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蝮蛇蛇毒蛋白指纹图谱研究及应用

中国医药工业杂志 2009年第4期40卷 288-291页

作者：苏恒魏晓东赵文杰冯军顾敏上海医药工业研究院上海200040

采用高效毛细管电泳法,研究了江浙蝮蛇蛇毒蛋白指纹图谱。以10mmol/L硼砂(pH9.1,含4.62%正丁醇、3.5%十二烷基磺酸钠和0.64%正辛烷)为电泳缓冲液,紫外检测波长195nm,电压10kV。纤溶酶峰为参照物峰,确定了15个共有峰,并分析比较了11种不... 详细信息

采用高效毛细管电泳法,研究了江浙蝮蛇蛇毒蛋白指纹图谱。以10mmol/L硼砂(pH9.1,含4.62%正丁醇、3.5%十二烷基磺酸钠和0.64%正辛烷)为电泳缓冲液,紫外检测波长195nm,电压10kV。纤溶酶峰为参照物峰,确定了15个共有峰,并分析比较了11种不同来源的江浙蝮蛇蛇毒蛋白。结果显示,指纹图谱中主要峰群的整体图貌基本一致,但各成分含量的对比值有所不同。

关键词：蝮蛇蛇毒指纹图谱毛细管电泳

一种新的蝮蛇蛇毒蛋白组分的分离纯化及其对肿瘤细胞的作用

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中药材 2009年第12期32卷 1878-1880页

作者：吴少瑜王广发吕琳徐伟万山河吴曙光张嘉杰饶进军南方医科大学药学院广东广州510515

目的:用高效液相色谱一步法分离江浙蝮蛇蛇毒中的组分,研究其纯度、分子量、氨基酸序列及其体外抗肿瘤细胞增殖的生物学活性。方法:采用高效液相色谱法分离蛇毒组分,并测定其纯度;用Micromass ZQ质谱仪测定其分子量;用Edman降解法测定... 详细信息

目的:用高效液相色谱一步法分离江浙蝮蛇蛇毒中的组分,研究其纯度、分子量、氨基酸序列及其体外抗肿瘤细胞增殖的生物学活性。方法:采用高效液相色谱法分离蛇毒组分,并测定其纯度;用Micromass ZQ质谱仪测定其分子量;用Edman降解法测定蛇毒组分N端的15个氨基酸序列,并用CCK-8方法检测蛇毒蛋白组分对肝癌细胞Hep38增殖的作用。结果:用高效液相色谱一步法从江浙蝮蛇蛇毒中分离出一种新的组合,并命名为AHP-4,纯度在98%以上,分子量为7554 Da。AHP-4N端1～15个氨基酸是N-EAEEADEDDDAAAANC,经Genebank检索后,表明AHP4是一种新的蛇毒组分。该组分对Hep3B细胞的增殖有剂量依赖性的抑制作用。结论:用高效液相色谱一步法从蝮蛇蛇毒中分离了一种新的组分AHP-4,该组分能以剂量及时间依赖的方式抑制肿瘤细胞Hep3B和肺癌细胞A549的增殖。

关键词：蝮蛇蛇毒抗肿瘤分离纯化

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浙江蝮蛇蛇毒诱导人白血病K562细胞凋亡

中华急诊医学杂志 2006年第2期15卷 121-123页

作者：董庆华郑树吕庆华何立明浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所杭州310009

目的研究浙江蝮蛇毒诱导人白血病K562细胞凋亡的作用及机制。方法MTT法测IC50值及细胞毒作用,Hoechest33258荧光染色法观察凋亡小体形成,流式细胞仪PI染色法检测凋亡峰和细胞周期,同时FCM及Westernblot法检测Bcl2蛋白表达。结果浙江蝮... 详细信息

目的研究浙江蝮蛇毒诱导人白血病K562细胞凋亡的作用及机制。方法MTT法测IC50值及细胞毒作用,Hoechest33258荧光染色法观察凋亡小体形成,流式细胞仪PI染色法检测凋亡峰和细胞周期,同时FCM及Westernblot法检测Bcl2蛋白表达。结果浙江蝮蛇毒能抑制细胞生长且呈剂量依赖关系,并能诱导人白血病K562细胞凋亡,Bcl2蛋白表达下降。结论浙江蝮蛇毒能诱导人白血病K562细胞凋亡且呈剂量依赖关系,此作用与Bcl2蛋白表达下调有关。

关键词：浙江蝮蛇蛇毒白血病 B细胞淋巴瘤白血病-2基因细胞凋亡

促甲状腺素释放激素,浙江蝮蛇蛇毒对体外培养的胚胎在鼠脊…

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中华神经精神科杂志 1994年第5期27卷 302-303页

作者：张博爱沈定国北京解放军总医院肌病研究室河南医科大学第一附属医院神经内科

促甲状腺素释放激素、浙江蝮蛇蛇毒对体外培养的胚胎大鼠脊髓腹侧神经细胞的作用张博爱，沈定国运动神经元病为难治性疾病，国内外目前有应用促甲状腺素释放激素（ＴＲＨ）和浙江蝮蛇蛇毒治疗此病的报道，但疗效众说不一。为了客观评价... 详细信息

促甲状腺素释放激素、浙江蝮蛇蛇毒对体外培养的胚胎大鼠脊髓腹侧神经细胞的作用张博爱，沈定国运动神经元病为难治性疾病，国内外目前有应用促甲状腺素释放激素（ＴＲＨ）和浙江蝮蛇蛇毒治疗此病的报道，但疗效众说不一。为了客观评价上述药物对脊髓前角运动神经元的作用...

关键词：促甲状腺素释放激素蝮蛇蛇毒脊髓细胞培养

促甲状腺素释放激素、浙江蝮蛇蛇毒对体外培养的胚胎大鼠脊髓腹侧神经细胞的作用

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中华神经科杂志 1994年第5期27卷 302-303页

作者：张博爱沈定国北京解放军总医院肌病研究室河南医科大学第一附属医院神经内科

关键词：体外培养胚胎大鼠促甲状腺素释放激素蝮蛇蛇毒脊髓腹侧神经细胞浙江

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蝮蛇蛇毒对肿瘤细胞和凝血的影响

中国医科大学学报 1987年第S3期 27-34页

作者：郝文学李厚文寺田成之木本英治川崎宏都築义明日本福冈第一药科大学中国医科大学日本福冈大学

蝗蛇蛇毒中含有多种酶类,除L-氨基酸氧化酶外,大多数是蛋白水解酶。体外实验时,发现粗制蝮蛇蛇毒注射粉剂对各种肿瘤细胞及正常增殖的细胞具有细胞毒性作用。粗制蛇毒纯化后用于体内实验,发现具有细胞毒性的物质是L-氨基酸氧化酶。蛇毒... 详细信息

蝗蛇蛇毒中含有多种酶类,除L-氨基酸氧化酶外,大多数是蛋白水解酶。体外实验时,发现粗制蝮蛇蛇毒注射粉剂对各种肿瘤细胞及正常增殖的细胞具有细胞毒性作用。粗制蛇毒纯化后用于体内实验,发现具有细胞毒性的物质是L-氨基酸氧化酶。蛇毒注射粉剂在体内对肿瘤细胞的生长没有明显的抑制作用,由粗制蛇毒分离出凝血酶样酶,并与牛凝血酶之间有特异性区别;蛇毒促凝酶由于唾液酸的含量不同而表现为微观的不均一性(microheterogeneity)。此外,证明蛇毒中还含有几种能参与纤维蛋白凝块降解作用的肽链内切酶。

关键词：蝮蛇蛇毒细胞毒作用凝血酶样酶蛇毒促凝酶肽链内切酶

蝮蛇蛇毒中小分子肽抑制血小板聚集作用的研究

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中国民族民间医药 2010年第6期19卷 13-14页

作者：吴少瑜吕琳徐伟万山河饶进军南方医科大学药学院广东广州510515

目的:研究华南地区蝮蛇粗毒中分离得到的蛇毒多肽AHP-4的抑制血小板聚集作用。方法:分别用二磷酸腺苷、胶原和花生四烯酸诱导兔血小板聚集,观察不同剂量的AHP-4对血小板聚集的抑制率,并计算IC50。结果:AHP-4在体外可剂量依赖性地抑制由... 详细信息

目的:研究华南地区蝮蛇粗毒中分离得到的蛇毒多肽AHP-4的抑制血小板聚集作用。方法:分别用二磷酸腺苷、胶原和花生四烯酸诱导兔血小板聚集,观察不同剂量的AHP-4对血小板聚集的抑制率,并计算IC50。结果:AHP-4在体外可剂量依赖性地抑制由二磷酸腺苷、胶原和花生四烯酸诱导的兔血小板聚集,其IC50分别为25.4nM、256.6nM、11.2nM。结论:从AHP-4对这三种诱导剂诱导的体外兔血小板聚集的作用来看,其作用机制可能如下:阻断二磷酸腺苷与二磷酸腺苷受体的结合;抑制花生四烯酸的代谢产物的生成;抑制血小板膜上磷脂酶的激活。

关键词：蝮蛇蛇毒血小板聚集二磷酸腺苷胶原花生四烯酸