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人树突状细胞与肝癌细胞系HLE融合细胞的构建

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中华肿瘤杂志 2005年第8期27卷 465-467页

作者：关心彭吉润冷希圣北京大学人民医院肝胆外科中心

目的构建人源树突状细胞(DC)与肝癌细胞系HLE的融合细胞。方法含15%FCS的RPMI1640培养HLE细胞,用GMCSF和IL4培养成人外周血单核细胞7d,并用TNFα和PGE2促成熟2d后获得成熟DC;用荧光染料PKH67GL(绿色荧光)和PKH26GL(红色荧光)分别标记DC... 详细信息

目的构建人源树突状细胞(DC)与肝癌细胞系HLE的融合细胞。方法含15%FCS的RPMI1640培养HLE细胞,用GMCSF和IL4培养成人外周血单核细胞7d,并用TNFα和PGE2促成熟2d后获得成熟DC;用荧光染料PKH67GL(绿色荧光)和PKH26GL(红色荧光)分别标记DC和HLE细胞,以50%聚乙二醇和10%二甲基亚砜为融合剂,构建可供流式细胞仪快速筛选的融合细胞。结果成功构建具有红、绿双色荧光的人源DC与HLE的融合细胞,融合率为16.8%。结论利用PKH67GL和PKH26GL为标记,可获得便于快速识别和筛选的DC与肝癌细胞的融合细胞,为使用融合DC疫苗治疗肝癌奠定了基础。

关键词：人树突状细胞肝癌细胞系HLE细胞融合细胞 HLE细胞肝癌细胞系人外周血单核细胞荧光染料快速筛选 TNF-α 二甲基亚砜

枸杞子、淫羊藿对衰老-年轻2BS融合细胞DNA合成的影响

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中国中西医结合杂志 2003年第12期23卷 926-928页

作者：吴白燕邹俊华孟书聪郑振北京大学医学部细胞生物学与遗传学系北京100083 复旦大学华山医院

目的 :研究枸杞子、淫羊藿水提液对衰老 -年轻 2BS融合细胞DNA合成的影响。方法 :以人胚肺二倍体成纤维细胞国内标准株 2BS为衰老模型 ,用细胞脱核和细胞融合技术 ,观察枸杞子、淫羊藿对衰老-年轻 2BS融合细胞的DNA合成的影响。结果 :2B... 详细信息

目的 :研究枸杞子、淫羊藿水提液对衰老 -年轻 2BS融合细胞DNA合成的影响。方法 :以人胚肺二倍体成纤维细胞国内标准株 2BS为衰老模型 ,用细胞脱核和细胞融合技术 ,观察枸杞子、淫羊藿对衰老-年轻 2BS融合细胞的DNA合成的影响。结果 :2BS细胞分别在含 0 0 2 5 (V/V)枸杞子、淫羊藿水提液的DMEM培养液中 ,可连续培养至 6 1 0± 2 9、5 6 0± 2 6代 ,对照组为 4 9 0± 2 6代 (P 细胞分别用枸杞子、淫羊藿水提液处理 2h后 ,进行细胞脱核并与年轻 2BS细胞融合 ,其〔3H〕TdR掺入百分率明显高于对照组 (P 融合细胞的DNA的合成速率 ,延长 2BS细胞寿命。

关键词：枸杞子淫羊藿融合细胞 DNA合成细胞衰老衰老-年轻2BS融合细胞人胚肺二倍体成纤维细胞实验

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肺癌DC融合细胞诱导的抗肿瘤免疫应答

免疫学杂志 2001年第4期17卷 271-273页

作者：陆燕蓉张洁林苹黄孝忠宁其志杨可四川大学华西医院肿瘤研究所四川成都610041

目的研究肺癌 DC融合细胞 FL D- A11体内外诱导免疫应答的能力。方法用 MTT法测定 FL D- A11细胞诱导淋巴细胞增殖的能力 ;EL ISA法检测其诱导淋巴细胞分泌 IL- 2的水平 ;L DH释放法测定 FL D- A11细胞免疫后小鼠脾淋巴细胞的特异性 CTL... 详细信息

目的研究肺癌 DC融合细胞 FL D- A11体内外诱导免疫应答的能力。方法用 MTT法测定 FL D- A11细胞诱导淋巴细胞增殖的能力 ;EL ISA法检测其诱导淋巴细胞分泌 IL- 2的水平 ;L DH释放法测定 FL D- A11细胞免疫后小鼠脾淋巴细胞的特异性 CTL 活性。结果 FL D- A11细胞能有效刺激淋巴细胞的增殖反应 ( SC∶ RC=1∶ 5 0时 ,SI=2 .3 8) ,诱导淋巴细胞分泌 IL- 2。 FL D- A11细胞免疫后 ,小鼠的胸腺和脾脏重量均高于对照组 ( P细胞对 L ewis肺癌细胞的杀伤活性显著高于对照组。结论 FL D- A11细胞具有诱导初次抗肿瘤免疫应答的能力 ,不仅能在体外诱导淋巴细胞的增殖和 IL- 2的分泌 ,而且体内免疫接种也能引起小鼠免疫器官的增生反应 ,产生针对 L ewis肺癌的特异性 CTL 杀伤作用。

关键词：肺癌树突状细胞融合细胞免疫应答

检测尿液中融合细胞早期快速诊断肾综合征出血热

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中华传染病杂志 1996年第2期14卷 89-91页

作者：马立宪邵丽华彭布明韩承业邱璞玲吕敏和山东医科大学山东省菏泽市第二人民医院济南市传染病医院

为了寻求肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）早期、快速的诊断方法，对１９６例ＨＦＲＳ患者尿液融合细胞（ＦＣ）和血清特异性ＩｇＭ抗体进行了检测，阳性率分别为８５．２％（１６７／１９６）和９３．９％（１８４／１９６），两者差异无显... 详细信息

为了寻求肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）早期、快速的诊断方法，对１９６例ＨＦＲＳ患者尿液融合细胞（ＦＣ）和血清特异性ＩｇＭ抗体进行了检测，阳性率分别为８５．２％（１６７／１９６）和９３．９％（１８４／１９６），两者差异无显著性（Ｐ＞０．９）。以ＥＬＩＳＡＩｇＭ抗体捕捉法为标准考核ＦＣ检测的诊断价值，结果ＦＣ的灵敏度是ＥＬＩＳＡ的８９．７％；特异度是８３．３％；阳性预告值为９８．８％；二者的诊断符合率为８９．３％。同一时期门诊的麻疹、水痘、风疹、流行性腮腺炎、乙型脑炎等患者尿ＦＣ阳性率（１３．９％、２０％、２．９％、０、０）与ＨＦＲＳ患者的相比差异有显著性（Ｐ＜０．００５）。本文结果提示：ＦＣ检测在一定程度上可以取代条件要求较高，操作比较复杂的ＥＬＩＳＡ。

关键词：肾综合征出血热诊断尿液融合细胞

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人外周血树突状细胞-乳腺癌细胞融合细胞

解剖学杂志 2003年第2期26卷 105-108页

作者：伊焕发唐军民唐岩孙红亚甄昱戴燕秦屹北京大学基础医学院组织胚胎学教研室北京100083 中国人民解放军261医院妇产科

目的:探讨树突状细胞-肿瘤细胞融合细胞的形态特性,为研制融合细胞疫苗提供形态学依据。方法:将免疫磁珠法分离的人外周血树突状细胞与人乳腺癌细胞株MCF7融合,瑞氏-姬姆萨染色观察;扫描电镜观察树突状细胞、融合细胞的表面超微结构。结... 详细信息

目的:探讨树突状细胞-肿瘤细胞融合细胞的形态特性,为研制融合细胞疫苗提供形态学依据。方法:将免疫磁珠法分离的人外周血树突状细胞与人乳腺癌细胞株MCF7融合,瑞氏-姬姆萨染色观察;扫描电镜观察树突状细胞、融合细胞的表面超微结构。结果:树突状细胞与MCF7细胞接10:1比例融合后,一个乳腺癌细胞可以与一个或多个树突状细胞相融合;扫描电镜下可见分离的树突状细胞表面有突起,树突状细胞/MCF7融合细胞具两种亲代细胞的表面超微结构特点。结论:树突状细胞与人乳腺癌细胞融合后无明显的形态改变。

关键词：乳腺癌细胞树突状细胞融合细胞疫苗免疫磁珠法瑞氏-姬姆萨染色法扫描电镜

诱导多能干细胞/原代心肌细胞的融合细胞表现出双向重建

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第三军医大学学报 2011年第22期33卷 2376-2380页

作者：熊挺淋张晓刚赵霞马红芬重庆医科大学附属第一医院心内科重庆400016

目的体外构建诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSc)与原代心肌细胞的融合细胞,初步探讨融合细胞体外生物学特性。方法绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)转染八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor-4,Oct-4)小鼠来源的iPSc与小鼠乳鼠心肌细胞通过聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG-4000)诱导融合,建立细胞融合模型。动态观察融合细胞生长形态变化情况,融合细胞碱性磷酸酶(alkali phosphatase,AKP)染色,免疫荧光鉴定融合细胞表达干细胞与心肌细胞特异性蛋白情况,以及染色体核型分析,确定融合细胞是否发生细胞核的融合及程度。结果聚乙二醇(PEG-4000)能够介导iPSc与心肌细胞融合,融合后第4天开始出现成集落状生长的细胞团;第2、3、4、5天的iPSc和融合细胞AKP阳性率分别为(0.935±0.039)、(0.939±0.022)、(0.954±0.017)、(0.944±0.027)和(0.761±0.044)、(0.740±0.023)、(0.681±0.034)、(0.748±0.045),同时间点的iPSc和融合细胞AKP阳性率比较有明显差异(P融合细胞初期主要表现为iPSc的特点,Oct-4表达阳性,cTnT表达阴性,融合7 d后,逐渐表现出两种细胞的特点,Oct-4与cTnT均表达阳性;超过80%的杂交细胞染色体数目在76～80条之间。结论二倍体iPSc与二倍体心肌细胞的融合细胞,具有两亲本细胞的特性,表现出双向重建。

关键词：细胞融合诱导多能干细胞心肌细胞融合细胞心肌梗死

自体肿瘤树突状融合细胞体外诱导抗人脑胶质瘤活性的研究

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中华神经外科杂志 2007年第12期23卷 921-924页

作者：史泓浏陈忠平中山大学肿瘤医院神经外科/神经肿瘤科广州510060

目的本实验使用人脑胶质瘤细胞和同一患者的外周血单个核细胞(PBMC)诱导的树突状细胞(DC)融合来制备DC-肿瘤融合细胞(FC),并研究其体外诱导抗胶质瘤的活性。方法采用PEG法将来自胶质瘤患者的肿瘤细胞和其自体DC进行融合,采用混合淋巴细... 详细信息

目的本实验使用人脑胶质瘤细胞和同一患者的外周血单个核细胞(PBMC)诱导的树突状细胞(DC)融合来制备DC-肿瘤融合细胞(FC),并研究其体外诱导抗胶质瘤的活性。方法采用PEG法将来自胶质瘤患者的肿瘤细胞和其自体DC进行融合,采用混合淋巴细胞反应和乳酸脱氢酶法(LDH)释放法来分别评价FC刺激T淋巴细胞增殖能力和FC致敏的T淋巴细胞对相同患者胶质瘤细胞的杀伤能力。结果建立了DC-人脑胶质瘤融合细胞(FC)的制备方法,通过荧光双染色证明FC具有胶质瘤细胞和DC细胞的双重标记,经过1.5Gy照射的FC致敏患者外周血T细胞,对自体胶质瘤细胞的杀伤明显高于仅用单纯DC或自体胶质瘤细胞致敏的T细胞(P细胞MCF7的杀伤仅在10%左右,显著低于对自体胶质瘤细胞的杀伤(P细胞在负载患者胶质瘤细胞裂解物(lysate)的自体DC的刺激下引起的增殖高于仅用单纯DC或自体胶质瘤细胞致敏的T细胞,并具有统计学意义(P细胞,负载lysate的自体DC所引起的T细胞增殖明显高于自体DC或lysate的作用(P细胞,并在负载抗原的DC的刺激下可以在体外扩增,致敏的患者外周血T淋巴细胞是可以进行特异性杀伤的CTL,杀伤能力随效靶比增高而上升。

关键词：树突细胞细胞,培养的神经胶质瘤融合细胞

肾综合征出血热患者尿融合细胞中病毒结构蛋白的检测及其意义

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中华医学杂志 1993年第3期73卷 135-138页

作者：戴巍王贵强 150030，哈尔滨市传染病院哈尔滨医科大学附属第一医院安徽省医学科学研究所黑龙江省绥化地区卫生学校

对21例肾综合征出血热(HFRS)息者进行尿细胞学检查,发现其中18倒尿中有融合细胞,其数量与病情和肾损害关系密切。经免疫细胞酶染发现所有融合细胞内均有特异性HFRS病毒(HFRSV)抗原颗粒;分别采用特异性抗HFRSV的膜结构蛋白单克隆抗体(McA... 详细信息

对21例肾综合征出血热(HFRS)息者进行尿细胞学检查,发现其中18倒尿中有融合细胞,其数量与病情和肾损害关系密切。经免疫细胞酶染发现所有融合细胞内均有特异性HFRS病毒(HFRSV)抗原颗粒;分别采用特异性抗HFRSV的膜结构蛋白单克隆抗体(McAb)3G1、3D8和核结构蛋白McAbA35进行抗原分析,发现3G1和3D8McAb阳性率占72.2%;而A35McAb全部为阴性,提示HFRS患者尿中融合细胞的形成与HFRSV膜结构蛋白有关。

关键词：肾病综合征病毒膜蛋白融合细胞

树突状细胞-肿瘤细胞之融合细胞在抗肿瘤免疫中的研究进展

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解剖学报 2003年第6期34卷 665-666页

作者：伊焕发唐军民大连医科大学解剖学教研室大连116027 北京大学医学部基础医学院组织学胚胎学教研室北京100083

树突状细胞（dendritic cells，DCs）是体内的专职抗原呈递细胞，具有活跃地摄取、处理抗原的能力，并表达高水平的MHC-I、II类抗原和CD80、CD86等共刺激分子，因而能有效地向T细胞呈递抗原、激发初次细胞免疫应答。肿瘤融合细胞可用于... 详细信息

树突状细胞（dendritic cells，DCs）是体内的专职抗原呈递细胞，具有活跃地摄取、处理抗原的能力，并表达高水平的MHC-I、II类抗原和CD80、CD86等共刺激分子，因而能有效地向T细胞呈递抗原、激发初次细胞免疫应答。肿瘤融合细胞可用于免疫治疗，最早由Cohen报道，他发现某些弱免疫原性肿瘤的肿瘤相关抗原（tumourassociated antigen，TAA）在融合的肿瘤细胞中免疫原性显著提高。

关键词：树突状细胞肿瘤细胞融合细胞免疫治疗