检索结果-南通市图书馆

编码harpin_(Xoo)蛋白的基因hpa1_(Xoo)转化菊花增强对蚜虫的抗性

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中国生物防治 2010年第3期26卷 280-286页

作者：柴一秋陈官菊李明潘小玫邵敏王金生南京农业大学植物保护学院/农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095 浙江省亚热带作物研究所温州325005

将水稻白叶枯病原菌Xanthomonas oryzae ***编码harpinXoo蛋白的hpa1Xoo基因构建植物重组表达质粒pCAMBIA3300-hpa1Xoo-bar,由根癌农杆菌Agrobacterium tumefa-ciensLBA4404介导,叶盘法转化寒菊QX-077,获得了草丁膦转基因寒菊株系。经PCR、Southernblot和RT-PCR检测证明hpa1Xoo已整合到寒菊基因组中。在转基因株系的叶片和植株上抗虫性鉴定表明,转基因寒菊显著抑制桃蚜Myzus persicae的繁殖(t蚜虫的抗性。

关键词： hpa1Xoo 转基因菊花蚜虫抗性水稻黄单胞菌

NtJAZ1基因敲除对烤烟Y2001烟碱合成和腺毛发育的影响

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烟草科技 2023年第9期56卷 1-9页

作者：侯子航罗锐朱文奇季盈彤时兴铭闫筱筱崔红河南农业大学烟草学院郑州市450046

烟碱合成和腺毛发育与烟草品质和抗性密切相关,二者受茉莉酸信号的调控。JAZ1是茉莉酸信号途径中关键的负调控基因,为明确NtJAZ1基因敲除对烟碱生物合成、腺毛发育和分泌物积累的影响,采用CRISPR/Cas9技术对烤烟Y2001中的NtJAZ1进行编辑... 详细信息

烟碱合成和腺毛发育与烟草品质和抗性密切相关,二者受茉莉酸信号的调控。JAZ1是茉莉酸信号途径中关键的负调控基因,为明确NtJAZ1基因敲除对烟碱生物合成、腺毛发育和分泌物积累的影响,采用CRISPR/Cas9技术对烤烟Y2001中的NtJAZ1进行编辑,获得了纯合突变株系HN。与Y2001相比,HN烟苗生长发育无明显差异,叶面腺毛密度降低,但腺头发育完善且比Y2001饱满,腺毛分泌物组分和含量(质量分数)无显著差异。烟苗叶片的烟碱含量提高19.38%,根系烟碱含量提高30.85%,根系中烟碱合成相关基因NtMYC2a、NtMYC2b、NtPMT和NtQPT的表达量极显著增加,烟苗对蚜虫抗性显著增强。NtJAZ1基因敲除虽然对烟腺毛发生有一定影响,但对腺头发育和分泌物合成有明显促进作用,可在不影响叶面分泌物组分和含量的基础上提高烟碱含量和对蚜虫的抗性。因此,NtJAZ1基因是改良烟草品质和抗性的重要靶点之一。

关键词：烟草 NtJAZ1 基因编辑烟碱腺毛蚜虫抗性

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甘蓝型油菜COI1的调控功能分析

中国农业科学 2015年第10期48卷 1882-1891页

作者：王文静杨小川丁永强尹国英马浩然张洁石小于张鼎宇李加纳张洪博西南大学农学与生物科技学院/重庆市油菜工程技术研究中心

【目的】研究甘蓝型油菜中茉莉素受体复合体核心成员CORONATINE INSENSITIVE 1(COI1)蛋白的基因表达特性及生理调控功能。【方法】利用基因组数据分析甘蓝型油菜及其亲本种白菜和甘蓝基因组的COI1构成情况;使用定量和半定量RT-PCR扩增... 详细信息

【目的】研究甘蓝型油菜中茉莉素受体复合体核心成员CORONATINE INSENSITIVE 1(COI1)蛋白的基因表达特性及生理调控功能。【方法】利用基因组数据分析甘蓝型油菜及其亲本种白菜和甘蓝基因组的COI1构成情况;使用定量和半定量RT-PCR扩增方法检测油菜COI1的组织特异性表达;克隆油菜COI1保守区片段,构建病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)载体,以农杆菌侵染方法培育VIGS诱导COI1沉默的油菜植株,然后,用鉴定出的COI1沉默植株研究油菜COI1在育性调控及虫害抗性等方面的调控功能。【结果】基因组数据分析表明,甘蓝型油菜亲本种白菜和甘蓝共有7个高度同源的COI1,依序列同源性可分为4类:COI1a、COI1b.1、COI1b.2和COI1c;甘蓝型油菜有8个COI1,也由上述几类同源基因组成。半定量和定量RT-PCR扩增试验表明甘蓝型油菜COI1在茎中的表达水平最低。从培育的VIGS诱导COI1沉默油菜中,共鉴定出COI1表达水平被抑制超过70%的株系25个,其中抑制效果最明显的10个株系被用于育性调控及蚜虫抗性试验。育性分析结果证明,VIGS沉默COI1油菜的结实能力受到严重影响,其角果在授粉20 d以后的长度只达到对照油菜角果授粉5 d后的长度,且角果中无正常种子;沉默COI1油菜的雄蕊长度短于相同花期的对照油菜雄蕊,其花药开裂延迟;显微观察发现,沉默COI1油菜的花粉中有超过80%呈不正常形态。在相同处理条件下进行的蚜虫抗性比较试验中,沉默COI1油菜叶片上的蚜虫数量超过对照油菜1倍多,而且有很多小蚜虫围绕大蚜虫的虫落,繁殖态势比对照油菜叶片上的蚜虫旺盛。【结论】甘蓝型油菜COI1具有组织特异表达特性,沉默COI1会导致油菜雄性不育性状发生,并降低油菜植株对蚜虫的抗性。

关键词：甘蓝型油菜 COI1 茉莉素雄性不育蚜虫抗性

半夏凝集素基因的克隆及转基因烟草对蚜虫的抑制作用

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植物保护 2010年第6期36卷 21-25页

作者：张正英令利军王红梅李淑洁李静雯甘肃省农业科学院科研处兰州730070 甘肃省农业科学院生物技术研究所兰州730070

采用同源序列克隆方法，通过设计特异性引物从甘肃西和半夏叶片基因组DNA中克隆到1条1069bp的半夏凝集素基因pta，与以同科内植物的mRNA为模板扩增得到的凝集素基因序列的同源性很高，达到98％以上，功能区完整，具有1条信号肽和3个甘... 详细信息

采用同源序列克隆方法，通过设计特异性引物从甘肃西和半夏叶片基因组DNA中克隆到1条1069bp的半夏凝集素基因pta，与以同科内植物的mRNA为模板扩增得到的凝集素基因序列的同源性很高，达到98％以上，功能区完整，具有1条信号肽和3个甘露糖结合区，GenBank登录号AY725425。用该基因替换pBI121载体的GUS基因，正向插入35S启动子之下，构建了植物表达载体pBI—pta。通过农杆菌介导法转化烟草，从20株Kan抗性植株中得到PCR检测阳性植株14株，证明pta已整合到烟草基因组中。对随机挑取的7株PCR阳性植株进行了抗蚜虫（Myzus persicae）筛选试验，结果表明：不同株系蚜口密度抑制率在22．5％～89．4％，平均蚜口密度抑制率56．2％。

关键词：同源克隆半夏凝集素基因(pta) 表达载体构建蚜虫抗性

转GNA基因小麦新株系的分子检测和抗蚜虫性鉴定

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麦类作物学报 2005年第3期25卷 7-10页

作者：徐琼芳田芳陈孝李连城林志姗莫英徐惠君刘燕许为钢杜丽璞辛志勇中国农业科学院作物科学研究所农业部作物遗传育种重点实验室北京100081 中国农业科学院植物保护研究所北京100081 河南省农业科学院小麦研究所郑州450006

为了进行抗蚜虫转基因小麦的研究,将人工合成的雪花莲凝结素(Galanthusnivlisagglutinin,GNA)基因通过基因枪转入优质小麦品种郑州9405的幼胚愈伤组织,经过在选择培养基上多次筛选,从360块被轰击的愈伤组织中再生到1株Bialaphos(除草剂... 详细信息

为了进行抗蚜虫转基因小麦的研究,将人工合成的雪花莲凝结素(Galanthusnivlisagglutinin,GNA)基因通过基因枪转入优质小麦品种郑州9405的幼胚愈伤组织,经过在选择培养基上多次筛选,从360块被轰击的愈伤组织中再生到1株Bialaphos(除草剂)抗性植株,命名为G郑州9405。通过连续2代对转化株系进行PCR、Southern检测和蚜虫抗性鉴定,证明GNA基因已经整合到了郑州9405基因组中。目前已经获得了纯合稳定的转基因株系,并在河南农业科学院小麦所进行了环境释放试验。

关键词：小麦 GNA基因遗传转化蚜虫抗性

转GNA和ACA双基因抗蚜虫棉花新材料的创制

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分子植物育种 2021年第20期19卷 6731-6740页

作者：赵亚楠李刚强王楠杨彩峰郭文芳刘德虎中国农业科学院生物技术研究所北京100081

棉蚜是继棉铃虫之后棉花的又一主要害虫。为了验证转多凝集素基因的陆地棉对蚜虫的抗性,本研究选取了研究广泛且具有良好抗蚜虫效果的雪花莲凝集素和苋菜凝集素构建双抗虫基因的植物表达载体,通过农杆菌介导法转入棉花R15中,共获得6株T_... 详细信息

棉蚜是继棉铃虫之后棉花的又一主要害虫。为了验证转多凝集素基因的陆地棉对蚜虫的抗性,本研究选取了研究广泛且具有良好抗蚜虫效果的雪花莲凝集素和苋菜凝集素构建双抗虫基因的植物表达载体,通过农杆菌介导法转入棉花R15中,共获得6株T_(0)代转基因植株。分别通过PCR、RT-qPCR和Western blot证实了双凝集素基因在棉花中的遗传和表达。通过在转基因植株上接种棉蚜的生物测定,发现转凝集素基因的棉花对棉蚜具有一定的抑制作用,抑制率可达36%~55.5%,抗虫效果明显优于对照植株。本实验采用环境友好型、安全性较高的凝集素基因,既可以减少蚜虫的危害,降低棉花的生产成本,提升棉花的质量和产量,还可以保护非靶标昆虫,减少化学农药的使用,保护生态环境。

关键词：雪花莲凝集素苋菜凝集素棉蚜蚜虫抗性

一种抗虫凝集素基因的分子克隆及对油菜的遗传转化

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西北农业学报 2012年第9期21卷 79-84页

作者：张正英甘肃省农业科学院兰州730070

采用同源序列克隆方法,通过设计特异引物克隆甘肃西和半夏(Pinellia ternata)凝集素基因pta,为基因工程抗虫品种选育奠定基础。研究结果表明,克隆pta序列全长1 069bp,编码区804bp,编码268个氨基酸残基,预测的分子质量和等电点分别为29.... 详细信息

采用同源序列克隆方法,通过设计特异引物克隆甘肃西和半夏(Pinellia ternata)凝集素基因pta,为基因工程抗虫品种选育奠定基础。研究结果表明,克隆pta序列全长1 069bp,编码区804bp,编码268个氨基酸残基,预测的分子质量和等电点分别为29.1ku和7.77,功能区完整,GenBank登录号AY725425。构建35S启动子驱动的植物表达载体pBI-pta,通过农杆菌介导法转化烟草,获得14株卡那霉素抗性和PCR检测阳性植株。对其中7个株系的接种试验显示,蚜口密度抑制率为22.5%～89.4%,平均蚜口密度抑制率56.2%,说明该基因具有较好的抗虫功能。另外,优化针对综合性状优良的陇油2号品种的遗传转化体系,获得3株经分子鉴定的转基因遗传工程植株。

关键词：半夏凝集素同源克隆蚜虫抗性油菜遗传转化

GNA和ACA双价转基因烟草培育及其抗蚜研究

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中国农业科技导报 2019年第4期21卷 35-41页

作者：杨彩峰李刚强王楠刘德虎中国农业科学院生物技术研究所北京100081

蚜虫是一种常见的农作物害虫,作为多种植物病毒的载体而成为影响农业发展的重要害虫之一,对蚜虫的防治一直是众多科学工作者所面对的难题。构建了雪花莲凝集素(GNA)和苋菜凝集素(ACA)双价植物表达载体pBI121-GA,在农杆菌介导下,叶盘法... 详细信息

蚜虫是一种常见的农作物害虫,作为多种植物病毒的载体而成为影响农业发展的重要害虫之一,对蚜虫的防治一直是众多科学工作者所面对的难题。构建了雪花莲凝集素(GNA)和苋菜凝集素(ACA)双价植物表达载体pBI121-GA,在农杆菌介导下,叶盘法转化烟草NC89,得到卡那霉素抗性植株65株。通过基因组PCR、ELISA、RT-PCR和Western-blot等分子生物学检测,从中筛选出外源凝集素不同表达水平的转基因烟草5株。对筛选出的5株转基因烟草植株进行初步蚜虫抗性实验,证实转基因烟草对桃蚜表现出一定的抗性,最高抑制率达85.8%,为农作物双价抗蚜基因的应用研究提供一定的理论基础。

关键词：转基因烟草雪花莲凝集素苋菜凝集素蚜虫抗性

人工合成gna基因在小麦中的表达及其抗蚜虫效果研究

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农业生物技术学报 2006年第4期14卷 559-564页

作者：高泽发陈绪清杨凤萍梁荣奇张立全张晓东北京市农林科学院农业生物技术研究中心北京市农林科学院农业生物技术研究中心北京100097 首都师范大学生命科学学院北京100037

利用经密码子优化的、人工合成雪花莲凝集素(Galanthusnivalisagglutinin),gna基因及RbcS启动子构建了高效特异表达载体pBAC202,通过基因枪轰击小麦幼胚和幼穗,将外源gna基因导入到3个高产小麦(TriticumaestivumL.)品种中,获得42个转基... 详细信息

利用经密码子优化的、人工合成雪花莲凝集素(Galanthusnivalisagglutinin),gna基因及RbcS启动子构建了高效特异表达载体pBAC202,通过基因枪轰击小麦幼胚和幼穗,将外源gna基因导入到3个高产小麦(TriticumaestivumL.)品种中,获得42个转基因后代株系。对转基因后代植株进行了DNA点杂交、PCR及PCR-Southern验证,确认外源gna基因已成功地整合到小麦基因组中。进一步的凝集素活性检测表明,小麦叶片中表达的凝集素可使红细胞凝集,并具有正常的生物学活性。转基因植株在人工饲养条件下进行抗蚜虫(Rhopalosiphumpadi)试验,蚜口密度抑制率从19%～73%不等,部分株系抑虫效果较好。利用转基因的方式可将外源抗虫基因gna导入到小麦中,并可有效地增强小麦的抗蚜能力,为选育具抗虫特性的优质小麦提供新的途径。

关键词：雪花莲凝集素 gna基因转基因小麦蚜虫抗性