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衢枳壳提取物对CCl_(4)诱导的肝纤维化小鼠肝脏炎症及NF-κB/NLRP3炎性体通路的影响

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中国中药杂志 2021年第6期46卷 1474-1479页

作者：王思为蓝天郑芳雷美康张峰衢州市人民医院浙江衢州324000 衢州海关技术中心浙江衢州324000

研究衢枳壳提取物(QAF)对四氯化碳(CCl_(4))诱导的肝纤维化小鼠肝脏炎症的影响及其机制。将60只C57BL/6雄性小鼠按照随机数字表法随机分为对照组(蒸馏水灌胃)、模型组(蒸馏水灌胃)、秋水仙碱组(Col,秋水仙碱2 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃)... 详细信息

研究衢枳壳提取物(QAF)对四氯化碳(CCl_(4))诱导的肝纤维化小鼠肝脏炎症的影响及其机制。将60只C57BL/6雄性小鼠按照随机数字表法随机分为对照组(蒸馏水灌胃)、模型组(蒸馏水灌胃)、秋水仙碱组(Col,秋水仙碱2 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃)、QAF低剂量组(QAF-L,QAF 100 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃)和QAF高剂量组(QAF-H,QAF 300 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃)。模型组和各给药组用1 mL·kg^(-1)CCl_(4)(CCl_(4)-橄榄油1∶4)腹腔注射,每周2次。给药和造模共6周。末次给药后16 h,处死小鼠,收集血清以及肝脏组织。检测血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平,并观察小鼠肝功能情况;HE染色法观察各组小鼠肝组织病理学变化;F4/80免疫组化法观察各组小鼠肝脏炎症细胞浸润情况;采用RT-PCR法检测各组小鼠肝脏肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)^(-1)8和IL^(-1)βmRNA表达;采用Western blot法检测各组小鼠肝脏IκBα,p-IKKα/β,p-p65,NLRP3,caspase^(-1)和cleaved caspase^(-1)表达情况。结果显示,不同剂量QAF显著缓解肝损伤程度,并降低肝纤维化小鼠肝功能指标血清ALT和AST水平。免疫组化结果显示,QAF显著减少肝纤维化小鼠肝脏炎症细胞浸润。RT-PCR和Western blot结果显示,QAF显著降低肝纤维化小鼠肝组织TNF-α,IL^(-1)8和IL^(-1)β基因表达,并抑制肝脏IκBα蛋白降解,以及p-IKKα/β,p-p65,NLRP3和cleaved caspase^(-1)蛋白表达。综上所述,QAF具有改善CCl_(4)诱导的小鼠肝纤维化的作用,其机制可能与抑制NF-κB/NLRP3炎性体介导的炎症信号通路有关。

关键词：衢枳壳肝纤维化炎症 NF-κB NLRP3炎性体

衢枳壳黄酮类成分调节胃肠动力的谱效关系研究

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中国现代应用药学 2022年第17期39卷 2241-2245页

作者：冯敬骞宋剑锋赵四清徐礼萍张文婷雷美康衢州职业技术学院医学院浙江衢州324000 衢州市食品药品检验研究院浙江衢州324002 常山县胡柚研究院浙江衢州324200 浙江省食品药品检验研究院杭州310052 衢州出入境检验检疫局综合技术服务中心浙江衢州324000

目的研究衢枳壳甲醇提取物的 HPLC 指纹图谱及其调节胃肠动力的谱效关系。方法采用小肠炭末推进模型和离体回肠收缩模型得到调节胃肠动力的药效结果,经 LC-MS 分析并指认衢枳壳甲醇提取物中的各色谱峰,运用多元回归分析(multiple regr... 详细信息

目的研究衢枳壳甲醇提取物的 HPLC 指纹图谱及其调节胃肠动力的谱效关系。方法采用小肠炭末推进模型和离体回肠收缩模型得到调节胃肠动力的药效结果,经 LC-MS 分析并指认衢枳壳甲醇提取物中的各色谱峰,运用多元回归分析(multiple regression analysis,MRA)和双变量相关分析(bivariate correlation analysis,BCA),将衢枳壳甲醇提取物的药效数据与指纹图谱共有峰的相对峰面积相关联,分析谱效相关性。结果采用 LC-MS 指认出 12 个色谱峰,经 MRA 和BCA,得出谱效方程(Y_(1)=52.379–0.255X_(2)+0.335X_(3)–4.499X_(4)+4.308X_(5)+0.750X_(6),R~2=0.959;Y_(2)=0.250+0.013 5X_(2)+0.023 0X_(3)+0.076 9X_(6),R~2=0.921),其中 5 个是相关峰,2 个色谱峰呈现极显著的相关性。采用不同样品代入谱效方程做拟合验证后,该拟合方程的预测值与实测值的拟合误差均衢枳壳甲醇提取物中芸香柚皮苷(峰 2)、柚皮苷(峰 3)、柚皮素(峰4)、橙皮苷(峰 5)、新橙皮苷(峰 6)可能是衢枳壳中调节胃肠动力的效应物质,其中柚皮苷(峰 3)和新橙皮苷(峰 6)呈现极显著的相关性,与调节胃肠动力密切相关。

关键词：衢枳壳调节胃肠动力谱效关系

基于HPLC指纹图谱研究衢枳壳与不同栽培变种枳壳质量差异

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中草药 2024年第8期55卷 2764-2770页

作者：岳超张文婷郑成梁晶晶宋剑锋陈碧莲郭增喜赵维良浙江省食品药品检验研究院国家市场监管重点实验室(功能食品质量与安全领域)浙江省市场局重点实验室(保健品质量安全重点实验室)国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室浙江杭州310052 杭州师范大学浙江杭州311121 衢州市食品药品检验研究院浙江衢州324002

目的基于HPLC指纹图谱技术和统计学分析方法,比较和评价常山柚橙Citrus aurantium‘Changshan-huyou’未成熟的干燥果实(衢枳壳)与不同栽培变种酸橙间质量的一致性与差异性。方法使用Extend XDB C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),检... 详细信息

目的基于HPLC指纹图谱技术和统计学分析方法,比较和评价常山柚橙Citrus aurantium‘Changshan-huyou’未成熟的干燥果实(衢枳壳)与不同栽培变种酸橙间质量的一致性与差异性。方法使用Extend XDB C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),检测波长330 nm,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温为30℃。通过聚类分析(cluster analysis,CA)和主成分分析(principal component analysis,PCA)对35批样品的指纹图谱进行评价。结果建立的酸橙枳壳的指纹图谱共有模式获得24个共有峰,并指认出12个目标化合物。13批衢枳壳样品的相似度结果范围0.920~0.947,质量一致性好,不同基原枳壳相似度结果为0.127~0.990,质量差异大。CA将衢枳壳均与酸橙枳壳聚为一类,朱栾和部分黄皮酸橙单独聚为一类,结合PCA获得区分不同基原枳壳的差异性标志物,其中9个已知化合物分别为葡萄内酯水合物、川陈皮素、柚皮苷、桔皮素、木犀草素、新橙皮苷、芸香柚皮苷、橙皮苷、柚皮素。结论研究表明衢枳壳的化学成分与酸橙枳壳相似度高,且药材质量一致性好,药材质量优于朱栾和塘橙,推荐作为《中国药典》的枳壳植物基原之一。同时应增加区分不同基原枳壳的关键化合物作为指标成分,以全面准确的评价和控制枳壳药材质量。

关键词：衢枳壳常山柚橙指纹图谱化学模式分析圣草次苷芸香柚皮苷柚皮苷柚皮素橙皮苷新橙皮苷橘皮内酯水合物木犀草素橘皮内酯川陈皮素桔皮素葡萄内酯

基于HPLC特征图谱、化学模式识别分析和多指标成分测定的衢枳壳及其相似药用部位的质量差异研究

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中国现代应用药学 2024年第14期41卷 1943-1951页

作者：施梦瑶徐冰晶童超英李谨廷梁泽华邹莉钦丹萍寿旦浙江中医药大学药学院杭州311400 浙江艾佳食品有限公司浙江衢州324200 浙江中医药大学附属第一医院杭州310006

目的研究衢枳壳与相似药用部位胡柚皮的差异性成分及含量特征,为其质量评价提供依据。方法建立10批衢枳壳和12批胡柚皮的HPLC特征图谱,并进行相似度评价,采用主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法判别分析... 详细信息

目的研究衢枳壳与相似药用部位胡柚皮的差异性成分及含量特征,为其质量评价提供依据。方法建立10批衢枳壳和12批胡柚皮的HPLC特征图谱,并进行相似度评价,采用主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least square discriminate analysis,OPLS-DA)筛选差异性成分,结合特征峰相对峰面积比值探究不同部位质量差异,通过特征性成分的含量测定及t检验和聚类分析验证方法可靠性。结果建立了衢枳壳与胡柚皮的特征图谱,相似度>0.9,且组内相似度高于组间相似度;分别确认衢枳壳中12个特征峰,胡柚皮中15个特征峰,其中10个为共有峰,经对照品指认圣草次苷等8个色谱峰。根据每批17个特征峰面积进行化学模式识别分析,PCA提取出2个主成分,累积方差贡献率可达83.841%;OPLS-DA分析筛选出新北美圣草苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、新橙皮苷4个差异性成分。统计分析结果显示,峰8、峰13的峰面积比值可区分2种不同药用部位。含量测定结果表明特征成分新北美圣草苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、新橙皮苷在10批衢枳壳中含量范围分别为0.25%~0.55%、0.84%~2.29%、4.24%~8.57%、3.40%~10.13%;在12批胡柚皮中含量范围分别为0.66%~1.40%、0.30%~0.45%、3.60%~5.52%、2.19%~3.69%,且其在衢枳壳与胡柚皮中的平均含量均有极显著差异(P衢枳壳与胡柚皮两类。结论本研究建立的方法能特异性识别衢枳壳及其相似药用部位的差异成分并对两者进行有效区分,为衢枳壳质量控制提供依据。

关键词：衢枳壳胡柚皮 HPLC 特征图谱化学模式识别质量差异评价

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衢枳壳总黄酮提取工艺的优化及其抗氧化活性

中成药 2020年第7期42卷 1687-1691页

作者：刘小娟方月娟夏道宗王思为衢州市妇幼保健院浙江衢州324000 浙江中医药大学浙江杭州310053 衢州市人民医院浙江衢州324000

目的优化衢枳壳总黄酮提取工艺,并评价其抗氧化活性。方法在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、提取时间、料液比、提取温度为影响因素,总黄酮提取率为评价指标,正交试验优化提取工艺。考察总黄酮对DPPH、ABTS自由基的清除能力。结果最... 详细信息

目的优化衢枳壳总黄酮提取工艺,并评价其抗氧化活性。方法在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、提取时间、料液比、提取温度为影响因素,总黄酮提取率为评价指标,正交试验优化提取工艺。考察总黄酮对DPPH、ABTS自由基的清除能力。结果最佳条件为乙醇体积分数80%,料液比1∶30,提取时间2.0 h,提取温度80℃,总黄酮提取率6.21%。总黄酮质量浓度为250μg/mL时,对ABTS自由基的清除能力与维生素C相当;为1 000μg/mL时,对DPPH自由基的清除率达88.537%,呈量效关系。结论该方法简便可靠,可用于提取具有较强抗氧化活性的衢枳壳总黄酮。

关键词：衢枳壳总黄酮提取抗氧化活性正交试验 DPPH自由基 ABTS自由基

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中药材衢枳壳的基源植物研究

中国现代应用药学 2019年第13期36卷 1652-1655页

作者：赵维良黄琴伟张文婷岳超宋剑锋浙江省食品药品检验研究院杭州310052 衢州市食品药品检验研究院浙江衢州324002

目的厘清中药材衢枳壳基源植物的起源,解决衢枳壳基源植物起源的争议,根据各种文献使用的不同名称,确定科学的中文名和拉丁学名正名。方法对衢枳壳形态、栽培历史和抗寒基因特性进行调查研究,对PCR扩增、化学成分和基因片段测序等方面... 详细信息

目的厘清中药材衢枳壳基源植物的起源,解决衢枳壳基源植物起源的争议,根据各种文献使用的不同名称,确定科学的中文名和拉丁学名正名。方法对衢枳壳形态、栽培历史和抗寒基因特性进行调查研究,对PCR扩增、化学成分和基因片段测序等方面进行文献考证。结果衢枳壳基源植物的形态、PCR扩增结果和ITS1测序结果均与柚和酸橙非常相似或相同,而化学成分和抗寒基因特性与酸橙十分相近。结论衢枳壳的基源植物系柚和酸橙的自然杂交栽培变种,不具备独立种的地位,其拉丁学名应为Citrus aurantium'Changshan-huyou',中文名宜为常山柚橙,常山胡柚和胡柚可作为别名。

关键词：衢枳壳常山柚橙常山胡柚柚酸橙

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ICP-MS测定衢枳壳中26种无机元素

中国现代应用药学 2020年第12期37卷 1493-1497页

作者：郑明金情政王也宋剑锋胡卫南徐礼萍衢州市食品药品检验研究院浙江衢州324000 浙江衢化医院浙江衢州324004

目的建立微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定衢枳壳中26种无机元素(Mg、K、Ca、Na、Al、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Rb、Sr、Ag、Cd、Cs、Ba、Tl、Pb、U、Hg)的方法。方法样品经微波消解后,采用ICP-MS测定26... 详细信息

目的建立微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定衢枳壳中26种无机元素(Mg、K、Ca、Na、Al、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Rb、Sr、Ag、Cd、Cs、Ba、Tl、Pb、U、Hg)的方法。方法样品经微波消解后,采用ICP-MS测定26种无机元素,并进行方法学验证。结果检测的26种元素线性关系良好(r≥0.9990),平均回收率为90%~111%,RSD均衢枳壳中多种无机元素的同时测定。

关键词：衢枳壳电感耦合等离子体质谱法微波消解无机元素

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衢枳壳的药理作用研究进展

中国高新科技 2019年第10期 26-28页

作者：许守超陈屠梦包绍印吴双双陈天翔李晓红浙江中医药大学药学院浙江中医药大学医学技术学院浙江杭州310053

对衢枳壳的药理作用进行综述和分析,为衢枳壳的发展提供基础。对衢枳壳中主要有效成分的药理作用进行综述和分析,证明衢枳壳中的有效成分具有抗氧化、抗菌、抗病毒、降血脂和降血糖等药理作用。衢枳壳中的有效成分具有广泛的生物活性,... 详细信息

对衢枳壳的药理作用进行综述和分析,为衢枳壳的发展提供基础。对衢枳壳中主要有效成分的药理作用进行综述和分析,证明衢枳壳中的有效成分具有抗氧化、抗菌、抗病毒、降血脂和降血糖等药理作用。衢枳壳中的有效成分具有广泛的生物活性,对于其各种生物活性有待进一步深入研究。

关键词：衢枳壳药理作用生物活性

衢枳壳HPLC指纹图谱的建立及特征成分分析

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中国现代应用药学 2018年第8期35卷 1217-1220页

作者：岳超马临科宋剑锋张文婷赵维良浙江省食品药品检验研究院杭州310052 衢州市食品药品检验研究院浙江衢州324002

目的建立衢枳壳的HPLC指纹图谱方法,并联合聚类分析技术,评价衢枳壳的质量。方法色谱柱采用Extend XDB C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为330 nm,柱温为30℃,流速为1.0 m L·min-1。结果通... 详细信息

目的建立衢枳壳的HPLC指纹图谱方法,并联合聚类分析技术,评价衢枳壳的质量。方法色谱柱采用Extend XDB C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为330 nm,柱温为30℃,流速为1.0 m L·min-1。结果通过11批衢枳壳样品建立了对照指纹图谱,得到19个共有峰,利用多级质谱信息,结合对照品和文献对9个共有峰进行指认,同时采用相似度分析和系统聚类分析方法对指纹图谱数据进行模式识别研究。衢枳壳相似度结果为0.995~1.000,并聚为一类,说明其质量较为一致,而其他混淆品差异性较大,另聚为一类。结论该方法简便、快速,专属性强,可以有效地评价衢枳壳的质量。

关键词：衢枳壳混淆品种指纹图谱聚类分析质量评价