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新旧版国家标准《高致病性禽流感诊断技术》血凝和血凝抑制试验内容比较

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中国动物检疫 2021年第8期38卷 34-37页

作者：张智瑜袁凯徐秀荣王慧敏兰邹然淄博市动物疫病预防与控制中心山东淄博255000 山东省动物疫病预防与控制中心山东济南250100

为进一步做好高致病性禽流感强制免疫抗体效价评估工作,国家市场监督管理总局和国家标准化管理委员会于2020年12月14日发布实施了新版《高致病性禽流感诊断技术》(GB/T 18936—2020)。新版标准中重新规定了高致病性禽流感血凝和血凝抑... 详细信息

为进一步做好高致病性禽流感强制免疫抗体效价评估工作,国家市场监督管理总局和国家标准化管理委员会于2020年12月14日发布实施了新版《高致病性禽流感诊断技术》(GB/T 18936—2020)。新版标准中重新规定了高致病性禽流感血凝和血凝抑制试验的技术要求,与旧版本比较内容有所变动。为尽快理解新版标准要求,熟练掌握操作要领,对新、旧版标准中血凝和血凝抑制试验进行了比较。经对比分析发现,新版标准增加了对血凝抑制试验4 HAU抗原配制的验证,鸭、鹅等水禽血清的预处理内容,并对其结果判定予以补充。新版标准在操作步骤上更为精准详细,在结果判定上更加科学准确,弥补了旧版本存在的诸多不足。本文为广大兽医实验室检测人员更好地理解新、旧标准差异以及新版标准优点,从而提高试验结果准确性提供了参考。

关键词：《高致病性禽流感诊断技术》新旧标准血凝和血凝抑制试验比较分析

盐津乌骨鸡新城疫病毒和禽流感病毒母源抗体的检测与分析

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养禽与禽病防治 2024年第5期 15-19页

作者：木卫武杨凤林和凤平李蕾杨亮宇张立梅向斌云南农业大学动物医学院昆明650201 云南农业大学家禽疾病防控研究中心昆明650201

为了探究云南省盐津乌骨鸡维鸡体内新城疫病毒和禽流感病毒(H5Re-13、H5Re-14、H7和H9型)母源抗体的变化规律,分别于1、7、14、21和28日龄随机采集20只鸡的血液样本,通过血凝抑制(HI)方法检测维鸡母源抗体。结果显示,1日龄H9亚型禽流感... 详细信息

为了探究云南省盐津乌骨鸡维鸡体内新城疫病毒和禽流感病毒(H5Re-13、H5Re-14、H7和H9型)母源抗体的变化规律,分别于1、7、14、21和28日龄随机采集20只鸡的血液样本,通过血凝抑制(HI)方法检测维鸡母源抗体。结果显示,1日龄H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒母源抗体水最高,分别为5.55logz和7.25log2,合格率为90%以上;7日龄新城疫病毒、H9、H7、H5亚型(Re-14)禽流感病毒以及14日龄体内的H9亚型禽流感病毒母源抗体平均效价均在5log2以上,合格率在90%以上;7日龄H5亚型(Re-13)禽流感病毒、14日龄新城疫病毒以及H7、H5亚型(Re-14)禽流感病毒、21日龄H9亚型禽流感病毒平均母源抗体水平下降到抗体保护水平以下。以上结果表明,H9亚型禽流感病毒母源抗体在21日龄下降至抗体保护水平以下;新城疫病毒、H7、H5(Re-14)亚型禽流感病毒母源抗体在14日龄下降至抗体保护水平以下;维鸡H5亚型(Re-13)禽流感病毒母源抗体在7日龄下降至抗体保护水平以下。因此,建议H5和H7亚型禽流感二价灭活苗在7~10日龄进行首免,H9亚型禽流感和新城疫的二价灭活苗在14~15日龄进行首免。本研究中所得盐津乌骨鸡母源抗体水平消长规律的变化,为确定盐津乌骨鸡维鸡新城疫和禽流感首免日龄提供了科学依据。

关键词：新城疫禽流感血凝和血凝抑制试验母源抗体水平平雏鸡

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血凝和血凝抑制试验影响因素及解决方法

河南畜牧兽医（综合版） 2020年第8期41卷 43-43页

作者：胡秋霞长葛市动物疫病预防控制中心河南长葛461500

1血凝试验中常见的问题1.1抗原的配制与标定如果用冻干血凝抗原做试验时,要按照瓶签要求的量加人注射用水或灭菌用纯化水(有时加入0.9%生理盐水),摇匀静置备用。在反应板上同时做3份标定抗原效价,严格按照操作规程进行操作,在倍比稀释... 详细信息

1血凝试验中常见的问题1.1抗原的配制与标定如果用冻干血凝抗原做试验时,要按照瓶签要求的量加人注射用水或灭菌用纯化水(有时加入0.9%生理盐水),摇匀静置备用。在反应板上同时做3份标定抗原效价,严格按照操作规程进行操作,在倍比稀释过程中避免产气溶胶,最好是每孔稀释次数一致,加入1%红细胞悬液时,边加边摇匀,然后放到微量振荡器上混合1 min,避免液体溅出。

关键词：红细胞悬液血凝试验反应板抗原效价血凝抗原注射用水血凝和血凝抑制试验倍比稀释

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影响禽流感血凝和血凝抑制试验的因素分析

中国畜牧兽医文摘 2016年第12期32卷 55-55,168页

作者：丰春燕相城区动物卫生监督所江苏苏州215131

禽流感血凝和血凝抑制试验是禽流感疫病监测和免疫抗体检测中最为常用的方法,随着动物疫病防控形势的需要,禽流感疫病的日常监测、集中监测和免疫抗体检测工作量的逐年增加,禽流感血凝和血凝抑制试验成为当前基层动物疫病预防控制中心... 详细信息

禽流感血凝和血凝抑制试验是禽流感疫病监测和免疫抗体检测中最为常用的方法,随着动物疫病防控形势的需要,禽流感疫病的日常监测、集中监测和免疫抗体检测工作量的逐年增加,禽流感血凝和血凝抑制试验成为当前基层动物疫病预防控制中心实验室检测禽流感最常用的方法。但是由于试验中不规范的操作和细节方面的不注意,导致出现了不正确的检测结果,影响了试验的准确性。

关键词：禽流感血凝和血凝抑制试验影响因素对策

2019年-2021年长丰县高致病性禽流感H5和H7免疫抗体监测与分析

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2019年-2021年长丰县高致病性禽流感H5和H7免疫抗体监测与分析

作者：张多敏安徽农业大学

学位级别：硕士

高致病性禽流感是由正黏病毒科流感病毒属引起家禽烈性的传染病,是国家强制免疫的动物传染病,发病率高、病死率高。近年来,长丰县养禽业发展迅速,年出栏家禽达3600万羽以上,分布14个乡镇,养殖模式有公司+农户、规模场、散养户等多种形... 详细信息

高致病性禽流感是由正黏病毒科流感病毒属引起家禽烈性的传染病,是国家强制免疫的动物传染病,发病率高、病死率高。近年来,长丰县养禽业发展迅速,年出栏家禽达3600万羽以上,分布14个乡镇,养殖模式有公司+农户、规模场、散养户等多种形式。检测H5、H7亚型禽流感流抗体水平,为了解掌握禽流感的免疫状况,评估本县高致病性禽流感的免疫防控提供科学依据,科学指导免疫方案制订及补免工作。在2019-2021年间,对14个乡镇、547个公司+农户、34个种禽场和蛋鸡场、44个商品禽规模场、50家肉禽散养户,按不同时间、品种、季节、区域共采集血清25130份,应用血凝和血凝抑制试验(HA、HI)检测HPAI的H5、H7抗体,根据GB/T18936-2003高致病性禽流感诊断技术中抗体效价标准进行判定。结果HI抗体效价≥2,判定个体合格;群体免疫抗体合格率≥70%,判为群体合格。检测结果表明,在25130份血清样品中,H5、H7抗体滴度大于等于2的有20104份,抗体滴度小于2的有5026份,抗体平均合格率达到80%(20104/25130);其中2019年H5、H7亚型抗体合格率85%(4505/5300)和84%(4452/5300)、2020年H5、H7亚型抗体合格率84.4%(4895/5800)和82%(4756/5800)、2021年H5、H7亚型抗体合格率87%(4872/5600)和85.9%(4810/5600);14个乡镇禽流感抗体水平参差不齐,H5、H7亚型抗体平均阳性率分别为76.4%(1612/2110)、74.8%(1578/2110),H5、H7抗体合格率最高100%(160/160),最低的分别为40.0%(72/180)、39%(70/180);规模场H5、H7亚型抗体合格率分别为79.1%(1685/2130)、70.2%(1495/2130),散养户H5、H7亚型抗体合格率分别为62.0%(1308/2110)、41.5%(876/2110);春季H7亚型抗体合格率达80.1%(9948/12420),秋季抗体合格率达82.5%(10486/12710);商品肉禽场H7亚型抗体合格率达62.4%(1329/2130),种蛋禽场H7亚型抗体合格率87.5%(3666/4190)。从结果分析,禽流感总体抗体水≥70%国家标准水平,全县免疫工作较扎实有效,但散养户抗体水平低于规模场,秋季抗体水平高于春季抗体,H7亚型免疫抗体合格率参差不齐,抗体水平合格率低于H5。综上所述,监测禽流感免疫抗体对指导科学免疫接种、预防H5、H7亚型的流行和其他亚型的侵入提供基础数据支撑。需要强化培训宣传力度,切实提升散养户免疫防控意识,确保不漏一村一户一针,保障禽流感抗体水平常年位于较高水平,最大限度保障全县范围内不会出现区域性严重动物疫病和公共卫生安全事件。

关键词：高致病性禽流感血凝和血凝抑制试验 H5、H7抗原血清学监测抗体合格率

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血凝与血凝抑制试验的操作细节浅析

畜牧业环境 2020年第24期 84-84页

作者：高峰刘宇葛兴吉林省松原市宁江区动物疫病预防控制中心吉林松原138000 吉林省松原市宁江区大洼镇综合服务中心吉林松原138000

血凝和血凝抑制试验原理是病毒抗原中的血凝素能凝集动物红细胞,形成血凝现象;血凝和血凝抑制试验操作简便、结果快速准确、试验仪器设备少等特点,使其成为区县级兽医实验室检测禽流感与鸡新城疫免疫效果最常用的检测方法之一。笔者结... 详细信息

血凝和血凝抑制试验原理是病毒抗原中的血凝素能凝集动物红细胞,形成血凝现象;血凝和血凝抑制试验操作简便、结果快速准确、试验仪器设备少等特点,使其成为区县级兽医实验室检测禽流感与鸡新城疫免疫效果最常用的检测方法之一。笔者结合自身参加实验室检测工作的实践经验,从对其需要注意的细节进行了归纳分析。

关键词：血凝和血凝抑制试验操作细节经验

野生动物园野禽禽流感、新城疫抗体水平检测及初步分析

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野生动物园野禽禽流感、新城疫抗体水平检测及初步分析

作者：闫梦杨安徽农业大学

学位级别：硕士

目前,国内外研究人员对于野生动物疫病展开的研究较少。野鸟是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)、禽流感病毒(Avian Influenza virus,AIV)的自然宿主。也是潜在的NDV和AIV病原携带者和传染源。为做好野生动物园鸟类的疫病防控,... 详细信息

目前,国内外研究人员对于野生动物疫病展开的研究较少。野鸟是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)、禽流感病毒(Avian Influenza virus,AIV)的自然宿主。也是潜在的NDV和AIV病原携带者和传染源。为做好野生动物园鸟类的疫病防控,了解目前野生动物园鸟类的免疫状况,开展了本次研究。应用血凝和血凝抑制试验对合肥野生动物园和郑州市动物园的鸟类在疫苗免疫前后抗体水平进行了检测。选取合肥野生动物园和郑州市动物园25种野生禽类共207只。其中有孔雀35只、白鹇20只、马鸡8只、白腹锦鸡5只、红腹锦鸡9只、珠鸡2只、火鸡3只、环颈雉6只、白冠长尾雉9只、红腹角雉2只、白鹤17只、白枕鹤13只、丹顶鹤10只、灰冠鹤14只、白鹳17只、火烈鸟23只、赤麻鸭2只、鸿雁2只、天鹅4只、鸳鸯4只、斑头雁2只。2019年秋防期间对所有野禽进行两种疾病的疫苗接种。用血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验方法分别在免疫接种前、免疫接种后30d、60d对试验动物进行H5、H7和H9亚型禽流感和新城疫抗体检测。免疫前野生禽类H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为6.4log2、5.9log2、6.6log2和5.6log2。雉科野禽免疫前H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为6.2log2、6.0log2、5.9log2和4.8log2,鹤科野禽免疫前H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为7.5log2、5.8log2、7.8log2和7.1log2,鹳形目野禽免疫前H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为5.6log2、6.0log2、6.7log2和5.9log2,鸭科野禽免疫前H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为6.2log2、5.7log2、6.6log2和4.9log2。10只野禽H5亚型禽流感抗体滴度(27)4log2,4只野禽H7亚型禽流感抗体滴度(27)4log2,5只野禽H9亚型禽流感抗体滴度(27)4log2,33只野禽新城疫抗体滴度(27)4log2。免疫接种后30天野生禽类H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为10.1log2、10.0log2、10.0log2和9.6log2,雉科野禽免疫接种后30天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为10.0log2、10.0log2、9.9log2和9.6log2,鹤科野禽免疫接种后30天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为10.3log2、10.2log2、10.3log2和9.9log2。鹳形目野禽免疫接种后30天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为10.0log2、9.8log2、10.1log2和9.1log2。鸭科野禽免疫接种后30天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为9.7log2、9.7log2、9.9log2和9.4log2。免疫接种后60天野生禽类H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为8.9log2、9.0log2、9.1log2和7.7log2,雉科野禽免疫接种后60天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为8.7log2、9.0log、8.9log2和7.4log2,鹤科野禽免疫接种后60天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为9.3log2、9.3log、9.6log2和8.7log2,鹳形目野禽免疫接种后60天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为8.7log2、8.5log2、9.0log2和6.8log2,鸭科野禽免疫接种后60天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为9.1log2、8.9log2、9.3log2和7.8log2。结果表明免疫前不同种野禽间禽流感、新城疫抗体水平差异较大,同种野禽个体间抗体水平差异较大。免疫接种后30d和60d抗体滴度高,没有出现应激反应。野禽使用家禽疫苗进行免疫是安全、有效的。相同疫苗和免疫程序对不同野禽的免疫效果不同,需要针对野禽的免疫抗体情况制定切实可行且安全有效的免疫程序。

关键词：野生动物园新城疫禽流感抗体检测血凝和血凝抑制试验

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藏药绿萝花水提物对小鼠免疫功能的影响

西南民族大学学报（自然科学版） 2015年第3期41卷 305-309页

作者：杨荣刘群康莲莲王赛韩金潭西南民族大学生命科学与技术学院四川成都610041

探讨藏药绿萝花对机体免疫功能的影响,为临床合理用药和进一步开发利用提供科学依据.本研究以L9(34)正交设计试验所获得的绿萝花水萃取干膏制剂为研究材料,以N2Hmice小白鼠为研究对象,以Con A诱导小鼠淋巴细胞转化试验(CCK-8法)、血凝... 详细信息

探讨藏药绿萝花对机体免疫功能的影响,为临床合理用药和进一步开发利用提供科学依据.本研究以L9(34)正交设计试验所获得的绿萝花水萃取干膏制剂为研究材料,以N2Hmice小白鼠为研究对象,以Con A诱导小鼠淋巴细胞转化试验(CCK-8法)、血凝和血凝抑制试验及巨噬细胞吞噬试验为研究方法,以(SI)刺激指数、(HI)新城疫抗体效价、吞噬百分率和吞噬指数为检测指标,探讨不同剂量绿萝对机体免疫功能的影响.实验结果显示低剂量绿萝花能够增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数,其增强作用极显著优于空白组;低、中剂量绿萝花组具有促进小鼠血清ND抗体产生的作用,作用显著优于空白组;低、中剂量绿萝花组具有促进小鼠外周血淋巴细胞增殖的作用,作用显著优于空白组.研究结果表明低(1.08g/次/d,7d)、中(2.16g/次/d,7d)剂量绿萝花对小鼠免疫功能具有增强作用.

关键词：藏药绿萝花淋巴细胞转化试验血凝和血凝抑制试验巨噬细胞吞噬试验

甘肃省甘南州碌曲县蕨麻猪流感抗体的血清学调查

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国外畜牧学（猪与禽） 2017年第9期37卷 40-41页

作者：陈桃红周峰甘肃省碌曲县动物疫病预防控制中心甘肃碌曲747200 甘肃省动物疫病预防控制中心甘肃兰州730046

用血凝和血凝抑制试验对甘肃省甘南州碌曲县400份猪血清进行了猪流感H3、H5和H9亚型抗体检测。检出H3亚型阳性19份,阳性率4.78%。检出H5亚型1份,阳性率0.25%。检出H9亚型4份,阳性率1%。

关键词：碌曲猪流感抗体血凝和血凝抑制试验