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蛋白微阵列免疫分析法用于海洋致病菌的定量检测

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分析化学 2006年第10期34卷 1411-1414页

作者：黄荣夫庄峙厦鄢庆枇李景喜陈石王小如厦门大学化学化工学院化学系现代分析科学教育部重点实验室集美大学水产学院

建立了一种用于水体中副溶血弧菌、河弧菌和大肠杆菌检测定量的蛋白微阵列免疫分析法。以Cy3标记免疫球蛋白(IgG)为探针,蛋白芯片为载体,对孵育反应的IgG浓度、反应时间和温度等条件进行了优化,结果表明:当IgG浓度为0.1g/L在37℃下孵育6... 详细信息

建立了一种用于水体中副溶血弧菌、河弧菌和大肠杆菌检测定量的蛋白微阵列免疫分析法。以Cy3标记免疫球蛋白(IgG)为探针,蛋白芯片为载体,对孵育反应的IgG浓度、反应时间和温度等条件进行了优化,结果表明:当IgG浓度为0.1g/L在37℃下孵育60min,可以获得理想的检测效果;在优化条件下,本方法中副溶血弧菌、河弧菌和大肠杆菌的检出限分别为9.9×104个/mL、9.3×104个/mL和3.9×105个/mL;将本方法与ELISA进行了比较,结果表明,本方法具有快速、操作便捷、高通量检测等特点;并将本方法应用于海水中这3种致病菌的快速、准确地定量检测。

关键词：蛋白微阵列荧光免疫法海洋致病菌

EDTA应用于微接触印刷法制备高密度蛋白微阵列的研究

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核技术 2008年第12期31卷 946-950页

作者：杨海军李海王鹏李宾中国科学院上海应用物理研究所上海201800 中国科学院研究生院北京100049

本文提供了一种在聚二甲基硅氧烷(PDMS)基底上制备高密度蛋白微阵列的新方法。此方法的特点在于通过在PDMS基底上物理吸附乙二胺四乙酸二钠(EDTA)达到提高蛋白质分子转印效率的目的。AFM检测结果表明:转印后的图案结构规整,边缘清晰。... 详细信息

本文提供了一种在聚二甲基硅氧烷(PDMS)基底上制备高密度蛋白微阵列的新方法。此方法的特点在于通过在PDMS基底上物理吸附乙二胺四乙酸二钠(EDTA)达到提高蛋白质分子转印效率的目的。AFM检测结果表明:转印后的图案结构规整,边缘清晰。测得的蛋白条纹平均宽度约为500nm,条纹间距约为1μm,是一种高密度的蛋白微阵列。

关键词：微接触印刷法聚二甲基硅氧烷(PDMS) 物理吸附 AFM 蛋白微阵列

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功能蛋白微阵列的作用

生命科学研究 2006年第S1期10卷 21-23,31页

作者：吴汝林亓凤青岛科技大学化工学院中国山东青岛266042

对蛋白质阵列的两大功能—分子识别和酶活测定进行了阐述.其中前者包括蛋白质-D N A间的相互作用、蛋白质-蛋白质复合体的相互作用、蛋白质-小分子之间的相互作用;后者包括阵列蛋白作为底物来测酶活、阵列蛋白作为酶的酶活.

关键词：蛋白微阵列分子识别酶活

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蛋白微阵列研究进展

生物技术通讯 2003年第4期14卷 333-335页

作者：李泽松张文曹恒杰深圳益生堂生物企业有限公司深圳518026

蛋白微阵列是随着基因微阵列技术发展起来的,用于基因微阵列的制备方法、信号的检测及分析系统,也可用于蛋白微阵列。各种蛋白微阵列基质的发展,提高了蛋白的固定效率。放射性同位数、化学发光、激光共聚焦荧光扫描等技术都已用于微阵... 详细信息

蛋白微阵列是随着基因微阵列技术发展起来的,用于基因微阵列的制备方法、信号的检测及分析系统,也可用于蛋白微阵列。各种蛋白微阵列基质的发展,提高了蛋白的固定效率。放射性同位数、化学发光、激光共聚焦荧光扫描等技术都已用于微阵列的检测。重组蛋白技术的发展,提高了蛋白微阵列检测的通量和灵敏度。蛋白微阵列具有通量高、使用样品少、重复性好、可定量的特点,使其在生物医药科学研究中得到了广泛应用。本文综述了蛋白微阵列的制备及其在免疫检测、医学诊断及蛋白组研究中的应用。

关键词：蛋白微阵列抗原抗体免疫检测基因微阵列

同步检测两种输血传播病原体的蛋白微阵列的研究

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重庆医学 2007年第10期36卷 914-915页

作者：黄敏张敏丽蒲晓允第三军医大学新桥医院检验科重庆400037 军事医学科学院北京100871

目的建立一种基于多元蛋白微阵列的免疫检测方法,用于筛查人血清中艾滋病毒、丙型肝炎病毒。方法将HIV/HCV抗原喷印到活化的玻片表面,抗原与活化基团共价结合后与血清中的特异性抗体反应,用激光芯片扫描系统对蛋白微阵列进行扫描成像。... 详细信息

目的建立一种基于多元蛋白微阵列的免疫检测方法,用于筛查人血清中艾滋病毒、丙型肝炎病毒。方法将HIV/HCV抗原喷印到活化的玻片表面,抗原与活化基团共价结合后与血清中的特异性抗体反应,用激光芯片扫描系统对蛋白微阵列进行扫描成像。所获得的图像用软件进行分析,并自动判定并生成待测样本的定性结果。结果蛋白微阵列法检测HIV、HCV两种定值血清检测限分别为:12ng/ml、5ng/ml。运用该系统检测HIV、HCV两种抗体参比品,各检测项目的符合率分别为87.5%、93.75%。结论多元蛋白微阵列法特异性强,灵敏度、准确度、精密度较高,具有应用和推广价值。

关键词：蛋白微阵列同步检测艾滋病毒丙型肝炎病毒

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凝胶基片的制备与应用研究

生物工程学报 2003年第5期19卷 577-580,T003页

作者：周升平王欣荣秦胜营林志新刘建华上海交通大学生命科学技术学院上海200240

在Bind SilaneR 处理的玻片上交联聚丙烯酰胺凝胶层 (15mm× 15mm× 2 0 μm) ,戊二醛活化。与末端氨基修饰的寡核苷酸片段共价结合制成芯片。这种芯片能够区分液相中序列不同的Cy 3标记的目标核酸。与平面基片相比 ,凝胶基片具有背景... 详细信息

在Bind SilaneR 处理的玻片上交联聚丙烯酰胺凝胶层 (15mm× 15mm× 2 0 μm) ,戊二醛活化。与末端氨基修饰的寡核苷酸片段共价结合制成芯片。这种芯片能够区分液相中序列不同的Cy 3标记的目标核酸。与平面基片相比 ,凝胶基片具有背景低、固定探针量高、杂交时间短的优点。将细胞因子IL 4、IL 5、IL 6、IL 7、ANG、I 30 9和VEGF的单克隆抗体加样于凝胶基片上制成蛋白质芯片 ,对乳腺癌患者和正常人的血清进行检测 ,发现乳腺癌患者细胞因子IL 4、IL 5、I 30 9和VEGF的表达量高于正常人的表达量。

关键词：凝胶基片制备聚丙烯酰胺凝胶寡核苷酸微阵列蛋白微阵列三维芯片

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微阵列检测血样感染相关四项指标的实验研究

第三军医大学学报 2007年第21期29卷 2080-2082页

作者：黄敏张敏丽蒲晓允第三军医大学新桥医院检验科重庆400037 军事医学科学院放射医学研究所北京100871

目的利用蛋白芯片技术检测血样感染相关四项指标,并与ELISA酶联免疫技术进行客观分析评价。方法对230份国家参比品同时进行蛋白芯片与ELISA酶联免疫的检测,并观察蛋白芯片对诊断血样感染四项指标的敏感性和特异性。结果用统计学的配对... 详细信息

目的利用蛋白芯片技术检测血样感染相关四项指标,并与ELISA酶联免疫技术进行客观分析评价。方法对230份国家参比品同时进行蛋白芯片与ELISA酶联免疫的检测,并观察蛋白芯片对诊断血样感染四项指标的敏感性和特异性。结果用统计学的配对计数资料检验得出:χ2=0.5,P=0.125,说明两种方法检测结果无统计学差异。结论蛋白微阵列检测结果无论是与参比品本身还是与ELISA试剂盒都有极高的符合率,是一种很有发展前途的检验技术。

关键词：蛋白微阵列乙型肝炎病毒人类免疫缺陷病毒丙型肝炎病毒梅毒螺旋体

硅酸修饰的抗体微阵列玻片对红细胞的血型抗体吸附能力的研究

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重庆医学 2005年第10期34卷 1500-1502页

作者：菅强蒲晓允黎儒清赵树铭第三军医大学西南医院输血科重庆400038 第三军医大学临床检验教研室重庆400038

目的探讨用硅酸修饰的微阵列玻璃基片,对红细胞血型抗体的吸附能力。方法将玻片用硅酸钠溶液处理,经酸化以形成硅酸,然后用抗红细胞血型抗体(抗-A、抗-B、抗-AB、抗-D)包被,以对应红细胞作反应指示物,以检测经硅酸修饰后的玻片对红细胞... 详细信息

目的探讨用硅酸修饰的微阵列玻璃基片,对红细胞血型抗体的吸附能力。方法将玻片用硅酸钠溶液处理,经酸化以形成硅酸,然后用抗红细胞血型抗体(抗-A、抗-B、抗-AB、抗-D)包被,以对应红细胞作反应指示物,以检测经硅酸修饰后的玻片对红细胞血型抗体的吸附能力,以及血型抗体的免疫活性。结果抗红细胞血型抗体可以牢固的结合在硅酸修饰过的玻片上,并且可以与其对应的红细胞抗原进行免疫学反应。结论经硅酸修饰的玻片对血型抗体有很高的结合效力,同时抗体仍保持很高的免疫活性,因而可进一步充当蛋白质抗体微阵列基片。

关键词：蛋白微阵列硅酸修饰玻片

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阵列技术应用于非小细胞肺癌诊疗的研究

阵列技术应用于非小细胞肺癌诊疗的研究

作者：祁松楠苏州大学

学位级别：硕士

目的探讨新型固体支撑材料改性聚二甲基硅氧烷(Integrated Poly(dimethysiloxane),i PDMS)多肽微阵列和蛋白微阵列技术应用于非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)诊疗的研究。方法第一部分对p53和EGFR胞外段的序列进行叠瓦... 详细信息

目的探讨新型固体支撑材料改性聚二甲基硅氧烷(Integrated Poly(dimethysiloxane),i PDMS)多肽微阵列和蛋白微阵列技术应用于非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)诊疗的研究。方法第一部分对p53和EGFR胞外段的序列进行叠瓦式切割,构建高内涵精细多肽库,建立i PDMS多肽微阵列检测方案;对150例NSCLC患者和96例健康对照者进行血清p53和EGFR多肽自身抗体的大规模筛选;应用传统生物信息学手段进行分析研究,确定血清p53和EGFR自身抗体所识别的线性抗原表位位点,探讨其潜在的研究价值。第二部分采用i PDMS蛋白微阵列法定量检测50例NSCLC患者、50例健康对照者血清IL-6、IL-8、MCP-1、GM-CSF的水平,结合NSCLC患者不同临床病理参数进行分析。结果第一部分p53和EGFR多肽的自身抗体既存在于NSCLC患者血清中,也存在于健康对照组的血清中,微阵列芯片表达差异显著分析(Significance analysis of microarrays,SAM)显示在NSCLC组和健康对照组血清中存在针对4条p53多肽和2条EGFR多肽的差异表达的自身抗体,这6条多肽的自身抗体在NSCLC患者血清的响应明显高于健康对照组(P0.05);与无淋巴结转移的患者相比,有淋巴结转移的患者血清IL-6水平升高(P0.05);与肺鳞癌患者相比,肺腺癌患者血清IL-8水平升高(P0.05)。结论1.NSCLC组和健康对照组之间存在差异性表达的p53和EGFR多肽自身抗体,可通过i PDMS多肽微阵列技术加以检测。基于p53和EGFR多肽库的NSCLC诊断模型展示出了一定的临床应用前景。i PDMS多肽微阵列技术为p53和EGFR线性表位的精细定位研究提供了强有力的工具。2.血清IL-6、IL-8、MCP-1、GM-CSF水平的改变与NSCLC的发生、发展密切相关,其血清学定量检测不仅有助于了解NSCLC患者的免疫功能状态,而且对NSCLC分期、分型具有一定参考价值。3.i PDMS微阵列技术小型化、高通量、多指标、低成本的特点为免疫学研究提供了极大的方便,具有一定的科研和临床应用前景。

关键词： iPDMS 多肽微阵列蛋白微阵列 NSCLC 自身抗体细胞因子