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作者：王学彬华中科技大学

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第一部分糖尿病大鼠肾脏SGK1与CTGF的表达及其相关性研究【目的】检测血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶1(SGK1)及结缔组织生长因子(CTGF)等指标在糖尿病大鼠肾脏中的表达,探讨SGK1介导的信号传导通路在糖尿病大鼠肾脏纤维化中的作用。【... 详细信息

第一部分糖尿病大鼠肾脏SGK1与CTGF的表达及其相关性研究【目的】检测血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶1(SGK1)及结缔组织生长因子(CTGF)等指标在糖尿病大鼠肾脏中的表达,探讨SGK1介导的信号传导通路在糖尿病大鼠肾脏纤维化中的作用。【方法】雄性Wistar大鼠64只随机分为糖尿病模型组(DN)与正常对照组(NC),链脲佐菌素制作成糖尿病大鼠模型,于0、2、4、8周末分别检测各组血糖、体重、肾重/体重、24小时尿蛋白、内生肌酐清除率,免疫组化方法检测转化生长因子β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)、CTGF及SGK1的表达,RT-PCR方法检测SGK1 mRNA及CTGF mRNA的表达水平,Western Blot检测SGK1蛋白的表达变化。【结果】糖尿病大鼠内生肌酐清除率、24小时尿蛋白分别在4周、8周时明显增加(P蛋白、内生肌酐清除率,免疫组化方法检测TGF-β1及FN,RT-PCR方法检测SGK1mRNA及CTGFmRNA的表达水平,Western Blot检测SGK1的蛋白表达变化。【结果】与糖尿病组比较,氟伐他汀组肾重/体重、24小时尿蛋白、内生肌酐清除率明显下降,而体重明显上升(P皮质SGK1及CTGF mRNA的表达水平较糖尿病组明显下调,免疫组化结果显示TGF-β1及FN均有不同程度下调(P<0.01)。【结论】氟伐他汀对SGK1的表达有抑制作用,并可能通过抑制其表达而减轻和延缓糖尿病肾病的发展。

关键词：血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶结缔组织生长因子相关性分析糖尿病肾病氟伐他汀

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小鼠各期卵母细胞中SGK3 mRNA和蛋白的动态表达及其亚细胞定位

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吉林大学学报（医学版） 2023年第5期49卷 1210-1216页

作者：何文宁冯少青庞海垚孟峻内蒙古医科大学临床检验诊断教研室内蒙古呼和浩特010059 内蒙古医科大学附属医院检验科内蒙古呼和浩特010050

目的:检测小鼠各期卵母细胞中血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶3(SGK3)mRNA和蛋白的表达及其亚细胞定位,为阐明SGK3对小鼠卵母细胞周期变化的调控作用机制提供依据。方法:通过超排卵技术收集小鼠生发泡(GV)期、生发泡破裂(GVBD)期、第1次... 详细信息

目的:检测小鼠各期卵母细胞中血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶3(SGK3)mRNA和蛋白的表达及其亚细胞定位,为阐明SGK3对小鼠卵母细胞周期变化的调控作用机制提供依据。方法:通过超排卵技术收集小鼠生发泡(GV)期、生发泡破裂(GVBD)期、第1次减数分裂(MⅠ)期卵母细胞和第2次减数分裂(MⅡ)期卵母细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测各期小鼠卵母细胞中SGK3 mRNA和蛋白表达水平,收集GV、GVBD和MⅠ期卵母细胞后采用Western blotting法检测小鼠各期卵母细胞中Cdc25B-Ser30的磷酸化表达情况,免疫荧光法观察小鼠各期卵母细胞中SGK3亚细胞定位情况。结果:在小鼠各期卵母细胞中均有SGK3mRNA和蛋白表达。与GV期比较,GVBD和MⅡ期卵母细胞中SGK3 mRNA和蛋白表达水平升高(P蛋白表达水平降低(P蛋白表达水平升高(P蛋白表达水平升高(P<0.01)。Cdc25B-Ser30在GV期被去磷酸化,在GVBD和MⅠ期被磷酸化。小鼠的GV期卵母细胞中SGK3定位于细胞核膜,在GVBD期前进入细胞核,在GVBD期定位于细胞核,MⅠ期则分布于整个细胞,在MⅡ期则由细胞浆再次进入细胞核。结论:小鼠各期卵母细胞中SGK3均呈动态表达,SGK3存在核浆穿梭,SGK3定位的动态变化可能参与了细胞周期B的激活。

关键词：血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶卵母细胞减数分裂动态表达亚细胞定位

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SGK3蛋白激酶在小鼠卵母细胞的表达和定位研究

SGK3蛋白激酶在小鼠卵母细胞的表达和定位研究

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作者：冯少青内蒙古医科大学

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目的血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶(SGK)是属于AGC(即PKA/PKG/PKC)激酶家族的一个Ser/Thr双重特异性蛋白激酶。SGK与蛋白激酶B(AKT/PKB)等第二信使蛋白具有极高同源性,且均受磷脂酰肌醇-3-激酶/磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PI3K/PDK1)信号... 详细信息

目的血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶(SGK)是属于AGC(即PKA/PKG/PKC)激酶家族的一个Ser/Thr双重特异性蛋白激酶。SGK与蛋白激酶B(AKT/PKB)等第二信使蛋白具有极高同源性,且均受磷脂酰肌醇-3-激酶/磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PI3K/PDK1)信号途径的调控,在真核生物体内广泛参与基因快速转录调节和细胞内定位调节。SGK可以介导DNA合成、葡萄糖跨膜转运、细胞增殖和细胞骨架重排列等多种生理过程,并通过其在胞浆、胞核之间的穿梭来调控细胞的增殖、分化或凋亡。目前已发现哺乳动物的SGK有SGK1、SGK2和SGK3三种亚型。最近越来越多的研究揭示了SGK3在人类肿瘤中的作用,如调控肿瘤生长、存活、转移、影响肿瘤干细胞(CSCs)的增殖以及参与肿瘤的治疗抵抗等,也证明SGK3与多种疾病的发生发展有关。海星卵母细胞的研究揭示了SGK能直接磷酸化细胞分裂周期因子25(CDC25)和髓磷脂转录因子1(MYT1)并触发Cyclin B-CDK1的激活,进而导致减数分裂G2/M期的转换。小鼠卵母细胞作为哺乳动物细胞周期研究的理想模型之一,其发育的具体机制尚未研究透彻,其中可能涉及SGK3蛋白激酶对细胞周期进程的调控。然而SGK3在小鼠卵母细胞中是否表达及其对卵母细胞第一次减数分裂的恢复是否具有调控作用,到目前为止国内外均未见报道。因此为了验证SGK3在小鼠卵母细胞第一次减数分裂恢复中的作用和影响,本研究以小鼠卵母细胞为研究对象,应用Real-time PCR、Western blotting和间接免疫荧光技术,检测SGK3的表达和亚细胞定位,为研究SGK3参与调控小鼠卵母细胞第一次减数分裂提供实验依据,并为今后进一步研究小鼠卵母细胞早期发育机理奠定了坚实的基础。方法:1.通过小鼠超排卵技术分别收集GV、GVBD、MⅠ和MⅡ四个时期的卵母细胞。2.利用Real-time PCR技术检测小鼠卵母细胞SGK1-3四个时期m RNA的相对表达量。3.利用Western-blotting法检测小鼠卵母细胞SGK1-3四个时期蛋白的表达水平。4.通过间接免疫荧光定位技术观察SGK3在小鼠卵母细胞GV、GVBD、MⅠ、MⅡ四个期的迁移和共定位情况。结果:***-time PCR实验显示:SGK1-3 m RNA在小鼠卵母细胞GV、GVBD、MⅠ和MⅡ四个时相中均有表达,但相对表达水平有所不同。SGK1和SGK2主要在GV期表达,GV期至MⅡ期呈逐渐下降的趋势,在同一期SGK1的表达水平明显高于SGK2,而SGK3在GVBD期和MⅡ期的表达水平明显高于GV和MI期。***-blotting结果显示:SGK1-3在小鼠卵母细胞GV、GVBD、MⅠ和MⅡ四个时相中的表达趋势与其各自m RNA的表达趋势基本一致。SGK1和SGK2的表达量由GV期到MⅡ期呈逐渐下降的趋势,而SGK3的表达量由GV期至GVBD期明显增加,而MⅠ期显著减少,到MⅡ期又升高,并达到峰值。3.细胞免疫荧光定位结果显示:SGK3偶联的红色荧光信号在小鼠卵母细胞的GV期定位于核膜,而在GVBD前入核,在GVBD期定位于细胞核,MⅠ期则分布于整个细胞,随着细胞周期的进程,SGK3(红色荧光信号)在MⅡ期则由胞浆再次进入细胞核。结论1.在小鼠卵母细胞GV、GVBD、MⅠ和MⅡ四个时相中,SGK1-3均有表达且表达水平各不相同。SGK1和SGK2主要在GV期表达,但是SGK2的表达量相对较少,而SGK3主要在GVBD期和MⅡ期表达。***3蛋白激酶在四个时相均有表达,表达水平由GV期至GVBD期升高,MⅠ期明显减少,而在MⅡ期又陡然升高,并达到峰值。***3在小鼠卵母细胞的GV期定位于核膜,而在GVBD前入核,GVBD期定位于细胞核,MⅠ期分布于整个细胞,在MⅡ期由胞浆进入细胞核。SGK3的这种核浆穿梭可能参与了Cyclin B-Cdc2的激活。

关键词：血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶小鼠卵母细胞减数分裂表达定位

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SGK1功能的研究进展及临床意义

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医学综述 2020年第3期26卷 427-432页

作者：孟琴琴郭美亮袁定芬邓辉上海交通大学附属第六人民医院皮肤科

血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶(SGKs)是一种AGC家族的丝氨酸苏氨酸蛋白激酶,其包括位于不同染色体的三个基因编码的蛋白激酶(SGK1、SGK2、SGK3)。SGKs主要由磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)激活,通过磷酸化下游的靶蛋白调控细胞的生长、神经元... 详细信息

血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶(SGKs)是一种AGC家族的丝氨酸苏氨酸蛋白激酶,其包括位于不同染色体的三个基因编码的蛋白激酶(SGK1、SGK2、SGK3)。SGKs主要由磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)激活,通过磷酸化下游的靶蛋白调控细胞的生长、神经元兴奋性、肾钠排泄等。SGK1作为PI3K通路主要的调节靶点,不仅参与离子转运、T细胞活化、炎症抑制、脂肪细胞分化,还在心肌细胞纤维化、血管钙化、炎症性肠病、自噬抑制、结直肠癌及多形胶质母细胞瘤等多种临床生理和病理过程中起重要作用。

关键词：溃疡性结肠炎肿瘤血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶磷脂酰肌醇-3-激酶

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