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虫萤光素酶系的制备及性质

植物生理学报 1982年第4期 38-41页

作者：王维光中国科学院上海植物生理研究所

1947年Mcelroy最早发现萤火虫的发光需要ATP,1952年Strehler和Totter根据Mcelrory的发现首先用萤火虫提取物测定ATP,以后这种方法不断得到改进和完善,现在日益广泛地应用于生物化学、生物物理及工、农、医的研究中。在植物生理学的

关键词：萤光素酶 ATP pH 酶反应发光强度缓冲液

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选择合适的萤光素酶照亮您的路程

生物技术世界 2005年第02M期2卷 54-56页

作者： KeithWood 戴钢

现有的多和萤光素酶检捌方法和多种萤光素酶基因使得您能根据实验目的选择最好的组合。我们在这里讨论一些Promega公司提供的萤光报告基因技术的特点，并叙述如何利用这些技术来满足您的需要。

关键词：萤光素酶 Promega公司萤光报告基因检测技术检测试剂

cAMP反应元件萤光素酶报告基因载体的构建

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生物技术通讯 2014年第1期25卷 58-61页

作者：马晓芸于金梅卓仁恭张康郑建全军事医学科学院毒物药物研究所北京100850

目的:构建含有cAMP反应元件(CRE)的萤光素酶报告基因载体。方法:以含有gal4位点的萤光素酶报告基因质粒为模板,利用PCR方法,在去除gal4位点的同时,连入4个CRE元件得到pCRE-luc;将该载体与G蛋白偶联受体(GPCR)共转染人胚肾细胞HEK293,测... 详细信息

目的:构建含有cAMP反应元件(CRE)的萤光素酶报告基因载体。方法:以含有gal4位点的萤光素酶报告基因质粒为模板,利用PCR方法,在去除gal4位点的同时,连入4个CRE元件得到pCRE-luc;将该载体与G蛋白偶联受体(GPCR)共转染人胚肾细胞HEK293,测定萤光素酶活性;应用蛋白激酶A(PKA)抑制剂确认CRE的活性是否与Gs通路相关。结果:pCRE-luc的活性直接相关于GPCR的激活程度,并依赖Gs信号通路。结论:CRE萤光素酶报告基因载体构建成功,可用于检测Gs偶联GPCR的活性,为基于GPCR的高通量药物筛选奠定了基础。

关键词： cAMP反应元件报告基因萤光素酶 G蛋白偶联受体

利用GAL4和萤光素酶确定锌指蛋白HZF1的激活结构域

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利用GAL4和萤光素酶确定锌指蛋白HZF1的激活结构域

最新二恶英检测技术—“Ah萤光素酶化验法”

第九届全国酶学学术讨论会暨邹承鲁诞辰85周年纪念会

作者：邓敏捷彭瀚张俊武中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室

大量研究已证明锌指蛋白在细胞分化和发育过程中扮演着重要角色。先前我们课题组从人骨髓 cDNA 文库中筛选到一个新的锌指蛋白基因 HZF1,并已证明其在红系和巨核系分化中具有重要作用(Leukemia,20:1109-1116,2006)。为了鉴定 HZF1

关键词：锌指蛋白 HZF1 萤光素酶转录激活

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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吉林农业农村经济信息 2005年第11期 45-45页

日前，日本株式会社住化分析中心与住友化学共同开发出最新二恶英检测技术——“Ah萤光素酶化验法190此技术将生物化验所需的测定时间缩短到目前的5～10天，节省成本30％左右。

关键词：检测技术萤光素酶二恶英化验测定时间株式会社

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日销售美制利用虫萤光素酶的微生物检测装置

生物技术通报 1989年第1期5卷 22-22页

作者：孙国凤

日本丸红公司销售了美国IMSCO公司开发的商品名为MICROSURE的微生物检测装置。每台650万日元。这种装置利用萤火虫的虫萤光素酶,测定活微生物的ATP。可省去以前活菌检查所需的培养操作,15分钟就能检出微生物(细菌、酵母、霉菌)。根据说... 详细信息

日本丸红公司销售了美国IMSCO公司开发的商品名为MICROSURE的微生物检测装置。每台650万日元。这种装置利用萤火虫的虫萤光素酶,测定活微生物的ATP。可省去以前活菌检查所需的培养操作,15分钟就能检出微生物(细菌、酵母、霉菌)。根据说明书,其检测灵敏度是每100毫升中,酵母为1～3个,细菌为30～50个。以吸引人的字句说它具有超高灵敏度。至于其用途,举出了两方面:一是食品和饮料制造过程中的品质管理。

关键词：萤光素酶微生物检测商品名品质管理超高灵敏度制造过程密勒超纯水三年

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源氏萤虫萤光素酶基因的克隆化

生物技术通报 1988年第8期 11-11页

作者：孙国凤

日本キッコ一マソ研究总部第三研究部主任研究员中野卫一等的小组已成功地克隆化源氏萤(Luciola cruciata)的虫萤光素酶基因,并用大肠杆菌生产。这项成果于1987年11月2～5日在大阪召开的日本发酵工学会上发表。虫萤光素酶也称为发光酶,... 详细信息

日本キッコ一マソ研究总部第三研究部主任研究员中野卫一等的小组已成功地克隆化源氏萤(Luciola cruciata)的虫萤光素酶基因,并用大肠杆菌生产。这项成果于1987年11月2～5日在大阪召开的日本发酵工学会上发表。虫萤光素酶也称为发光酶,是催化萤火虫和微生物生物发光的酶。在基质虫萤光素氧化时发光。因反应时伴随ATP的加水分解,所以被用作ATP的定量试剂。キツコ一マソ公司

关键词：克隆化小组美洲萤光素酶源氏基因

基于Mx启动子和荧光素酶报告基因定量检测鸡Ⅰ型干扰素生物学活性的研究

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畜牧兽医学报 2008年第1期39卷 123-128页

作者：陈伟业葛金英肇慧君胡森温志远曹文雁王喜军黄克和步志高南京农业大学动物医学院南京210095 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

为了探索并建立快速、敏感、准确的Ⅰ型干扰素生物学活性定量分析方法,本研究克隆了鸡Mx启动子(Mxp),并在其下游连接荧光素酶(Luciferase,luc)报告基因,构建鸡Ⅰ型干扰素活性检测质粒pMxp-luc。以pMxp-luc瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,... 详细信息

为了探索并建立快速、敏感、准确的Ⅰ型干扰素生物学活性定量分析方法,本研究克隆了鸡Mx启动子(Mxp),并在其下游连接荧光素酶(Luciferase,luc)报告基因,构建鸡Ⅰ型干扰素活性检测质粒pMxp-luc。以pMxp-luc瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,24 h后用鸡IFN-α/β处理细胞,结果荧光素酶基因在Mx启动子的作用下获得转录表达;荧光素酶的表达量与干扰素的抗病毒活性有着良好的线性相关性,并在干扰素处理细胞6 h后就可以检测;对鸡IFN-α和IFN-β检测的敏感性分别约为抗病毒活性定量检测方法的10和100倍。该检测系统与传统抗病毒定量检测方法相比,具有快速简便、准确敏感、便于高通量检测等优势,在禽类乃至哺乳动物干扰素生物学基础和应用研究及产业化过程中具有重要应用价值。

关键词：鸡Ⅰ型干扰素生物活性检测鸡Mx启动子萤光素酶

不同地域卵黄萤荧光素酶基因的克隆与序列分析

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中国生物化学与分子生物学报 2008年第8期24卷 775-781页

作者：侯清柏董平轩李学燕梁醒财中国科学院昆明动物研究所

为了比较不同地域萤火虫荧光素酶基因的进化关系,通过GenBank中已知的荧光素酶基因保守区段设计引物,利用5′-RACE(rapid-amplification of cDNAends)和3′-RACE技术克隆了来自云南省文山州和西双版纳州的同种卵黄萤荧光素酶基因cDNA和... 详细信息

为了比较不同地域萤火虫荧光素酶基因的进化关系,通过GenBank中已知的荧光素酶基因保守区段设计引物,利用5′-RACE(rapid-amplification of cDNAends)和3′-RACE技术克隆了来自云南省文山州和西双版纳州的同种卵黄萤荧光素酶基因cDNA和全基因序列.来自不同地域的2种卵黄萤荧光素酶在基因序列上存在3个不同碱基位点,但是它们编码的荧光素酶只存在1个不同的氨基酸.卵黄萤荧光素酶基因全长(从起始密码子到终止密码子)1998bp,包含7个外显子,6个内含子,其cDNA序列共1976bp,包含102bp5′UTR(untranslated region)、1635bp的荧光素酶基因开放阅读框和239bp的3′UTR序列.卵黄萤荧光素酶基因的开放阅读框编码1个544个氨基酸的蛋白质,比同属的其它几种荧光素酶少4个氨基酸.来自2个不同地域的卵黄萤荧光素酶在进化上是比较保守的,它们与北美萤火虫Photinus pyralis荧光素酶在碱基序列上分别有62.9%和63%相似性.

关键词：卵黄萤萤光素酶克隆序列分析