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天津及周边地区血红蛋白变异体分析

中华预防医学杂志 2023年第12期57卷 2147-2152页

作者：刘瑜刘蕊代义松郭晓燕牛文彦天津医科大学朱宪彝纪念医院检验科天津市内分泌研究所国家卫生健康委员会激素与发育重点实验室天津市代谢性疾病重点实验室天津300134 贵州省人民医院中心实验室国家卫生健康委员会肺脏免疫性疾病重点实验室贵阳550000 金昌市人民医院河西院区病理科金昌737202 天津医科大学基础医学院免疫学系天津300070

探讨天津及周边地区常见血红蛋白变异体的种类和占比,分析两种常用糖化血红蛋白检测系统对这些血红蛋白变异体的识别能力和对糖化血红蛋白检测结果的影响,为天津地区糖化血红蛋白检测的一致性提供实验数据支持。采用病例对照研究,进行... 详细信息

探讨天津及周边地区常见血红蛋白变异体的种类和占比,分析两种常用糖化血红蛋白检测系统对这些血红蛋白变异体的识别能力和对糖化血红蛋白检测结果的影响,为天津地区糖化血红蛋白检测的一致性提供实验数据支持。采用病例对照研究,进行回顾性分析,从2020年6至12月期间在天津医科大学朱宪彝纪念医院就诊的天津及周边地区患者的5万多例标本中,收集毛细管电泳法检测糖化血红蛋白时出现异常电泳峰的标本156例。通过DNA测序确定其血红蛋白突变位点。比较高效液相色谱法和毛细管电泳法测得的变异体糖化血红蛋白值。利用SPSS 23计算变异体标本血常规结果,并与正常参考区间进行比较,分析血红蛋白变异体对红细胞相关参数的影响。结果显示,DNA测序发现了21种血红蛋白变异体,其中11种为α链变异体,10种为β链变异体。其中,1种为未曾报道的血红蛋白变异位点,Hb Headington(HBB:c.217A>C)。高效液相色谱法和毛细管电泳法测定结果比较发现,Hb G-Honolulu、Hb Queens、Hb Q-Thailand、Hb J-Broussais、Hb O-Indonesia、Hb G-Coushatta、Hb G-Taipei、Hb E、Hb Headington、Hb New York和Hb D-Los Angeles 11种变异体糖化血红蛋白结果偏移大于7%。血细胞分析发现,Hb Q-Thailand变异体患者和Hb E变异体患者平均血细胞比容(mean corpuscular volume,MCV)和平均红细胞血红蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin,MCH)减低。综上,天津及周边地区患者存在新的血红蛋白变异位点突变体,Hb Q-Thailand变异体患者和Hb E变异体患者MCV和MCH减低,11种血红蛋白变异体会干扰离子高效液相色谱法对糖化血红蛋白检测的准确性。

关键词：糖化血红蛋白血红蛋白变异体毛细管电泳高效液相色谱

血红蛋白变异体对解读糖化血红蛋白结果的影响

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中华检验医学杂志 2019年第11期42卷 899-903页

作者：高冉程歆琦中国医学科学院北京协和医院检验科北京100730

糖化血红蛋白(HbA1c)是监测糖尿病患者长期血糖控制情况的金标准,也是临床调整降糖治疗的重要依据。近年来,世界卫生组织(WHO)和许多国家的糖尿病学会将HbA1c纳入为糖尿病的诊断指标。血红蛋白变异体是影响HbA1c检测和结果解读的重要因... 详细信息

糖化血红蛋白(HbA1c)是监测糖尿病患者长期血糖控制情况的金标准,也是临床调整降糖治疗的重要依据。近年来,世界卫生组织(WHO)和许多国家的糖尿病学会将HbA1c纳入为糖尿病的诊断指标。血红蛋白变异体是影响HbA1c检测和结果解读的重要因素之一,血红蛋白变异体可以通过干扰某些HbA1c检测方法影响HbA1c结果,也可以通过改变红细胞寿命和(或)血红蛋白糖基化速率影响临床医生和实验室人员对HbA1c结果的正确解读。

关键词：糖化血红蛋白血红蛋白变异体红细胞寿命血红蛋白糖化速率

常见血红蛋白变异体对糖化血红蛋白检测结果的影响及β链糖化水平的差异研究

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常见血红蛋白变异体对糖化血红蛋白检测结果的影响及β链糖化水平...

作者：高冉北京协和医学院

学位级别：硕士

目的鉴定糖化血红蛋白(HbA1c)检测过程中常见的血红蛋白变异体类型,评价离子交换高压液相色谱法(IE-HPLC)与毛细管电泳方法(CFP)对含有常见血红蛋白变异体标本的糖化血红蛋白检测结果的一致性。采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法分别... 详细信息

目的鉴定糖化血红蛋白(HbA1c)检测过程中常见的血红蛋白变异体类型,评价离子交换高压液相色谱法(IE-HPLC)与毛细管电泳方法(CFP)对含有常见血红蛋白变异体标本的糖化血红蛋白检测结果的一致性。采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法分别检测Hb G-Coushatta和Hb G-Taipei杂合子血红蛋白中βA、βG-Coushatta和βG-Taipei链的糖基化水平,比较三者之间β链糖基化水平以及HbAA、Hb AG-Coushatta和Hb AG-Taipei整体血红蛋白糖基化水平的差异。方法收集2017年1月～2019年11月北京协和医院采用IE-HPLC方法检测HbA1c中分离色谱峰异常的临床剩余样本共149例,采用毛细管电泳法检测糖化血红蛋白,初步辨别血红蛋白变异体的存在。利用血红蛋白电泳方法再次确认血红蛋白变异体的存在,同时得到血红蛋白变异体和正常血红蛋白的含量比例。最后采用Sanger测序方法对含有血红蛋白变异体标本进行基因测序,确定血红蛋白变异体类型。比较IE-HPLC和毛细管电泳方法在检测Hb G-Coushatta杂合子、HbG-Taipei杂合子和HbE杂合子(在第2章中已明确的β链血红蛋白变异体)HbA1c结果的一致性。分别计算两种方法HbA1c检测结果估计的平均血糖水平(eAG),探讨eAG与患者同期空腹血糖(Fasting Plasma Glucose,FPG)的相关性。建立检测血红蛋白β链糖基化水平的LC-MS/MS方法。洗涤、分离含血红蛋白变异体标本中的红细胞,使用去离子水破坏红细胞,加入四氯乙烯并震荡,离心后取上清液用于检测。在正离子模式下,经ESI离子源电喷雾电离,多离子反应监测模式下检测正常血红蛋白β链、变异体血红蛋白β链的糖基化比例。使用Bio-Rad Lyphochek? Diabetes Control糖化血红蛋白高、低两个水平的质控品评价方法的精密度。每水平质控物每天测定5次,重复测定5天,计算各水平的批内及总变异。用一份低浓度新鲜全血标本(L)和一份高浓度新鲜全血标本(H),按1.0L、0.75L:0.25H、0.5L:0.5H、0.25L:0.75H、1.0H,配成5个浓度梯度的混合全血标本,评价方法的线性范围。其预期β链糖化水平按照公式:x=β glycatedL×VL×HbL+β glycatedH×VH×HbH/VL×HbL×VH×HbH计算。分别采用IFCC糖化血红蛋白参考实验室网络指定的一级参考物质pcal-2014和20份新鲜全血标本,评价LC-MS/MS检测的β链糖基化水平与HbA1c的相关性。检测本实验室最常见的Hb G-Coushatta和Hb G-Taipei血红蛋白变异体杂合子标本β链的糖基化水平,比较变异体中βG-Coushatta、βG-Taipei和βA的糖基化水平差异。根据以往研究报道中的结论,α链糖化比例约为β链的64%,计算Hb G-Coushatta和Hb G-Taipei血红蛋白变异体杂合子的整体糖化水平,并比较其与HbAA的整体糖化水平的差异。结果共计发现149例疑似血红蛋白变异体标本,经过血红蛋白β链DNA序列分析显示,β链血红蛋白变异体共128例,均为杂合子突变。最常见的β链血红蛋白变异体是 Hb G-Coushatta 和 Hb G-Taipei,分别占 31.3%和 33.3%。HbE、HbS、HbJ-Bangkok等β链血红蛋白变异体较为少见,共占比例21.3%。其余21例标本中,DNA测序失败9例(双峰、乱峰),未发现β链基因突变12例,这12例有可能是α链基因突变产生的血红蛋白变异体。在IE-HPLC方法和毛细管电泳两种HbA1c检测方法中,Hb G-Coushatta患者组HbA1c检验统计量Z=-1.73,P=0.08>0.05,两种检测方法检测结果无统计学差异。两种检测方法的HbA1c检测结果具有显著相关性,r=0.81,双侧Spearman检验P0.05,两种检测方法的结果无统计学差异;两种检测方法的HbA1c检测结果具有显著相关性,r=0.83,双侧 Spearman 检验P变异体患者组,双侧配对t检验中,t=6.965,P变异体杂合子组分别有8.7%(4/46)和4.0%(2/50)的样本落在IE-H

关键词：糖化血红蛋白血红蛋白变异体离子交换高压液相色谱法毛细管电泳法液相色谱串联质谱法血红蛋白糖基化水平

影响A1C检测结果的罕见血红蛋白C变异体1例报告

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四川大学学报（医学版） 2023年第3期54卷 659-662页

作者：梁利波何訸孙婉婷李友琼张玫四川大学华西医院全科医学中心成都610041 四川大学华西医院实验医学科成都610041 广西壮族自治区人民医院医学遗传与产前诊断中心南宁530012

血红蛋白(hemoglobin,Hb)变异体是影响糖化血红蛋白A1C(glycated hemoglobin,A1C)检测结果的常见因素。不同的血红蛋白变异体对检测结果的影响各不相同。本文首次报道了1例中国人中血红蛋白C(Hb C)对A1C测定结果的影响。本研究分别使用... 详细信息

血红蛋白(hemoglobin,Hb)变异体是影响糖化血红蛋白A1C(glycated hemoglobin,A1C)检测结果的常见因素。不同的血红蛋白变异体对检测结果的影响各不相同。本文首次报道了1例中国人中血红蛋白C(Hb C)对A1C测定结果的影响。本研究分别使用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)和毛细管电泳法检测A1C;采用血红蛋白电泳识别血红蛋白变异体;Hb测序确定β链上的突变位点。HPLC检测A1C结果降低,可通过电泳法纠正,但电泳图谱仍存在异常峰。Hb电泳结果提示存在Hb变异,测序结果显示为Hb C。因此,我们建议对A1C常规开展解释性报告模式,对每份报告中的检测方法进行注释,并对图谱进行分析,避免单一检验结果影响临床决策。

关键词：糖化血红蛋白血红蛋白变异体高效液相色谱法毛细管电泳

血红蛋白变异体对糖化血红蛋白测定方法的干扰

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国际检验医学杂志 2014年第17期35卷 2345-2347页

作者：徐胜男温冬梅张秀明中山市人民医院广东中山528403

目前，大部分糖化血红蛋白的检测系统可排除常见的血红蛋白变异体杂合子的干扰，或给出警告提示信息，而一些较为罕见的血红蛋白变异体引起的干扰常被临床医生和患者忽视。因此对于血红蛋白变异体普遍存在的地区，应谨慎选择HbA1c 的检... 详细信息

目前，大部分糖化血红蛋白的检测系统可排除常见的血红蛋白变异体杂合子的干扰，或给出警告提示信息，而一些较为罕见的血红蛋白变异体引起的干扰常被临床医生和患者忽视。因此对于血红蛋白变异体普遍存在的地区，应谨慎选择HbA1c 的检测系统，对于变异体携带者可选择合适的替代指标用于评估血糖水平。

关键词：血红蛋白变异体糖化血红蛋白干扰

常见血红蛋白变异体对离子交换高效液相色谱法检测糖化血红蛋白的影响

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江西医药 2020年第4期55卷 468-470页

作者：潘少霞陈冬莲刘艳晨章青英陈晓英刘首明广东省清远市中医院检验中心清远511500

目的探讨广东清远地区常见血红蛋白变异体对离子交换高效液相色谱法(IE-HPLC)检测糖化血红蛋白(HbA1c)的干扰程度和干扰因素。方法回顾性分析2017年1月至2019年6月二型糖尿病患者行IE-HPLC测定HbA1c的水平、已糖激酶法测定血浆葡萄糖的... 详细信息

目的探讨广东清远地区常见血红蛋白变异体对离子交换高效液相色谱法(IE-HPLC)检测糖化血红蛋白(HbA1c)的干扰程度和干扰因素。方法回顾性分析2017年1月至2019年6月二型糖尿病患者行IE-HPLC测定HbA1c的水平、已糖激酶法测定血浆葡萄糖的水平、毛细管电泳法分析血红蛋白性质和双脱氧链终止法进行血红蛋白基因测序的40例体检者的诊断学资料。结果 40例体检者HbA1c测定结果与血糖检测结果均出现明显偏差,均超出IE-HPLC的定量分析范围。毛细管蛋白电泳结果显示,40例体检者均出现的异常血红蛋白区带。基因测序结果显示,40例体检者的血红蛋白β链均发生突变基因。结论血红蛋白E(Hb E)、血红蛋白G-Taipei(Hb G-Taipei)、血红蛋白纽约(Hb Newyork)及异常血红蛋白(Hb J-Bangkok)等血红蛋白变异体对IE-HPLC检测HbA1c构成不同程度干扰,其干扰因素与血红蛋白变异体的理化性质密切相关。

关键词：糖化血红蛋白血红蛋白变异体糖基化色谱法高效液相

一种新型抗干扰高效液相色谱法血红蛋白分析系统

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生物医学工程学杂志 2021年第5期38卷 940-950页

作者：徐岩姚甜甜胡文雍张波郭兴明重庆大学生物工程学院重庆400044 深圳普门科技股份有限公司广东深圳518055

高效液相色谱法(HPLC)是目前主流的检测血红蛋白技术,糖化血红蛋白(HbA1c)是诊断糖尿病的金指标,但HPLC检测时HbA1c易受到地中海贫血因子血红蛋白F(HbF)/血红蛋白A2(HbA2)和血红蛋白变异体的干扰而影响检测结果的准确性。本研究基于高... 详细信息

高效液相色谱法(HPLC)是目前主流的检测血红蛋白技术,糖化血红蛋白(HbA1c)是诊断糖尿病的金指标,但HPLC检测时HbA1c易受到地中海贫血因子血红蛋白F(HbF)/血红蛋白A2(HbA2)和血红蛋白变异体的干扰而影响检测结果的准确性。本研究基于高效液相色谱法提出一种新型抗干扰血红蛋白分析系统,本系统通过改进高压三梯度洗脱法,优化高压层析柱中微球粒径和筛板孔径,并优化双柱塞往复式串联高压泵的结构,既能检测HbA1c又可检测地中海贫血因子HbF/HbA2和血红蛋白变异体,抗干扰性好,性能稳定,有望实现产业化。本系统与日本东曹G8、美国伯乐Ⅶ和D10糖化血红蛋白分析系统等世界一线品牌产品进行HbA1c和地中海贫血因子HbF/HbA2检测性能对比,结果表明,本系统与世界一流系统的线性相关性好,检测性能优异,是国内首次实现快速、精准筛查糖化血红蛋白和地中海贫血因子HbF/HbA2的高效液相色谱法血红蛋白分析系统。

关键词：高效液相色谱法糖化血红蛋白地中海贫血因子HbF/HbA2 血红蛋白变异体

血红蛋白双重杂合子对不同糖化血红蛋白检测系统结果的影响

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临床检验杂志 2019年第3期37卷 167-172页

作者：索明环温冬梅王伟佳董子智王霞胡婷中山大学附属中山医院检验医学中心广东中山528403

目的观察Hb Q-H和Hb J-Bangkok合并β地中海贫血(简称"地贫")双重杂合子患者糖化血红蛋白A1c(HbA1c)对不同糖化血红蛋白检测系统结果的影响。方法收集20例表观健康成年人和20例2型糖尿病(T2DM)患者标本,用于5个糖化血红蛋白检测系统间... 详细信息

目的观察Hb Q-H和Hb J-Bangkok合并β地中海贫血(简称"地贫")双重杂合子患者糖化血红蛋白A1c(HbA1c)对不同糖化血红蛋白检测系统结果的影响。方法收集20例表观健康成年人和20例2型糖尿病(T2DM)患者标本,用于5个糖化血红蛋白检测系统间的结果比对。收集1例Hb Q-H患者标本和1例Hb J-Bangkok合并β地贫双重杂合子患者标本,用Capillarys2行血红蛋白毛细管电泳,用gap-PCR、PCR-RDB和基因测序方法鉴定2例异常标本的珠蛋白基因。同时用BioRad VARIANTⅡ(VⅡ)、BioRad VARIANTⅡTurbo2.0(VⅡ-T2.0)、Capillarys 2 Flex Piercing(C2FP)、Primus Ultra2(Ultra2)、Roche PPI 800(PPI 800)5个糖化血红蛋白检测系统检测所有标本的HbA1c结果,其中对于双重杂合子标本,每个检测系统检测3次,保存图谱和检测结果并对比分析。结果 Hb Q-H标本的基因型为--α^(QT)/--SEA;β~N/β~N,珠蛋白α1链发生HbA1 CD74G>C突变,形成Hb Q-Thailand血红蛋白变异体,无正常的α珠蛋白肽链。Hb J-Bangkok合并β地贫的基因型为:αα/αα;β^(CD56)/β^(CD41-42),珠蛋白β链第56位密码子发生GGC>GAC点突变,形成Hb J-Bangkok血红蛋白变异体,无正常的β珠蛋白肽链。对于Hb Q-H标本,5个HbA1c检测系统中有3个检测系统报告了HbA1c结果;VⅡ和VⅡ-T2.0系统图谱与正常图谱存在明显区别,未报告HbA1c结果;C2FP系统图谱与正常图谱相似,HbA1c结果为3.7%;Ultra2系统和PPI系统报告了HbA1c结果,分别为5.3%和5.7%,不存在异常提示。对于Hb J-Bangkok合并β地贫标本,5个HbA1c检测系统中有3个检测系统报告了HbA1c结果;VⅡ系统图谱与正常图谱存在明显区别,未报告HbA1c结果;VⅡ-T2.0系统图谱与正常图谱存在区别,存在84.9%的P4峰,报告了HbA1c结果为4.7%;C2FP系统图谱与正常图谱存在明显区别,未报告HbA1c结果。Ultra2系统和PPI系统均报告了HbA1c结果,分别为4.7%和3.8%,不存在异常提示。结论 Hb Q-H患者与Hb J-Bangkok合并β地贫患者标本均不含正常的HbA,应无HbA1c结果。对于二者,VⅡ系统及VⅡ-T2.0系统的结果图谱存在明显异常,提示结果不可报告;Hb Q-H对C2FP系统存在明显干扰,报告了HbA1c结果,而Hb J-Bangkok合并β地贫标本C2FP系统未报告HbA1c结果;二者对PPI及Ultra2系统存在明显干扰。

关键词：糖化血红蛋白A1c 血红蛋白变异体 HbQ-Thailand HbJ-Bangkok 色谱法毛细管电泳法比浊法

离子交换高效液相色谱法检测糖化血红蛋白异常峰原因分析与对策

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标记免疫分析与临床 2021年第10期28卷 1795-1799页

作者：冯广晓王佶图刘娜首都医科大学附属北京世纪坛医院医学检验科北京大学第九临床医学院医学检验科尿液细胞分子诊断北京市重点实验室北京100038

目的分析使用离子交换高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)过程中出现异常峰图的情况,探索HbA1c异常峰与各种疾病之间的联系。方法选择2017年至2020年首都医科大学附... 详细信息

目的分析使用离子交换高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)过程中出现异常峰图的情况,探索HbA1c异常峰与各种疾病之间的联系。方法选择2017年至2020年首都医科大学附属北京世纪坛医院进行HbA1c检测的175304例患者的临床资料进行回顾性分析,统计HbA1c结果及疾病分布情况;分别使用HPLC和毛细管电泳法(capillary electrophoresis,CE)对159例出现异常峰图的样本进行检测。结果不同疾病中HbA1c升高人数所占比由高到低前三名依次为:内分泌、营养和代谢疾病62.00%(21646/34913)、肿瘤38.41%(910/2369)和循环系统疾病24.00%(11380/47418)。在不同疾病中HbA1c异常峰占比由高到低前三名依次为:呼吸系统疾病0.16%(9/5760)、泌尿生殖系统疾病0.14%(3/2136)和肿瘤0.13%(3/2369)。出现异常峰的159例样本使用HPLC与CE检测结果差异存在统计学意义(P<0.05)。结论在HPLC检测HbA1c过程中,呼吸系统疾病、泌尿生殖系统疾病等与HbA1c异常峰的关系较为密切。

关键词：离子交换高效液相色谱法毛细管电泳法血红蛋白变异体糖化血红蛋白