检索结果-南通市图书馆

血红素氧合酶-1基因真核表达载体的构建及其在大鼠腹膜间皮细胞中的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

上海交通大学学报（医学版） 2013年第4期33卷 425-429页

作者：朱淳郭志勇刘怡晟黄海东蒋更如上海交通大学医学院附属新华医院肾内科上海200092 第二军医大学附属长海医院肾内科上海200433

目的构建大鼠血红素氧合酶-1(HO-1)真核表达载体,并以该重组表达载体体外转染培养的大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)。方法从SD大鼠脾脏中提取总RNA,并经RT-PCR扩增HO-1基因的CDS区全长片段,将PCR产物克隆至pMD-18T载体,BamHⅠ和KpnⅠ双酶切后... 详细信息

目的构建大鼠血红素氧合酶-1(HO-1)真核表达载体,并以该重组表达载体体外转染培养的大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)。方法从SD大鼠脾脏中提取总RNA,并经RT-PCR扩增HO-1基因的CDS区全长片段,将PCR产物克隆至pMD-18T载体,BamHⅠ和KpnⅠ双酶切后获取HO-1片段,用T4DNA连接酶将HO-1片段与双酶切后的真核表达载体pcDNA3.1(-)连接,构建大鼠HO-1真核表达载体pcDNA3.1(-)-HO-1。酶切鉴定和测序验证后,利用脂质体介导将重组质粒转染原代培养的RPMCs,通过RT-PCR和Western blotting检测RPMCs中HO-1的表达。结果成功克隆了大鼠HO-1基因并构建了其真核表达载体pcDNA3.1(-)-HO-1,酶切鉴定证实基因正确地插入表达载体中,并经DNA测序验证。pcDNA3.1(-)-HO-1转染RPMCs后,经RT-PCR和Western blotting检测,HO-1在RPMCs中获得高效表达。结论 HO-1基因真核表达载体的成功构建以及HO-1在RPMCs中的高效表达,为进一步研究HO-1在腹膜透析所致RPMCs损伤中的作用奠定了基础。

关键词：血红素氧合酶-1 表达载体腹膜间皮细胞大鼠

血红素氧合酶-1的诱导对肺缺血再灌注损伤的保护作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医学杂志 2007年第17期87卷 1211-1213页

作者：贾晓民周中新黄继江储伟关秋华徐州医学院第二附属医院呼吸内科 221006 徐州医学院第二附属医院胸心外科 221006 徐州医学院生物化学教研室

目的探讨血红素氧合酶-1的诱导对肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法将40只健康 Sprague-Dawley 大鼠随机分为4组:假手术对照(sham)组、肺缺血再灌注(I/R)组(阻断左肺门30 min 再灌注2 h)、氯化血红素(Hemin)组(给予血红素氧合酶-1的诱导... 详细信息

目的探讨血红素氧合酶-1的诱导对肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法将40只健康 Sprague-Dawley 大鼠随机分为4组:假手术对照(sham)组、肺缺血再灌注(I/R)组(阻断左肺门30 min 再灌注2 h)、氯化血红素(Hemin)组(给予血红素氧合酶-1的诱导剂)与锌原卟啉(ZnPP)组(给予血红素氧合酶-1的抑制剂)。检测各组肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,血浆肿瘤坏死因子(TNF-α)含量,观察肺组织湿干重比(W/D)以及电镜下肺组织超微结构变化。结果 Hemin 组肺湿/干重比(5.92±0.66)低于 I/R 组(7.55±0.66)(P血红素氧合酶-1的诱导可有效保护肺缺血再灌注损伤。

关键词：再灌注损伤血红素氧合酶-1 氯化血红素

血红素氧合酶-1激活对大鼠化学性急性呼吸窘迫综合征的防治作用及其机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华劳动卫生职业病杂志 2005年第3期23卷 199-202页

作者：陈静赵金垣王广增北京大学第三医院职业病研究中心 100083 华北煤炭医学院

目的探讨血红素氧合酶1(HO1)激活对化学性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的防治作用及其可能机制。方法利用HO1的作用底物———血红蛋白(Hb)诱导HO1的产生,并用免疫印迹法(Westernblot)和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)等方法验证其蛋白量和mRN... 详细信息

目的探讨血红素氧合酶1(HO1)激活对化学性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的防治作用及其可能机制。方法利用HO1的作用底物———血红蛋白(Hb)诱导HO1的产生,并用免疫印迹法(Westernblot)和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)等方法验证其蛋白量和mRNA表达情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测油酸型ARDS大鼠血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素8(IL8)水平;结合动脉血气分析、肺湿重、干重测定和病理学检查等方法来验证HO1激活对ARDS的防治效果。结果Westernblot测定结果证实24h时HO1蛋白明显增加,RTPCR结果表明其mRNA表达在16h就已明显升高;且Hb+油酸(OA)组ARDS大鼠血清和BALF中TNFα及IL8水平明显低于OA组,差异有统计学意义(P氧饱和度(79.53%±5.82%)及血氧合指数[(258.81±29.37)mmHg]均明显高于OA组[分别为(35.08±4.59)mmHg、55.80%±12.76%、(167.86±21.94)mmHg],肺湿干重和病理学检查指标亦有明显改善。结论Hb可成功地诱导体内HO1的表达,并显示出防治ARDS的作用;其机制可能系HO1通过减少炎症细胞因子如TNFα和IL8来减轻肺损伤。

关键词：化学性急性呼吸窘迫综合征血红素氧合酶-1 防治作用急性呼吸窘迫综合征(ARDS) 酶联免疫吸附试验(ELISA) 白细胞介素-8(IL-8) 激活逆转录聚合酶链反应血红蛋白(Hb) 肿瘤坏死因子-α 支气管肺泡灌洗液油酸型ARDS Western

血红素氧合酶-1对心肌相对缺血/再灌注损伤的延迟保护作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国应用生理学杂志 2008年第1期24卷 50-53页

作者：翟庆峰刘洪涛李媛媛马强潍坊医学院山东潍坊261042 军事医学科学院卫生学环境医学研究所天津300050 潍坊市妇幼保健院山东潍坊261011

目的:探讨血红素氧合酶-1(HO-1)在运动预适应(EP)中对大鼠心肌相对缺血/再灌注(rI/R)损伤的延迟保护作用。方法:40只Wistar大鼠随机分为5组:正常对照组(CN)、相对缺血/再灌注组(IR)、运动预适应+相对缺血/再灌注组(EI)、Hemin(HO-1诱导... 详细信息

目的:探讨血红素氧合酶-1(HO-1)在运动预适应(EP)中对大鼠心肌相对缺血/再灌注(rI/R)损伤的延迟保护作用。方法:40只Wistar大鼠随机分为5组:正常对照组(CN)、相对缺血/再灌注组(IR)、运动预适应+相对缺血/再灌注组(EI)、Hemin(HO-1诱导剂)+相对缺血/再灌注组(HE)和运动预适应+ZnPP(HO-1抑制剂)+相对缺血/再灌注组(EZ)。测定大鼠再灌注期心率脉压乘积(PRP)、冠脉流出液MDA含量、HO-1活性等。结果:心肌HO-1活性:EI组和HE组较IR组显著升高,EZ组则显著降低。EZ组较EI组显著降低,EI组和HE组间亦有显著性差异。再灌注后60 min时间点PRP恢复率:EI组较IR组显著增高;IR组与HE组未见显著性差异,但30min时间点HE组显著增高;EZ组较EI组显著降低。冠脉流出液MDA含量:EI组、EZ组和HE组MDA含量较IR组皆显著降低;EZ组较EI组显著升高。结论:EP可以诱导HO-1合成,进而通过HO-1对24 h后发生的rI/R损伤产生延迟保护作用。

关键词：血红素氧合酶-1 运动预适应延迟预适应缺血/再灌注

血红素氧合酶-1在急性百草枯中毒小鼠肺组织中的表达及意义

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华危重病急救医学 2015年第4期27卷 280-284页

作者：刘刚宋冬梅江宇朱丽青葛赟重庆医科大学附属大学城医院急诊科重庆401331 河北医科大学第一医院耳鼻喉科实验室河北石家庄050031 重庆医科大学呼吸科重庆401331 温州医科大学附属第一医院检验科浙江温州325015 杭州市滨江医院急诊科浙江杭州310052

目的：观察百草枯中毒小鼠肺组织血红素氧合酶-1（HO-1）的表达，探讨其在百草枯中毒肺损伤中的机制。方法将58只雄性ICR小鼠按随机数字表法分为对照组（8只）和染毒组（50只），采用一次性灌胃20%百草枯溶液50 mg/kg建立中毒模型，对... 详细信息

目的：观察百草枯中毒小鼠肺组织血红素氧合酶-1（HO-1）的表达，探讨其在百草枯中毒肺损伤中的机制。方法将58只雄性ICR小鼠按随机数字表法分为对照组（8只）和染毒组（50只），采用一次性灌胃20%百草枯溶液50 mg/kg建立中毒模型，对照组灌胃等量生理盐水。对照组于实验首日，染毒组于染毒后6 h及1、3、7、14 d分别处死8只存活小鼠取肺组织，行苏木素-伊红（HE）染色后光镜下观察肺组织病理改变；免疫组化法检测肺组织HO-1阳性表达；蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测肺组织HO-1蛋白表达；检测超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。结果小鼠染毒后1 h即出现呼吸急促、乏力等症状，3～5 d时表现最为严重，14 d时饮食、活动恢复正常。光镜下观察显示，对照组肺组织无明显病理改变。染毒1 d时肺泡结构紊乱，肺组织出现明显的出血、水肿和炎性细胞浸润；3 d时肺组织病理改变加重；7 d时肺泡炎症表现减轻；14 d时炎症表现基本消失，但肺泡结构仍紊乱。免疫组化显示，对照组肺组织细胞中HO-1多不表达，少许轻度表达于气道上皮细胞。染毒1 d时HO-1主要分布于气道黏膜上皮细胞、炎性细胞、血管内皮细胞的胞质中；随后表达逐渐减少，7 d时恢复至对照组水平。染毒6 h时肺组织HO-1蛋白表达（灰度值）即较对照组明显升高（2.438±0.467比0.475±0.167，P＜0.01），1 d时达高峰（9.200±0.940比0.475±0.167，P＜0.01），持续至7 d时恢复至对照组水平（0.825±0.260比0.475±0.167，P＞0.05）。染毒6 h时肺组织SOD活性（μU/L）即较对照组明显降低（649.681±13.951比1167.051±15.744，P＜0.01），随后逐渐升高，至14 d仍显著低于对照组（859.733±121.079比1167.051±14.744，P＜0.01）；染毒6 h时肺组织MDA含量（μmol/L）即较对照组明显升高（4.542±0.266比3.705±0.176，P＜0.01），1 d时达到高峰（5.956±0.281比3.705±0.176，P＜0.01），随后逐渐下降，3 d时已恢复至对照组水平（4.134±0.168比3.705±0.176，P＞0.05）。结论急性百草枯中毒小鼠肺组织HO-1表达明显增高，可能是参与百草枯中毒肺损伤的重要保护机制。

关键词：百草枯中毒肺损伤血红素氧合酶-1

血红素氧合酶-1在离体大鼠心肌缺血预适应中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国应用生理学杂志 2005年第4期21卷 386-387,406页

作者：易凌刘洪涛王天辉军事医学科学院卫生学环境医学研究所天津300050

目的:分别观察给予HO-1诱导剂和抑制剂对心肌相对缺血再灌注损伤和缺血预适应的影响,探讨HO-1在缺血预适应中的作用。方法:实验动物随机分为对照组(CN)、缺血/再灌损伤组(I/R)、缺血预适应+缺血/再灌损伤组(PC)、HO-1诱导剂+缺血/再灌... 详细信息

目的:分别观察给予HO-1诱导剂和抑制剂对心肌相对缺血再灌注损伤和缺血预适应的影响,探讨HO-1在缺血预适应中的作用。方法:实验动物随机分为对照组(CN)、缺血/再灌损伤组(I/R)、缺血预适应+缺血/再灌损伤组(PC)、HO-1诱导剂+缺血/再灌损伤组(HM)、HO-1抑制剂+缺血预适应组(ZP)。心肌缺血/再灌损伤采用相对缺血/再灌损伤模型,缺血预适应则为相对缺血5 min恢复5 min,反复2次。测定心功能、MDA及HO-1活性变化。结果:HM组HO-1活性升高,心功能恢复率均显著高于IR组(P1),MDA含量显著低于IR组(P1是缺血预适应释放的内源性活性物质之一。

关键词：血红素氧合酶-1 缺血预适应心肌缺血/再灌注

血红素氧合酶-1抗氯化汞急性肾损伤的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华劳动卫生职业病杂志 2006年第5期24卷 289-290页

作者：张英曾维诚陈容王顺蓉四川省泸州医学院病生理教研室 646000

目的探讨诱导血红素氧合酶-1(HO-1)表达在抗氯化汞急性肾损伤中的作用及其可能的机制。方法40只雄性Wistar大鼠随机分为HO-1诱导组(16只大鼠,腹腔注射血晶素20 mg／kg,24 h后再注射HgCl2 1 mg／kg)、单纯染汞组(16只大鼠,等量空白液+HgC... 详细信息

目的探讨诱导血红素氧合酶-1(HO-1)表达在抗氯化汞急性肾损伤中的作用及其可能的机制。方法40只雄性Wistar大鼠随机分为HO-1诱导组(16只大鼠,腹腔注射血晶素20 mg／kg,24 h后再注射HgCl2 1 mg／kg)、单纯染汞组(16只大鼠,等量空白液+HgCl2 1 mg／kg)、对照组(8只大鼠,等量空白液+等量生理盐水)。检测肾组织中HO-1蛋白表达及HO-1活力、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(TAOC)和血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)含量及肾组织形态学改变。结果(1)血晶素明显诱导了肾内HO-1表达及活力增加;(2)与对照组比较,单纯染汞组Cr、BUN、MDA升高,TAOC降低,组织学损伤严重,染汞前诱导HO-1表达则可逆转上述改变。结论肾内HO-1的诱导表达明显减轻了HgCl2所致的急性肾损伤,其作用机制与增强肾组织抗氧化能力有关。

关键词：血红素氧合酶-1 肾汞氧化应激大鼠

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

血红素氧合酶-1对肝癌作用的研究进展

生物物理学报 2012年第5期28卷 396-401页

作者：杨世英宋阳王翔钟莉重庆大学生物工程学院 "111计划"生物力学与组织修复工程基地(重庆大学)教育部生物流变学与技术重点实验室重庆400044

血红素氧合酶-1(heme oxygenase,HO-1)是细胞内的一种可诱导的保护性酶,具有抗氧化、抗炎、抗凋亡等作用。它在肿瘤细胞(如肝癌细胞)中的表达一般会增强,能影响肿瘤细胞的增殖等生物学行为。一方面,HO-1能促进肝癌细胞的生长和扩散,并... 详细信息

血红素氧合酶-1(heme oxygenase,HO-1)是细胞内的一种可诱导的保护性酶,具有抗氧化、抗炎、抗凋亡等作用。它在肿瘤细胞(如肝癌细胞)中的表达一般会增强,能影响肿瘤细胞的增殖等生物学行为。一方面,HO-1能促进肝癌细胞的生长和扩散,并通过减少氧化应激产生的氧自由基而对肝癌细胞发挥保护作用,使肝癌细胞对治疗产生抵抗性。另一方面,HO-1使肝移植治疗晚期肝癌中的免疫排斥降低,提高肝移植的成功率。本文简要概括了HO-1对肝癌发生进展的影响,并阐述了HO-1在肝移植方面的重要作用,这可能对抗肝癌药物的研发及肝癌的治疗具有一定的指导意义。

关键词：血红素氧合酶-1 肝癌氧自由基免疫抑制

血红素氧合酶-1对大鼠肝移植缺血再灌注损伤后缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华消化外科杂志 2017年第9期16卷 955-962页

作者：张治清展希黄汉飞段键张玉君王昆华曾仲昆明医科大学第一附属医院器官移植中心 650032 第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所重庆400038

目的探讨血红素氧合酶-1（HO-1）对大鼠肝移植缺血再灌注损伤后肝脏组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、VEGF的表达和肝内血管再生的影响。方法采用实验研究方法。240只大鼠按随机数字表法，分为3组，每组80只，空病毒组大鼠转染空病... 详细信息

目的探讨血红素氧合酶-1（HO-1）对大鼠肝移植缺血再灌注损伤后肝脏组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、VEGF的表达和肝内血管再生的影响。方法采用实验研究方法。240只大鼠按随机数字表法，分为3组，每组80只，空病毒组大鼠转染空病毒，诱导组大鼠转染HO-1过表达腺病毒，抑制组大鼠转染HO-1RNAi腺病毒。大鼠进行1：1配对，选取体质量较小者作为供体，体质量较大者作为受体，参照“二袖套”法大鼠肝移植模型行肝移植。供、受体大鼠均于手术前24h经尾静脉注射腺病毒。（1）术前腺病毒转染效率检测：注射腺病毒后12、24h，Westernblot检测3组大鼠肝脏组织中HO-1的表达量。（2）肝移植术后受体大鼠肝功能检测：肝移植术后1、3、7、14d检测3组受体大鼠肝功能指标（ALT、AST、ALP、GGT）。（3）肝移植术后受体大鼠肝组织病理形态学和损伤评分：术后1d和14d取受体大鼠肝脏组织制备成石蜡切片，HE染色观察，并采用Suzuki损伤评分标准评价。（4）Westernblot检测受体大鼠肝脏组织中HIF-1α、VEGF、HO-1相对蛋白表达量。（5）免疫荧光染色检测3组受体大鼠肝移植术后14d肝脏组织中血管性血友病因子（vWF）。计数小血管数量。正态分布的计量资料以孟±s表示，两组间比较采用独立样本的t检验，多组间比较采用单因素方差分析。两两比较采用LSD检验。结果（1）术前腺病毒转染效率检测：空病毒组、诱导组和抑制组大鼠术前注射腺病毒12h时肝脏组织中HO-1相对表达量分别为1．08±0．16、1．18±0．21、0．87±0．26，24h时分别为1．08±0．26、1．39±0．19、0．57±0．12，3组不同时间点比较，差异均有统计学意义（F=4．232，36．513，P〈O．05）。（2）肝移植术后受体大鼠肝功能情况：肝移植术后3d空病毒组、诱导组和抑制组大鼠ALT分别为（504±67）U／L、（438±47）U／L、（490±39）U／L，3组比较，差异有统计学意义（F=3．517，P〈0．05）。肝移植术后7d空病毒组、诱导组和抑制组大鼠A¨分别为（443±49）U／L、（382±49）U／L、（493±44）U／L，AST分别为（430±34）U／L、（372±50）U／L、（455±62）U／L，ALP分别为（455±38）U／L、（394±25）U／L、（470±72）U／L，3组上述指标比较，差异均有统计学意义（F=10．950，5．667，5．398，P〈0．05）。肝移植术后14d空病毒组、诱导组和抑制组大鼠ALT分别为（394±46）U／L、（283±47）U／L、（446±43）U／L，AST分别为（361±68）U／L、（288±60）U／L、（422±51）U／L，ALP分别为（417±17）U／L、（332±46）U／L、（423±63）U／L，GGT分另U为（4．5±1．1）U／L、（2．5±0．5）U／L、（4．3±1．3）U／L，3组上述指标比较，差异均有统计学意义（F=26．906，9．924，8．013，9．279，P〈0．05）。（3）肝移植术后受体大鼠肝脏组织病理形态学和损伤评分：肝移植术后1d空病毒组、诱导组和抑制组大鼠肝脏组织均见细胞肿胀，胞质疏松，汇管区见数量不等炎性细胞浸润。术后14d空病毒组大鼠见汇管区仍有少量炎症细胞浸润，肝细胞排列基本正常，但稍显肿胀。诱导组大鼠见肝细胞肿胀较前减少、肝小叶结构基本正常。抑制组大鼠见肝细胞出现小片状、局灶性坏死，汇管区大量炎症细胞浸润、胆管结构破坏。空病毒组、诱导组、抑制组受体大鼠肝移植术后1dSuzuki损伤评分分别为（6．7±1．7）分、（6．1±1．2）分、（7．6±1．3）分，3组比较，差异无统计学意义（F=2．257，P〉0．05）。术后14dSuzuki损伤评分分别为（4．0±0．8）分、（2．9±0．8）分、（5．1±1．4）分，3组比较，差异有统计学意义（F=9．776，P〈0．05）。（4）Westernblot检测结果显示：空病毒组、诱导组和抑制组受体大鼠肝移植术后1d肝脏组织中相关蛋白的相对表达量：HIF-1α分别为0．21±0．10、0．23±0．09、0．17±0．06，VEGF（43KD）分别为0．30±0．12、0．34±0．14、0．29±0．11，3组上述指标比较，差异均无统计学意义（F=0．902，0．410，P〉0．05）；VEGF（24KD）分别为1．21±0．25、2．13±0．40、0．91±0．22，HO-1分别为0．55±0．12、0．72±0．12、0．26±0．07，3组上述指标比较，差异均有统计学意义（F=35．158，39．082，P〈O．05）。空病毒组、诱导组和抑制

关键词：缺血再灌注损伤肝移植血红素氧合酶-1 血管再生