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世界华人消化杂志 2011年第17期19卷 1767-1772页

作者：吴莺李翔周红范钰张尤历沈琰何亚龙江苏大学附属医院消化科江苏省镇江市212001 江苏大学基础医学与医学技术学院江苏省镇江市212013 江苏大学附属人民医院肿瘤科江苏省镇江市212001

目的:探讨***刺激人胃癌细胞BGC-823后,对细胞形态以及凋亡抑制基因Survivin和凋亡基因caspase-3mRNA表达的影响.方法:分别用东亚型***菌株和西方型***菌株超声提取物,刺激胃癌细胞BGC-823,显微镜下直接观察细胞形态的变化.同时利用荧... 详细信息

目的:探讨***刺激人胃癌细胞BGC-823后,对细胞形态以及凋亡抑制基因Survivin和凋亡基因caspase-3mRNA表达的影响.方法:分别用东亚型***菌株和西方型***菌株超声提取物,刺激胃癌细胞BGC-823,显微镜下直接观察细胞形态的变化.同时利用荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测胃癌细胞BGC-823凋亡抑制基因Survivin和凋亡基因caspase-3 mRNA的表达水平.结果:***刺激胃癌细胞BGC-823后12h,出现蜂鸟表型,呈时间依赖性,24h最明显,东亚型组与西方型组相比,引起的细胞蜂鸟表型百分率明显增加(29.3%±2.1%vs8.0%±2.0%,F=164.73,P<0.05).***超声提取液刺激胃癌细胞BGC-823后,在东亚型组和西方型组均出现凋亡抑制基因Survivin mRNA的表达量明显上调,与对照组相比caspase-3 mRNA的表达量明显下降(P<0.05);并且东亚型组Survivin mRNA的表达的上调以及cas-pase-3 mRNA的表达较西方型组均明显下降(P<0.05).结论:***超声提取液可诱导胃癌细胞BGC-823发生形态学改变,并且引起凋亡抑制基因Survivin mRNA表达上调、凋亡基因caspase-3 mRNA表达下降.东西方型***菌株之间存在生物活性的差异.

关键词：幽门螺杆菌蜂鸟表型凋亡相关基因 CagA蛋白分型

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幽门螺杆菌提取物体外对人胃癌细胞SGC-7901形态的影响

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世界华人消化杂志 2008年第9期16卷 919-923页

作者：陆芬英张尤历王文兵陈永昌张宇川刘勇攀吴莺江苏大学附属医院消化内科江苏省镇江市212001 江苏大学生命科学研究院江苏省镇江市212013 江苏大学医学院生理教研室江苏省镇江市212013

目的:探讨幽门螺杆菌(H pylori)刺激人胃癌细胞SGC-7901后,对细胞形态,迁移以及细胞骨架的影响.方法:从人胃黏膜组织中分离培养H pylori,将得到的H pylori菌体超声裂解,用超声提取物刺激SGC-7901细胞,直接观察SGC-7901细胞形态的变化:... 详细信息

目的:探讨幽门螺杆菌(H pylori)刺激人胃癌细胞SGC-7901后,对细胞形态,迁移以及细胞骨架的影响.方法:从人胃黏膜组织中分离培养H pylori,将得到的H pylori菌体超声裂解,用超声提取物刺激SGC-7901细胞,直接观察SGC-7901细胞形态的变化:细胞迁移活动用Boyden迁移槽和划线法分析;用phalloidin对细胞内F-actin进行荧光染色,研究其对细胞骨架的作用.各组间细胞迁移数量比较用单因素方差分析,组间两两比较用SNK检验:对照组和刺激组细胞发生蜂鸟表型的百分率进行t检验.结果:H pylori菌体超声提取物刺激人胃癌细胞SGC-7901后,细胞的活动性增强,高浓度和低浓度刺激组与对照组相比细胞迁移数明显提高(F=12697.314,P蜂鸟表型细胞数较对照组大大提高(t=29.626,P<0.01).对照组细胞仅有少量应激纤维形成,H pylori刺激10 min后,应激纤维增加.结论:H pylori可诱导胃癌细胞SGC-7901发生形态改变,促进其迁移,并且增加细胞内细胞骨架的形成.

关键词：幽门螺杆菌胃癌细胞蜂鸟表型迁移细胞骨架

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幽门螺杆菌对人胃癌细胞SGC-7091形态的影响

幽门螺杆菌对人胃癌细胞SGC-7091形态的影响

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作者：陆芬英江苏大学

学位级别：硕士

自1982年Robin JW和Marshall B等人首次从胃炎和消化性溃疡患者胃窦分离出幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H pylori)以来,因其感染与消化道疾病密切相关,其致病机制一向是研究的焦点。幽门螺杆菌是一种革兰氏染色阴性螺旋形的微需氧菌... 详细信息

自1982年Robin JW和Marshall B等人首次从胃炎和消化性溃疡患者胃窦分离出幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H pylori)以来,因其感染与消化道疾病密切相关,其致病机制一向是研究的焦点。幽门螺杆菌是一种革兰氏染色阴性螺旋形的微需氧菌,其感染是诱发人胃粘膜病变的主要因素之一。在世界范围内约有50%人群感染***。幽门螺杆菌致病因子包括细胞毒素相关基因A(Cytotoxin-associated gene A,cagA),空泡毒素基因A(vacuolatingcytotoxin A,VacA),cagT,cagE等,其中以cagA为其关键的毒力因子。临床和病理研究有力地证明幽门螺杆菌与慢性胃炎、消化性溃疡以及胃癌等疾病有着因果关联,但是***的致病机制尚不明确。小G蛋白RhoA是Rho家族的重要成员之一,在细胞信号转导通路中起着重要作用。它参与了一系列的生物学进程,包括细胞形态改变,迁移,细胞骨架的调节,平滑肌收缩和肿瘤浸润等。在众多肿瘤组织中,RhoA蛋白的高表达与肿瘤的发生和发展密切相关。SHP-2是一种具有两个SH2功能域的酪氨酸蛋白磷酸酶,以往的研究都集中于其对信号转导通路,如Rho家族GTP酶,MAPK和Ras等通道的影响,近年的研究发现SHP-2与肿瘤的发生也有一定的关联。本课题的目的是研究幽门螺杆菌对人胃癌细胞SGC-7901中的SHP-2的表达是否有影响,以及幽门螺杆菌对细胞形态,运动及细胞骨架的影响,探讨幽门螺杆菌与消化道疾病之间的相互关系。本研究将***菌株从人胃粘膜组织中分离,固体培养,收获后用超声波方法裂解***,提取其生物活性物质;取生长良好的人胃癌细胞SGC-7901,给予无血清培养基饥饿12h后,以H pyIori菌体提取物刺激胃癌细胞SGC-7901 1h,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法测定SHP-2 mRNA相对量,对PCR产物进行克隆和测序。通过实验发现***菌体提取物刺激胃癌细胞后,与阴性对照相比,细胞中的SHP-2 mRNA表达量无明显差异。在与GenBank中序列进行了同源性比较时发现,序列大小为376bp,同源性为93%。本试验还将***超声提取物刺激SGC-7901细胞,直接观察SGC-7901细胞形态的变化;用Boyden迁移槽和划线法分析细胞迁移活动;用phalloidin对细胞内F-actin进行荧光染色,研究***对细胞骨架的作用。结果发现,***菌体超声提取物刺激人胃癌细胞SGC-7901后,细胞的活动性增强,受刺激后蜂鸟表型细胞数较对照组大大提高,细胞内骨架也较对照组增多,转染野生型RhoA的细胞受***超声提取物刺激后细胞骨架较未转染者增多;而转染了无活性突变型RhoA的细胞受刺激后与未转染者相比无明显变化。以上结果表明,***提取物在转录水平对人胃癌细胞SGC-7901内SHP-2表达无影响;但其可通过增强RhoA活性而引起细胞发生一系列形态学改变,包括迁移性的增强,骨架增多以及细胞发生蜂鸟表型改变等。

关键词：幽门螺杆菌 SHP-2 SGC-7901 RhoA 蜂鸟表型迁移细胞骨架

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