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β-葡糖苷酸酶测定用基质的制备方法改进及其临床应用

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浙江医学 1998年第1期20卷 60-61页

作者：蔡真汤德骥周思文赵允文浙江医科大学附属一院血液科 310003 浙江医科大学附属一院检验科 310003

β-葡糖苷酸酶(β-Glucuronidase,β-G)是一种酸性水解酶,可催化多种β-葡萄糖苷酸盐,最适pH为3.8～6.8,对低温及热稳定性较好。因在肿瘤组织中含量较高而用作肿瘤的诊断指标。我们对其基质——酚肽葡糖苷酸异辛可宁碱的生物合成、纯化... 详细信息

β-葡糖苷酸酶(β-Glucuronidase,β-G)是一种酸性水解酶,可催化多种β-葡萄糖苷酸盐,最适pH为3.8～6.8,对低温及热稳定性较好。因在肿瘤组织中含量较高而用作肿瘤的诊断指标。我们对其基质——酚肽葡糖苷酸异辛可宁碱的生物合成、纯化及配制作了改进,使其简便易行,报道如下。

关键词：葡糖苷酸酶酚肽葡糖苷酸异辛可宁碱制备

用一种新的B—葡糖苷酸酶显色测定法快速检验尿中大肠杆菌

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国外兽医学（畜禽传染病） 1990年第2期10卷 53-53,48页

作者： Deli.,GJ 潘华

类风湿性关节炎患者的白细胞β-葡萄糖苷酸酶活性的变化

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同济医科大学学报 1992年第3期21卷 185-187页

作者：章菊花王国春胡永红刘沛林同济医科大学附属同济医院中医科

对35例类风湿性关节炎(RA)患者及35例正常人的白细胞中β-Ga的活性及治疗前后的变化进行了测定,并将活动性RA和非活动性RA进行了比较,结果表明RA组的β-Ga的活性明显高于正常人组,经过治疗后RA患者的β-Ga活性明显降低。且β-Ga活性与ES... 详细信息

对35例类风湿性关节炎(RA)患者及35例正常人的白细胞中β-Ga的活性及治疗前后的变化进行了测定,并将活动性RA和非活动性RA进行了比较,结果表明RA组的β-Ga的活性明显高于正常人组,经过治疗后RA患者的β-Ga活性明显降低。且β-Ga活性与ESR呈正相关。因此,β-Ga活性高低可以作为RA的诊断与鉴别活动性RA和非活动性RA的一个重要参考指标。

关键词：葡糖苷酸酶类风湿关节炎白细胞

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苹果基因转移技术研究初报

园艺学报 1992年第2期19卷 101-104页

作者：程家胜 Dandekar A.M. Uratsu S.L. 陕西果品研究中心 Dept.of Pomology University of California Davis. CA95616 U.S.A.

应用农杆菌EHA101,携带抗卡那霉素基因(氨基葡糖磷酸转移酶)和GUS基因(葡糖苷酸酶),对苹果品种‘Greensleeves’作基因导入获得成功,提出了应用农杆菌与苹果叶片外植体共培养并经卡那霉素筛选后,早期检测出已导入外源基因的愈伤组织。然... 详细信息

应用农杆菌EHA101,携带抗卡那霉素基因(氨基葡糖磷酸转移酶)和GUS基因(葡糖苷酸酶),对苹果品种‘Greensleeves’作基因导入获得成功,提出了应用农杆菌与苹果叶片外植体共培养并经卡那霉素筛选后,早期检测出已导入外源基因的愈伤组织。然后,通过愈伤组织增殖和应用TD7诱导获得不定芽,从而获得转基因的苹果试管苗。这一技术将有利于提高获得转基因植株的成功率。

关键词：苹果农杆菌基因转移葡糖苷酸酶

GUS基因在大麦叶肉原生质体中瞬间表达的研究

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杭州大学学报（自然科学版） 1993年第3期20卷 344-349页

作者：明镇寰翁醒华胡蓉孙卫宁金理明杭州大学生物科学与技术系杭州大学生物系

本研究以GUS(9-葡糖苷酸酶)基因为报道基因,采用PEG转化法,对大麦(Hordeum vulgare)叶肉原生质体进行直接转化.转化处理后的原生质体在MSPI 12M培养基中培养1—7天后,用底物x-Gluc的组织化学定位法和底物MUG的荧光分析法分别检测到GUS... 详细信息

本研究以GUS(9-葡糖苷酸酶)基因为报道基因,采用PEG转化法,对大麦(Hordeum vulgare)叶肉原生质体进行直接转化.转化处理后的原生质体在MSPI 12M培养基中培养1—7天后,用底物x-Gluc的组织化学定位法和底物MUG的荧光分析法分别检测到GUS基因在大麦叶肉原生质体中的瞬间表达.兰细胞计数的统计结果表明,在转化处理后42—72小时转化细胞中GUS酶活力最高,最高转化率达5.4％.实验结果还表明,不同的PEG浓度影响转化效率,7.5％PEG(终浓度)处理转化效果最佳.

关键词：大麦原生质体葡糖苷酸酶转化

含patatin-GUS嵌合基因的质粒的构建及其在马铃薯中的表达

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Acta Botanica Sinica 1991年第12期33卷 943-948页

作者：明镇寰 G.Ooms 杭州大学生物系杭州 310012 Biochemistry Department Rothamsted Experimental Station

本试验构建了一个含有马铃薯蛋白(patatin)基因的5′端调控序列和细菌葡糖苷酸酶(β-glu-curonidase GUS EC 3.***.1.31)的编码序列及胭脂碱合成酶3′端序列所组成的嵌合基因的重组质粒。利用三亲交配法将其导入经改造的根癌农杆菌菌株Agr... 详细信息

本试验构建了一个含有马铃薯蛋白(patatin)基因的5′端调控序列和细菌葡糖苷酸酶(β-glu-curonidase GUS EC 3.***.1.31)的编码序列及胭脂碱合成酶3′端序列所组成的嵌合基因的重组质粒。利用三亲交配法将其导入经改造的根癌农杆菌菌株Agrobacterium tumefaciensLBA 4404,然后利用农杆菌介导,将该嵌合基因转入马铃薯栽培品种Desiree。从卡那霉素抗性筛选得到的再生的转基因植株,经扩大培养后,对其叶、茎、根和块茎等组织的抽提液的GUS酶活力分析表明,嵌合基因在转基因植株中得到了明显的表达。光照条件下培养和完全黑暗中培养的转基因植株的幼苗的GUS酶活力分析还表明,嵌合基因在转基因植株中的表达可能是受到光的诱导的。

关键词：马铃薯蛋白葡糖苷酸酶基因表达

头颈部恶性肿瘤患者β-葡萄糖苷酸酶活性的检测

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中华耳鼻咽喉科杂志 1996年第3期31卷 181-184页

作者：游学俊谭慎微同济医科大学附属同济医院耳鼻咽喉科武汉430030

研究头颈部恶性肿瘤患者上呼吸道分泌物和血清中β－葡萄糖着酸酶（beta－glu－curonidase，β－GD）活性变化。采用微量比色法检测头颈部恶性肿瘤患者、健康人和头颈部良性疾患者各40例上呼吸道分泌物和血清中β－GD活性，并进行对比... 详细信息

研究头颈部恶性肿瘤患者上呼吸道分泌物和血清中β－葡萄糖着酸酶（beta－glu－curonidase，β－GD）活性变化。采用微量比色法检测头颈部恶性肿瘤患者、健康人和头颈部良性疾患者各40例上呼吸道分泌物和血清中β－GD活性，并进行对比研究。结果表明：三级血清中β－GD活性差异无显著性；上呼吸道分泌物中β－GD活性在健康人群组与良性疾患组间差异亦无显著性，而恶性肿瘤组则明显升高，与前两级相比，差异有极显著性（P＜0．001），若以正常对照组的均数加两个标准差为阳性判断标准，则敏感性、可靠性和特异性分别为85．0％、92．5％和100％。晚期、有淋巴结或远处转移者β－GD活性较早期、未发生转移者升高更明显。对6例恶性肿瘤患者治疗前后上呼吸道分泌物中β－GD活性进行一年的动态监测，其变化气临床症状相一致。实验结果提示上呼吸道分泌物中β－GD活性的检测可作为头颈部恶性肿瘤早期诊断、临床分期分级、疗效评估及判断肿瘤有无复发或转移的有价值的辅助指标。

关键词：头颈部肿瘤葡糖苷酸酶

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拟南芥AtJ70的组织定位和亚细胞定位

拟南芥AtJ70的组织定位和亚细胞定位

作者：贾宁河北师范大学

学位级别：硕士

J-蛋白是一个包含J-结构域的蛋白质家族,它的一些成员具有分子伴侣的功能。基因组序列分析表明,拟南芥中有90多种J-蛋白基因,其中大多数基因的功能还不知道。AtJ70是拟南芥J-蛋白家族的成员之一,关于它的特性、定位及功能还未见任何报... 详细信息

J-蛋白是一个包含J-结构域的蛋白质家族,它的一些成员具有分子伴侣的功能。基因组序列分析表明,拟南芥中有90多种J-蛋白基因,其中大多数基因的功能还不知道。AtJ70是拟南芥J-蛋白家族的成员之一,关于它的特性、定位及功能还未见任何报道。本课题利用GUS和GFP报告基因的方法,研究AtJ70的组织特异性表达及亚细胞中的定位,旨在为AtJ70功能的研究提供线索和依据。用PCR的方法获得了AtJ70基因的启动子,构建了双元载体pCAMBIA1300 AtJ70 promoter:GUS,利用浸花法转化野生型拟南芥,获得了携带AtJ70 promoter:GUS融合基因的纯合体株系。对转基因植株的不同器官进行了GUS染色,结果表明:除了茎、花药、种子不被染色外,其它器官(根、叶、雌蕊、花丝、长角果)中AtJ70都有表达,其中维管组织及顶端分生组织表达较强。对不同发育时期的转基因幼苗进行GUS染色,结果发现:3d、7d、10d的小苗中都有表达,其中7d的苗表达最强。对转基因植株不同时期的叶片、花染色发现,各个时期都有表达,但是随着植株的衰老,GUS着色逐渐变浅,表明AtJ70表达量下降。软件分析表明,AtJ70可能定位在细胞核中。本课题旨在通过转基因实验验证这一分析结果。用RT-PCR的方法获得了AtJ70基因的编码区序列,构建了含有融合基因AtJ70-mGFP4的双元载体,以浸花法转化拟南芥,获得了转基因植株。利用激光共聚焦扫描显微镜观察转基因植株的根部细胞,结果表明:在转空载体的根细胞中,GFP蛋白能够在细胞内普遍分布,而转AtJ70-mGFP4的根细胞和对照差异很大,荧光只分布在细胞核中。表明AtJ70可能定位于细胞核中,与信息学分析结果一致。

关键词： AtJ70 葡糖苷酸酶绿色荧光蛋白表达定位

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植物遗传工程

生物技术通报 1993年第5期9卷 70-80页

933448转基因马铃薯植株对病毒的抗性[会,英]/Huis-man,M.J.…//Euphytica.-1993,63(2).-187～197[译自 DBA,1993,12(8)。

关键词：植物基因基因连锁启动子调控报道基因根癌土壤杆菌电激法基因转移葡糖苷酸酶 CaMV 瞬时表达