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葵灵化积煎对荷瘤小鼠H22肝癌Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

葵灵化积煎对荷瘤小鼠H22肝癌Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

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作者：张秋大连医科大学

学位级别：硕士

目的：研究葵灵化积煎对荷瘤小鼠H22肝癌生长抑制作用及其对肿瘤组织Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法：建立荷瘤H22动物模型，将40只健康昆明种小鼠随机分为中药实验组，盐水对照组，5－氟脲嘧啶组和中西医结合组，共4组，每组10只... 详细信息

目的：研究葵灵化积煎对荷瘤小鼠H22肝癌生长抑制作用及其对肿瘤组织Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法：建立荷瘤H22动物模型，将40只健康昆明种小鼠随机分为中药实验组，盐水对照组，5－氟脲嘧啶组和中西医结合组，共4组，每组10只。中药实验组小鼠每天分别中药灌胃，盐水对照组小鼠给予生理盐水灌胃，5－氟脲嘧啶组每天腹腔注射5－FU，中西医结合组同时给予中药灌胃和5－FU腹腔注射，15d后处死小鼠，取瘤组织测定瘤质量、抑瘤率，并采用免疫组化法检测各组小鼠肿瘤组织Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果：5－氟脲嘧啶组及中西医结合组肿瘤抑瘤率分别为75.13%、52.06%，与盐水对照组比较，有统计学意义（P＜0.01）。中药实验组和中西医结合组可降低肿瘤组织中Bcl-2蛋白基因表达，升高Bax蛋白基因表达，与盐水对照组比较，有显著性差异（P＜0.01）。结论：细胞凋亡（Apoptosis APO）是在基因控制下的细胞自我消亡过程。Bcl-2家族蛋白是细胞凋亡过程中发挥主要调控作用的一类因子，根据其功能分为两类：一类抑制细胞凋亡，以Bcl-2为代表;另一类促进细胞凋亡，以Bax、Bad为代表。葵灵化积煎可下调Bcl-2蛋白表达，上调Bax蛋白表达，且具有抑制肿瘤生长作用，提示葵灵化积煎通过凋亡机制促进肿瘤细胞凋亡，从而起到抗癌的作用。

关键词：葵灵化积煎肝癌 Bcl-2Bax

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葵灵化积煎对小鼠H22肝癌细胞的抑瘤作用及对C-myc、nm23-H1表达的影响

葵灵化积煎对小鼠H22肝癌细胞的抑瘤作用及对C-myc、nm23-H1表达...

引用

作者：沈蓓蓓大连医科大学

学位级别：硕士

目的：癌症目前已经成为了全球的一个主要死亡原因，其中肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，对于目前主要的治疗手段手术、放疗及化疗均具有一定的局限性，尤其是具有毒性反应的化疗药物明显降低了癌症患者的生存质量，因此低毒且有效的中药... 详细信息

目的：癌症目前已经成为了全球的一个主要死亡原因，其中肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，对于目前主要的治疗手段手术、放疗及化疗均具有一定的局限性，尤其是具有毒性反应的化疗药物明显降低了癌症患者的生存质量，因此低毒且有效的中药逐渐被人们应用于各种肿瘤的治疗中。本实验通过以氟尿嘧啶为阳性对照，以生理盐水为阴性对照，观察研究葵灵化积煎对肝癌荷瘤细胞系H小鼠的抗肿瘤作用，并探讨其可能的作用机制。方法：将冻存的肝癌H细胞株成功复苏后在昆明小白鼠体内进行传代，无菌环境下抽取小鼠腹水，并稀释调整细胞至5x10个·mL1浓度，分别取0.1mL悬液注射在64只6～8周龄，体重20±2g的昆明小鼠右腋下，建立肝癌实体瘤模型进行体内实验。随机将昆明小鼠分为对照组(0.85%生理盐水0.4mL/只)、5-Fu组(氟尿嘧啶20mg·kg)、中药组(葵灵化积煎0.4mL/只)及联合组(葵灵化积煎0.2mL/只+氟尿嘧啶10mg·kg)4组，每组16只，雌雄各8只。分别用灌胃或腹腔注射的方式每天给4组小鼠进行药物治疗，在连续给药治疗期间，观察并记录各组小鼠生存状态的变化，14天后以颈椎脱臼法处死小鼠，剥取移植瘤，拍照并对其称重，通过比较移植瘤的体积、重量、计算抑瘤率，观察葵灵化积煎对肝癌细胞的抑制作用，并采用免疫组织化学技术检测葵灵化积煎对C-myc、nm23-H表达的影响。结果：在小鼠用药治疗期间，通过对其精神状态、呼吸频率、毛发色泽、体形、食量及活动灵敏程度等指标的观察，发现随着用药时间的延长，中药组的小鼠生存质量优于联合组及5-Fu组的小鼠。通过比较4组小鼠移植瘤体积的大小，可以明显观察到5-Fu组、中药组及联合组小鼠移植瘤的体积均小于对照组，其中抑制肿瘤生长最明显的是5-Fu组，联合组较中药组抑瘤效果明显。从移植瘤重量上看，5-Fu组、中药组及联合组小鼠的瘤重亦明显低于对照组，差异有统计学意义(**P﹤0.01，*P﹤0.05)，各自对小鼠肝癌细胞的生长抑制率分别为5-Fu组50.23%，联合组36.41%，中药组29.03%。从免疫组织化学结果可观察到C-myc及nm23-H在4组中均呈阳性表达，用方差分析统计结果显示：葵灵化积煎能减弱C-myc的表达，增强nm23-H的表达，与对照组相比较差异均有统计学意义(△P﹤0.05)，而5-Fu组、联合组及中药组三组两两比较，差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论：葵灵化积煎同氟尿嘧啶都具有明显的抑制肿瘤生长的作用，其作用机制可能与调节C-myc及nm23-H表达有关;此外，葵灵化积煎的毒性作用远低于氟尿嘧啶，可提高癌症患者的生存质量，延长癌症患者的生存期;因此，从远期的疗效看，有效且低毒的药物葵灵化积煎可作为治疗肝癌的新药物。但是本实验对葵灵化积煎只是初步阐明抗肿瘤的可能机制，其明确的作用机制还有待于进一步深入探讨与研究。

关键词：葵灵化积煎肝癌 C-myc nm23-H1

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