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蝎毒多肽提取物联合化疗抑制Lewis肺癌血管生成实验研究

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中国中药杂志 2011年第12期36卷 1644-1649页

作者：孙晓佳张月英贾青王兆朋王朝霞张维东山东省医学科学院基础医学研究所山东省现代医用药物与技术重点实验室山东济南250062

目的:观察蝎毒多肽提取物(polypeptide extract from scorpion venom,PESV)对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤血管生成的抑制作用并探讨可能的机制。方法:54只C57BL/6J小鼠皮下接种小鼠肺癌Lewis细胞,7 d后随机分为荷瘤对照组、化疗组和PESV组。... 详细信息

目的:观察蝎毒多肽提取物(polypeptide extract from scorpion venom,PESV)对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤血管生成的抑制作用并探讨可能的机制。方法:54只C57BL/6J小鼠皮下接种小鼠肺癌Lewis细胞,7 d后随机分为荷瘤对照组、化疗组和PESV组。以环磷酰胺对荷瘤小鼠进行化疗建立肿瘤化疗模型。按不同用药方法对3组小鼠进行干预,隔日测量肿瘤体积。各组每7 d处死6只小鼠,实验共进行28 d。以免疫组织化学方法检测各组肿瘤组织Ⅷ因子,α-SMA,Dll4及Notch1蛋白表达水平。以Ⅷ因子标记微血管,计算微血管密度(MVD),以α-SMA标记成熟有功能的血管,计算血管成熟度。以RT-PCR方法检测肿瘤组织Dll4,Notch1基因水平表达。结果:PESV抑瘤率为42.21%。PESV组肿瘤体积与化疗组存在明显差异(P<0.05),与荷瘤对照组有显著差异(P<0.01)。PESV组Ⅷ因子表达水平显著低于化疗组(P<0.05)。化疗组肿瘤组织α-SMA表达低于荷瘤对照组(P<0.01),PESV组显著低于化疗组(P<0.01)。化疗组Dll4及Notch1第28天表达低于荷瘤对照组(P<0.05),PESV组肿瘤Dll4及Notch1第21天表达显著低于化疗组(P<0.05)。结论:PESV可对Lewis肿瘤血管生成起抑制作用,其机制可能与抑制肿瘤微环境中血管生成相关因子Dll4及Notch1有关。

关键词：蝎毒液类肺肿瘤化疗血管生成

蝎毒多肽提取物联合5-氟尿嘧啶对H_(22)肝癌血管生成拟态形成的作用及机制研究

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中国中西医结合杂志 2013年第4期33卷 492-496页

作者：郑安红张维东王兆朋王朝霞武利存贾青张月英山东省医学科学院基础医学研究所实验病理研究室山东省罕见病重点实验室济南250062

目的观察蝎毒多肽提取物(polypeptide extract from scorpion venom,PESV)联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)对小鼠H22肝癌移植瘤血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)形成的抑制作用并探讨其可能的作用机制。方法 60只昆明小鼠,皮下接种H22肝癌细胞悬液建立荷瘤模型,随机分为荷瘤对照组、5-氟尿嘧啶组(5-Fu组)、联合组(PESV+5-Fu),每组20只,连续干预14天,隔日测量肿瘤体积,绘制肿瘤体积增殖曲线,并计算抑瘤率;HE染色法观察肿瘤组织的形态学改变;免疫组织化学法和过碘酸雪夫氏染色(PAS)双标法检测各组肿瘤组织VM密度;免疫组织化学法检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的蛋白表达水平,用LeicaQwin V3图像分析软件进行灰度值半定量分析。结果联合组和5-Fu组H22肝癌移植瘤的生长较荷瘤对照组均受到明显抑制(P<0.05),且联合组和5-Fu组瘤重和肿瘤体积亦存在显著差异(P<0.05);免疫组织化学法和PAS双标法检测显示,联合组VM密度明显低于荷瘤对照组和5-Fu组(P<0.01);与荷瘤对照组比较,联合组HIF-1α和MMP-2的蛋白表达水平均显著降低(P<0.01)。结论 PESV联合5-Fu可抑制小鼠H22肝癌移植瘤VM形成,其机制可能与抑制肿瘤微环境中HIF-1α和MMP-2的表达有关。

关键词：血管生成拟态蝎毒液类缺氧诱导因子-1 基质金属蛋白酶类 H22肝癌移植瘤

蝎毒多肽提取物对小鼠Lewis肺癌免疫逃逸的影响

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中国中药杂志 2010年第17期35卷 2324-2327页

作者：徐林张维东王兆朋贾青张月英姜国胜山东省医学科学院基础所实验病理学与生理学研究室山东现代医用药物与技术重点实验室山东济南250062

目的:观察蝎毒多肽提取物(PESV)对Lewis肺癌(LLC)免疫逃逸的影响。方法:取40只C57BL/6J小鼠,右腋下接种Lewis肺癌细胞悬液,建立皮下种植瘤模型,随机分为荷瘤对照组和PESV治疗组,连续灌胃给予PESV 18 d,检测肿瘤体积并计算抑瘤率;免疫组... 详细信息

目的:观察蝎毒多肽提取物(PESV)对Lewis肺癌(LLC)免疫逃逸的影响。方法:取40只C57BL/6J小鼠,右腋下接种Lewis肺癌细胞悬液,建立皮下种植瘤模型,随机分为荷瘤对照组和PESV治疗组,连续灌胃给予PESV 18 d,检测肿瘤体积并计算抑瘤率;免疫组化法和ELISA法分别检测瘤组织及血清中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)和白介素10(IL-10)的表达,免疫组化法和流式细胞仪分别检测肺癌组织中浸润的DC表面共刺激分子CD80,CD86的表达。结果:PESV抑瘤率为56.60%。与荷瘤对照组相比,瘤组织和血清中VEGF,TGF-β1和IL-10的表达明显降低(P<0.05),DC共刺激分子CD80,CD86的表达明显增加(P<0.05)。结论:PESV可干预肺癌免疫逃逸,其机制可能与减少肿瘤微环境中VEGF,TGF-β1和IL-10的表达,增加DC共刺激分子CD80,CD86的表达有关。

关键词：蝎毒液类肺肿瘤肿瘤逃逸

东亚钳蝎毒抗癌多肽对Eca109 细胞和HeLa 细胞的毒性作用

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中国病理生理杂志 1999年第12期15卷 1116-1119页

作者：杨建斌王庸晋董伟华孔天翰杨红艳宋红霞刘桂亭长治医学院附属医院血液内科 046000 河南医科大学生物毒素中心郑州450052 长治医学院病解教研室

目的和方法：采用ＭＴＴ比色法、生长抑制实验、集落形成抑制实验，探讨东亚钳蝎毒抗癌多肽（ａｎｔｉｃａｎｃｅｒｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｆｒｏｍＢｕｔｈｕｓＭａｒｔｅｎｓｉｉＶｅｎｏｍ，ＡＰＢＭＶ）对Ｅｃａ１０９细... 详细信息

目的和方法：采用ＭＴＴ比色法、生长抑制实验、集落形成抑制实验，探讨东亚钳蝎毒抗癌多肽（ａｎｔｉｃａｎｃｅｒｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｆｒｏｍＢｕｔｈｕｓＭａｒｔｅｎｓｉｉＶｅｎｏｍ，ＡＰＢＭＶ）对Ｅｃａ１０９细胞和ＨｅＬａ细胞的细胞毒作用。结果：ＡＰＢＭＶ对Ｅｃａ１０９细胞有明显的毒性作用，且呈显著量效关系，处理细胞２４ｈ和７２ｈ的ＩＣ５０分别为０－０２７μｇ·ｍＬ－１和０－０２４ μｇ·ｍＬ－１。ＡＰＢＭＶ对Ｅｃａ１０９细胞的生长抑制作用呈明显的时效和量效关系。处理Ｅｃａ１０９细胞２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ的ＩＣ５０分别为０－０３２μｇ·ｍＬ－１，０－０２８ μｇ·ｍＬ－１，０－０２３ μｇ·ｍＬ－１。ＡＰＢＭＶ还显著抑制Ｅｃａ１０９细胞的集落形成，并有明显的量效关系，其ＩＣ５０值为０－０２３μｇ·ｍＬ－１。但ＡＰＢＭＶ对ＨｅＬａ细胞的作用不明显。结论：ＡＰＢＭＶ对肿瘤细胞的杀伤或生长抑制作用具有一定的肿瘤差异性。

关键词：蝎毒液类细胞毒性抗癌药 APBMV

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蝎毒多肽对肿瘤细胞的抑制作用研究

中国病理生理杂志 2004年第6期20卷 968-972页

作者：孔天翰林山韩雪飞琚济杭董伟华广州医学院蛇毒研究所广东广州510182 杭州市武警医院肿瘤科浙江杭州310015 河南医科大学生物毒素中心河南郑州450052 中国科学院生物化学与细胞生物学研究所上海200031 广州医学院病理生理学教研室广东广州510182

目的 :观察蝎毒多肽 (PBMV)对肿瘤细胞生长、细胞周期、P5 3表达和膜电位的影响。方法 :MTT法、集落形成、细胞分裂指数、流式细胞仪和玻璃微电极细胞内记录法。结果 :PBMV对数种肿瘤细胞具有毒性作用 ,细胞生长抑制、集落形成能力和分... 详细信息

目的 :观察蝎毒多肽 (PBMV)对肿瘤细胞生长、细胞周期、P5 3表达和膜电位的影响。方法 :MTT法、集落形成、细胞分裂指数、流式细胞仪和玻璃微电极细胞内记录法。结果 :PBMV对数种肿瘤细胞具有毒性作用 ,细胞生长抑制、集落形成能力和分裂指数降低、多核细胞数减少 ;PBMV使进入S期的CNE - 2Z细胞明显减少 ,G1、S和G2 期细胞的百分比增多 (P <0 0 1) ;PBMV处理后 ,CNE - 2Z细胞P5 3蛋白表达量降低 (P <0 0 1) ,细胞膜负电位明显减小 ,胞膜呈去极化状态。结论 :PBMV可能具有膜毒素的作用 ,通过使CNE - 2Z细胞膜电位降低 ,影响肿瘤细胞的生长增殖。

关键词：蝎毒液类 Eca109细胞细胞周期蛋白质P53 膜电位

SVHRP对Aβ_(1-40)处理后大鼠海马突触形态学改变的抑制作用

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神经解剖学杂志 2010年第3期26卷 249-254页

作者：于胜波宫瑾迟彦艳彭岩高船舟赵杰张万琴隋鸿锦大连医科大学基础医学院解剖学教研室大连医科大学基础医学院生理学教研室大连医科大学基础医学院中心实验室大连116044

目的:探索蝎毒耐热蛋白(SVHRP)对淀粉样β蛋白(Aβ)神经毒性的抑制作用。方法:在大鼠海马内每侧注射Aβ1-40(10μg/2μl)后1d,给予腹腔SVHRP(0.5～2μg/100g),1次/d,连续10次。建模16d后分别进行海马部位的突触体素免疫组织化学分析和... 详细信息

目的:探索蝎毒耐热蛋白(SVHRP)对淀粉样β蛋白(Aβ)神经毒性的抑制作用。方法:在大鼠海马内每侧注射Aβ1-40(10μg/2μl)后1d,给予腹腔SVHRP(0.5～2μg/100g),1次/d,连续10次。建模16d后分别进行海马部位的突触体素免疫组织化学分析和突触超微结构计量观察。结果:与对照组比较,Aβ组大鼠突触体素免疫反应强度和电镜下突触密度明显下降(P<0.01),小突触丢失为主,突触终末可见突触小泡大量集聚,突触活性区平均长度增加。SVHRP干预组大鼠实触体素免疫反应强度和电镜下突触密度明显高于Aβ组大鼠(P<0.01),突触终末内未见突触小泡过量集聚,但小突触比例显著增加(P<0.01)。结论:以上结果强有力的提示,Aβ是突触退变的始动因素,SVHRP可抑制Aβ引起的突触退变,有可能成为治疗Alzheimer病(AD)的一种药物。

关键词：蝎毒液类蝎毒耐热蛋白淀粉样β蛋白阿尔茨海默病海马突触突触体素超微结构大鼠

蝎毒多肽提取物对前列腺癌细胞侵袭力影响的体外研究

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中华肿瘤防治杂志 2008年第14期15卷 1045-1048,1075页

作者：王燕张维东贾青王兆朋宋守芹王朝霞张月英山东省医学科学院基础医学研究所实验病理学与生理学研究室山东现代医用药物与技术重点实验室山东济南250062

目的:观察蝎毒多肽提取物(PESV)对前列腺癌DU-145细胞侵袭力的影响,并探讨其可能作用机制。方法:前列腺癌DU-145细胞经PESV处理后,用MTT法检测其生长与增殖的变化;Transwell小室法观察其体外侵袭能力的变化;免疫组织化学方法及逆转录聚... 详细信息

目的:观察蝎毒多肽提取物(PESV)对前列腺癌DU-145细胞侵袭力的影响,并探讨其可能作用机制。方法:前列腺癌DU-145细胞经PESV处理后,用MTT法检测其生长与增殖的变化;Transwell小室法观察其体外侵袭能力的变化;免疫组织化学方法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法研究其基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的蛋白水平和mRNA水平表达的变化。结果:经PESV处理后,DU-145细胞的增殖受抑制。体外侵袭实验结果显示,对照组每100倍视野穿过的细胞数平均为(51.29±7.56)个,而5、10和20μg/mLPESV作用24h后,每100倍视野穿过的细胞数分别为(20.43±1.51)、(12.29±2.75)和(5±1.73)个,不同浓度组比较差异有统计学意义,F=38.933,P=0.000。PESV组侵袭细胞数目较对照组明显减少,P值均为0.000;免疫组化及RT-PCR结果显示,经PESV处理后,MMP-9表达下调,TIMP-1表达上调。结论:PESV抑制DU-145细胞侵袭力的作用可能与其下调MMP-9,上调TIMP-1的表达有关。

关键词：前列腺肿瘤蝎毒液类侵袭性基质金属蛋白酶类金属蛋白酶组织抑制剂

蝎毒多肽提取物对肿瘤生长和细胞免疫功能的影响

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山东大学学报（医学版） 2007年第3期45卷 286-289页

作者：张维东张月英王朝霞王兆朋贾青山东省医学科学院基础医学研究所山东现代医用药物与技术重点实验室山东济南250062

目的:观察蝎毒多肽提取物(PESV)对大鼠W256癌肉瘤抑制作用及其对荷瘤大鼠细胞免疫功能的影响。方法:将30只Wistar荷瘤大鼠,随机分为模型组、5-FU治疗组和蝎毒治疗组,连续灌胃给蝎毒多肽提取物7 d,处死,计算各组抑瘤率;流式细胞术(FCM)... 详细信息

目的:观察蝎毒多肽提取物(PESV)对大鼠W256癌肉瘤抑制作用及其对荷瘤大鼠细胞免疫功能的影响。方法:将30只Wistar荷瘤大鼠,随机分为模型组、5-FU治疗组和蝎毒治疗组,连续灌胃给蝎毒多肽提取物7 d,处死,计算各组抑瘤率;流式细胞术(FCM)检测外周血T淋巴细胞亚群变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清中细胞因子INF-γ和IL-4含量。结果:蝎毒治疗组抑瘤率为55.21%。与模型组相比较,蝎毒治疗组荷瘤大鼠外周血中CD4+T细胞比例明显提高,CD8+T细胞明显降低,CD4+T/CD8+T值明显增高,差异均具有统计学意义(P蝎毒多肽提取物对W256荷瘤大鼠肿瘤有明显抑制作用,通过提高细胞免疫功能,逆转荷瘤机体Th1/Th2漂移,改变荷瘤机体免疫抑制状态,发挥抗肿瘤作用。

关键词：蝎毒液类免疫活性 CD4+T/CD8+T Th1/Th2漂移

蝎毒多肽提取物对白血病NOD／SCID小鼠MMP2、MMP9表达的影响

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天津医药 2009年第10期37卷 856-858页

作者：杨文华郝征杨向东史哲新于文俊吕俊秀天津中医药大学第一附属医院血液科 300193 天津中医药大学

目的:观察蝎毒多肽提取物(PESV)对白血病NOD/SCID小鼠基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9表达的影响,探讨PESV对白血病细胞外基质降解和髓外浸润的干预机制。方法:首先选取急性白血病患者骨髓单个核细胞注入经过铯-137源照射的NOD/SCID小鼠体内... 详细信息

目的:观察蝎毒多肽提取物(PESV)对白血病NOD/SCID小鼠基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9表达的影响,探讨PESV对白血病细胞外基质降解和髓外浸润的干预机制。方法:首先选取急性白血病患者骨髓单个核细胞注入经过铯-137源照射的NOD/SCID小鼠体内,建立人白血病NOD/SCID小鼠髓外浸润模型;再将实验小鼠随机分组,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别注射不同浓度的PESV,Ⅳ组为模型组注射生理盐水,另设Ⅴ组为空白对照组,观察各组小鼠外周白细胞计数、血涂片及生存状态;观察4周后处死小鼠,用RealtimePCR方法检测小鼠体内MMP2、MMP9表达水平。结果:给药各组小鼠MMP2、MMP9表达水平均明显低于模型组(P<0.05),且各组间表达水平随给药浓度增加而减低。给药各组小鼠外周血白细胞计数、血涂片及生存状态也均优于模型组。结论:PESV可以抑制白血病NOD/SCID小鼠体内MMP2、MMP9过度表达,对白血病细胞外基质降解和髓外浸润具有明显阻抑作用。

关键词：蝎毒液类白血病基因表达基质金属蛋白酶类小鼠