤的保护作用。方法采用眼镜蛇毒因子（CVF）去除补体。以脂多糖（LPS）造成大鼠急性肺损伤。将40只健康雄性SD大鼠随机分为LPS损伤组、3个不同时间CVF组和生理盐水对照组。通过大鼠尾静脉注射5mg/kgLPS,造成急性肺损伤模型。CVF组于注射LPS前24h,通过尾静脉注射50u/kgCVF去除补体。在给予LPS后分别于0.5、2、4h采集标本。分别测定各组血清补体活性和蛋白含量、肺泡灌洗液（BALF）中蛋白、TNF-α、IL-8、ICAM-1含量及多形核白细胞（PMN）比、计算肺通透指数（LPI）、测定肺湿/干质量比、检查肺组织病理学变化情况等。结果 LPS组肺间质水肿、出血,大量炎性细胞浸润,而CVF组肺组织损伤明显轻于LPS组;CVF组肺湿/干质量比、LPI、PMN比均明显低于LPS组（P〈0.05）,与对照组比较差异无统计学意义。而CVF各组BALF中TNF-α、IL-8、ICAM-1浓度均低于LPS组,但差异无统计学意义。结论补体在内毒素致急性肺损伤早期具有重要作用,抑制补体可以有效减轻肺组织损伤,减少肺组织液渗出和中性粒细胞聚集。

关键词：急性肺损伤补体脂多糖补体抑制眼镜蛇毒因子

两种抗补体蛋白对脂多糖致急性肺损伤的保护作用比较研究

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中国药理学通报 2012年第4期28卷 521-526页

作者：李敏沈良贤张湘燕孙黔云贵州省人民医院呼吸疾病研究所贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550002

目的通过比较两种不同的补体干预方式对脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用,进一步认识补体在LPS致ALI中的作用,并探讨补体不同成分在ALI中的作用。方法造模前将抗补体蛋白眼镜蛇毒因子(CVF)和Atrase A分别给予对应组别的大鼠... 详细信息

目的通过比较两种不同的补体干预方式对脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用,进一步认识补体在LPS致ALI中的作用,并探讨补体不同成分在ALI中的作用。方法造模前将抗补体蛋白眼镜蛇毒因子(CVF)和Atrase A分别给予对应组别的大鼠,抑制补体。通过大鼠尾静脉注射LPS(5 ***-1),造成ALI模型。在给予LPS后1、6、12 h采集标本,分别测定血清补体溶血活性、肺含水量、肺组织匀浆髓过氧化物酶(MPO)活性,取支气管肺泡灌洗液(BALF)测定细胞数、蛋白含量以及TNF-α和P-selectin的含量,取肺组织行病理切片检查。通过对实验结果的分析比较,评价两种抗补体蛋白对LPS致大鼠ALI的保护作用。结果在LPS致ALI的早期伴随有明显的血清补体活性下降。模型组的血清补体活性在给予LPS后的1 h内下降了47%。采用Atrase A抑制了50%补体活性的实验组其MPO、TNF-α、P-selectin水平未上调。完全去除补体活性的CVF组其MPO活力在1 h时与正常对照组相当,在6、12 h时则上升至与模型组相当,而TNF-α和P-selectin水平则介于模型组和正常组之间。病理切片检查表明两种抗补体蛋白均能有效减轻肺组织病理损伤,其中Atrase A明显优于CVF。结论补体明确参与了LPS致ALI的病理过程。采用抗补体干预能减轻ALI炎症和相关病理损伤,但两种抗补体蛋白的保护作用有明显区别。采用CVF完全去除补体C3、C5-C9仅在ALI早期有明显的保护作用,而仅部分抑制了补体活性的Atrase A则明显优于CVF,提示Atrase A作用的补体成分可能在ALI中具有重要作用。

关键词：急性肺损伤脂多糖补体补体抑制炎症眼镜蛇毒因子抗补体蛋白

重组跨膜型人CD55分子在小鼠NIH3 T3细胞上的表达及其补体溶破保护功能的研究

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中国免疫学杂志 2002年第12期18卷 820-823页

作者：姜曼杜瑞琴黎万玲白云第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的 :在小鼠NIH3T3细胞转染表达人天然GPI锚固型CD5 5和重组跨膜型CD5 5 TM分子 ,观察比较它们对人补体溶破异源细胞的抑制功能。方法 :将带有CD5 5cDNA、CD5 5 TMcDNA的重组逆病毒表达质粒CD5 5 pLXSN、CD5 5TM pLXSN经脂质体法转... 详细信息

目的 :在小鼠NIH3T3细胞转染表达人天然GPI锚固型CD5 5和重组跨膜型CD5 5 TM分子 ,观察比较它们对人补体溶破异源细胞的抑制功能。方法 :将带有CD5 5cDNA、CD5 5 TMcDNA的重组逆病毒表达质粒CD5 5 pLXSN、CD5 5TM pLXSN经脂质体法转染PA317细胞 ,用病毒上清感染小鼠成纤维母细胞NIH3T3。经G418加压筛选 ,利用FACS检测获得表达CD5 5和CD5 5 TM分子的阳性细胞克隆 ,通过MTT比色法比较两种分子对人血清补体溶破细胞的抑制功能有无差别。结果 :细胞转染筛选获得多个表达跨膜型人CD5 5分子的NIH3T3细胞克隆 ,补体杀伤试验证实其具有抑制人补体溶破的功能 ,且两种分子的补体抑制功能无明显差异。结论 :成功地建立了稳定表达天然CD5 5、跨膜型CD5 5分子的小鼠NIH3T3细胞 ,证实其表达的GPI型CD5 5分子和CD5 5TM分子均具有抑制人补体溶破细胞的功能 ,为进一步探讨应用跨膜型的CD5 5分子对PNH进行基因治疗奠定了基础。

关键词： GPI锚型CD55 跨膜型CD55 基因转染 NIH3T3细胞补体抑制

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C1q结合线性十二肽的改建及其活性鉴定

免疫学杂志 2006年第3期22卷 334-336,340页

作者：胡静谭艳陈政良南方医科大学免疫学教研室广州510515

目的改建以C1q为钓饵蛋白筛选随机肽库所获线性十二肽HWDPFSLSAYFP(a肽)以增强其生物学活性。方法在a肽序列两端加上噬菌体展示短肽上的支架氨基酸残基,得到线性肽GGG HWDPFSLSAYFP SHS(a1肽);在a1肽内部构建环化结构,得到环肽GGGC HWDP... 详细信息

目的改建以C1q为钓饵蛋白筛选随机肽库所获线性十二肽HWDPFSLSAYFP(a肽)以增强其生物学活性。方法在a肽序列两端加上噬菌体展示短肽上的支架氨基酸残基,得到线性肽GGG HWDPFSLSAYFP SHS(a1肽);在a1肽内部构建环化结构,得到环肽GGGC HWDPFSLSAYFP CSHS(a2肽);采用U937细胞配体结合抑制试验、多聚IgG(AIgG)竞争抑制试验和CH50抑制试验鉴定其生物学活性。结果a1肽较a肽抑制活性明显提高,对C1q介导的溶血以及C1q与U937细胞表面受体、AIgG的结合均有抑制作用,而a2肽的活性不明显,对C1q的结合活性和溶血活性无影响。结论获得一个更具稳定结构和生物学活性的C1q结合短肽,它能更有效地抑制C1q与免疫复合物结合,从而阻断补体经典途径的激活。

关键词： C1q结合肽改建肽补体抑制

金黄色葡萄球菌Efb蛋白的表达、纯化及功能抗体的制备

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军事医学科学院院刊 2009年第6期33卷 531-534页

作者：张鑫高亚萍董洁刘玉吴娜邵宁生杨光军事医学科学院基础医学研究所北京100850

目的:利用大肠杆菌重组表达金黄色葡萄球菌外分泌蛋白Efb(extracellular fibrinogen-binding protein,细胞外纤维蛋白原结合蛋白),检测其生物学活性,并制备其功能性抗体,以探讨Efb蛋白在金葡菌感染中的生物学意义。方法:以金黄色葡萄球... 详细信息

目的:利用大肠杆菌重组表达金黄色葡萄球菌外分泌蛋白Efb(extracellular fibrinogen-binding protein,细胞外纤维蛋白原结合蛋白),检测其生物学活性,并制备其功能性抗体,以探讨Efb蛋白在金葡菌感染中的生物学意义。方法:以金黄色葡萄球菌NCTC-8325菌株基因组为模板,PCR扩增efb基因,构建重组表达载体pET28a-Efb,转化大肠杆菌BL21(DE3),利用IPTG诱导表达,通过Ni柱亲和纯化获得Efb;通过补体激活试验及竞争ELISA的方法检测Efb蛋白的生物学活性,免疫动物制备抗体。结果:获得了纯度较高的重组Efb蛋白,重组蛋白能够有效抑制CH50以及AH50,并且制备了Efb的功能性多克隆抗体。结论:Efb蛋白能够抑制补体激活的经典途径及替代途径,其特异性抗体能够阻断对于补体激活经典途径的抑制作用。

关键词：葡萄球菌金黄色 Efb 补体抑制抗体

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具C1q抑制活性的C1q结合环七肽的研究

具C1q抑制活性的C1q结合环七肽的研究

作者：胡静第一军医大学

学位级别：硕士

补体系统是天然免疫的重要组成部分，在机体免疫防御、免疫调节中起重要作用。然而，补体的异常活化也参与许多疾病的发生和发展，因此抗补体治疗一直是补体学研究中的重要领域之一。补体级联反应中的多个环节都可作为抗补体治疗的靶点... 详细信息

补体系统是天然免疫的重要组成部分，在机体免疫防御、免疫调节中起重要作用。然而，补体的异常活化也参与许多疾病的发生和发展，因此抗补体治疗一直是补体学研究中的重要领域之一。补体级联反应中的多个环节都可作为抗补体治疗的靶点。C1q不仅是补体经典途径的始动识别因子，它还能与多种配基相互作用，产生多种生物功能，其中与免疫复合物(immune complex，IC)及C1q受体(C1q receptor，C1qR)的结合所引发的后续反应就参与多种疾病中补体介导的组织损伤。我们设想，选择性抑制C1q与IC及C1qR的结合，可能有效阻断补体异常激活介导的组织损伤。本研究中，我们以C1q为靶标筛选噬菌体展示环七肽库，获得一批结合C1q并具C1q抑制活性的噬菌体克隆，然后根据噬菌体展示肽DNA序列人工合成短肽并研究合成短肽及其BSA偶联物的活性。一、C1q结合性噬菌体克隆的筛选与鉴定以人C1q为钓饵筛选噬菌体环七肽库，经C1q结合实验、U937细胞C1qR结合抑制实验、多聚IgG(aggregated immunoglobulin G，AIgG)竞争抑制实验鉴定噬菌体克隆，获得一批结合C1q并具C1q抑制活性的噬菌体克隆，从其展示肽DNA测序结果推导氨基酸顺序，得到8个序列：CKKSGKPKC、CFNPFRLDC、CWDLFLFPC，CSPFFLTPC、CSPFHLEPC、CWGNPFFLC、CNNPFTLLC和CSPFFWYEC。

关键词： C1q结合肽补体抑制补体经典途径噬菌体展示肽库天然免疫