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血红密孔菌菌丝体多糖提取条件优化及活性研究

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中国食用菌 2022年第6期41卷 52-58页

作者：鲁铁李登朱园园苏正娴段鹏菲陈怀中刘宇谢朝晖河南城建学院生命科学与工程学院河南平顶山467036 暨南大学生命科学技术学院广东广州510632 鲁东大学农学院山东烟台264025

在试验中探究了超声辅助时间、热水浸提时间、提取温度、料液比4个因素在血红密孔菌菌丝体多糖提取中的最优条件,并评估其抗氧化活性和抑菌能力。在单因素试验的基础上采用响应面法对其多糖提取工艺进行多因素试验,结果显示其提取的最... 详细信息

在试验中探究了超声辅助时间、热水浸提时间、提取温度、料液比4个因素在血红密孔菌菌丝体多糖提取中的最优条件,并评估其抗氧化活性和抑菌能力。在单因素试验的基础上采用响应面法对其多糖提取工艺进行多因素试验,结果显示其提取的最优条件为超声辅助时间15 min、热水浸提时间59 min、提取温度79.7℃、料液比1∶30,此时血红密孔菌菌丝体多糖提取率为5.231%。且试验结果还表明血红密孔菌菌丝体多糖具有抗氧化活性和抑菌能力。该研究结果为进一步开发食用菌功能食品提供了基础性数据。

关键词：血红密孔菌工艺优化抗氧化性抑菌活性

血红密孔菌Pycnoporus sanguineus SYBC-L10产纤维二糖脱氢酶的发酵优化

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食品与生物技术学报 2018年第3期37卷 303-308页

作者：冯圆圆唐明月管政兵蔡宇杰廖祥儒江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122

研究了血红密孔菌Pycnoporus sanguineus SYBC-L10产纤维二糖脱氢酶的发酵优化。该酶是诱导酶,微晶纤维素是其最好的诱导底物。通过对发酵培养基中培养成分的优化,添加大分子碳源微晶纤维素和小分子碳源葡萄糖作为复合碳源,发酵优化后... 详细信息

研究了血红密孔菌Pycnoporus sanguineus SYBC-L10产纤维二糖脱氢酶的发酵优化。该酶是诱导酶,微晶纤维素是其最好的诱导底物。通过对发酵培养基中培养成分的优化,添加大分子碳源微晶纤维素和小分子碳源葡萄糖作为复合碳源,发酵优化后提高到78±5.94 U/L,是未优化前的2倍(39±4.78 U/L)。通过对氮源的优化,即有机氮源黄豆粉和无机氮源磷酸氢二铵的添加,使酶活达到700±35.78 U/L,比优化前提高了近17倍。而通过四因素四水平的碳氮源正交实验之后酶活达到1245±35.78 U/L,比优化前提高了近32倍。由此,确定了当微晶纤维素为7 g/L,葡萄糖5 g/L,黄豆粉6 g/L,磷酸氢二铵2 g/L时,其他不变,此时的产酶最高,达到1 245±35.78U/L。

关键词：纤维二糖脱氢酶发酵优化正交实验血红密孔菌

自带介质血红密孔菌NFZH-1的鉴定及其木质素降解特性(英文)

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林产化学与工业 2014年第5期34卷 1-7页

作者：冯年捷翟华敏王传槐南京林业大学轻工科学与工程学院江苏南京210037

菌株自带介质可提高其漆酶降解木质素能力,因此自带介质高产漆酶菌株的筛选、鉴定对漆酶的商业应用将起到促进作用。从南京山林地区分离出两株血红密孔菌NFZH-1和NFZH-2,并以杂色云芝为对照,研究了两株血红密孔菌发酵产漆酶和木质素降... 详细信息

菌株自带介质可提高其漆酶降解木质素能力,因此自带介质高产漆酶菌株的筛选、鉴定对漆酶的商业应用将起到促进作用。从南京山林地区分离出两株血红密孔菌NFZH-1和NFZH-2,并以杂色云芝为对照,研究了两株血红密孔菌发酵产漆酶和木质素降解特性。首先通过形态学特性鉴定了NFZH-1为自带介质血红密孔菌。其次以愈创木酚为反应底物,平板接种菌株,培养5天,NFZH-1颜色圈较菌丝圈大,且颜色最深;经10天固态发酵,NFZH-1所产漆酶酶活高达23 600 U/g,且未检测出木质素过氧化物酶(LiP)和锰过氧化物酶(MnP)。平板显色和固态发酵产酶结果表明自带介质血红密孔菌NFZH-1为漆酶高产菌株。麦草粉经菌株NFZH-1 30天降解,木质素降解率、综纤维素降解率分别达56.7%和36.6%,表明血红密孔菌NFZH-1为选择性高木质素降解活性菌株。

关键词：血红密孔菌漆酶介质脱木质素选择性

血红密孔菌Pycnoporus sanguineusSYBC-L12固态发酵小麦秸秆产漆酶及其对小麦秸秆的降解作用

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食品与生物技术学报 2015年第2期34卷 128-133页

作者：范晶晶马德丽席艳茹蔡宇杰孙啸管政兵廖祥儒江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122

以小麦秸秆为基本培养基质,漆酶活力为指标,对其培养条件--包括碳源、氮源、起始含水量和秸秆粒度进行了初步的优化,得到了较佳产酶条件。在此过程中测定了发酵后还原糖的质量分数,探究了白腐菌在小麦秸秆降解过程中的作用。另外,测定... 详细信息

以小麦秸秆为基本培养基质,漆酶活力为指标,对其培养条件--包括碳源、氮源、起始含水量和秸秆粒度进行了初步的优化,得到了较佳产酶条件。在此过程中测定了发酵后还原糖的质量分数,探究了白腐菌在小麦秸秆降解过程中的作用。另外,测定了添加氮源发酵后的麦草秸秆与未发酵麦草秸秆的组成,并进行了比较。

关键词：漆酶小麦秸秆固态发酵还原糖血红密孔菌

血红密孔菌(Pycnoporus sanguineus SYBC-L7)色素的提取及其理化性质

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食品与生物技术学报 2013年第11期32卷 1163-1168页

作者：骆守鹏范晶晶毛飞君蔡宇杰廖祥儒江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122 金坤生物工程有限公司江苏无锡214131

研究了一株血红密孔菌(Pycnoporus sanguineus SYBC-L7)固态发酵产色素的提取条件及色素的理化性质。结果表明:该菌株在以木屑为基质固态发酵时色素产量最高;以甲醇为提取液,在35℃水浴下40 min后可从发酵后的培养物中最大化提取该色素... 详细信息

研究了一株血红密孔菌(Pycnoporus sanguineus SYBC-L7)固态发酵产色素的提取条件及色素的理化性质。结果表明:该菌株在以木屑为基质固态发酵时色素产量最高;以甲醇为提取液,在35℃水浴下40 min后可从发酵后的培养物中最大化提取该色素;所得色素溶液呈黄色,在可见光区的最大吸收波长为430 nm,该色素的热稳定性和耐酸性较好,常用的氧化剂与还原剂对其影响不大。

关键词：色素固态发酵提取稳定性血红密孔菌

血红密孔菌Pycnoporus sanguineus SYBC-L12固态发酵水稻秸秆产漆酶及其对染料的脱色作用

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食品与生物技术学报 2013年第3期32卷 240-249页

作者：孙啸蔡宇杰廖祥儒张峰刘家扬袁小曼马德丽席艳茹江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122

血红密孔菌Pycnoporus sanguineus SYBC-L12能以水稻秸秆作为底物和支撑物进行固态发酵并且具有较高的产漆酶能力。以水稻秸秆为基本培养基,漆酶活力为指标,对产酶培养基和培养条件进行了单因素优化,优化后的漆酶活力约为优化前的10倍... 详细信息

血红密孔菌Pycnoporus sanguineus SYBC-L12能以水稻秸秆作为底物和支撑物进行固态发酵并且具有较高的产漆酶能力。以水稻秸秆为基本培养基,漆酶活力为指标,对产酶培养基和培养条件进行了单因素优化,优化后的漆酶活力约为优化前的10倍。所得漆酶在常温下对蒽醌类染料、三苯甲烷类染料、亚胺醌类染料具有较强的脱色作用,其混合物也可被漆酶大部分脱色,在较高温度下,漆酶可将偶氮类染料部分脱色。此外,科学试验使用的工业废水样品中常见金属离子大部分对脱色作用没有抑制。因此,漆酶作为一种环境友好型生物催化剂,对工业污水的处理具有广阔的应用前景。

关键词：漆酶水稻秸秆固态发酵合成染料脱色血红密孔菌 Pycnoporus sanguineus

血红密孔菌mk528漆酶对刚果红的脱色研究（英文）

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生物学杂志 2015年第3期32卷 30-36页

作者：章淑艳赵丛波郭林李伟河北省微生物研究所保定071051 中国科学院微生物研究所真菌学国家重点实验室北京100101

刚果红是一种重要的难降解偶氮型染料,研究利用血红密孔菌mk528菌株产生的漆酶粗品在添加介体条件下对其进行脱色降解实验。结果表明:介体阿魏酸对刚果红脱色有抑制作用,而紫脲酸、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)和... 详细信息

刚果红是一种重要的难降解偶氮型染料,研究利用血红密孔菌mk528菌株产生的漆酶粗品在添加介体条件下对其进行脱色降解实验。结果表明:介体阿魏酸对刚果红脱色有抑制作用,而紫脲酸、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)和香兰素对刚果红脱色有促进作用;其中氧化还原介体紫脲酸比ABTS和香兰素更有效。通过实验确定刚果红脱色介体系统温度为40℃,p H值5.5,介体紫脲酸用量为0.05 m M,漆酶用量为5 U/m L,作用时间6 h的最佳条件。刚果红脱色的漆酶-紫脲酸介体系统表明漆酶在偶氮染料脱色降解方面将会有潜在的应用价值。

关键词：刚果红脱色漆酶介体血红密孔菌

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血红密孔菌H1对蒽和芘降解机制的研究

血红密孔菌H1对蒽和芘降解机制的研究

作者：王焰浙江工业大学

学位级别：硕士

多环芳烃是由两个或两个以上苯环稠合而成的有机化合物,是一种环境中广泛存在的持久性有机污染物。目前研究最为广泛的多环芳烃降解微生物主要是白腐真菌。本研究以前期分离到的44#白腐真菌为供试菌株,经IST测序鉴定并命名为血红密孔菌... 详细信息

多环芳烃是由两个或两个以上苯环稠合而成的有机化合物,是一种环境中广泛存在的持久性有机污染物。目前研究最为广泛的多环芳烃降解微生物主要是白腐真菌。本研究以前期分离到的44#白腐真菌为供试菌株,经IST测序鉴定并命名为血红密孔菌H1,并分析了该菌的木质素降解酶的产酶特性,以蒽和芘为模式多环芳烃,研究血红密孔菌H1对蒽和芘的降解率、代谢方式和代谢途径,旨在深入认识白腐真菌对多环芳烃的代谢机制,为多环芳烃污染的白腐真菌修复奠定理论基础。主要研究结果如下：1.通过ITS法扩增得到ITS片段,测序后经NCBI序列比对,鉴定并命名为血红密孔菌H1。通过实验发现该真菌分泌的木质素降解酶系中只能检测到漆酶活性而不能检测到木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶的活性。在第十二天时漆酶活性最高为5.36 U/mL,添加2g/L的麸皮后漆酶活性达到15.60 U/mL,该漆酶最适pH约4.5。经SDS-PAGE测定漆酶单体分子量为43.2 KDa。2.在培养基中添加50 ppm的蒽和芘为唯一碳源,经过两周的摇瓶培养发现血红密孔菌H1能以蒽为唯一碳源进行生长而不能利用芘。添加葡萄糖和麸皮进行共代谢后蒽和芘的降解率显著升高,蒽降解率为71.3%,芘降解率为30.2%。通过GC-MS检测发现蒽的主要降解产物是9,10-蒽醌,芘的降解产物可能是4,5-二氢芘和4,5-二甲基菲。3.通过摇瓶培养血红密孔菌H1,离心获得含有漆酶的胞外酶液和含有细胞色素P450的胞内组分,加入含有蒽和芘的反应体系,通过HPLC测定蒽和芘的降解研究各组分的作用。发现蒽的降解是由胞外的漆酶起主要作用,芘的降解主要是通过胞内的细胞色素P450。通过添加漆酶和细胞色素P450抑制剂的实验进一步证明了前面的结论。总的来说,血红密孔菌H1对蒽和芘的降解不是由某一类单独的酶或反应一步完成的,而是通过胞外酶和胞内组分协调完成的。

关键词：血红密孔菌蒽芘降解降解机制

血红密孔菌对磷酸三苯酯的降解机制及其降解产物毒性研究

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血红密孔菌对磷酸三苯酯的降解机制及其降解产物毒性研究

作者：周家华桂林理工大学

学位级别：硕士

磷酸三苯酯（Triphenyl phosphate,TPHP）是一种典型的芳香族有机磷阻燃剂,广泛存在于各种环境介质中并对生物体具有多种毒性效应。白腐真菌能有效降解多种结构各异的芳香族有机污染物,在芳香族有机污染物的微生物修复领域具有广阔的应... 详细信息

磷酸三苯酯（Triphenyl phosphate,TPHP）是一种典型的芳香族有机磷阻燃剂,广泛存在于各种环境介质中并对生物体具有多种毒性效应。白腐真菌能有效降解多种结构各异的芳香族有机污染物,在芳香族有机污染物的微生物修复领域具有广阔的应用前景,然而,白腐真菌对TPHP的降解特性及机理还尚不明确。本研究以TPHP作为目标污染物,以血红密孔菌（Pycnoporus sanguineus）作为白腐真菌的代表菌株进行实验,探讨了P.sanguineus在TPHP生物降解中的降解特性、降解机理及其生物修复的可行性。本研究的主要成果如下:（1）P.sanguineus降解TPHP的最佳实验条件为:P.sanguineus孢子液投加量为5%（V/V）,体系初始pH值为4-6,葡萄糖的投加浓度为5 g/L,污染物TPHP浓度为5 mg/L。（2）P.sanguineus降解TPHP的过程中共检测出7种TPHP降解产物,根据降解产物推测出TPHP的降解途径主要涉及氧化裂解、甲基化和羟基化。（3）TPHP以浓度依赖的方式诱导E.coli中ROS的累积和细胞的凋亡,并且TPHP经过P.sanguineus生物处理后表现出更低的细胞毒性。（4）细胞色素P450酶及其辅助蛋白以及芳香族化合物双加氧酶表达水平的上调表明它们可能参与了TPHP及其降解产物的羟基化过程。葡萄糖-甲醇-胆碱氧化还原酶、铜自由基氧化酶和纤维二糖脱氢酶以及Class II过氧化物酶表达水平的上调表明它们在TPHP的氧化分解中起到了重要作用。甲基转移酶类型11和S-腺苷-L-蛋氨酸依赖性甲基转移酶表达水平的上调表明它们可能参与了TPHP及其降解产物的甲基化过程。MFS转运蛋白的表达上调说明它们在TPHP及其降解产物的跨膜转运中可能发挥了一定的作用。此外羧化酯酶、谷胱甘肽S-转移酶也被激活可能用以抵御TPHP引起的毒性损伤。（5）P.sanguineus能够抵抗来自原生真菌菌群的竞争且成功的在水-沉积物体系中定殖,并与鞘氨醇单胞菌、伯克霍尔德氏菌、分枝杆菌和甲基杆菌这些原生细菌菌群协同作用,有效促进水-沉积物体系中TPHP的生物降解。苯酚好氧降解、β-酮己二酸酯降解以及芳香族化合物间位裂解等与芳香族化合物降解有关的代谢途径在生物强化组中显著富集,芳基酯酶、磷酸二酯酶Ⅰ、碱性磷酸酶、邻苯二酚1,2-双加氧酶和羟基喹啉1,2-双加氧酶等与芳香族磷酸酯降解有关的功能基因也在生物强化过程中出现明显富集。

关键词：磷酸三苯酯血红密孔菌毒性评估生物降解分子机制