检索结果-南通市图书馆

虫草菌液拮抗人白蛋白致HK-2细胞增殖及TGF-β1、FN表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国现代医学杂志 2009年第4期19卷 509-512页

作者：殷薇肖平黄安兰刘伏友段绍斌彭佑铭湖南省人民医院肾内科湖南长沙410000 中南大学湘雅二医院肾内科湖南长沙410011

目的初步探讨虫草菌液能否拮抗人白蛋白致HK-2细胞的促纤维化效应。方法人白蛋白组(albumin,ALB 5g/L)加或不加虫草菌液(hirsu-tella sinensis,HS 10mg/L)与HK-2细胞孵育,然后用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖水平;使用酶联免... 详细信息

目的初步探讨虫草菌液能否拮抗人白蛋白致HK-2细胞的促纤维化效应。方法人白蛋白组(albumin,ALB 5g/L)加或不加虫草菌液(hirsu-tella sinensis,HS 10mg/L)与HK-2细胞孵育,然后用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖水平;使用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清FN、TGF-β1的分泌水平。采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)半定量分析HK-2中TGF-β1及Fn的mRNA表达。结果虫草菌液可抑制人白蛋白所致HK-2增殖(P虫草菌液干预人白蛋白孵育的HK-2,可使TGF-β1和Fn mRNA和分泌及表达明显下调(P虫草菌液可抑制人白蛋白刺激的HK-2细胞增殖和TGF-β1、FN表达。

关键词：人白蛋白肾小管上皮细胞虫草菌液

虫草菌液对糖尿病肾病肾小管上皮细胞转分化的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生化药物杂志 2014年第4期34卷 46-49,52页

作者：刘彤崴周盾郝春艳辽宁医学院附属第一医院肾病内科辽宁锦州121001

目的探讨虫草菌液对糖尿病肾病肾小管上皮细胞转分化的影响。方法将不同浓度的虫草菌液和高糖作用于人近端肾小管上皮细胞,根据加入剂量和组份不同分成以下5组:对照组给予5.5 mmol/L D-葡萄糖;高糖组给予30 mmol/L D-葡萄糖;实验组1给予... 详细信息

目的探讨虫草菌液对糖尿病肾病肾小管上皮细胞转分化的影响。方法将不同浓度的虫草菌液和高糖作用于人近端肾小管上皮细胞,根据加入剂量和组份不同分成以下5组:对照组给予5.5 mmol/L D-葡萄糖;高糖组给予30 mmol/L D-葡萄糖;实验组1给予30 mmol/L D-葡萄糖+5μg/mL虫草菌液;实验组2给予30 mmol/L D-葡萄糖+10μg/mL虫草菌液;实验组3给予30 mmol/L D-葡萄糖+20μg/mL虫草菌液。检测各组细胞内E-钙粘蛋白(E-Cadherin),纤连蛋白(fibrous protein,FN),α-平滑肌肌动蛋白(a-smooth muscle actin,α-SMA)及整合素连接激酶(Integrin Linked Kinase,ILK)蛋白的表达。结果与对照组相比,高糖组E-cadherin蛋白表达显著降低(P虫草菌液加入的量升高,E-cadherin蛋白表达也逐渐升高(均P虫草菌液能够抑制肾小管上皮细胞向肌成纤维细胞的转化,从而抑制肾小管间质纤维化。

关键词：虫草菌液糖尿病肾病肾小管上皮细胞

虫草菌液通过增强自噬改善β-甘油磷酸诱导的血管平滑肌细胞钙化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

虫草菌液通过增强自噬改善β-甘油磷酸诱导的血管平滑肌细胞钙化

作者：邱小波中国医科大学

学位级别：硕士

目的:慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者常合并骨矿物质代谢异常,导致慢性肾脏病特有的中层血管钙化,明显增加了CKD患者的全因和心血管死亡率。高磷血症是CKD患者血管钙化的始动因素,控制血磷可显著减缓肾脏病患者血管钙化的... 详细信息

目的:慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者常合并骨矿物质代谢异常,导致慢性肾脏病特有的中层血管钙化,明显增加了CKD患者的全因和心血管死亡率。高磷血症是CKD患者血管钙化的始动因素,控制血磷可显著减缓肾脏病患者血管钙化的进程。血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)的病理改变是中膜钙化的主要原因,其机制包括血管平滑肌细胞表型转换、凋亡增加、释放基质囊泡等。自噬在血管及血管平滑肌细胞的生理及病理改变过程中发挥着至关重要的作用,调节细胞自噬水平可能为防治血管钙化提供新的干预手段。冬虫夏草具有肾脏和心血管保护作用,冬草夏草可以激活一磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK),而一磷酸腺苷活化的蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AMP-activated protein kinase/mammalian target of rapamycin,AMPK/mTOR)信号通路在调控自噬中发挥重要作用。本研究拟探讨冬虫夏草提取物虫草菌液能否通过AMPK/mTOR信号通路激活自噬从而改善高磷诱导VSMC钙化。方法:用cell count kit-8(CCK-8)检测虫草菌液对细胞生存活力的影响。用β-甘油磷酸(β-glycerophosphate,β-GP)建立大鼠血管平滑肌细胞钙化模型,加入虫草菌液(cordyceps sinensis,CS)、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)及AMPK抑制剂化合物C(compound C,CC)进行干预。实验分为5组:对照组(Ctrl)、β-GP组、β-GP+CS组、3-MA+β-GP+CS组、CC+β-GP+CS组。通过茜素红S染色及钙测定试剂盒检测各组细胞钙结节及钙含量;透射电镜观察血管平滑肌细胞内自噬体的形成;免疫荧光检测细胞胞浆内LC3的表达;Western Blot检测血管平滑肌标志物α-SMA、成骨基因Runx2、自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1及AMPK/mTOR信号通路蛋白。结果:茜素红S染色及钙含量测定显示:β-甘油磷酸诱导钙化成功;虫草菌液能使高磷环境中血管平滑肌细胞的钙结节及钙含量明显减少;用3-甲基腺嘌呤或化合物C预处理后,再给予β-甘油磷酸+虫草菌液处理细胞,结果发现虫草菌液未能减轻高磷环境中血管平滑肌细胞的钙结节及钙含量。透射电镜及免疫荧光结果显示:β-甘油磷酸能使血管平滑肌细胞的自噬体及LC3荧光点状聚集增多;虫草菌液能使高磷环境中血管平滑肌细胞的自噬体及LC3荧光点状聚集进一步增多;用3-甲基腺嘌呤或化合物C预处理后,再给予β-甘油磷酸+虫草菌液处理细胞,结果发现血管平滑肌细胞内的自噬体及LC3荧光点状聚集明显减少。Western blot结果显示:β-甘油磷酸组血管平滑肌细胞的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、Runx2、p-AMPK蛋白表达增多,p-mTOR蛋白表达减少;虫草菌液能使高磷环境中血管平滑肌细胞的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、α-SMA、p-AMPK蛋白表达增多,Runx2、p-mTOR蛋白表达减少;用3-甲基腺嘌呤预处理后,再给予β-甘油磷酸+虫草菌液处理细胞,结果发现血管平滑肌细胞的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、α-SMA蛋白表达减少,Runx2蛋白表达增多;用化合物C预处理后,再给予β-甘油磷酸+虫草菌液处理细胞,结果发现血管平滑肌细胞的p-AMPK、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、α-SMA蛋白表达减少,Runx2、p-mTOR蛋白表达增多。结论:虫草菌液能有效减轻高磷诱导的血管平滑肌细胞钙化,其机制可能是通过激活AMPK/mTOR信号通路增强自噬。

关键词：虫草菌液 β-甘油磷酸血管平滑肌细胞自噬钙化慢性肾脏病

高糖诱导HK-2细胞非磷酸化β-catenin表达及虫草菌液对其作用

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

高糖诱导HK-2细胞非磷酸化β-catenin表达及虫草菌液对其作用

作者：贺丹中南大学

学位级别：硕士

研究背景及目的：糖尿病肾病(DN)是终末期肾病的主要原因之一,其肾间质病变与远期预后密切相关。研究表明肾小管上皮细胞转分化(EMT)参与肾间质纤维化进展。β-catenin是一种多功能蛋白质,除了与E钙粘蛋白(E-cad)连接介导细胞粘附外,还... 详细信息

研究背景及目的：糖尿病肾病(DN)是终末期肾病的主要原因之一,其肾间质病变与远期预后密切相关。研究表明肾小管上皮细胞转分化(EMT)参与肾间质纤维化进展。β-catenin是一种多功能蛋白质,除了与E钙粘蛋白(E-cad)连接介导细胞粘附外,还参与了多条EMT通路的信号转导,该功能与其代谢过程有关：β-catenin在胞质中与多种蛋白共同组成Axin复合物,随后被CK1、GSK3磷酸化,进而被泛素-蛋白酶系统降解。13-catenin磷酸化与否决定了其是否被降解,非磷酸化β-catenin是其活化形式,不能被泛素-蛋白酶降解系统识别,因而在胞质内累积并转移入核,与核内转录因子TCF／LEF结合,激活靶基因转录。研究表明β-catenin信号在糖尿病肾病EMT中是活化的,但既往研究多通过观察β-catenin表达部位变化或蛋白总含量及胞核含量变化反映其是否活化,而直接对非磷酸化β-catenin(活化形式)研究较少,在糖尿病肾病中也未见报道。冬虫夏草是我国名贵中药材,广泛用于肾脏疾病的治疗,对糖尿病肾病有一定疗效。近期研究表明其肾保护作用涉及抑制EMT,能改善高糖诱导的肾小管上皮细胞自身表型丢失、间质细胞表型增加,降低尿蛋白排泄、减少肾间质胶原沉积及减轻肾损伤,但具体机制尚不清楚。本实验将观察高糖环境下人近端肾小管上皮细胞(HK-2)非磷酸化β-catenin表达,探讨β-catenin活化与EMT的关系。同时采用虫草菌液进行干预,观察其对上述过程的影响,探索其肾保护作用的可能新机制。方法：应用细胞培养技术,分下列六组培养HK-2细胞：正常对照组(5.5mM葡萄糖DMEM/F12培养液),高糖组(30mM葡萄糖DMEM/F12培养液),甘露醇组(5.5mM葡萄糖DMEM/F12培养液+甘露醇24.5mM),高糖+5μg/mL虫草菌液干预组(HG+C5组,5.5mM葡萄糖DMEM/F12培养液+5μg/mL虫草菌液),高糖+10μg/mL虫草菌液干预组(HG+C10组,5.5mM葡萄糖DMEM/F12培养液+10μg/mL虫草菌液),高糖+20μg/mL虫草菌液干预组(HG+C20组,5.5mM葡萄糖DMEM/F12培养液+20μg/mL虫草菌液)。培养48h后收集各组细胞,Western Blot检测E-cad、α-SMA、非磷酸化β-catenin的蛋白表达。结果：高糖组与正常组及甘露醇组比较,E-cad表达减少(P虫草菌液干预后,与高糖组比较,HG+C5组E-cad表达无明显变化(P>0.05), HG+C10、HG+C20组E-cad表达上调(P虫草菌液干预的三组α-SMA表达均下调(P虫草菌液干预的三组非磷酸化β-catenin表达较高糖组均下调(P虫草菌液浓度增大其下调幅度增大(P虫草菌液能上调高糖环境下HK-2细胞E-cad表达,下调α-SMA表达,同时非磷酸化β-catenin表达下调,表明虫草菌液具有阻抑肾小管上皮细胞EMT的作用,抑带β-catenin活化可能是其机制之一。

关键词：糖尿病肾病虫草菌液非磷酸化β-catenin 肾小管上皮细胞上皮间质转分化

虫草菌液对高糖作用下大鼠腹膜间皮细胞转化生长因子β_1和纤维连接蛋白表达的影响

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国中西医结合肾病杂志 2011年第6期12卷 493-496页

作者：王立瑞黄海东蒋更如刘怡晟上海交通大学医学院附属新华医院肾脏内科上海200092

目的:研究虫草菌液(HS)对高糖作用下体外培养的大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)转化生长因子β1(TGF-β1)和纤维连接蛋白(FN)表达的影响。方法:将原代培养的第3代RPMCs随机分为6组:对照组、1.5%葡萄糖组、2.5%葡萄糖组、单纯虫草组(10mg/ml)、1... 详细信息

目的:研究虫草菌液(HS)对高糖作用下体外培养的大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)转化生长因子β1(TGF-β1)和纤维连接蛋白(FN)表达的影响。方法:将原代培养的第3代RPMCs随机分为6组:对照组、1.5%葡萄糖组、2.5%葡萄糖组、单纯虫草组(10mg/ml)、1.5%葡萄糖+10mg/ml虫草组、2.5%葡萄糖+10mg/ml虫草组。同步培养72h后,以RTPCR法检测各组细胞TGF-β1和FN mRNA表达情况;ELISA法检测细胞上清液中TGF-β1和FN的蛋白质水平。结果:高糖作用下RPMC的TGF-β1、FN mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组(P虫草菌液干预后RPMC的TGF-β1、FN mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P虫草菌液可下调高糖作用下RPMCs的TGF-β1和FN的表达,具有抗腹膜纤维化的作用。

关键词：高糖腹膜间皮细胞虫草菌液转化生长因子β1 纤维连接蛋白