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变形链球菌葡聚糖结合蛋白a真核表达质粒pcDNA3.1/GBD在哺乳动物细胞中的表达

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华西口腔医学杂志 2004年第1期22卷 10-12页

作者：苏凌云吴补领李福洋陆群第四军医大学口腔医院牙体病科第四军医大学基础部生化与分子生物学教研室陕西西安710032

目的　观察变形链球菌葡聚糖结合蛋白a(GbpA)的葡聚糖结合区 (GBD)真核表达质粒pcDNA3 1 GBD在哺乳动物细胞COS_7的表达情况。方法　通过基因重组技术构建真核表达质粒pcDNA3 1 GBD ,通过脂质体转染法将其转染至COS_7细胞 ,通过免疫组化... 详细信息

目的　观察变形链球菌葡聚糖结合蛋白a(GbpA)的葡聚糖结合区 (GBD)真核表达质粒pcDNA3 1 GBD在哺乳动物细胞COS_7的表达情况。方法　通过基因重组技术构建真核表达质粒pcDNA3 1 GBD ,通过脂质体转染法将其转染至COS_7细胞 ,通过免疫组化SABC法检测其在COS_7细胞的表达。结果　pcDAN3 1 GBD质粒转染的细胞质呈棕黄色染色 ,胞核无着色 ,pcDAN3 1空载体转染的细胞质及胞核无着色 ,空白对照组也无着色。结论　质粒pcDAN3 1 GBD转染COS_7后能够在细胞内翻译、表达 ,表达的蛋白质位于细胞质中 ,可与抗GbpA抗体特异性结合 ,具有抗原性。

关键词：变形链球菌葡聚糖结合蛋白a GbpA 真核表达质粒哺乳动物基因表达

葡聚糖结合蛋白a-壳聚糖纳米颗粒系统的构建及其特征

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牙体牙髓牙周病学杂志 2004年第3期14卷 154-157页

作者：江川吴补领苏凌云第四军医大学口腔医学院陕西西安710032

目的 :制备葡聚糖结合蛋白a(GbpA) -壳聚糖纳米颗粒系统 ,检测其物理性能。方法 :制备葡聚糖结合蛋白a -壳聚糖纳米颗粒系统并检测颗粒大小、形态、包装容量、包装效率、稳定性、包裹方式。结果 :葡聚糖结合蛋白a(GbpA) -壳聚糖纳米颗... 详细信息

目的 :制备葡聚糖结合蛋白a(GbpA) -壳聚糖纳米颗粒系统 ,检测其物理性能。方法 :制备葡聚糖结合蛋白a -壳聚糖纳米颗粒系统并检测颗粒大小、形态、包装容量、包装效率、稳定性、包裹方式。结果 :葡聚糖结合蛋白a(GbpA) -壳聚糖纳米颗粒大小为 5 0～ 10 0nm之间 ,类似球形 ,散在分布 ,较为均匀 ,呈聚集团块状存在。包装效率为 99% ,包装容量为 4 3%。在 4℃稳定。电泳显示纳米颗粒上清中GbpA与游离GbpA在同一分子水平。CLSM图像研究证实葡聚糖结合蛋白a包裹于壳聚糖纳米颗粒内 ,不仅仅结合于其表面。结论 :葡聚糖结合蛋白a(GbpA)可以与壳聚糖结合形成纳米颗粒 ,且包装容量、包装效率、稳定性均较高。

关键词：葡聚糖结合蛋白a 壳聚糖纳米颗粒

葡聚糖结合蛋白a-壳聚糖纳米颗粒经鼻免疫小鼠的实验研究

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牙体牙髓牙周病学杂志 2004年第1期14卷 23-25页

作者：江川吴补领苏凌云第四军医大学口腔医院陕西西安710032

目的 :检测葡聚糖结合蛋白a[Glucanbindingprotein·A(GBPA) ]-壳聚糖纳米颗粒载体系统经鼻黏膜免疫小鼠的效果。证明壳聚糖可作为经鼻用蛋白防龋疫苗的载体系统。方法 :用该载体系统经鼻免疫小鼠 ,间接ELISA方法检测血清中针对葡聚糖... 详细信息

目的 :检测葡聚糖结合蛋白a[Glucanbindingprotein·A(GBPA) ]-壳聚糖纳米颗粒载体系统经鼻黏膜免疫小鼠的效果。证明壳聚糖可作为经鼻用蛋白防龋疫苗的载体系统。方法 :用该载体系统经鼻免疫小鼠 ,间接ELISA方法检测血清中针对葡聚糖结合蛋白a的特异的IgG以及唾液中针对葡聚糖结合蛋白a的特异的IgA。与霍乱毒素 - (GbpA)、未免疫组、空白壳聚糖纳米颗粒组作比较。结果 :产生的血清和唾液中针对GbpA的特异的IgG、IgA抗体滴度远大于未免疫组、空白壳聚糖纳米颗粒组 ,与霍乱毒素 - (GbpA)组抗体滴度相当。结论 :证明壳聚糖纳米颗粒系统可作为经鼻运输葡聚糖结合蛋白a的载体系统。

关键词：葡聚糖结合蛋白a 壳聚糖纳米颗粒 ELISA

变异链球菌葡聚糖结合蛋白a葡聚糖结合区真核表达质粒的构建及其在哺乳动物细胞中的表达

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牙体牙髓牙周病学杂志 2010年第6期20卷 310-313,340页

作者：韩琪刘建国柴巧学曲云鹏管晓燕白国辉杨德琴遵义医学院口腔内科学教研室贵州遵义563003

目的:构建变异链球菌葡聚糖结合蛋白a葡聚糖结合区的真核表达质粒pVAX1-GbpA/GBD,并观察其在哺乳动物细胞COS-7中的表达。方法:利用基因重组技术构建真核表达质粒pVAX1-Gb-pA/GBD,经酶切分析和测序分析鉴定后,通过脂质体转染法,将其转染... 详细信息

目的:构建变异链球菌葡聚糖结合蛋白a葡聚糖结合区的真核表达质粒pVAX1-GbpA/GBD,并观察其在哺乳动物细胞COS-7中的表达。方法:利用基因重组技术构建真核表达质粒pVAX1-Gb-pA/GBD,经酶切分析和测序分析鉴定后,通过脂质体转染法,将其转染至COS-7细胞中,免疫组化SABC法检测其在细胞中的表达。结果:重组质粒pVAX1-GbpA/GBD经EcoR I和BamH I酶切证实携带1.2kb目的基因片段,经测序分析,目的基因正确插入到预先设计的载体位点处。pVAX1-gbpA/GBD转染的细胞胞质呈褐色染色,pVAX1空载体质粒转染的细胞胞质中无着色。结论:成功构建防龋基因疫苗真核表达质粒pVAX1-GbpA/GBD,所携带的基因序列正确,能够在真核细胞COS-7中正确表达目的蛋白。

关键词：变异链球菌葡聚糖结合蛋白a 哺乳动物细胞真核表达 pVAXl

变异链球菌葡聚糖结合蛋白a真核表达质粒的构建以及在真核细胞中的表达

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变异链球菌葡聚糖结合蛋白A真核表达质粒的构建以及在真核细胞中...

变形链球菌GbpA的GBD融合蛋白诱导SD大鼠产生免疫应答

全国第三次牙体牙髓病学临床技术研讨会

作者：韩琪刘建国曲云鹏柴巧学管晓燕白国辉遵义医学院口腔医学院口腔内科学教研室

目的:构建变异链球菌葡聚糖结合蛋白a葡聚糖结合区的真核表达质粒pVAX1-GbpA/GBD,并观察其在哺乳动物细胞COS-7中的表达。方法:利用基因重组技术构建真核表达质粒pVAX1-GbpA/GBD。通过脂质体转染法,将其转染至COS-7细胞中,免疫组化SABC... 详细信息

目的:构建变异链球菌葡聚糖结合蛋白a葡聚糖结合区的真核表达质粒pVAX1-GbpA/GBD,并观察其在哺乳动物细胞COS-7中的表达。方法:利用基因重组技术构建真核表达质粒pVAX1-GbpA/GBD。通过脂质体转染法,将其转染至COS-7细胞中,免疫组化SABC法检测其在细胞中的表达。结果:重组质粒pVAX1-GbpA/GBD经酶切分析证实携带GbpA/GBD片段。pVAX1-gbpA/GBD转染的细胞胞质呈褐色染色,pVAX1空载体质粒转染的细胞胞质中无着色。结论:成功构建防龋基因疫苗真核表达质粒pVAX1-GbpA/GBD,所携带的基因序列正确,能够在真核细胞COS-7中正确表达目的蛋白,为下一步基因防龋疫苗pVAX1-GbpA/GBD的动物实验研究奠定了基础。

关键词：变异链球菌葡聚糖结合蛋白a 哺乳动物细胞真核表达 pVAX1

来源： cnki会议评论

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第6期23卷 450-452页

作者：吴补领苏凌云范继红陆群第四军医大学口腔医学院西安710032

目的　研究变形链球菌葡聚糖结合蛋白a(glucanbindingprotein A ,GbpA)的GBD融合蛋白免疫SD大鼠时 ,其所诱导的血清和唾液特异性免疫反应。方法　用纯化的变形链球菌GbpA的GBD融合蛋白皮下免疫SD大鼠 ,免疫后间隔一定的时间收集大鼠的... 详细信息

目的　研究变形链球菌葡聚糖结合蛋白a(glucanbindingprotein A ,GbpA)的GBD融合蛋白免疫SD大鼠时 ,其所诱导的血清和唾液特异性免疫反应。方法　用纯化的变形链球菌GbpA的GBD融合蛋白皮下免疫SD大鼠 ,免疫后间隔一定的时间收集大鼠的血清及唾液 ,间接ELISA检测血清及唾液中特异性抗GBD抗体。结果　GBD融合蛋白免疫大鼠 ,可引起血清中IgG及唾液中IgA的显著提高。另外 ,GBD融合蛋白免疫大鼠 ,38d采血 ,血清中抗GBD抗体效价最高 ,后逐渐降低。结论变形链球菌GbpA的GBD融合蛋白具有免疫原性 ,可供研制防龋疫苗参考。

关键词：变形链球菌葡聚糖结合蛋白a GBD融合蛋白免疫应答龋病