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IVF/ICSI助孕后早期流产患者蜕膜组织焦亡相关因子表达水平的研究

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天津医药 2023年第4期51卷 351-354页

作者：车小群王丽莲王笑许丽华马天仲荆霞陈碧广东医科大学附属医院生殖中心 524001

目的探讨体外受精(IVF)/卵胞浆内单精子注射(ICSI)助孕妊娠后早期流产患者蜕膜组织中焦亡相关因子的表达及作用。方法选取行IVF/ICSI助孕妊娠后早期流产患者102例(研究组),同期因意外妊娠行人工流产术的患者100例(对照组),收集蜕膜组... 详细信息

目的探讨体外受精(IVF)/卵胞浆内单精子注射(ICSI)助孕妊娠后早期流产患者蜕膜组织中焦亡相关因子的表达及作用。方法选取行IVF/ICSI助孕妊娠后早期流产患者102例(研究组),同期因意外妊娠行人工流产术的患者100例(对照组),收集蜕膜组织。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法及Western blot法检测蜕膜组织中焦亡相关因子Nod样受体蛋白3(NLRP3)、白细胞介素(IL)-1β、胱天蛋白酶1(Caspase1)、gasdermin D(GSDMD)mRNA及蛋白表达,TUNEL法检测蜕膜组织中细胞焦亡情况,Pearson法分析蜕膜组织中细胞焦亡率与NLRP3、IL-1β、Caspase1、GSDMD蛋白水平的相关性。结果与对照组相比,研究组蜕膜组织中NLRP3、IL-1β、Caspase1、GSDMD mRNA及蛋白水平、蜕膜组织中细胞焦亡率升高(P蜕膜组织中细胞焦亡率与NLRP3、IL-1β、Caspase1、GSDMD蛋白表达水平均呈正相关(r分别为0.429、0.474、0.498、0.540,均P蜕膜组织中焦亡相关因子NLRP3、IL-1β、Caspase1、GSDMD表达均升高,且与蜕膜组织细胞焦亡有关。

关键词：流产治疗性受精体外精子注射细胞质内蜕膜组织 Nod样受体蛋白3 白细胞介素-1β 胱天蛋白酶1 gasdermin D

蜕膜组织中Ang-1、Ang-2及VEGF的表达与IVF后稽留流产的关系

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中华妇产科杂志 2018年第8期53卷 564-566页

作者：赵文杰张玉花刘洁崔青孙理兰李淑红马华刚山东省潍坊市人民医院生殖医学科 261041 山东省烟台毓璜顶医院产科

辅助生殖技术已经历了30多年的发展，使众多不孕症夫妇获益。随着辅助生殖技术的发展，目前的临床妊娠率在不断提高。但有许多文献报道，辅助生殖技术治疗后早期流产率达18％-30％;加之随着“二孩政策”的实行，高龄不孕症患者人数明显... 详细信息

辅助生殖技术已经历了30多年的发展，使众多不孕症夫妇获益。随着辅助生殖技术的发展，目前的临床妊娠率在不断提高。但有许多文献报道，辅助生殖技术治疗后早期流产率达18％-30％;加之随着“二孩政策”的实行，高龄不孕症患者人数明显增加，辅助生殖技术治疗后的早期流产率将会继续增加。稽留流产又称过期流产，是早期流产中的特殊类型，大多数发生在妊娠20周以内，胚胎或胎儿已死亡，滞留宫腔内未能及时排出。

关键词：稽留流产 Ang-1 Ang-2 蜕膜组织 VEGF 辅助生殖技术 IVF 不孕症夫妇

孕酮及其受体、IL-8与原因不明自然流产的相关性研究

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中国免疫学杂志 2022年第10期38卷 1245-1248页

作者：马铭艳杨美霞宫晓玲赵紫薇岳淑芬宋芳(指导) 包头医学院组织学与胚胎学教研室包头014040 包头医学院生殖医学研究所包头014040 包钢第三职工医院包头014040

目的:探讨孕酮(P)及其受体(PR)、IL-8在原因不明自然流产患者外周血及母胎界面的表达及相关性。方法:ELISA检测30例原因不明自然流产患者(流产组)和30例正常妊娠妇女(对照组)血清P、IL-8水平,免疫组织化学染色法检测两组流产绒毛和蜕膜... 详细信息

目的:探讨孕酮(P)及其受体(PR)、IL-8在原因不明自然流产患者外周血及母胎界面的表达及相关性。方法:ELISA检测30例原因不明自然流产患者(流产组)和30例正常妊娠妇女(对照组)血清P、IL-8水平,免疫组织化学染色法检测两组流产绒毛和蜕膜组织PR、IL-8表达。结果:流产组血清P水平明显低于对照组(P组织PR蛋白表达均为阴性;两组蜕膜组织中PR均表达于蜕膜细胞的细胞核,且流产组表达明显低于对照组(P组织中IL-8均表达于绒毛上皮细胞的细胞质,且流产组表达明显高于对照组(P蜕膜组织中IL-8均表达于蜕膜细胞的细胞质,且流产组表达高于对照组(P蜕膜组织PR与IL-8呈显著负相关(r=-0.650,P<0.01)。结论:P、PR低表达、IL-8高表达可能与原因不明自然流产发生相关,且P、PR可能通过下调IL-8表达维持正常妊娠。

关键词：自然流产孕酮受体 IL-8 绒毛组织蜕膜组织

寿胎丸调控组蛋白修饰对复发性流产小鼠子宫内膜蜕膜化的影响

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中国中医药信息杂志 2024年第1期31卷 104-109页

作者：靳梓琪任守杨王天一马珺卓王子璐张铭娜张宇河北中医药大学中西医结合学院(研究所) 河北省中西医结合肝肾病证研究重点实验室河北石家庄050200 河北中医药大学基础医学院河北石家庄050200 石家庄市人民医院河北石家庄050000

目的观察寿胎丸对复发性流产(RSA)小鼠子宫内膜蜕膜化的影响,基于组蛋白修饰探讨其治疗RSA的可能作用机制。方法将40只雌性CBA/J小鼠分为正常组、模型组、寿胎丸低剂量组(7.5 g/kg)、寿胎丸高剂量组(15 g/kg)和地屈孕酮组(3 mg/kg),正... 详细信息

目的观察寿胎丸对复发性流产(RSA)小鼠子宫内膜蜕膜化的影响,基于组蛋白修饰探讨其治疗RSA的可能作用机制。方法将40只雌性CBA/J小鼠分为正常组、模型组、寿胎丸低剂量组(7.5 g/kg)、寿胎丸高剂量组(15 g/kg)和地屈孕酮组(3 mg/kg),正常组与BALB/C雄性小鼠合笼饲养,其余各组与DBA/2雄性小鼠合笼饲养建立RSA小鼠模型,造模后各给药组灌胃相应药液,正常组和模型组灌胃等体积纯水,连续10 d。观察胚胎情况,计算胚胎丢失率,ELISA检测血清泌乳素(PRL)含量,HE染色观察蜕膜组织形态,RT-PCR检测蜕膜组织PRL mRNA表达,Western blot检测蜕膜组织PRL、H4乙酰化(H4ac)、H3K27乙酰化(H3K27ac)、H3K27三甲基化(H3K27me3)蛋白表达。结果与正常组比较,模型组小鼠胚胎丢失率明显升高,血清PRL含量明显减少,蜕膜细胞排列紊乱,出现大面积出血坏死;蜕膜组织PRL mRNA和蛋白表达明显降低,H4ac、H3K27ac蛋白表达明显降低,H3K27me3蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(P蜕膜细胞排列紧密,坏死减少,腺体完整;寿胎丸高剂量组和地屈孕酮组小鼠蜕膜组织PRL mRNA和蛋白表达明显升高,H4ac、H3K27ac蛋白表达明显升高,H3K27me3蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P蜕膜化,其机制与调节子宫内膜基质细胞组蛋白修饰有关。

关键词：寿胎丸复发性流产蜕膜组织组蛋白修饰小鼠

蜕膜组织中调节性T细胞的表达与妊娠期免疫耐受的关系

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海军医学杂志 2022年第4期43卷 370-373页

作者：张一丹深圳市人民医院产科广东深圳518000

目的探讨蜕膜组织中调节性T细胞的表达与妊娠期免疫耐受的关系。方法选取2019年5月至2020年10月深圳市人民医院产科收治的原因不明复发性流产(URSA)患者80例作为URSA组,正常早孕人工流产终止妊娠的妇女50例作为对照组。采用流式细胞术(F... 详细信息

目的探讨蜕膜组织中调节性T细胞的表达与妊娠期免疫耐受的关系。方法选取2019年5月至2020年10月深圳市人民医院产科收治的原因不明复发性流产(URSA)患者80例作为URSA组,正常早孕人工流产终止妊娠的妇女50例作为对照组。采用流式细胞术(FCM)检测蜕膜组织中CD4+CD25+T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)比例。采用ELISA检测白细胞介素‐17(IL‐17)、白细胞介素‐23(IL‐23)、白细胞介素‐10(IL‐10)、γ干扰素(IFN‐γ)表达。采用Pearson检验分析Treg表达与Th17细胞及巨噬细胞(Mφ)相关因子表达的关系。结果URSA组Th17细胞和CD4^(+)CD25^(+)均显著高于对照组(P蜕膜组织中调节性T细胞的表达与妊娠期免疫耐受存在显著相关性,其机制可能与参与调控的Th17细胞和巨噬细胞活性有关。

关键词：蜕膜组织调节性T细胞妊娠期免疫耐受 Pearson

益母草总生物碱对药物流产大鼠蜕膜绒毛组织排出的促进作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2021年第6期47卷 1476-1484页

作者：马静静刘宇梁艳李颖河南省新乡市中心医院产科河南新乡453000 河南省第二人民医院生殖科河南郑州450000

目的:探讨益母草总生物碱对药物流产大鼠蜕膜绒毛组织排出的促进作用,并阐述其可能的作用机制。方法:选取动情期健康雌性SD大鼠100只和雄性SD大鼠50只合笼,在受孕雌鼠中选取60只。随机选取9只作为正常组,其余51只大鼠建立药物流产后子... 详细信息

目的:探讨益母草总生物碱对药物流产大鼠蜕膜绒毛组织排出的促进作用,并阐述其可能的作用机制。方法:选取动情期健康雌性SD大鼠100只和雄性SD大鼠50只合笼,在受孕雌鼠中选取60只。随机选取9只作为正常组,其余51只大鼠建立药物流产后子宫复旧不全病理模型,成功建模的40只大鼠随机分为模型组、激活剂组、激活剂+益母草总生物碱组和益母草总生物碱组(n=10)分别给予生理盐水、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路激活剂胰岛素样生长因子1(IGF-1)、IGF-1+益母草总生物碱和益母草总生物碱灌胃。正常组大鼠灌胃等体积生理盐水。检测各组大鼠子宫出血量、凝血时间、子宫质量、子宫系数、子宫平滑肌张力和收缩力,HE染色观察大鼠子宫组织病理形态表现,免疫组织化学法检测各组大鼠子宫内膜组织中雌激素受体(ER)蛋白表达水平,Western bloting法检测各组大鼠蜕膜组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、AKT和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达水平。结果:与正常组比较,激活剂组、模型组、激活剂+益母草碱组和益母草碱组大鼠子宫出血量增加(P蜕膜组织中ER表达水平升高(P蜕膜组织中p-p38MAPK/p38MAPK、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值降低(P蜕膜组织中ER表达水平升高(P蜕膜组织中p-p38MAPK/p38MAPK、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值降低(P蜕膜组织中ER表达水平升高(P蜕膜组织中p-p38MAPK/p38MAPK、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值降低(P蜕膜组织中ER表达水平升高(P蜕膜组织中p-p38MAPK/p38MAPK、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值降低(P蜕膜细胞,激活剂+益母草总生物碱组和益母草总生物碱组大鼠子宫无淤血,蜕膜细胞明显减少。结论:益母草总生物碱可促进药物流产大鼠蜕膜绒毛组织排出,其作用机制可能与抑制MAPK/PI3K/AKT信号通路有关。

关键词：益母草总生物碱丝裂原活化蛋白激酶/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路药物流产蜕膜组织

维生素D相关代谢基因在妊娠期糖尿病蜕膜组织中的表达及意义

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维生素D相关代谢基因在妊娠期糖尿病蜕膜组织中的表达及意义

作者：谢晶晶河北医科大学

学位级别：硕士

目的:通过检测妊娠期糖尿病(Gestational Diabetes Mellitus,GDM)孕妇和糖耐量正常(Normal Glucose Tolerance,NGT)孕妇蜕膜组织中维生素D相关代谢基因的表达情况和甲基化程度,探讨蜕膜组织维生素D相关代谢基因在GDM发生发展中的作用,... 详细信息

目的:通过检测妊娠期糖尿病(Gestational Diabetes Mellitus,GDM)孕妇和糖耐量正常(Normal Glucose Tolerance,NGT)孕妇蜕膜组织中维生素D相关代谢基因的表达情况和甲基化程度,探讨蜕膜组织维生素D相关代谢基因在GDM发生发展中的作用,为维生素D防治GDM提供依据。方法:随机选择在河北省人民医院行择期剖宫产终止妊娠的足月单胎孕妇为研究对象,收集患者一般资料,依据孕期产检口服葡萄糖耐量试验结果将其分为GDM组和NGT组,用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)法检测25-羟基维生素D-1-α-羟化酶(Cytochrome P450 27B1,CYP27B1)、维生素D受体(Vitamin D Receptor,VDR)、25-羟基维生素D-24-羟化酶(Cytochrome P450 24A1,CYP24A1)在蜕膜组织的表达位置、用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real Time Quantitative PCR,RT-q PCR)技术和蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)法检测维生素D相关代谢基因的表达水平,用甲基化特异性PCR(Methylmion Specific PCR,MSP)法检测维生素D相关代谢基因的甲基化情况。结果:1.GDM组孕妇的空腹血糖(5.12±0.36mmol/L vs.4.54±0.28mmol/L,P蜕膜组织中有维生素D相关代谢基因的蛋白表达,通过Fiji软件计算光密度(Optical density,OD)值结果显示,GDM组CYP27B1水平(0.079±0.0027 vs.0.093±0.013,P蜕膜组织中CYP27B1 m RNA(0.75±0.28 vs.1.07±0.40,P蜕膜组织中VDR m RNA(1.68±0.20vs.1.20±0.73,P蜕膜组织CYP27B1蛋白相对表达量(0.84±0.35 vs.1.28±0.36,P蜕膜组织VDR蛋白(1.39±0.81 vs.0.73±0.42,P蜕膜组织中CYP27B1基因、VDR基因和CYP24A1基因甲基化率无明显差异。结论:1.维生素D代谢基因在蜕膜组织中参与GDM的发病,推测GDM患者维生素D水平降低与蜕膜组织中CYP24A1表达升高和CYP27B1表达降低有关。2.GDM患者蜕膜组织通过增加VDR表达来提高维生素D的生物利用率。3.维生素D相关代谢基因甲基化与妊娠期糖尿病无明显相关。

关键词：妊娠期糖尿病维生素D 维生素D代谢基因甲基化蜕膜组织

减味寿胎丸对流产模型大鼠子宫蜕膜脂质过氧化及铁死亡蛋白表达的影响

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中医杂志 2021年第21期62卷 1917-1922,1929页

作者：赖裕玲张莹轩曾丽华邓高丕罗颂平郜洁广州中医药大学第一临床医学院广东省510545 广州中医药大学第一附属医院

目的探讨减味寿胎丸治疗流产的潜在分子机制。方法SD雌性及雄性大鼠各48只,按雌、雄1∶1合笼持续配种2周,以观察到阴道栓作为妊娠第0天,共获得妊娠大鼠40只,随机分为正常组、模型组、地屈孕酮组、减味寿胎丸组,每组10只。自妊娠第0天开... 详细信息

目的探讨减味寿胎丸治疗流产的潜在分子机制。方法SD雌性及雄性大鼠各48只,按雌、雄1∶1合笼持续配种2周,以观察到阴道栓作为妊娠第0天,共获得妊娠大鼠40只,随机分为正常组、模型组、地屈孕酮组、减味寿胎丸组,每组10只。自妊娠第0天开始,正常组和模型组雌鼠予10 ml/(kg·d)纯水灌胃,减味寿胎丸组予减味寿胎丸药液1.8 g/(kg·d)灌胃,地屈孕酮组予地屈孕酮片5.4 mg/(kg·d)灌胃,每日1次,连续13天。在妊娠第13天上午,模型组、地屈孕酮和减味寿胎丸组予浓度为1.2 mg/ml米非司酮药液10 ml/kg灌胃建立流产大鼠模型。妊娠第14天取材,HE染色观察各组大鼠子宫蜕膜组织的病理形态改变,检测蜕膜组织脂质过氧化相关指标[还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、丙二醛(MDA)]水平及总铁离子[Fe^((Ⅱ+Ⅲ))]含量,普鲁士蓝(Perls)染色检测大鼠蜕膜组织铁离子分布,免疫组化及Western Blot法检测蜕膜组织铁死亡关键蛋白[谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、转铁蛋白受体1(TFR1)]蛋白分布及相对表达量。结果HE染色结果显示,正常组大鼠蜕膜组织血管丰富,蜕膜细胞排列紧密;模型组大鼠蜕膜组织血管分布少,胞浆水肿,部分细胞核消失;地屈孕酮组及减味寿胎丸组大鼠蜕膜组织病理较模型组明显改善。模型组大鼠较正常组蜕膜组织中GSH、GPX水平及GPX4、SLC7A11蛋白表达降低,Fe^((Ⅱ+Ⅲ))含量、MDA水平及TFR1蛋白表达升高(P蜕膜组织中GSH、GPX水平及GPX4、SLC7A11蛋白表达升高,MDA水平、Fe^((Ⅱ+Ⅲ))含量、TFR1蛋白表达降低(P0.05)。结论减味寿胎丸可减轻流产大鼠脂质过氧化及过度铁累积,抑制子宫蜕膜组织铁死亡,从而防止流产的发生。

关键词：流产减味寿胎丸子宫蜕膜组织铁死亡脂质过氧化

丹参酮ⅡA对复发性流产小鼠模型蜕膜组织膜联蛋白A2 mRNA及蛋白表达的影响

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中华中医药杂志 2022年第1期37卷 483-486页

作者：童星丽郭银华聂晓伟殷燕云谈勇南京中医药大学附属医院(江苏省中医院) 南京210004 南京中医药大学南京210000

目的:观察丹参酮ⅡA(TⅡA)对复发性流产(RSA)小鼠蜕膜组织膜联蛋白A2(ANXA2)mRNA及蛋白表达的影响。方法:取雌性小鼠CBA/J分别与DBA/2及Balb/c两种雄性小鼠合笼交配分别建立RSA小鼠模型和正常妊娠小鼠模型。实验分为空白对照组、模型组... 详细信息

目的:观察丹参酮ⅡA(TⅡA)对复发性流产(RSA)小鼠蜕膜组织膜联蛋白A2(ANXA2)mRNA及蛋白表达的影响。方法:取雌性小鼠CBA/J分别与DBA/2及Balb/c两种雄性小鼠合笼交配分别建立RSA小鼠模型和正常妊娠小鼠模型。实验分为空白对照组、模型组、阿司匹林组及TⅡA低、中、高剂量组。干预后测定各组凝血酶原时间(PT)、D-二聚体(D-D)、同行半胱氨酸(HCY)的含量,分别采用实时免疫荧光定量PCR和Western Blot检测ANXA2 mRNA和蛋白表达情况,另外采用免疫组化检测ANXA2蛋白表达情况。结果:与模型组比较,TⅡA中、高剂量组均能显著降低RSA小鼠PT、D-D、HCY(P蜕膜组织ANXA2 mRNA和蛋白的表达(P蜕膜组织中ANXA2 mRNA和蛋白表达有关,与降低血清中PT、D-D和HCY有关。

关键词：丹参酮ⅡA 复发性流产膜联蛋白A2 蜕膜组织机制凝血酶原时间 D-二聚体同型半胱氨酸