检索结果-南通市图书馆

果树学报 2009年第2期26卷 158-162页

作者：尚佑芬王升吉赵玖华张家魁吕志华路兴波孙红炜杨崇良山东省农业科学院植物保护研究所山东省葡萄研究所济南250100 山东省济宁市林业局经济林站山东济宁272000

为明确沙地葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)在山东省发生的情况,2006-2007年在葡萄主栽区和葡萄品种资源圃进行了田间调查、样品采集和病原检测。应用GRSPaV外壳蛋白基因表达获得的多克隆抗体,经间接酶联免疫吸附试验(PTA-ELISA)和斑点酶联免... 详细信息

为明确沙地葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)在山东省发生的情况,2006-2007年在葡萄主栽区和葡萄品种资源圃进行了田间调查、样品采集和病原检测。应用GRSPaV外壳蛋白基因表达获得的多克隆抗体,经间接酶联免疫吸附试验(PTA-ELISA)和斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测,在2a采集的298个样品中,125个样品为阳性反应,阳性率41.95%。125个阳性样品涉及43个品种,品种被侵染率74.14%。研究对检测的样品用RT-PCR法验证,有3对引物均扩增出了预期片段,分别为解旋酶基因340bp片段、外壳蛋白(CP)基因842bp片段和RNA聚合酶(RdRp)基因499bp片段。

关键词：葡萄茎痘相关病毒病原检测 ELISA RT-PCR

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沙地葡萄茎痘相关病毒PCR检测及基因变异分析

沙地葡萄茎痘相关病毒PCR检测及基因变异分析

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中国植物保护学会第十一次全国会员代表大会暨2013年学术年会

作者：朱红娟胡国君范旭东张尊平任芳董雅凤中国农业科学院果树研究所国家落叶果树脱毒中心

葡萄皱木复合病(Rugose wood complex disease)是一种发生普遍、为害严重的葡萄病毒病。依其在指示植物上的症状表现分为葡萄栓皮病、Kober 5BB茎沟病、LN33茎沟病和沙地葡萄茎痘病等四种主要类型。该病可导致葡萄嫁接不亲和,开花延迟,... 详细信息

葡萄皱木复合病(Rugose wood complex disease)是一种发生普遍、为害严重的葡萄病毒病。依其在指示植物上的症状表现分为葡萄栓皮病、Kober 5BB茎沟病、LN33茎沟病和沙地葡萄茎痘病等四种主要类型。该病可导致葡萄嫁接不亲和,开花延迟,生长衰退,甚至死亡。研究表明沙地葡萄茎痘相关病毒(Grapevine rupestris stem pitting associatedvirus,GRSPaV)与沙地葡萄茎痘症状密切相关。此外,该病毒与Syrah衰退病、Richter 110叶脉坏死症以及美国密苏里州的酿酒葡萄"霞多丽"脉明症状均有显著的相关性。GRSPaV在我国研究较少,其分子特性及变异情况不明,检测体系不完善,不利于对该病毒进行有效防控。本研究采用RT-PCR方法对来自16个省市自治区的不同葡萄样品进行了检测,结果表明:除新疆外,其余15个地区的葡萄样品中均检测到了GRSPaV。检测的305株葡萄样品中,有114株带毒,平均带毒株率为37.4%。对检测结果进行分析发现,不同地区的葡萄品种带毒情况不同,品种带毒率最高的为88.9%,最低的为20.0%;不同地区的葡萄植株带毒情况也存在差别,葡萄植株带毒率最高的为75.0%,最低的为20%。GRSPaV主要随葡萄繁殖材料进行传播扩散,目前,尚未发现传毒介体,由于各地区苗木来源不同,导致了带毒率有所差异。筛选部分带毒样品进行克隆测序,克隆片段(905bp)覆盖GRSPaV的完整CP基因(780bp)及其两端的部分片段(125bp)。已从16个带毒样品中克隆得到目标序列,它们之间的同源性为81.3%～98.6%,截取16个片段的CP基因序列与NCBI上登录的GRSPaV序列进行比对分析,构建系统进化树。结果表明:所有GRSPaV分离物聚为两个大组,且各分离物间未表现明显的地域差异。

关键词：葡萄茎痘相关病毒 PCR检测基因变异

来源： cnki会议评论

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葡萄GLRaV-3和GRSPaV病毒双重PCR方法建立及初步应用

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中国南方果树 2019年第1期48卷 72-77页

作者：李升李玲玉乔光龙天文王嘉福贵州大学农业生物工程研究院贵阳550025 贵州大学生命科学学院贵阳550025 铜仁学院贵州铜仁554300

针对我国西南地区葡萄园中卷叶相关病毒3(grapevine leafroll-associated virus 3,GLRaV-3)和茎痘相关病毒(grapevine rupestris stem pitting-associated virus,GRSPaV)发生普遍的情况,在单一PCR检测的基础上,分别从引物浓度和退火温度对双重PCR体系进行优化,建立了同时检测GLRaV-3和GRSPaV的双重PCR技术。建立的双重PCR反应体系最适退火温度为56.1℃,20μL PCR反应体系中10μmol/L浓度的混合引物最适用量为0.1μL;该方法能够检测出GLRaV-3和GRSPaV的cDNA最低浓度分别为0.99pg/μL和99.43ng/μL,且特异性良好。应用该双重PCR方法检测了来自贵州凯里和遵义地区"南玉""温克""摩尔多瓦"葡萄品种疑似病株样品,GLRaV-3检出率为100%,部分样品检出GRSPaV。通过核苷酸序列克隆测序和对比发现,贵州检测出的GLRaV-3与美国分离株(AJ748523)相似度最高,为99.82%;贵州检测出的GRSPaV与巴西分离株(KT008370)相似度最高,为99.08%。

关键词：葡萄卷叶相关病毒3 葡萄茎痘相关病毒多重PCR

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