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缺氧诱导因子-1α、葡萄糖转运体-1在恶性黑素瘤中的表达及意义

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实用医院临床杂志 2009年第2期6卷 16-18页

作者：杨井陶娟刘业强李延涂亚庭华中科技大学同济医学院附属协和医院皮肤科湖北武汉430022

目的研究缺氧诱导因子-1α(Hypoxia inducing factor-1α,HIF-1α)及葡萄糖转运体-1(Glucose transporter-1,GLUT-1)在人恶性黑素瘤组织中表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测35例人恶性黑素瘤标本和22例色素痣中HIF-1α、G... 详细信息

目的研究缺氧诱导因子-1α(Hypoxia inducing factor-1α,HIF-1α)及葡萄糖转运体-1(Glucose transporter-1,GLUT-1)在人恶性黑素瘤组织中表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测35例人恶性黑素瘤标本和22例色素痣中HIF-1α、GLUT-1的表达。结果HIF-1α在恶性黑素瘤和色素痣中均有表达,但在恶性黑素瘤中的表达明显高于色素痣(t=7.00,P1);29例恶性黑素瘤组织表达GLUT-1阳性率82.8%,色素痣组织仅2例呈弱阳性表达(9.1%),两者表达差异有显著性意义(χ2=29.63,P1);HIF-1α与GLUT-1的表达呈正相关(r=0.71,P1)。结论HIF-1α和GLUT-1在恶性黑素瘤中的表达增高,可能参与肿瘤的发生发展。

关键词：恶性黑素瘤缺氧诱导因子-1α 葡萄糖转运体-1

栝楼桂枝汤对脑缺血/再灌注大鼠脑组织葡萄糖代谢的作用及机制研究

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中医学 2022年第1期11卷 89-95页

作者：韩静张继州邹俊蒋畅福建省中医药科学院福建福州

目的:动态观察栝楼桂枝汤对脑缺血再灌注损伤后脑组织葡萄糖代谢的作用及葡萄糖转运体相关的机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组和栝楼桂枝汤组,采用线栓法制作大脑中动脉闭塞再灌注模型,栝楼桂枝汤组于造模后连续14日灌胃栝楼... 详细信息

目的:动态观察栝楼桂枝汤对脑缺血再灌注损伤后脑组织葡萄糖代谢的作用及葡萄糖转运体相关的机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组和栝楼桂枝汤组,采用线栓法制作大脑中动脉闭塞再灌注模型,栝楼桂枝汤组于造模后连续14日灌胃栝楼桂枝汤予以干预,每日1次。分别于造模后3天、7天和14天,采用Micro-PET活体影像检测方法,观察大鼠脑组织造影剂18F-FDG摄取情况变化。采用免疫组织化学方法检测脑缺血周边区葡萄糖转运体Glut-1的表达。结果:随着用药时间增加,栝楼桂枝汤可显著降低缺血损伤大鼠葡萄糖低摄取区域(p 1阳性染色较模型组显著提高(p 葡萄糖摄取,该作用可能与其提高脑组织葡萄糖转运相关。

关键词：栝楼桂枝汤脑缺血 Micro-PET 葡萄糖转运体-1

低氧诱导因子-1α沉默对膀胱癌细胞血管内皮生长因子和葡萄糖转运蛋白-1表达的影响

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中华实验外科杂志 2013年第1期30卷 108-111页

作者：刘廷江孙福振杨涛刘学军河北省人民医院泌尿外科石家庄050051 河北省人民医院药剂科石家庄050051

目的采用RNA干扰技术（RNAi）技术观察低氧诱导因子-1α（HIF-1α）对膀胱癌细胞株B1U-87血管内皮生长因子（VEGF）、葡萄糖转运蛋白-1（GLUT-1）表达的影响。方法体外培养人膀胱癌BIU-87细胞，荧光定量聚合酶链反应（PCR）和Western b... 详细信息

目的采用RNA干扰技术（RNAi）技术观察低氧诱导因子-1α（HIF-1α）对膀胱癌细胞株B1U-87血管内皮生长因子（VEGF）、葡萄糖转运蛋白-1（GLUT-1）表达的影响。方法体外培养人膀胱癌BIU-87细胞，荧光定量聚合酶链反应（PCR）和Western blot检测低氧（90％氮气＋5％氢气＋5％二氧化碳）和常氧下HIF-1α、VEGF、GLUT-1的表达；Western blot检测HIF-1α-siRNA的转染效果及转染前后细胞VEGF、GLUT-1的表达；采用磺酰罗丹明B（SRB）法检测HIF-1α-siRNA转染后的细胞增殖。结果低氧8、24h条件下，BIU-87中HIF．1仪蛋白（0．56±0．08、1．33±0．21）、VEGFmRNA（2．12±0．29、3．27±0．46）、VEGF蛋白（0．29±0．04、0．59±0．10）、GLUT-1mRNA（1．99±0．22、3．95±0．48）、GLUT-1蛋白（0．384-0．05、0．65±0．11）表达均较正常氧条件下HIF-1α蛋白（O．33±O．05）、VEGF mRNA（0．97±0．11）、VEGF蛋白（0．98±0．16）、GLUT-1 mRNA（1．05±0．12）、GLUT-1蛋白（1．46±0．24）表达显著升高（P〈0．05），而HIF-1α mRNA在低氧8、24h（1．05±0．09、0．96±O．11）与正常氧（1．16±O．13）条件下差异无统计学意义（P〉0．05）；HIF-1α-siRNA转染能有效沉默HIF-1α,转染后BIU-87增殖水平（0．63±0．08）与转染前（1．12±0．17）比较明显降低（P〈0．05），转染后VEGFmr^NA（O．43±O．05）和蛋白（0．58±0.07）表达比转染前（1．08±0.12、1．19±0．17）降低（P〈0．05），GLUT-1mltNA和蛋白（0．56±0．06、0．51±0．07）表达比转染前（1．07±0．18、1．16±0．16）降低。结论低氧条件下，HIF-1α-siRNA能通过沉默HIF-1α，抑制BIU-87细胞VEGF、GLUT-l表达，从而抑制膀胱癌细胞增殖。

关键词：低氧诱导因子-1α 膀胱肿瘤 RNA干扰血管内皮生长因子葡萄糖转运体-1

KRAS/BRAF基因与结肠癌糖代谢研究现状

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世界华人消化杂志 2017年第22期25卷 2045-2050页

作者：刘亮黄劲柏邱大胜长江大学第一临床医学院长江大学附属第一医院湖北省荆州市434000 荆州市第一人民医院放射科湖北省荆州市434000 湖北省肿瘤医院PET/CT中心湖北省武汉市430079

正电子发射断层成像术(positron emission tomography,PET)/计算机断层扫描(computed tomography,CT)显像可用于结肠癌的诊断、监测疗效和预后评估.^(18)F标记葡萄糖(2-fluorine-18-fluoro-2-deeoxy-D-glucose,^(18)F-FDG)是PET/CT常用显像剂,可以反映结肠癌活体组织葡萄糖代谢.KRAS/BRAF基因检测常用于结肠癌靶向治疗方案的选择及评估其治疗效果.文献报道^(18)F-FDGPET/CT显像可预测结肠癌KRAS/BRAF基因状态,能以无创的方式预测结肠癌抗表皮生长因子受体靶向治疗效果.目前国内有关KRAS/BRAF基因与结肠癌糖代谢的研究相对较少,本文结合近期的相关文献进行概述.

关键词：结肠癌 KRAS/BRAF基因正电子发射断层扫描葡萄糖转运体-1

以脑能量转运蛋白为靶点研究通络醒脑泡腾片的抗痴呆作用

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中国中医基础医学杂志 2016年第12期22卷 1612-1615,1651页

作者：付文君胡勇任香怡魏江平付昆徐世军四川省中药资源系统研究与开发利用国家重点实验室培育基地成都611137 成都中医药大学成都611137

目的:通过考察通络醒脑泡腾片干预后MID模型大鼠海马主要能量转运蛋白表达揭示其抗痴呆的作用机制。方法:建立微血栓诱发的MID大鼠模型,给予通络醒脑泡腾片干预90 d,采用Morris水迷宫评价大鼠的学习记忆功能,采用免疫组化和图像分析法... 详细信息

目的:通过考察通络醒脑泡腾片干预后MID模型大鼠海马主要能量转运蛋白表达揭示其抗痴呆的作用机制。方法:建立微血栓诱发的MID大鼠模型,给予通络醒脑泡腾片干预90 d,采用Morris水迷宫评价大鼠的学习记忆功能,采用免疫组化和图像分析法评价大鼠海马GLUT-1、MCT-1和MCT-2的表达。结果:与模型对照组比较,通络醒脑泡腾片能显著缩短MID模型大鼠的逃避潜伏期,增加进入有效区域次数并延长有效区域停留时间,差异有统计学意义;通络醒脑泡腾片能显著促进模型大鼠海马GLUT-1、MCT-1和MCT-2表达。结论:通络醒脑泡腾片改善MID模型大鼠学习记忆功能的作用与其促进增强海马能量转运蛋白GLUT-1、MCT-1和MCT-2的表达有关。

关键词：通络醒脑泡腾片多发脑梗死性痴呆葡萄糖转运体-1 单羧酸转运体-1 单羧酸转运体-2

rAAV-HIF-1α-siRNA联合抗坏血酸对人胰腺癌MiaPaC2细胞糖代谢的影响

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rAAV-HIF-1α-siRNA联合抗坏血酸对人胰腺癌MiaPaC2细胞糖代谢的...

作者：张宝帅天津医科大学

学位级别：硕士

目的胰腺癌为高度恶性的乏血管肿瘤，其组织中有高丰度的HIF-1α表达，而HIF-1α在肿瘤细胞缺氧自适应过程中对肿瘤细胞的糖代谢起着重要调节作用。因此，以HIF-1α为靶点有望成为治疗胰腺癌的有效手段。当前，RNAi技术可以高效、特异... 详细信息

目的胰腺癌为高度恶性的乏血管肿瘤，其组织中有高丰度的HIF-1α表达，而HIF-1α在肿瘤细胞缺氧自适应过程中对肿瘤细胞的糖代谢起着重要调节作用。因此，以HIF-1α为靶点有望成为治疗胰腺癌的有效手段。当前，RNAi技术可以高效、特异性地促使靶基因mRNA的降解，阻断靶基因的表达，达到基因敲除的效果。而作为基因治疗的载体——腺相关病毒(AAV)，因其无致病性、无免疫原性、可感染分裂细胞和非分裂细胞等特点被认为是抗肿瘤基因治疗的最理想载体，而抗坏血酸具有促进HIF-1α蛋白降解的作用。因此，本实验将以重组腺相关病毒(rAAV)为载体介导以HIF-1α为靶点的siRNA，联合抗坏血酸，作用于MiaPaC2人胰腺癌细胞，厌氧培养条件下观察其对糖代谢反应关键酶——葡萄糖转运体-1(Glut-1)表达的影响，为进一步探讨基因联合药物治疗胰腺癌提供一些理论依据。方法 1．提取和扩增载体质粒pAAV-hrGFP和pAAV-H1-siRNA-hrGFP及辅助质粒pAAV-RC、pAAV-Helper;应用磷酸钙沉淀三质粒共转染HEK293细胞法包装rAAV;提取和纯化rAAV并计算其滴度;再应用rAAV转染MiaPaCa2人胰腺癌细胞，利用GFP观察荧光表达判断转染效果。 2．对于厌氧培养下(5％CO、1％O、94％N)的MiaPaCa2人胰腺癌细胞，分5组并给予不同处理因素，(①空白对照组、②空载病毒组、③单纯抗坏血酸组、④单纯rAAV-H1-siRNA-hrGFP组、⑤rAAV-H1-siRNA-hrGFP联合抗坏血酸组)，24和48小时后，应用蛋白印迹法观察对MiaPaCa2人胰腺癌细胞HIF-1α蛋白表达的影响，应用RT-PCR法和蛋白印迹法分别观察对MiaPaCa2人胰腺癌细胞Glut-1基因及蛋白表达的影响。结果 1．成功包装了rAAV，其形态正常、纯度满意、滴度达4×10particles／ml。将rAAV-HIF-1α-siRNA转染MiaPaC2人胰腺癌细胞，荧光显微镜下可见绿色荧光表达。 *** Blot研究发现，rAAV-HIF-1α-siRNA和L-ascorbate作用于MiaPaC2细胞24h后，与对照组比，HIF-1α蛋白明显下降;在联合组中，48h下降更为显著。应用RT-PCR法检测各不同处理因素对MiaPaC2人胰腺癌细胞Glut-1 mRNA表达，发现rAAV-HIF-1α-siRNA和抗坏血酸有抑制MiaPaC2人胰腺癌细胞Glut-1 mRNA表达的作用，与对照组相比，差异有显著性(P＜0.01)，而rAAV-hrGFP对MiaPaC2细胞Glut-1 mRNA的表达无任何影响(P＞0.05)，且rAAV-HIF-1α-siRNA抑制Glut-1 mRNA的表达在48小时到达高峰，明显超过其在24小时的作用：应用Western Blot检测发现，rAAV-H1-siRNA-hrGFP处理组、抗坏血酸处理组及rAAV-H1-siRNA-hrGFP联合抗坏血酸处理组的Glut-1蛋白的表达，与对照组相比，有显著性差异(P＜0.01);而rAAV-hrGFP组与对照组相比，Glut-1蛋白的表达未见明显显著性差异(P＞0.05)，且24小时Glut-1蛋白的表达便明显下降，48小时下降更加显著。结论 1．成功包装rAAV，其形态、纯度及滴度满意，且能成功的转染MiaPaC2人胰腺癌细胞。 ***-HIF-1α-siRNA和L-ascorbate都可抑制MiaPaC2细胞HIF-1α蛋白表达，并且其联合作用大于其单独作。rAAV-H1-siRNA-hrGFP和抗坏血酸都有抑制MiaPaC2人胰腺癌细胞糖代谢关键酶Glut-1表达的作用，从而抑制肿瘤细胞的增殖，最终可能达到治疗胰腺癌的目的。

关键词：缺氧诱导因子-1α 葡萄糖转运体-1 小干扰RNA 重组腺相关病毒

结肠癌18F-FDG摄取与KRAS突变及患者临床特征的相关性研究

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结肠癌18F-FDG摄取与KRAS突变及患者临床特征的相关性研究

作者：刘亮长江大学

学位级别：硕士

目的:探讨结肠癌病灶最大标准化摄取值(maximum standardized uptake value,SUVmax)与KRAS突变及患者临床特征的关系。材料和方法:回顾性分析45例术后病理证实为结肠癌患者的PET/CT影像及临床资料,分别以性别、年龄、病变部位、肿瘤长... 详细信息

目的:探讨结肠癌病灶最大标准化摄取值(maximum standardized uptake value,SUVmax)与KRAS突变及患者临床特征的关系。材料和方法:回顾性分析45例术后病理证实为结肠癌患者的PET/CT影像及临床资料,分别以性别、年龄、病变部位、肿瘤长径分组,分析各组KRAS突变有无统计学差异。以KRAS突变状态、年龄、性别、病灶部位、分期、病理类型、组织分化程度、CEA、CA199、CA125、进行分组,分析各组SUVmax差异有无统计学意义。以KRAS突变状态分组,分析两组GLUT-1表达有无统计学差异。结果:1、KRAS突变型15例,KRAS野生型30例,KRAS突变率33.3%。2、分别以性别、年龄、病变部位、肿瘤长径分组,各组KRAS突变均无明显统计学差异(P﹥0.05)。3、KRAS突变型SUVmax为16.9±14.1,野生型SUVmax为13.0±9.8,差异具有统计学意义(P﹤0.05)。4、分别以性别、年龄、病灶部位、病理类型、CA199及CA125分组,各组SUVma x无明显统计学差异(P﹥0.05),分别以病灶长径、TNM分期、AJCC分期、组织学分化程度及CEA分组,各组SUVmax有统计学差异(P1表达有统计学差异(P1、结肠癌SUVmax偏高可能与KRAS突变有一定关系。2、SUVmax可能与组织学分化程度、病灶大小、CEA及分期有关。3、结肠癌KRAS突变可能与GLUT-1表达有关。

关键词：结肠癌 KRAS基因 PET/CT SUVmax 葡萄糖转运体-1

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高血氨诱导肝性脑病发生发展的研究现状

神经药理学报 2011年第4期1卷 33-41页

作者：薛占霞彭亮河北北方学院药学系中国医科大学药学院

肝性脑病(hepatic encephalopathy,HE)是急、慢性肝衰竭的严重并发症,以星形胶质细胞病变为主要病理变化。肝性脑病的发病可能与多种因素有关,大量研究表明氨在HE发病过程中起关键作用。高血氨诱导星形胶质细胞上末梢型苯二氮类受体(per... 详细信息

肝性脑病(hepatic encephalopathy,HE)是急、慢性肝衰竭的严重并发症,以星形胶质细胞病变为主要病理变化。肝性脑病的发病可能与多种因素有关,大量研究表明氨在HE发病过程中起关键作用。高血氨诱导星形胶质细胞上末梢型苯二氮类受体(peripheral-type benzodiazepine receptor,PTBR)、葡萄糖转运体-1(glucose tranporter-1,GLUT-1)、水通道蛋白-4(aquaporin-4,AQP4)和Na+/K+-ATPase基因表达上调;影响微管相关蛋-2(microtubule-associated protein-2,MAP-2)磷酸化及N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体表达;诱导一氧化氮(nitricoxide,NO)合成增加从而改变神经细胞功能。此外,氨能使脑内哇巴因类复合物生成增加,并能够使Na+/K+-ATPase的活性增加。对上述因素的研究将帮助我们理解氨诱导星形胶质细胞功能障碍的基本机制,并进一步制定防治肝性脑病的新策略。

关键词：肝性脑病末梢型苯二氮类受体葡萄糖转运体-1 水通道蛋白-4 钠/钾-ATPase 微管相关蛋白2 N-甲基-D-天冬氨酸受体一氧化氮

rAAV介导的靶向HIF-1α小干扰RNA在乏氧条件下对MiaPaCa2细胞Glut-1表达的影响

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天津医科大学学报 2009年第4期15卷 656-658,670页

作者：张宝帅陈传贵陈剑秋孙晋津天津医科大学第二医院普通外科天津300211

目的:以重组腺相关病毒(rAAV)为载体介导以HIF-1α为靶点的小干扰RNA,在厌氧培养条件下作用于Mia-PaCa2人胰腺癌细胞,观察其对糖代谢反应关键酶——葡萄糖转运体-1(Glut-1)表达的影响。方法:构建rAAV介导的以HIF-1α为靶基因的RNA干扰... 详细信息

目的:以重组腺相关病毒(rAAV)为载体介导以HIF-1α为靶点的小干扰RNA,在厌氧培养条件下作用于Mia-PaCa2人胰腺癌细胞,观察其对糖代谢反应关键酶——葡萄糖转运体-1(Glut-1)表达的影响。方法:构建rAAV介导的以HIF-1α为靶基因的RNA干扰表达载体,即rAAV-siHIF。将rAAV-hrGFP、rAAV-siHIF-1α分别转染对数生长的MiaPaCa2人胰腺癌细胞,在乏氧条件下进行培养,应用Real-Time PCR、RT-PCR、Western Blot法观察其对Mia-PaCa2细胞HIF-1α mRNA、蛋白以及Glut-1 mRNA、蛋白表达的影响。结果:Real-Time PCR和Western Blot检测发现,rAAV-siHIF-1α能够抑制MiaPaCa2细胞HIF-1α mRNA和蛋白的表达。RT-PCR和Western Blot检测发现,rAAV-siHIF-1α能抑制MiaPaCa2细胞Glut-1 mRNA和蛋白的表达。结论:rAAV-siHIF-1α能抑制MiaPaCa2人胰腺癌细胞糖代谢关键酶Glut-1表达的作用。

关键词：缺氧诱导因子-1α 葡萄糖转运体-1 小干扰RNA 重组腺相关病毒