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五步蛇毒蛋白c激活剂在脓毒症大鼠早期适应性免疫应答中的作用

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南方医科大学学报 2021年第4期41卷 514-520页

作者：孙瑶包鹏举张根葆王海华王国栋皖南医学院病理生理学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院蛇毒蛇伤研究所安徽芜湖241002 皖南医学院麻醉学院安徽芜湖241002 皖南医学院生理学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院药学院安徽芜湖241002

目的探讨五步蛇毒蛋白c激活剂(PcA)在脓毒症大鼠早期适应性免疫应答中的作用。方法采用SPF级SD大鼠78只,用随机数字表法分组:对照组(n=6,腹腔注射生理盐水);通过腹腔注射脂多糖(LPS 10 mg/kg)复制脓毒症大鼠模型,模型组以LPS注射后4、6... 详细信息

目的探讨五步蛇毒蛋白c激活剂(PcA)在脓毒症大鼠早期适应性免疫应答中的作用。方法采用SPF级SD大鼠78只,用随机数字表法分组:对照组(n=6,腹腔注射生理盐水);通过腹腔注射脂多糖(LPS 10 mg/kg)复制脓毒症大鼠模型,模型组以LPS注射后4、6、8、12、16、24 h时的标本采集时间分为6组,6只/组;余36只大鼠于LPS注射30 min后使用药物干预,分为1-磷酸鞘氨醇受体1(S1PR1)激动剂SEW2871干预组(0.5 mg/kg,腹腔注射)和PcA干预组(0.1 mg/kg,腹腔注射),各干预组以LPS注射后6、12、24 h时的标本采集时间分为3组,每组6只。采用ELISA法检测血浆IL-4、S1P、IL-12和IFN-γ水平,应用免疫荧光法检测肠系膜淋巴结S1PR1和cD103表达的变化。结果与对照组比较,脓毒症大鼠在注射LPS后的24 h内,血浆S1P、IL-12、IL-4和IFN-γ水平明显增高(PcD103的表达明显增高(PcD103的表达(PcA干预后,血浆IL-4水平明显增高,淋巴结S1PR1表达显著增多(PcA对维持脓毒症早期机体炎症和免疫反应的平衡具有调节作用,其机制可能与S1P-S1PR1通路有关。

关键词：脓毒症适应性免疫应答 1-磷酸鞘氨醇 1-磷酸鞘氨醇受体1 五步蛇毒蛋白c激活剂

蛇毒蛋白c激活剂的活化蛋白c特性及影响因素的探讨

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中药材 2005年第3期28卷 198-201页

作者：侯力强赵路宁江中喜黄韶玲何泉华孔天翰管锦霞广州医学院蛇毒研究所 510182 广州医学院第二附属医院 510260

目的:研究蛇毒蛋白c激活剂(PcA-SV)活化蛋白c的特性,探讨可能影响PcA-SV作用的实验条件.方法:分别采用APTT法和cBS02.46发色底物法,研究PcA-SV的作用特点,探讨PcA-SV在不同实验条件下的抗凝活性及酰胺酶活性.结果:PcA-SV是蛋白c特异性... 详细信息

目的:研究蛇毒蛋白c激活剂(PcA-SV)活化蛋白c的特性,探讨可能影响PcA-SV作用的实验条件.方法:分别采用APTT法和cBS02.46发色底物法,研究PcA-SV的作用特点,探讨PcA-SV在不同实验条件下的抗凝活性及酰胺酶活性.结果:PcA-SV是蛋白c特异性激活剂,可特异性地作用于蛋白c,使后者表现抗凝和酰胺酶活性.PcA-SV的最适pH值为6.0～7.0,最适温度为37～40℃,肝素、枸橼酸钠等抗凝剂及Na+、K+、EDTA等不影响其活性.结论:PcA-SV是一种效价较高、特异性强、影响因素少的蛋白c活化剂.

关键词：蛇毒蛋白c激活剂活化蛋白c 抗凝剂酰胺酶酶活性

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五步蛇毒蛋白c激活剂的纯化与活性分析

蛇志 2008年第4期20卷 249-251页

作者：张根葆张毅孔岩许敏李曙皖南医学院蛇毒研究室安徽芜湖241002 河南工业大学国际学院

目的研究五步蛇毒蛋白c激活剂(PcA)组分的分离纯化及其抗凝活性。方法借助DEAE-cel-lulose、cM-Sephadex c-50和Sephadex G-75柱层析,以离子交换和凝胶过滤法从皖南产五步蛇粗毒中分离纯化PcA组分;以SDS-PAGE凝胶电泳检测其纯度和分子量... 详细信息

目的研究五步蛇毒蛋白c激活剂(PcA)组分的分离纯化及其抗凝活性。方法借助DEAE-cel-lulose、cM-Sephadex c-50和Sephadex G-75柱层析,以离子交换和凝胶过滤法从皖南产五步蛇粗毒中分离纯化PcA组分;以SDS-PAGE凝胶电泳检测其纯度和分子量,发色底物法(chromogenic Substrate Assay)测定PcA组分的生色反应能力;测定PcA对正常血浆KPTT和PT的影响。结果从五步蛇粗毒中纯化的PcA组分经SDS-PAGE测定为单一区带,相对分子质量约为18.5 kD,等电点pH4.9;发色底物法显示其具有生色反应能力;该PcA1 mg/L在体外明显延长KPTT,但PT不受影响。结论采用离子交换和凝胶过滤法,可从皖南产五步蛇毒中分离纯化出高纯度的PcA组分,该组分可抑制内凝途径影响血液凝固过程。

关键词：五步蛇毒蛋白c激活剂柱层析

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蛋白c、蛋白c激活剂和血栓性疾病

蛇志 1999年第4期11卷 79-82页

作者：郑文波瞿国伟浙江大学湖滨校区杭州310031

五步蛇毒PcA改善脓毒症大鼠的血管低反应性

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中国病理生理杂志 2014年第10期30卷 1753-1759页

作者：包鹏举孙瑶王海华张根葆胡钱国蒋佳珅皖南医学院生理学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院蛇毒研究所安徽芜湖241002 皖南医学院病理生理学教研室安徽芜湖241002 黄山市昌仁医院安徽黄山245200

目的:初步探讨五步蛇毒蛋白c激活剂(PcA)对脓毒症大鼠血管张力的影响。方法:SD雄性大鼠随机分成6组(n=6):即假手术组(sham组)、模型组(LPS组)、PcA干预组(LPS+PcA组,分0.1 mg/kg、0.3mg/kg和0.6 mg/kg剂量组)和阳性对照组(LPS+多粘菌素B... 详细信息

目的:初步探讨五步蛇毒蛋白c激活剂(PcA)对脓毒症大鼠血管张力的影响。方法:SD雄性大鼠随机分成6组(n=6):即假手术组(sham组)、模型组(LPS组)、PcA干预组(LPS+PcA组,分0.1 mg/kg、0.3mg/kg和0.6 mg/kg剂量组)和阳性对照组(LPS+多粘菌素B组,0.2 mg/kg多粘菌素B)。采用离体血管灌流法,经生物信号处理系统测定主动脉环的张力变化。结果:LPS组大鼠的平均动脉血压(MABP)、心率(HR)、左室发展压(LVDP)、心室内压最大上升/下降速率(±dp/dtmax)均显著下降;PcA干预组各指标较LPS组均有明显改善。LPS组主动脉环对去氧肾上腺素(Phe)刺激的收缩反应和对乙酰胆碱(Ach)的舒张反应较sham组均下降;而PcA干预组(尤其是0.6 mg/kg剂量组)对Phe刺激的收缩反应和对Ach的舒张反应较LPS组则明显提高。LPS组的去内皮主动脉环对Phe刺激的收缩反应量效曲线较sham组明显下移,但PcA干预组的去内皮主动脉环对Phe刺激的收缩反应与LPS组相比无显著差异。各组主动脉环对硝普钠诱导的非内皮依赖性舒张反应差异无统计学意义。N-硝基-L-精氨酸甲酯和甲烯蓝预处理可以升高主动脉环对Phe的收缩反应。结论:五步蛇毒PcA通过改善血管内皮功能而逆转脓毒症大鼠血管的低反应性,其机制可能与抑制NO-Gc-cGMP通路的活化有关。

关键词：五步蛇脓毒症蛋白c激活剂主动脉

五步蛇毒PcA在心肌缺血再灌注损伤诊断中的实验研究

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皖南医学院学报 2014年第5期33卷 382-385页

作者：张娅张根葆季娜王斐吴娟皖南医学院病理生理学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院蛇毒研究所安徽芜湖241002

目的:探讨五步蛇毒蛋白c激活剂(Protein c activator,PcA)在心肌缺血再灌注损伤诊断中的应用。方法:SD大鼠随机分成对照组(control,c组)和缺血再灌注损伤组(Ischemia reperfusion injury,IR组),每组15只。IR大鼠开胸结扎左冠状动脉前降... 详细信息

目的:探讨五步蛇毒蛋白c激活剂(Protein c activator,PcA)在心肌缺血再灌注损伤诊断中的应用。方法:SD大鼠随机分成对照组(control,c组)和缺血再灌注损伤组(Ischemia reperfusion injury,IR组),每组15只。IR大鼠开胸结扎左冠状动脉前降支30 min后再灌注120 min,c组大鼠只穿线而不结扎左冠状动脉前降支;记录大鼠在体心电图及心肌组织学改变。留取血液以制备血浆,检测其活化部分凝血酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT);以发色底物法检测血浆蛋白质c(Protein c,Pc)活性;酶联免疫吸附法检测血浆游离蛋白质S(plasma free protein S,FPS)的含量。结果:同c组相比,IR组大鼠心肌横纹模糊不清或消失,肌纤维及肌丝明显紊乱且心电图改变明显;IR组大鼠心脏再灌注60 min后血浆APTT明显缩短(Pc活性缺血期间明显下降,再灌注60 min明显回升,而再灌注120 min又再次下降(PcA制备的血浆蛋白c活性检测试剂可较灵敏地反映心肌缺血再灌注损伤大鼠血浆蛋白c活性的变化。

关键词：蛋白c激活剂蛋白c 蛋白S 缺血再灌注损伤心肌