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虎眼万年青提取物抗氧化功能的研究

虎眼万年青提取物抗氧化功能的研究

作者：何滟澦黑龙江中医药大学

学位级别：硕士

虎眼万年青（Ornithogalum Caudatum Ait）系百合科虎眼万年青属,俗名珍珠草,又名海葱,葫芦兰,为多年生常绿草本植物。原产非洲,我国北方有栽培。虎眼万年青有极高的药用价值,民间全草入药,用于抗炎消毒及抗肿瘤治疗。我国东北地区民间... 详细信息

虎眼万年青（Ornithogalum Caudatum Ait）系百合科虎眼万年青属,俗名珍珠草,又名海葱,葫芦兰,为多年生常绿草本植物。原产非洲,我国北方有栽培。虎眼万年青有极高的药用价值,民间全草入药,用于抗炎消毒及抗肿瘤治疗。我国东北地区民间用于治疗肩周炎,抗炎止痛效果奇好。此外虎眼万年青具有很强的抗肿瘤活性,从虎眼万年青中分离得到的虎眼万年青皂苷OSW-1是常见抗癌药物喜树碱、阿霉素、紫衫醇等抗癌活性的10-100倍。目前,虎眼万年青在药理方面和化学成分方面的研究已有很多,尤其以抗肿瘤作用的研究报道最多。抗氧化能力是机体抗肿瘤作用的重要机制之一,研究表明许多具有抗炎、抗病毒、抗肿瘤活性的中药,都具有较强的抗氧化能力和消除自由基的活性。虎眼万年青是否具有抗脂质过氧化作用和活性自由基作用目前还未见报道。本论文对虎眼万年青的抗氧化作用进行了研究,该研究可为虎眼万年青药理作用及其作用机制的研究提供理论基础,为虎眼万年青的临床用药及虎眼万年青资源的进一步开发利用提供科学依据。本实验采用药理学和体外清除自由基的方法,对虎眼万年青乙醇提取物的抗氧化活性进行了初步研究。体外抗氧化活性的研究采用邻二氮菲-Fe2+氧化法、邻苯三酚自氧化法和DPPH法分别测定清除羟基自由基的能力、清除超氧阴离子的能力和DPPH自由基的能力,并筛选出抗氧化活性最佳乙醇体积分数和有效部位。体内抗氧化活性的研究方法是将虎眼万年青乙醇提取物以高中低三种不同剂量对小鼠灌胃给药14天,通过测定小鼠血清和肝组织中的超氧化歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）数值的变化来研究虎眼万年青乙醇提取物的抗氧化活性。体外研究结果表明,体积分数为70%虎眼万年青乙醇提取物不仅粗总皂苷的含量最高,而且抗氧化活性也最强;正丁醇相清除·OH、O2·和DPPH·三种自由基的综合能力最强。体内的研究结果表明,70%虎眼万年青乙醇提取物正丁醇相可以有效的提高体内SOD数量,降低MDA数量,抗氧化效果显著。

关键词：虎眼万年青抗氧化性体内体外

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虎眼万年青皂苷的分离纯化及分析鉴定

虎眼万年青皂苷的分离纯化及分析鉴定

作者：王东哲大连工业大学

学位级别：硕士

本论文对虎眼万年青皂苷的分离纯化及样品的分析鉴定进行了主要研究。通过水煎煮法对虎眼万年青皂苷进行提取,对该法提取虎眼万年青皂苷的条件进行了优化,得到最佳煎煮时间为3h,加水量为原料的15倍(mL/g),煎煮次数为2次。对不同部位的... 详细信息

本论文对虎眼万年青皂苷的分离纯化及样品的分析鉴定进行了主要研究。通过水煎煮法对虎眼万年青皂苷进行提取,对该法提取虎眼万年青皂苷的条件进行了优化,得到最佳煎煮时间为3h,加水量为原料的15倍(mL/g),煎煮次数为2次。对不同部位的虎眼万年青皂苷进行了提取,得到根中虎眼万年青皂苷的提取率为0.94%,茎中的提取率为0.89%,叶中的提取率为0.85%。通过高效液相色谱法对不同部位的总皂苷进行检测,结果表明茎中的皂苷种类最多。正丁醇萃取煎煮后的虎眼万年青皂苷,萃取物得率为1.35%。使用AB-8、D296树脂对正丁醇萃取物进行脱糖、脱色,脱糖和脱色产物得率相对于原料的虎眼万年青总皂苷分别为0.51%和0.14%。减压硅胶柱层析法纯化虎眼万年青总皂苷,得到7种单体组分,相对于总皂苷的得率分别为 1.83%、2.67%、3.17%、5.33%、15.33%、5.67%、4.21%。HPLC 检测各组分的纯度,结果分别为 50.69%、60.01%、65.89%、70.31%、81.76%、75.22%、69.73%。筛选产虎眼万年青皂苷糖苷酶的微生物条件,以25%虎眼万年青浸出液为诱导物,选取Absidia sp.048和Absidia sp.0848菌所产的糖苷酶作用于虎眼万年青总皂苷,能使总皂苷中的E组分转化。

关键词：虎眼万年青虎眼万年青总皂苷分离纯化

虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响及其机制

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时珍国医国药 2012年第6期23卷 1388-1390页

作者：刘旭章永红南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210029

目的探讨虎眼万年青总皂苷(Ornithogalum caudatum AIT saponins)诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡的机制,为开发应用于治疗乳腺癌的药物提供实验依据。方法用MTT比色法检测虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用;... 详细信息

目的探讨虎眼万年青总皂苷(Ornithogalum caudatum AIT saponins)诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡的机制,为开发应用于治疗乳腺癌的药物提供实验依据。方法用MTT比色法检测虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡;Western Blotting法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax与Bad表达的变化。结果虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长有明显抑制作用,并呈剂量、时间依赖性;能诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞发生凋亡,且凋亡率呈浓度依赖性;能下调Bcl-2蛋白的表达,升高Bax/Bcl-2的比值,其高剂量组具有显著统计学差异(P虎眼万年青总皂苷可抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,并可诱导细胞凋亡,其机制可能与升高Bax/Bcl-2的比值,上调Bad蛋白的表达相关。

关键词：虎眼万年青乳腺癌凋亡 MDA-MB-231细胞

虎眼万年青总皂苷诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡机制研究

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天然产物研究与开发 2020年第1期32卷 32-39页

作者：邹翔周林张月宫甜汲晨锋曲中原刘学李文兰哈尔滨商业大学药学院抗肿瘤天然药物教育部工程研究中心

为探讨虎眼万年青总皂苷(OCA-TS)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的分子机制,本研究采用溴化四氮唑蓝(MTT)法检测OCA-TS对MCF-7细胞增殖的抑制作用,并观察细胞凋亡形态、检测细胞膜电位及凋亡相关蛋白含量变化。实验表明,OCA-TS可显著抑制人... 详细信息

为探讨虎眼万年青总皂苷(OCA-TS)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的分子机制,本研究采用溴化四氮唑蓝(MTT)法检测OCA-TS对MCF-7细胞增殖的抑制作用,并观察细胞凋亡形态、检测细胞膜电位及凋亡相关蛋白含量变化。实验表明,OCA-TS可显著抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖(IC 50为93.17μg/mL),电镜下细胞呈现典型的凋亡形态;流式细胞仪检测结果显示不同浓度的OCA-TS作用MCF-7细胞48 h后,细胞内线粒体膜电位、Ca 2+浓度和Cyt-C的表达水平均无显著变化;细胞内Caspase-8和Caspase-3的活性显著升高,而Caspase-12的活性均未见显著改变,Western blot检测细胞内Fas、FasL和FADD蛋白表达水平显著升高。综上说明OCA-TS诱导MCF-7细胞凋亡的作用可能是通过启动死亡受体途径而不是通过线粒体途径和内质网途径实现的。

关键词：虎眼万年青总皂苷人乳腺癌MCF-7细胞凋亡抗肿瘤机制

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虎眼万年青皂苷及其衍生物研究进展

中国药房 2009年第12期20卷 950-952页

作者：谢明霞周媛邹坤三峡大学化学与生命科学学院/天然产物研究与利用湖北省重点实验室宜昌市443002

1992年，日本学者Sashido等从百合科植物虎眼万年青的球茎中首次分离获得一个不饱和多氧化酰化胆甾皂苷，命名为虎眼万年青皂苷（Ornithogalum Saundersiae Saponins，OSW-1）。它具有靶向抗癌作用，可直接杀灭癌细胞，在对多种肿瘤细... 详细信息

1992年，日本学者Sashido等从百合科植物虎眼万年青的球茎中首次分离获得一个不饱和多氧化酰化胆甾皂苷，命名为虎眼万年青皂苷（Ornithogalum Saundersiae Saponins，OSW-1）。它具有靶向抗癌作用，可直接杀灭癌细胞，在对多种肿瘤细胞表现出极强细胞毒活性的同时，对正常人体细胞的毒性很小（半数抑制浓度（IC50）=1．5μg·mL^-1），目前已将其开发应用于临床。

关键词：虎眼万年青皂苷衍生物半数抑制浓度百合科植物细胞毒活性首次分离抗癌作用

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虎眼万年青药理学和生物繁殖的研究进展

中国实验方剂学杂志 2012年第4期18卷 272-275页

作者：刘伟王欧刘久东文山学院云南文山663000 云南大学附属中学昆明650091 云南大学昆明650091 江苏仪征市农业委员会江苏仪征211400

对虎眼万年青的形态特征、药理作用和生物繁殖的研究内容进行了文献整理。查阅CNKI等期刊数据库近些年有关虎眼万年青的形态特征、药理作用和生物繁殖等方面的书籍和文献24篇,并对其进行汇总和分析。介绍了虎眼万年青的原植物形态、生... 详细信息

对虎眼万年青的形态特征、药理作用和生物繁殖的研究内容进行了文献整理。查阅CNKI等期刊数据库近些年有关虎眼万年青的形态特征、药理作用和生物繁殖等方面的书籍和文献24篇,并对其进行汇总和分析。介绍了虎眼万年青的原植物形态、生物学特征及采收条件等研究情况;及虎眼万年青具有的增强免疫力、抗肝癌和肝损伤及抗炎等药理作用。总结了虎眼万年青生物繁殖的经典繁殖方法和组织培养法。目前对于虎眼万年青的研究仍相对较少,因而作者在其药理作用和生物繁殖研究方面提出了一些进一步研究的建议。

关键词：虎眼万年青形态特征药理作用生物繁殖

虎眼万年青皂苷提取工艺研究及其口服液的研制

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食品工业科技 2010年第5期31卷 226-228,330页

作者：李明通化师范学院制药与食品科学系吉林通化134002

通过正交实验确定纤维素酶酶解提取虎眼万年青皂苷最佳工艺,并将所得皂苷研制成一种保健食品—虎眼万年青皂苷口服液。酶解提取最佳工艺为料液比1∶15,纤维素酶1%,50℃酶解30min。虎眼万年青皂苷口服液配方为虎眼万年青皂苷1.2%、香精0.... 详细信息

通过正交实验确定纤维素酶酶解提取虎眼万年青皂苷最佳工艺,并将所得皂苷研制成一种保健食品—虎眼万年青皂苷口服液。酶解提取最佳工艺为料液比1∶15,纤维素酶1%,50℃酶解30min。虎眼万年青皂苷口服液配方为虎眼万年青皂苷1.2%、香精0.04%、白砂糖5%、异抗坏血酸钠0.015%、苹果酸0.25%。

关键词：虎眼万年青虎眼万年青皂苷提取纤维素酶口服液

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虎眼万年青总皂苷中单体皂苷的分离纯化

大连工业大学学报 2010年第5期29卷 346-348页

作者：孙亚娟金凤燮鱼红闪大连工业大学生物与食品工程学院辽宁大连116034

虎眼万年青总皂苷中含有很多皂苷组分,为了得到虎眼万年青单体皂苷,采用硅胶柱层析法分离虎眼万年青总皂苷,以氯仿-甲醇混合液为流动相进行洗脱,TLC跟踪检测。5 g虎眼万年青总皂苷进行硅胶柱层析分离,TLC检测,得到5种虎眼万年青皂苷的... 详细信息

虎眼万年青总皂苷中含有很多皂苷组分,为了得到虎眼万年青单体皂苷,采用硅胶柱层析法分离虎眼万年青总皂苷,以氯仿-甲醇混合液为流动相进行洗脱,TLC跟踪检测。5 g虎眼万年青总皂苷进行硅胶柱层析分离,TLC检测,得到5种虎眼万年青皂苷的单体组分,得率分别为2.6%、2.6%、3.6%、5.4%、12.6%。超高压液相色谱检测,分离效果相对较好的是D、E组分。结果表明,采用硅胶柱层析的方法可以初步达到分离纯化虎眼万年青皂苷的目的。

关键词：虎眼万年青虎眼万年青皂苷硅胶柱层析

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虎眼万年青生药学研究

哈尔滨商业大学学报（自然科学版） 2019年第5期35卷 515-518页

作者：邹翔曲中原朱世儒周林宫甜吴双刘影哈尔滨商业大学药学院抗肿瘤天然药物教育部工程研究中心

对虎眼万年青进行生药学研究.采用性状鉴别、显微鉴别的方法鉴别虎眼万年青;按《中国药典》2015版附录的方法测定水分、灰分;采用紫外-可见分光光度法测定含总皂苷量.明确了虎眼万年青的性状特征,根、鳞茎和叶的显微组织构造及粉末特征... 详细信息

对虎眼万年青进行生药学研究.采用性状鉴别、显微鉴别的方法鉴别虎眼万年青;按《中国药典》2015版附录的方法测定水分、灰分;采用紫外-可见分光光度法测定含总皂苷量.明确了虎眼万年青的性状特征,根、鳞茎和叶的显微组织构造及粉末特征.15批药材水分、总灰分、酸不溶性灰分平均为8.7%、12.75%、2.62%;含总皂苷平均量为3.1mg/g.该研究为虎眼万年青药材质量标准的建立提供依据.

关键词：虎眼万年青性状鉴定显微鉴定总皂苷