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油莎豆粕蛋白制备工艺优化

食品工业 2014年第12期35卷 91-96页

作者：武张飞马泽鑫敬思群新疆大学生命科学与技术学院乌鲁木齐830046

以油莎豆粕为原料,采用超声辅助碱提法制备油莎豆粕蛋白,以蛋白提取率为指标,研究提取次数和水洗工艺对油莎豆粕蛋白得率的影响。通过响应面法优化一次碱提工艺,最优工艺为,料液比1︰17(g/m L),超声时间26 min,pH 9.6,提取率44.01%;油... 详细信息

以油莎豆粕为原料,采用超声辅助碱提法制备油莎豆粕蛋白,以蛋白提取率为指标,研究提取次数和水洗工艺对油莎豆粕蛋白得率的影响。通过响应面法优化一次碱提工艺,最优工艺为,料液比1︰17(g/m L),超声时间26 min,pH 9.6,提取率44.01%;油莎豆粕蛋白的等电点为pI 4.2。通过优化提取次数,水洗等工艺参数,确定碱提次数3次,水洗温度40℃,水洗3次,油莎豆粕蛋白得率26.85%,油莎豆粕蛋白纯度43.54%。最终确定油莎豆粕蛋白制备工艺为一次碱提pH 9.6,料液比1︰17(g/m L),超声时间26 min,二、三次碱提料液比1︰10(g/m L),pH 9.6,超声时间26 min,3 000 r/min离心15 min,合并三次碱提液,于pH 4.2条件下酸沉1 h,3 000 r/min离心15 min,蛋白乳用5倍质量,40℃的水水洗30 min,进行3次,冷冻干燥得到的油莎豆粕蛋白纯度43.54%,得率26.85%。

关键词：油莎豆粕蛋白制备超声辅助碱溶酸沉法优化

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酶法水解玉米蛋白制备氨基酸的研究

氨基酸和生物资源 1985年第1期13卷 23-29页

作者：牟正香贵阳制药厂

玉米中含蛋白质8%左右,其中谷氨酸含量高于大豆蛋白,并含有成人及婴儿的各种必需氨基酸与半必需氨基酸。为了高效利用工业用玉米,并为氨基酸、水解蛋白工业以及调味品工业开创出一种来源丰富价格低廉的原料,我们于1977—1980年间研制成... 详细信息

玉米中含蛋白质8%左右,其中谷氨酸含量高于大豆蛋白,并含有成人及婴儿的各种必需氨基酸与半必需氨基酸。为了高效利用工业用玉米,并为氨基酸、水解蛋白工业以及调味品工业开创出一种来源丰富价格低廉的原料,我们于1977—1980年间研制成功了“三酶法”

关键词：酶法水解蛋白制备副产物制酒水解物植酸钙镁水解产物米曲霉水解液活性炭处理

863计划“活性蛋白制备关键技术研究与开发”课题通过中期检查

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中国农业科技导报 2015年第5期17卷 168-168页

2015年8月1日,＂十二五＂国家863计划现代农业技术领域＂活性蛋白制备关键技术研究与开发＂课题中期检查会在山东省农业科学院农召开。课题组经过两年半的时间,以花生粕、大豆粕、坚果粕等低值蛋白资源为原料,开展了活性蛋白的酶解制备... 详细信息

2015年8月1日,＂十二五＂国家863计划现代农业技术领域＂活性蛋白制备关键技术研究与开发＂课题中期检查会在山东省农业科学院农召开。课题组经过两年半的时间,以花生粕、大豆粕、坚果粕等低值蛋白资源为原料,开展了活性蛋白的酶解制备技术研究,建立了最佳制备工艺,并对蛋白进行物理或酶法改性,提高了蛋白溶解度;构建了化学、

关键词：蛋白制备技术研究与开发现代农业技术酶法改性活性蛋白酶解制备花生粕蛋白资源蛋白肽活性评价

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偃松松仁蛋白的制备及其功能性质的研究

偃松松仁蛋白的制备及其功能性质的研究

作者：葛环宇东北林业大学

学位级别：硕士

偃松松仁营养均衡,必须营养成分全面,具有软化血管,滋补强壮,美容养颜等功效,偃松松仁蛋白是一种优良的植物蛋白质资源,具有很好的开发价值。本文以偃松松仁为原料,从蛋白的提取,理化性质,功能特性及蛋白的适度氧化几个方面进行研究,得... 详细信息

偃松松仁营养均衡,必须营养成分全面,具有软化血管,滋补强壮,美容养颜等功效,偃松松仁蛋白是一种优良的植物蛋白质资源,具有很好的开发价值。本文以偃松松仁为原料,从蛋白的提取,理化性质,功能特性及蛋白的适度氧化几个方面进行研究,得到主要结论如下:本试验以脱脂偃松松仁粕(蛋白质含量为45.39%)为原料,采用单因素和响应面分析法分别研究偃松松仁清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白最佳提取工艺。试验结果表明清蛋白的最佳提取工艺参数为:液料比44:1,超声温度45.4℃,超声功率240 W,超声时间40 min,此时松仁粕中清蛋白的得率为(32.59±0.70) %;球蛋白提取优化工艺参数为:液料比45:1,盐溶液浓度为1.83%,超声功率240 W,超声温度45℃,超声时间为40 min,在此条件下偃松松仁球蛋白得率为(8.48±0.25) %;醇溶蛋白最佳提取工艺参数为:液料比26:1,乙醇溶液浓度为74.5%,超声功率240 W,超声温度为45℃,超声时间为40 min,在此条件下醇溶蛋白得率为(0.92±0.04) %;谷蛋白最佳提取工艺为:液料比26:1,超声时间42 min,超声功率240 W,超声温度为45℃,碱液pH为9,在此条件下谷蛋白得率为(15.22±0.30) %。本试验对偃松松仁清蛋白、球蛋白、谷蛋白进行了理化性质分析。采用凯氏定氮法法测定了偃松松仁蛋白的纯度,其中清蛋白的纯度为79.22%、球蛋白的纯度为80.52%和谷蛋白的纯度为78.96%。测定偃松松仁清蛋白、球蛋白、谷蛋白等电点结果分别为4.2、3.8、4.4。三种蛋白氨基酸组成基本合理,氨基酸总量最高的是偃松松仁球蛋白(80.58 g/100g),谷蛋白(78.83 g/100g)和清蛋白(77.82 g/100g)含量大体一致,三种蛋白组分中谷氨酸与精氨酸含量最高;SDS-PAGE凝胶电泳结果表明三种蛋白分子量大概分布在 9.81 ～37.47 kD。本试验研究分析了偃松松仁清蛋白、球蛋白、谷蛋白的功能特性。采用ANS荧光探针法测定蛋白质的表面疏水性,三种蛋白组分的疏水性由大到小依次为谷蛋白(932)>球蛋白(773)>清蛋白(419)。偃松松仁蛋白溶解性结果表明,当温度达到50℃时,三种蛋白质的溶解性最好,溶解度为56.37%,其次球蛋白的溶解度为40.38%,谷蛋白溶解度为23.36%;偃松松仁蛋白持水性试验结果为清蛋白、球蛋白、谷蛋分别为2.59、1.49、1.91 g/g,持油性试验结果分别为3.99、3.25、3.54 g/g。清蛋白、球蛋白、谷蛋白的乳化能力分别为12.58、4.49、10.91 m2/g,乳化稳定性分别为55.38%、46.19%、41.2%;三种蛋白中起泡性最好的是清蛋白,其次是球蛋白,谷蛋白最差,三种蛋白的起泡性分别为是90.23%、54.36%、45.65%,在起泡稳定性的测定中,稳定性最好的是清蛋白为55.67%、其次是谷蛋白19.23%,最差的是球蛋白仅为11.33%。综合来看三种蛋白中清蛋白的功能特性最好。本试验采用羟基自由基氧化体系(0.1 mmol/L FeCl3和0.1 mmol/L Asc,在不同H2O2浓度(0.1,0.5,1,5,10,15 mmol/L)下分别对偃松松仁清蛋白进行氧化1、3、5 h。分析氧化处理偃松松仁清蛋白官能团结构和乳化性的影响。结果表明随着H2O2浓度的增大,以及氧化时间的增加,偃松松仁清蛋白的羰基含量不断增加,游离巯基及总巯基含量不断降低,说明偃松松仁清蛋白的氧化程度不断增强。当H2O2浓度为1 mmol/L氧化5 h后所得的大偃松松仁清蛋白的乳化性最好为33.97 m2/g,当H2O2浓度为10 mmol/L氧化1 h后所得的偃松松仁清蛋白的乳化稳定性最好为92.38%。说明适当氧化可以提高蛋白质的乳化能力及乳化稳定性,随着偃松松仁清蛋白氧化程度的加强,SDS-PAGE凝胶电泳条带密度逐渐减小,小分子聚集形成了高分子聚集体。

关键词：偃松松仁蛋白制备理化性质功能特性蛋白质氧化

多效生长因子蛋白（PTN）的制备及其对前列腺癌细胞顺铂敏感性的影响

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多效生长因子蛋白（PTN）的制备及其对前列腺癌细胞顺铂敏感性的...

作者：车秋儒吉林大学

学位级别：硕士

顺铂(DDP)作为一种抗肿瘤药物在多种类的肿瘤细胞中都表现出优良的治疗效果,现已在临床中应用多年。但在使用过程中顺铂所呈现出的细胞耐药性也成了医学界需要攻克的一大难题。Pleitrophin(PTN)又名肝素结合生长因子,它与孕中期肾蛋白(M... 详细信息

顺铂(DDP)作为一种抗肿瘤药物在多种类的肿瘤细胞中都表现出优良的治疗效果,现已在临床中应用多年。但在使用过程中顺铂所呈现出的细胞耐药性也成了医学界需要攻克的一大难题。Pleitrophin(PTN)又名肝素结合生长因子,它与孕中期肾蛋白(Midkine)生物学功能及基因结构相似,两者组成了一个全新的蛋白家族,命名为肝素结合生长/分化家族。PTN是一种在多种肿瘤细胞内高表达的分泌性蛋白,在某些肿瘤细胞中也表现出一定的抗细胞凋亡活性。在已经发现的与顺铂耐药性关联的抗凋亡蛋白研究中并未见PTN蛋白。本课题从Bxpc-3胰腺癌细胞的c DNA中克隆出PTN基因,并将其克隆到Ptracer-EF/V5-His质粒中,将该真核载体转染293T细胞进行瞬时表达,得到外源表达的PTN蛋白,根据PTN蛋白的促细胞生长功能判断其具有生物学活性,并将其纯化备用。在浓度梯度顺铂作用的PC3细胞中,加入外源表达的PTN蛋白,MTT实验结果证明PTN刺激顺铂处理的PC3细胞后其IC50值较未加PTN组有明显升高,说明PTN蛋白在顺铂作用细胞过程中起到抗凋亡的作用,降低了细胞对顺铂的敏感性;利用不同浓度的PTN蛋白刺激顺铂处理的PC3细胞的流式,结果发现这种对细胞产生的抗凋亡作用呈现一定的浓度依赖性。为了进一步探究PTN蛋白对顺铂敏感性的影响,本研究利用sh-PTN干扰载体沉默PTN蛋白在PC3细胞中的表达,检查细胞对顺铂的敏感性及细胞的凋亡情况。将sh-Scramble、sh-PTN-1、sh-PTN-2转染PC3细胞24h后,比较两种sh-RNA的干扰效率在m RNA及蛋白水平的表达哪种更为明显,琼脂糖电泳及western结果显示sh-PTN-2的干扰效率更佳。在PTN下调的PC3细胞中与正常PC3细胞对比,顺铂对其作用的IC50值有明显的降低,即提高了顺铂的敏感性;随后的流式实验中证明,转染了sh-Scramble质粒的PC3细胞组与Control组相比,加入顺铂后的细胞凋亡情况并未有太大变化,而在转染了sh-PTN-2质粒的PC3细胞中,顺铂诱导该组细胞的凋亡率较前两组有一定幅度的增加,这也证明了PTN的沉默提高了PC3细胞对顺铂的敏感性。同时western blot实验证明在PTN沉默的PC3细胞中,加入顺铂后其C-PARP蛋白的表达量较对照组明显增高,作为又一验证PTN调节顺铂敏感性的指标。综上所述,PTN可能是一种潜在的与顺铂敏感性相关的抗凋亡蛋白,为顺铂耐药性的研究提供了研究基础。

关键词：多效生长因子顺铂前列腺癌细胞敏感性蛋白制备

马缨杜鹃RdDFR1基因的克隆分析与可溶性重组蛋白的制备

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贵州师范大学学报（自然科学版） 2023年第4期41卷 88-96页

作者：王聿晗陈瑶黄菊徐小蓉孙威贵州师范大学生命科学学院/植物生理与发育调控重点实验室贵州贵阳550025 西南喀斯特山地生物多样性保护重点实验室贵州贵阳550025

二氢黄酮醇4-还原酶位于类黄酮代谢途径下游,可催化二氢黄酮醇转化为对应的花色素苷,因具有底物特异性,直接影响植物颜色的呈现。通过PCR法克隆得到马缨杜鹃DFR1基因(RdDFR1),序列分析显示,RdDFR1不具有信号肽,定位在细胞质膜的可能性最... 详细信息

二氢黄酮醇4-还原酶位于类黄酮代谢途径下游,可催化二氢黄酮醇转化为对应的花色素苷,因具有底物特异性,直接影响植物颜色的呈现。通过PCR法克隆得到马缨杜鹃DFR1基因(RdDFR1),序列分析显示,RdDFR1不具有信号肽,定位在细胞质膜的可能性最大,与越桔DFR的亲缘关系最近。随后,将RdDFR1与原核表达载体pET-32a(+)连接,构建重组质粒pET-32a(+)-RdDFR1,并转入大肠杆菌BL21感受态细胞中。诱导表达分析显示,重组蛋白最佳诱导表达条件为:IPTG浓度为0.25 mmol/L,15℃下诱导48 h。按照上述条件制备并纯化得到了符合实验要求的重组蛋白,为研究RdDFR1的生物学功能及性质奠定了基础。

关键词：二氢黄酮醇4-还原酶马缨杜鹃基因克隆蛋白制备

不同提取工艺制备的核桃蛋白的组成与结构特征

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江苏大学学报（自然科学版） 2011年第6期32卷 631-635页

作者：毛晓英华欲飞江南大学食品科学与技术国家重点实验室江苏无锡214122 石河子大学食品学院新疆石河子832003

研究了碱溶酸沉工艺和酸沉工艺制备的核桃蛋白产品的组成和结构特征的变化.结果表明:碱溶酸沉工艺制备的产品蛋白质量分数高于90%,酸沉工艺制备的产品蛋白质量分数高于70%;2种制备蛋白质工艺使蛋白产品中的α-螺旋结构减少,β-转角和无... 详细信息

研究了碱溶酸沉工艺和酸沉工艺制备的核桃蛋白产品的组成和结构特征的变化.结果表明:碱溶酸沉工艺制备的产品蛋白质量分数高于90%,酸沉工艺制备的产品蛋白质量分数高于70%;2种制备蛋白质工艺使蛋白产品中的α-螺旋结构减少,β-转角和无规则卷曲结构大量增加,使核桃蛋白的NSI显著增加;2种工艺对核桃蛋白质的亚基组成无显著影响,对氨基酸破坏不显著.碱溶酸沉和酸沉2种制备工艺具有得率高、对蛋白质结构和组成破坏小等优点.

关键词：提取工艺蛋白制备核桃蛋白组成结构特征

婴儿豆基粉中低植酸低异黄酮蛋白基料的制备工艺研究

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食品工业科技 2019年第6期40卷 161-166页

作者：徐婧婷赵忠良万洋灵郭顺堂植物蛋白与谷物加工北京市重点实验室中国农业大学食品科学与营养工程学院北京100083 北京康得利智能科技有限公司北京100074

为提升婴儿豆基配方粉的中蛋白基料的食用安全性,本研究从创新大豆蛋白制备工艺的角度出发,对大豆进行制浆浸提、酸沉、水洗等工艺获得蛋白产品,比较湿法、热烫法和半干法制浆工艺和关键环节对蛋白提取率、植酸和异黄酮去除率的影响。... 详细信息

为提升婴儿豆基配方粉的中蛋白基料的食用安全性,本研究从创新大豆蛋白制备工艺的角度出发,对大豆进行制浆浸提、酸沉、水洗等工艺获得蛋白产品,比较湿法、热烫法和半干法制浆工艺和关键环节对蛋白提取率、植酸和异黄酮去除率的影响。结果表明,当采用半干法制备蛋白浸提液后,再在pH5.15时酸沉并水洗离心获得大豆蛋白质,且体系中乳清保留量低于20%时,可以较好地控制植酸和异黄酮含量,其植酸和异黄酮含量分别为(12.08±0.46) mg/g和(1468±74)μg/g。利用此方法可较好的提高蛋白质基料的安全性,为进一步开发应用于婴儿豆基配方粉中的高安全性专用大豆蛋白粉基料奠定了基础。

关键词：蛋白制备婴儿豆基配方粉植酸异黄酮

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期刊文摘

空军军医大学学报 2002年第24期 2212-2220+2239-2264+2288-2301+2322-2324+2326页

作者：袁天峰