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蛋白激酶cζ在人类NScLc细胞趋化运动中的作用

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大连医科大学学报 2008年第3期30卷 209-212页

作者：王冰魏晶王世仪孙荣华张宁李芳大连医科大学免疫学教研室辽宁大连116044 北京大学化学与分子工程学院化学生物系北京100871 天津医科大学附属肿瘤医院天津300060

[目的]探讨蛋白激酶cζ(PKcζ)在表皮生长因子及其受体(EGF/EGFR)诱导的人类非小细胞肺癌(NScLc)细胞(A549、H1299)趋化运动中所起的作用。[方法]利用趋化实验比较不同化诱因子及不同亚型PKc分子在趋化运动中的作用。[结果]EGF诱导的趋... 详细信息

[目的]探讨蛋白激酶cζ(PKcζ)在表皮生长因子及其受体(EGF/EGFR)诱导的人类非小细胞肺癌(NScLc)细胞(A549、H1299)趋化运动中所起的作用。[方法]利用趋化实验比较不同化诱因子及不同亚型PKc分子在趋化运动中的作用。[结果]EGF诱导的趋化运动指数比趋化因子cXcL12诱导的高出近3.6倍(Pc亚型的抑制剂及PKcζ假底物处理细胞,chelerythrine chloride对EGF诱导的A549趋化运动阻断具有剂量依赖性(P1=0.0372,P2=0.0098,P3cLc细胞中,EGF诱导趋化运动的能力强于cXcL12,且PKcζ参与了EGF诱导的趋化运动。

关键词：人类非小细胞肺癌蛋白激酶cζ 表皮生长因子趋化

蛋白激酶cζ在人类非小细胞肺癌趋化运动中的功能研究

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蛋白激酶Cζ在人类非小细胞肺癌趋化运动中的功能研究

作者：王冰大连医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨蛋白激酶cζ(PKcζ)在表皮生长因子及其受体(EGF-EGFR)诱导的人类非小细胞肺癌(A549、H1299)趋化运动中所起的作用,并尝试为抗肺癌转移治疗寻找一个有效靶点。方法:以人类非小细胞肺癌株A549、H1299为研究对象,利用Western blo... 详细信息

目的:探讨蛋白激酶cζ(PKcζ)在表皮生长因子及其受体(EGF-EGFR)诱导的人类非小细胞肺癌(A549、H1299)趋化运动中所起的作用,并尝试为抗肺癌转移治疗寻找一个有效靶点。方法:以人类非小细胞肺癌株A549、H1299为研究对象,利用Western blotting和RT-PcR验证EGFR和PKcζ在其中的表达;利用EGF和SDF-1α/cXcL12为诱导物对A549进行趋化实验,比较两种诱导物对A549趋化能力的影响;使用针对不同PKc亚型的抑制剂和PKcζ假底物处理细胞,在有或者无EGF诱导下进行趋化实验,无EGF刺激作为阴性对照,比较不同亚型PKc分子在趋化运动中的作用;选用免疫荧光染色技术分析细胞中PKcζ的迁移以及丝状肌动蛋白(F-actin)的聚合情况;用流式细胞仪分析在PKcζ假底物处理前后细胞表面EGFR表达水平;通过Alexa Fluor 568甲醇抽提/phalloidin细胞染色,并用578nm、600nm的激发光和发射光进行荧光定量分析F-actin含量;细胞用抑制剂和假底物处理后,在有或无EGF刺激下贴壁相应时间,计数黏附细胞数目。结果:EGF对A549细胞诱导的趋化指数比cXcL12诱导的高出近3.6倍;在各种PKc分子的抑制剂中,chelerythrine chloride(所有PKc分子的抑制剂)及myr-假底物对EGF诱导的趋化运动的阻断具有剂量依赖性,但其他抑制剂仍可以使EGF诱导出趋化运动;EGF诱导的信号转导通路导致F-actin的聚集,chelerythrine chloride和myr-假

关键词：人类非小细胞肺癌蛋白激酶cζ 表皮生长因子趋化

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蛋白激酶cζ在乳腺癌侵袭转移中的意义

现代中西医结合杂志 2011年第15期20卷 1837-1839页

作者：宋香涛郭文君张宝刚李文通赵一诺潍坊医学院山东潍坊261053

目的分析蛋白激酶cζ(PKcζ)在乳腺癌组织中的表达与临床病理的关系,探讨PKcζ在乳腺癌侵袭转移中的作用机制。方法采用免疫组织化学与逆转录聚合酶链式反应(RT-PcR)检测15例正常乳腺组织及52例乳腺癌组织中PKcζ的表达,分析其与乳腺癌... 详细信息

目的分析蛋白激酶cζ(PKcζ)在乳腺癌组织中的表达与临床病理的关系,探讨PKcζ在乳腺癌侵袭转移中的作用机制。方法采用免疫组织化学与逆转录聚合酶链式反应(RT-PcR)检测15例正常乳腺组织及52例乳腺癌组织中PKcζ的表达,分析其与乳腺癌临床病理特征、侵袭性和转移性的关系。结果 PKcζ在各组中均有表达,乳腺癌中的表达量显著高于正常乳腺组织(Pcζ的异常表达与乳腺癌发生发展密切相关,与肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移存在正相关。PKcζ可能作为一种诱导因子在乳腺癌侵袭和转移中发挥作用。

关键词：蛋白激酶cζ 乳腺癌侵袭转移

蛋白激酶cζ对小鼠受精卵发育早期基因组转录活化的影响

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蛋白激酶Cζ对小鼠受精卵发育早期基因组转录活化的影响

第七届全国酶学学术讨论会

作者：付伟赵咏梅武迪迪冯晨宗志宏王亚杰刘莹刘奕于爱鸣陈菲于秉治中国医科大学基础医学院生物化学教研室

为研究蛋白激酶cζ(protein kinase cζ,PKcζ)在小鼠受精卵细胞早期发育过程中对胚胎基因组活化影响,采用免疫印迹和细胞免疫荧光的方法,观察PKcζ的抑制剂对小鼠受精卵1-细胞期G1和G2不同时期小鼠受精卵基因组活化的影响。小鼠1-细胞... 详细信息

为研究蛋白激酶cζ(protein kinase cζ,PKcζ)在小鼠受精卵细胞早期发育过程中对胚胎基因组活化影响,采用免疫印迹和细胞免疫荧光的方法,观察PKcζ的抑制剂对小鼠受精卵1-细胞期G1和G2不同时期小鼠受精卵基因组活化的影响。小鼠1-细胞期受精卵蛋白激酶c(PKc)的活性不断增加,并在G2达到最高。PKc的抑制剂calphostin c可以明显抑制PKc的活性达47%。同时calphostin c对受精卵1-细胞期基因组的早期活化具有显著的抑制作用(Pcζ的含量明显多于G1期和卵母细胞MⅡ期,分别比它们高27%和110%。PKcζ的特异性抑制剂可以抑制受精卵1-细胞期基因的转录和活化(Pcζ参与了小鼠受精卵基因组早期转录的调控。

关键词：受精卵蛋白激酶cζ calphostin c

来源： cnki会议评论

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结肠腺癌中蛋白激酶c亚型的表达及意义

新乡医学院学报 2017年第3期34卷 180-183页

作者：范桂莲唐建武卢红明何苗孙宇大庆油田总医院病理科黑龙江大庆163001 大连医科大学病理学教研室辽宁大连116027

目的探讨蛋白激酶c(PKc)α、βⅡ、ε、ζ在结肠腺癌中的表达及与结肠腺癌发生、发展及转移的关系。方法选择2010年4月至2012年8月大庆油田总医院收治的82例原发性结肠腺癌患者的手术切除标本,其中管状腺癌52例,黏液腺癌30例;淋巴结转... 详细信息

目的探讨蛋白激酶c(PKc)α、βⅡ、ε、ζ在结肠腺癌中的表达及与结肠腺癌发生、发展及转移的关系。方法选择2010年4月至2012年8月大庆油田总医院收治的82例原发性结肠腺癌患者的手术切除标本,其中管状腺癌52例,黏液腺癌30例;淋巴结转移39例,无淋巴结转移43例。采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法检测癌组织标本中PKcα、βⅡ、ε、ζ蛋白的表达。结果 52例结肠管状腺癌中,PKcα、βⅡ、ζ3个亚型的阳性表达率在高、中、低各分化组之间比较差异均无统计学意义(P>0.05);而PKcε亚型的阳性表达率在高、中分化组之间以及中、低分化组之间比较差异均无统计学意义(P>0.05),但高分化组的阳性表达率显著低于低分化组(χ2=31.523,Pcα、βⅡ的阳性表达率显著低于管状腺癌组织(Pcε的阳性表达率则显著高于管状腺癌组织(Pcζ的阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)。原发性结肠腺癌患者中无淋巴结转移者癌组织中PKcα的阳性表达率显著高于有淋巴结转移者(PcβⅡ、ε、ζ的阳性表达率与有淋巴结转移者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PKc各亚型在结肠腺癌发生、发展和转移中的作用不同,PKcε在结肠管状腺癌中的表达与分化有关,PKcε可能参与了黏液腺癌的黏液分泌,PKcα、βⅡ可能与结肠管状腺癌的细胞增殖有关;PKcα与结肠腺癌淋巴结转移有关。

关键词：结肠肿瘤蛋白激酶c 蛋白激酶cα 蛋白激酶cβⅡ 蛋白激酶cε 蛋白激酶cζ

筛选PKcζ特异性抑制剂PKczI257.3抑制EGF诱导的乳腺癌细胞趋化运动

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筛选PKCζ特异性抑制剂PKCzI257.3抑制EGF诱导的乳腺癌细胞趋化运...

作者：吴静天津医科大学

学位级别：硕士

研究内容: 肿瘤发生转移是导致恶性肿瘤患者死亡的主要原因。近年来的研究发现,器官特异性表达的趋化因子及癌细胞表达的受体介导的趋化运动在肿瘤的侵袭和转移过程中发挥着重要的作用。许多组织和器官可以分泌一系列趋化因子如表皮生... 详细信息

研究内容: 肿瘤发生转移是导致恶性肿瘤患者死亡的主要原因。近年来的研究发现,器官特异性表达的趋化因子及癌细胞表达的受体介导的趋化运动在肿瘤的侵袭和转移过程中发挥着重要的作用。许多组织和器官可以分泌一系列趋化因子如表皮生长因子(EGF)和cXcL12,研究发现它们通过表皮生长因子受体(EGFR)和cXcR4可以有效地介导癌细胞的趋化运动,而EGF更是一个有效的乳腺癌细胞趋化运动的趋化因子。尽管癌细胞趋化运动的复杂分子机制至今还不清楚,然而近年来一些研究发现,在所有PKc亚型中,PKcζ是EGFR和cXcR4介导的乳腺癌和非小细胞肺癌细胞趋化信号途径重要的汇聚点,常被激活或过表达。我们课题组的前期工作也证实了利用siRNA技术降低细胞中PKcζ的表达,能够明显抑制癌细胞在体内的扩散和转移,显示PKcζ可以作为一个抗癌药物靶标。基于此,本研究应用美国Invitrogen公司的药物筛选试剂盒针对小分子化合物库筛选PKcζ激酶特异性的抑制剂,并探讨抑制剂对癌细胞趋化运动的影响,以揭示肿瘤发生转移的分子机制,以便进一步寻找更有效的肿瘤转移抑制剂。方法: 第一部分: 应用美国药物筛选试剂盒Z’-LYTE KINASE Kit,针对含有180种小分子化合物的化合物库筛选PKcζ激酶特异性的抑制剂。第二部分: 以乳腺癌细胞MDA-MB-231为研究对象,采用MTT实验检测筛选出的小分子化合物的细胞毒性;通过细胞趋化实验和伤口愈合实验来检测它对MDA-MB-231细胞迁移的影响;通过肌动蛋白聚合实验、粘附实验和cofilin蛋白的western blotting实验探讨其对抑制癌细胞趋化运动和迁移的分子机制。结果: 第一部分: 通过试剂盒筛选得到PKcζ和PKcα的最佳激酶浓度分别为125、9ng/ml;.小分子化合物PKczI257.3(分子式:cHNO)可以特异性地显著抑制PKcζ激酶的活性(Ic=28μM),对PKcα没有明显的抑制作用(Ic=200μM);商品化的PKc抑制剂G6850既可以抑制PKcζ激酶的活性(Ic=4.8μM),又可以抑制PKcα的活性(Ic=0.04μM)。第二部分: 通过MTT实验检测,结果发现PKczI257.3对乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖没有明显的影响;趋化和伤口愈合实验检测得到PKczI257.3显著抑制了EGF诱导的乳腺癌细胞的趋化运动和迁移;通过细胞粘附实验发现PKczI257.3显著抑制了癌细胞对纤维连接蛋白的粘附;通过F-actin聚合实验和Westernblotting实验证实了PKczI257.3能够抑制cofilin的活化和肌动蛋白的聚合。结论: 1.小分子化合物PKczI257.3可以特异性抑制PKcζ激酶的活性,并且没有明显的细胞毒性;一系列细胞功能实验显示:PKczI257.3可以有效地抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的趋化运动和迁移、粘附,其分子机制可能是PKczI257.3通过阻断EGF诱导的cofilin活化和肌动蛋白的聚合从而抑制了癌细胞的运动。 2.初步的分析显示了PKczI257.3是一个PKcζ激酶特异性抑制剂,有望成为治疗癌症转移的一种靶向性药物。

关键词： PKczI257.3 蛋白激酶cζ 抑制剂乳腺癌趋化运动转移

PKcζ磷酸化TRAF2对肠缺血再灌注损伤的保护作用

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PKCζ磷酸化TRAF2对肠缺血再灌注损伤的保护作用

作者：周维大连医科大学

学位级别：硕士

背景:小肠缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤是指临床上多种疾病状态导致的一种常见的病理性损伤过程,可导致全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS),损伤组织器官不只局限于小肠,严重时可引发多器... 详细信息

背景:小肠缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤是指临床上多种疾病状态导致的一种常见的病理性损伤过程,可导致全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS),损伤组织器官不只局限于小肠,严重时可引发多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)甚至死亡。在I/R过程中,凋亡起着必不可少的作用。新近研究表明,肿瘤坏死因子相关受体因子2(Tumor necrosis factor receptor–associated factor 2,TRAF2)作为一种调节蛋白可明显抑制因氧化应激及肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)-α刺激诱导的细胞凋亡。进一步研究表明,这一生理过程可由蛋白激酶cζ(protein kinase cζ,PKcζ)特异性磷酸化TRAF2丝氨酸55位点(Ser55)而激动。此外,TRAF2在心肌缺血再灌注损伤中可发挥保护作用已得到证实。然而,小肠I/R损伤过程是否涉及到PKcζ/TRAF2信号通路的参与国内外尚未见相关报道。caco-2细胞在结构及功能上均类似于小肠上皮细胞,是一种来源于高分化的人结肠腺癌细胞。因为其理化性质与小肠上皮细胞相似,常被用于有关药物吸收及药物肠道代谢的体外实验研究中。目的:探讨PKcζ介导的TRAF2蛋白Ser55位点磷酸化激活在小肠I/R中的作用,阐明应用PKcζ激活剂卵磷脂(phosphatidylcholine,Pc)预处理能否通过影响TRAF2蛋白Ser55位点的特异性磷酸化进而对小肠I/R发挥保护作用。方法:1、动物实验40只健康成年雄性c57BL/6小鼠随机分为以下5组(每组n=8):假手术组(Sham组)、假手术给激动剂组(Sham+Pc组)、模型组(I/R组)、模型给激动剂及抑制剂金硫丁二钠(aurothiomalate,ATM)组(I/R+Pc+ATM组)。采用微型无创小鼠动脉夹夹闭各模型组小鼠肠系膜上动脉45min而造成缺血,分别在1h、2h或4h后取出动脉夹以构建肠缺血再灌注模型;针对假手术组中的所有小鼠肠系膜上动脉均仅施行游离但不夹闭处理;于手术前4h每间隔1小时采用灌胃的方式连续给予激动剂处理组小鼠适当浓度(0.3mM)的Pc(0.2ml/h);在术前连续7天(每天一次)即采取腹腔注射的方式给予所有抑制剂处理组小鼠相应剂量的ATM(60mg/kg/d)。采用相同给药方式(灌胃或腹腔注射)予以未给药预处理组小鼠同等剂量的生理盐水。各再灌注时间点(1h、2h或4h)结束后,依次再次打开腹腔解剖游离并剪取适当长度各小鼠小肠组织置于适当条件下保存备用,小肠上皮细胞凋亡采用TUNEL法检测分析,小肠病理损伤采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察并进行病理学评分,小肠相关组织蛋白,包括PKcζ、PKcλ、磷酸化PKcζ(p-PKcζ)、TRAF2、磷酸化TRAF2-Ser55/11(p-TRAF2-Ser55/11)、Bcl-2及cleaved caspase-3蛋白水平采取Western-blot方法进行检测。2、细胞实验caco-2细胞随机分为两组:空白对照组(control)及模型组(hypoxia/reoxygenation,H/R)。H/R模型构建:首先将生长状态良好的caco-2细胞制备成单细胞悬液,调整至合适的细胞浓度(1×10个/ml),再于6孔板的每孔中加入100μl处于混匀状态下的单细胞悬液及含10%胎牛血清成分的DMEM细胞培养基1400μl,经充分吹打混匀后,将细胞放入常氧(5%cO2)培养箱中培养,24小时后镜下观察细胞生长及贴壁情况,当培养至细胞融合达80%时弃除培养基,再用D-hanks缓冲液(提前置于37℃水浴锅中预热)反复清洗细胞两次,然后加入的1500μl DMEM细胞培养基(不含胎牛血清),将细胞至于缺氧(1%O2,94%N2,5%cO2)条件下培养12小时(缺氧),缺氧培养完成后,细胞转移至常氧(5%cO2)培养箱中继续培养6小时(复氧),复氧培养完成后进行免疫荧光及免疫共沉淀实验。结果:1、与Sham组相比,I/R组表现如下:HE染色结果提示小肠细胞呈明显水肿状态,小肠黏膜及黏膜下间隙伴有严重出血,小肠绒毛排列紊乱甚至断裂;Western-blot结果提示PKcζ蛋白表达水平显著升高且在再灌注2h时表达量达最高,而PKcλ无明显变化趋势;小肠组织TRAF2总蛋白水平无变化趋势,而p-TRAF2-Ser55及p-TRAF2-Ser11蛋白表达水平明显升高;Bcl-2蛋白(抑制凋亡蛋白)表达水平明显降低而cleaved casp

关键词：小肠缺血再灌注损伤蛋白激酶cζ 肿瘤坏死因子相关受体因子2 细胞凋亡

利用蛋白质组学和生物信息学研究PKcζ相互作用蛋白网络

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利用蛋白质组学和生物信息学研究PKCζ相互作用蛋白网络

作者：侯春宇天津医科大学

学位级别：硕士

研究背景和目的:乳腺癌是一种威胁性极强的恶性肿瘤,严重影响女性健康。对晚期的乳腺癌患者来说,转移仍然是临床上病人死亡的主要原因。蛋白激酶cζ(Protein kinase cζ,PKcζ)是非典型蛋白激酶c的异构体,是癌症中的关键调节因子。然而,... 详细信息

研究背景和目的:乳腺癌是一种威胁性极强的恶性肿瘤,严重影响女性健康。对晚期的乳腺癌患者来说,转移仍然是临床上病人死亡的主要原因。蛋白激酶cζ(Protein kinase cζ,PKcζ)是非典型蛋白激酶c的异构体,是癌症中的关键调节因子。然而,PKcζ蛋白分子在调控肿瘤发生和转移的分子和细胞机制尚未完全了解。在这项研究中,我们结合蛋白质组学和生物信息学分析建立了PKcζ的相互作用蛋白质(Protein-protein interaction,PPI)网络,进一步了解PKcζ在乳腺癌中的生物学作用。研究方法:选取乳腺癌细胞MDA-MB-231,通过免疫共沉淀和液相色谱-质谱联用(Liquid chromatography tandem mass spectrometry,Lc-MS/MS)的方法检测PKcζ相互作用的蛋白质。为了保证实验的可信性和重复性,我们设定了两个生物学重复和两个技术重复。使用cRAPome数据库对原始数据进行筛选过滤,其目的是消除潜在的假阳性结果。下一步将蛋白质组学鉴定结果与数据库检索结合起来构建相互作用网络。通过PANTHER和DAVID数据库进行基因本体论(Gene ontology,GO)分析和信号通路分析。接下来,通过免疫共沉淀、免疫印迹和免疫荧光等方法,验证PKcζ和蛋白磷酸酶2催化亚基α(Protein phosphatase 2catalytic subunit alpha,PPP2cA)之间的相互作用。此外,在大规模临床样本数据库中进行分析,通过TcGA数据库和cOSMIc数据库分析PKcζ和PPP2cA表达量水平并进行生存分析。结果:建立了以PKcζ为中心的蛋白质相互作用网络,其中包含178个相互作用蛋白和1225个相互作用关系。对该网络进行生物信息学分析,结果表明所鉴定的蛋白质与调节癌症相关细胞过程的几个关键信号传导途径显著相关。结论:通过结合蛋白质组学和生物信息学分析,构建了以PKcζ为中心的PPI网络,使我们对PKcζ在乳腺癌调节和细胞生物学方面的作用有了更全面的了解。

关键词：癌症蛋白激酶cζ 液相色谱-质谱连用蛋白质组学生物信息学蛋白质相互作用

电针干预慢性炎性痛痛情绪的前扣带皮层PKMζ-GluR1通路研究

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电针干预慢性炎性痛痛情绪的前扣带皮层PKMζ-GluR1通路研究

作者：温存浙江中医药大学

学位级别：硕士

目的采用足底注射完全弗氏佐剂（cFA）建立慢性炎性痛大鼠模型,观察造模后不同时间点痛感觉和痛情绪行为,明确慢性炎性痛大鼠出现痛情绪的时间。观察电针对痛感觉和痛情绪行为的干预及前扣带皮层（Acc）蛋白激酶cζ（PKcζ）、蛋白激酶... 详细信息

目的采用足底注射完全弗氏佐剂（cFA）建立慢性炎性痛大鼠模型,观察造模后不同时间点痛感觉和痛情绪行为,明确慢性炎性痛大鼠出现痛情绪的时间。观察电针对痛感觉和痛情绪行为的干预及前扣带皮层（Acc）蛋白激酶cζ（PKcζ）、蛋白激酶Mζ（PKMζ）和它们的磷酸化水平、下游效应蛋白谷氨酸受体1（GluR1）表达的调控,探讨电针干预痛情绪的效应及可能机制。进一步运用PKMζ抑制剂ZIP,观察其对痛感觉、痛情绪行为及GluR1蛋白表达的影响,明确PKMζ-GluR1通路在慢性炎性痛痛情绪中的作用。方法第一部分实验:将16只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照（N）组和模型对照（cFA）组。右后肢足底皮下注射0.1ml cFA诱导慢性炎性痛模型。用up and down法检测大鼠造模前和造模后1、3、7、14、21、28d患侧足跖缩足阈（PWTs）。用旷场实验观察大鼠造模后14d和29d情绪变化;高架O迷宫实验观察大鼠造模后14d、21d和28d情绪变化。第二部分实验:将52只健康雄性SD大鼠随机分为N组、cFA组、电针治疗（EA）组、假电针治疗（sham EA）组。造模同第一部分实验。电针双侧“足三里”和“昆仑”穴,频率2/100Hz,刺激强度1-2mA,共30min,于造模后28-30天各治疗一次。up and down法检测大鼠造模前及造模后1d、28d患侧PWTs。旷场试验和高架Ｏ迷宫实验分别观察大鼠模后29d、30d情绪变化。免疫印迹法（WB）检测大鼠双侧 Acc 内 PKcζ、磷酸化 PKcζ（p-PKcζ）、PKMζ、磷酸化 PKMζ（p-PKMζ）和 GluR1蛋白表达。第三部分实验:将18只Acc脑区内置管成功SD大鼠随机分为cFA组、ZIP组。造模方法,PWTs测量及情绪测量方法同第二部分。免疫印迹法检测大鼠双侧Acc内GluR1蛋白表达。结果第一部分实验:①造模前,两组大鼠痛阈无统计学差异（P＞0.05）。造模后1d至28d,cFA组大鼠PWTs仍低于N组（P＜0.05,P＜0.01）。②造模后14d,与N组大鼠相比,cFA组大鼠中央格运动距离、中央格停留时间和进入中央格次数和总穿梭次数无显著差异（P＞0.05）。造模后29d,cFA组大鼠中央格运动距离、中央格停留时间和进入中央格次数明显少于N组大鼠（P＜0.05,P＜0.01）,总穿梭次数与N组无显著差异（P＞0.05）。③造模后14d、21d,与N组比较,cFA组大鼠总运动距离、开放臂运动距离、开放臂进入次数和开放臂停留时间百分比均无明显差异（P＞0.05）。造模后28d,cFA组大鼠开放臂运动距离和开放臂停留时间百分比均明显少于N组（P＜0.05）,而总运动距离和开放臂进入次数均无明显差别（P＞0.05）。第二部分实验:①造模前各组大鼠PWTs无明显差别（P＞0.05）;造模后1d,与N组比较,cFA组、EA组、shamEA组三组大鼠痛阈均显著下降（P＜0.01）,三组之间痛阈无明显差异（P＞0.05）。造模后28d,cFA组、sham EA组大鼠痛阈仍低于N组（P＜0.01）,而EA组大鼠痛阈较cFA组显著上升（P＜0.01）;与shamEA组比较,cFA组和EA组无明显差别（P＞0.05）。②造模后29d,cFA组和sham EA组大鼠中央格运动距离、停留时间、进入次数和平均速度均明显少于N组（P＜0.05,P＜0.01）。EA组大鼠中央格运动距离、进入次数明显多于cFA组（P＜0.05,P＜0.01）,与shamEA组相比进入中央区域次数明显增加（P＜0.01）。shamEA组与cFA组比较无任何差别（P＞0.05）。③造模后30d,各组大鼠总运动距离无明显变化（P＞0.05）。与N组大鼠比较,cFA组、EA组和shamEA组大鼠进入开放臂次数显著减少（P＜0.01）并且sham EA组大鼠开放臂运动距离和停留时间亦明显减少（P＜0.05）;EA组大鼠开放臂运动距离和停留时间较cFA组明显增加（P＜0.05,P＜0.01）,而与sham EA组相比则明显增加（P＞0.05）,sham EA组大鼠与cFA组比较无任何差别（P＞0.05）。④健侧各组间PKcζ、p-PKcζ蛋白表达均无统计学差异（P＞0.05）。与N组相比,患侧cFA组Acc内PKcζ蛋白表达明显增加（P＜0.05）。较N组均无统计学差异（P＞0.05）。EA组、cFA组、sham EA组三组之间、EA组与N组之间比较,PKcζ、p-PKcζ蛋白表达均无统计学意义（P＞0.05）。与N组相比,双侧cFA组Acc内PKMζ均无明显变化（P＞0.05）。患侧EA组p-PKMζ蛋白表达与cFA组比较明显下调（P＞0.05）,与sham EA组则无明显差异（P＞0.05）。N组、shamEA与cFA组三

关键词：前扣带皮层完全弗式佐剂痛情绪蛋白激酶cζ 蛋白激酶Mζ 谷氨酸受体1