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萎缩芽孢杆菌WL520生物活性及干旱胁迫下促紫花苜蓿生长效应

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草地学报 2024年第1期32卷 322-330页

作者：武玲玲谢永丽杨杰杨雪李俊熹王添高英常斐斐青海大学农牧学院青海西宁810016 青海大学省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室青海西宁810016 青海省青藏高原优良牧草种质资源利用重点实验室青海西宁810016

为增强紫花苜蓿‘新牧1号’(Medicago sativa L.‘Xinmu 1’)的耐旱性,以分离筛选自青海乌兰干旱沙地白刺(Nitraria tangutorum)根际的萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)WL520对紫花苜蓿进行灌根处理,并测定菌株生物活性。通过平板对... 详细信息

为增强紫花苜蓿‘新牧1号’(Medicago sativa L.‘Xinmu 1’)的耐旱性,以分离筛选自青海乌兰干旱沙地白刺(Nitraria tangutorum)根际的萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)WL520对紫花苜蓿进行灌根处理,并测定菌株生物活性。通过平板对峙、透明圈法测定菌株拮抗、抑菌酶活性;测定菌株耐旱性及产IAA、固氮活性;采用16S rDNA及gyrB基因测序对菌株进行分子鉴定;并测定干旱胁迫下,菌株促紫花苜蓿的生长效应。结果表明:菌株WL520对2种病原真菌表现出拮抗活性,可产生4种抑菌水解酶;并表现出较强耐旱性、产IAA及固氮能力;分子鉴定为萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)。与干旱胁迫(D)相比,菌液灌根(DB)后,紫花苜蓿株高、根长及鲜重提高,叶绿素及SOD含量提高,MDA含量下降。因此,干旱胁迫下,菌株WL520对紫花苜蓿具有显著促生效应,本研究为挖掘高原微生物资源及促牧草生长提供了优异菌株及理论基础。

关键词：萎缩芽孢杆菌生物活性干旱胁迫紫花苜蓿

萎缩芽孢杆菌酸碱耐受性壳聚糖酶的表达及酶学性质分析

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生物工程学报 2024年

作者：杜文娟阿瓦古丽·图尔荪董志琴马惠娟马正海新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室

为筛选鉴定具有良好稳定性的壳聚糖酶，从源于贫瘠盐碱土壤的高产蛋白酶萎缩芽孢杆菌中克隆壳聚糖酶基因并在大肠杆菌中表达，利用镍柱纯化等方法获得萎缩芽孢杆菌壳聚糖酶(Bacillus atrophic chitosanase，BA-CSN)，并对BA-CSN的最适... 详细信息

为筛选鉴定具有良好稳定性的壳聚糖酶，从源于贫瘠盐碱土壤的高产蛋白酶萎缩芽孢杆菌中克隆壳聚糖酶基因并在大肠杆菌中表达，利用镍柱纯化等方法获得萎缩芽孢杆菌壳聚糖酶(Bacillus atrophic chitosanase，BA-CSN)，并对BA-CSN的最适温度、最适pH、底物特异性、动力学参数等性质进行表征。结果表明，BA-CSN的分子量为31.13 kDa，最适反应温度为55 ℃，最适pH为5.5，在温度低于45 ℃、pH 4-9时具有良好的稳定性，且在pH为3和10时处理4 h以内也具有较好的稳定性；K+、Na+、Mn2+、Ca2+、Mg2+、Co2+对BA-CSN具有激活作用，其中Mn2+的激活作用最为显著，而Fe3+、Cu2+、Ag+对BA-CSN有抑制作用；BA-CSN水解胶体壳聚糖的相对酶活最高，对胶体几丁质也有较好的酶解能力；在最适催化条件下，BA-CSN对胶体壳聚糖催化反应的米氏常数Km、最大反应速率Vmax分别为9.94 mg/mL、26.624 μmol/(mL·min)。本研究证明BA-CSN对酸碱有较强的耐受性，具有广阔的工业应用前景。

关键词：萎缩芽孢杆菌壳聚糖酶表达纯化酶学性质酸碱耐受性

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萎缩芽孢杆菌次级代谢产物的研究进展

现代化工 2019年第12期39卷 48-51页

作者：刘思靖天津大学药物科学与技术学院

系统地对萎缩芽孢杆菌的分离鉴定、次级代谢产物的化学结构、生物活性及其在生物防治、环境治理方面的应用进行了介绍,为萎缩芽孢杆菌的进一步研究提供了参考。

关键词：萎缩芽孢杆菌次级代谢产物生物活性应用

萎缩芽孢杆菌CNY01的生防特性及其对玉米的抗盐促生作用

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生物技术通报 2024年第5期40卷 248-260页

作者：孙亚楠王春雪王欣杜秉海刘凯汪城墙山东农业大学生命科学学院土肥高效利用国家工程研究中心山东省盐碱地植物-微生物联合修复工程技术研究中心山东省农业微生物重点实验室泰安271018

【目的】从黄河三角洲盐碱地中筛选到具有抗盐促生作用的一株根际菌,制成菌剂用于缓解玉米植株的高盐胁迫。【方法】通过功能培养基、16S rDNA序列和全基因组分析,确定菌株种属以及对玉米植株的抗盐促生效果。【结果】从黄河三角洲盐碱... 详细信息

【目的】从黄河三角洲盐碱地中筛选到具有抗盐促生作用的一株根际菌,制成菌剂用于缓解玉米植株的高盐胁迫。【方法】通过功能培养基、16S rDNA序列和全基因组分析,确定菌株种属以及对玉米植株的抗盐促生效果。【结果】从黄河三角洲盐碱地中筛选到一株可在0-16%的NaCl和pH 5-8的条件下正常生长的萎缩芽孢杆菌CNY01,该菌株可促进玉米在高盐条件下生长,具有降蛋白和解钾的能力,还可抑制青枯雷尔氏菌、串珠镰刀菌等病原菌的生长。玉米植株在含100 mmol/L NaCl的营养液中生长8 d时,施加菌株CNY01可使植株的生理株高、根长和鲜重分别提高38.80%(P萎缩芽孢杆菌CNY01,对玉米植株有显著的抗盐促生作用,结合基因组结果预测到该菌株含有与抗盐促生相关基因,是重要的菌种资源。

关键词：玉米植物根际促生细菌萎缩芽孢杆菌抗盐促生全基因组测序

萎缩芽孢杆菌处理提高花生黄曲霉抗性的作用机制

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食品科学 2013年第23期34卷 266-270页

作者：刘丁秦文四川农业大学食品学院四川雅安625014

通过接种萎缩芽孢杆菌的发酵液+黄曲霉孢子悬浮液、菌体悬浮液+黄曲霉孢子悬浮液、发酵上清液+黄曲霉孢子悬浮液,及单独接种黄曲霉孢子悬浮液的不同方法处理花生,测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧... 详细信息

通过接种萎缩芽孢杆菌的发酵液+黄曲霉孢子悬浮液、菌体悬浮液+黄曲霉孢子悬浮液、发酵上清液+黄曲霉孢子悬浮液,及单独接种黄曲霉孢子悬浮液的不同方法处理花生,测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活力的变化,研究萎缩芽孢杆菌提高花生黄曲霉抗性的诱导机制。结果表明:萎缩芽孢杆菌的各处理组接种4d后,花生中SOD酶活力达到峰值,其中菌体悬浮液+黄曲霉孢子悬浮液处理的花生酶活力最大,为5.3318U/(g·min);从接种后的第2天开始花生中POD酶活开始出现峰值,且以菌体悬浮液+黄曲霉悬浮液处理样品最大,为13.4710U/(g·min);CAT酶活性在接种处理后持续下降,至处理的第5天达到最小值5.5375U/(g·min);但各处理对PAL酶活性和PPO酶活性的诱导作用不明显,说明萎缩芽孢杆菌可在一定程度上诱导花生抗性的增加,提高其抗病能力。萎缩芽孢杆菌诱导抗性相关酶活性的变化是发挥拮抗作用的一种重要方式。

关键词：萎缩芽孢杆菌黄曲霉花生抗性

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重水对萎缩芽孢杆菌芽孢萌发的影响

生物化学与生物物理进展 2021年第10期48卷 1196-1203页

作者：常金辉吴文捷香港理工大学深圳研究院深圳518052 中国科学院大学附属肿瘤医院(浙江省肿瘤医院) 中国科学院基础医学与肿瘤研究所杭州310022 浙江省放射肿瘤学重点实验室杭州310022

本研究快报报道了重水对细菌芽孢的萌发及其可培养性的抑制作用.在常温条件下,用L-丙氨酸触发细菌芽孢的萌发,并用Tb-DPA荧光法、相差显微镜观测法和光密度测定法监测萌发过程,用最终萌发水平、萌发半期、萌发速度3个参数来表征萌发过程... 详细信息

本研究快报报道了重水对细菌芽孢的萌发及其可培养性的抑制作用.在常温条件下,用L-丙氨酸触发细菌芽孢的萌发,并用Tb-DPA荧光法、相差显微镜观测法和光密度测定法监测萌发过程,用最终萌发水平、萌发半期、萌发速度3个参数来表征萌发过程.除此之外,我们还用菌落形成单位的个数来评估萌发后芽孢的可培养性.结果表明,重水对整个萌发过程有抑制作用,同时降低了萌发后芽孢的可培养性,但对最终萌发水平无影响.我们推测这是因为重水增强了一些芽孢特异性信号蛋白的稳定性.

关键词：重水萎缩芽孢杆菌芽孢萌发可培养性

萎缩芽孢杆菌XW2胞外蛋白的抑菌活性及其特性

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2017年第12期45卷 68-76页

作者：黄华毅于地美梁英梅田呈明北京林业大学省部共建森林培育与保护教育部重点实验室广东广州510520 广东省林业科学研究院广东广州510520 北京林业大学博物馆北京100083

【目的】研究萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)XW2胞外蛋白的抑菌活性及其特性,探索植物病害生物防治的新途径。【方法】采用滤纸片法和叶盘法,检测XW2胞外蛋白对杨树炭疽病菌的最小抑菌浓度(MIC)和叶盘抑菌活性,以及对该病菌菌丝和... 详细信息

【目的】研究萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)XW2胞外蛋白的抑菌活性及其特性,探索植物病害生物防治的新途径。【方法】采用滤纸片法和叶盘法,检测XW2胞外蛋白对杨树炭疽病菌的最小抑菌浓度(MIC)和叶盘抑菌活性,以及对该病菌菌丝和孢子萌发的影响;研究其对另外5种植物病原真菌(尖孢镰刀菌、金黄壳囊孢、犁头霉、细极链格孢和黑腐皮壳菌)的抑菌活性,并分析其抑菌活性在不同的pH(2,3,4,5,6,7,8,9,10和11)、温度(30,40,50,60,70,80,90,100,110和121℃)、蛋白酶(木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和蛋白酶K)、紫外线作用时间(1,2,3和4h)、金属离子(Li^+、Na^+、K^+、Ca^(2+)、Mg^(2+)、Fe^(3+)、Mn^(2+)、Zn^(2+)、Cu^(2+)和Ag^+)、表面活性剂(Tween 20和SDS)、抑制剂(EDTA)、氧化剂(H2O2)和常温保存时间(0.5,1,2,3,4,5和6个月)下的稳定性,最后分析XW2产细胞壁裂解酶的特性。【结果】萎缩芽孢杆菌XW2胞外蛋白对杨树炭疽病菌的最小抑菌浓度为0.01mg/disc(5号滤纸片),能明显抑制杨树炭疽病菌在平板和杨树叶片上的生长,有效抑制孢子的萌发和附着孢的形成,并导致菌丝和萌发芽管产生膨大畸形;对尖孢镰刀菌、金黄壳囊孢、犁头霉、细极链格孢和黑腐皮壳菌均有明显的拮抗活性。XW2胞外蛋白在110℃下处理30min及pH 6.0~9.0下均能保持较高的抑菌活性;对蛋白酶、紫外光照、金属离子(Li^+、Na^+、K^+、Ag^+、Ca^(2+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)和Cu^(2+))、SDS和EDTA均不敏感,但Mn^(2+)和Fe^(3+)会抑制蛋白的抑菌活性,而Tween 20和H_2O_2则能提高其抑菌活性;在常温条件下保存6个月后,其抑菌活性并未发生明显丧失。细胞壁裂解酶检测发现,XW2能产生蛋白酶和β-1,3-葡聚糖酶。【结论】萎缩芽孢杆菌XW2胞外蛋白的抑菌活性强、稳定性好且抑菌谱广,具有潜在的工业开发和田间应用前景。

关键词：萎缩芽孢杆菌胞外蛋白抑菌活性

一株萎缩芽孢杆菌在小麦中的定植及对赤霉病的防治

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生态学杂志 2013年第6期32卷 1490-1496页

作者：辛海峰孟艳艳李建宏马鸿翔张旭南京师范大学生命科学学院南京210023 江苏省农业科学院农业生物技术研究所南京210014

从小麦的叶片中筛选获得了一株抗赤霉病菌株XM5,经16S-23SrDNAITS序列的扩增比对,鉴定其为萎缩芽孢杆菌(Bacillusatrophaeus)。通过逐步提高抗生素浓度驯化,使该菌株获得了利福平和链霉素的双抗性标记,同时针对其ITS序列的特异性区段,... 详细信息

从小麦的叶片中筛选获得了一株抗赤霉病菌株XM5,经16S-23SrDNAITS序列的扩增比对,鉴定其为萎缩芽孢杆菌(Bacillusatrophaeus)。通过逐步提高抗生素浓度驯化,使该菌株获得了利福平和链霉素的双抗性标记,同时针对其ITS序列的特异性区段,设计了特异性引物L6SF、L6SR。采用抗抗生素和特异性PCR双重标记,研究了XM5在小麦中的内生定植状况,发现根施的XM5能长期定植于室内小麦苗和室外植株中,但定植菌的数量随时间呈递减趋势。为研究穗部的防治效果,分别以XM5的菌悬液和发酵液喷施幼穗,结果表明:10d后两个处理组在穗部表面残余的活菌数量均已不足起始量的5%,但在喷施菌悬液组,麦穗内部定植的XM5的数量不断增加,由5.2×103持续增加至4.8×104cfu·穗-1,其对赤霉病的防效在7d时可达到68.3%。

关键词：萎缩芽孢杆菌内生定植小麦赤霉病内转录间隔区生物防治

马铃薯根系分泌物及氨基酸对萎缩芽孢杆菌QHZ3趋化成膜的影响

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干旱地区农业研究 2023年第5期41卷 236-245页

作者：庞娅楠邱慧珍成志远陈兰兰董爱菊张春红王友玲甘肃农业大学资源与环境学院/甘肃省干旱生境作物学重点实验室甘肃兰州730070 甘肃省畜禽废弃物资源化利用工程研究中心甘肃兰州730070

通过土培收集、硅烷衍生化分离、气质联用鉴定马铃薯苗期、现蕾期及盛花期根系分泌物的主要成分,并采用半固体平板法、类毛细管法和结晶紫染色法比较观察马铃薯不同生育时期根系分泌物及氨基酸对萎缩芽孢杆菌QHZ3趋化成膜的影响,以揭示... 详细信息

通过土培收集、硅烷衍生化分离、气质联用鉴定马铃薯苗期、现蕾期及盛花期根系分泌物的主要成分,并采用半固体平板法、类毛细管法和结晶紫染色法比较观察马铃薯不同生育时期根系分泌物及氨基酸对萎缩芽孢杆菌QHZ3趋化成膜的影响,以揭示菌株QHZ3在马铃薯根际的定殖机制。马铃薯根系分泌物鉴定中发现了5种氨基酸:脯氨酸、甘氨酸、天冬氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸。定性试验显示,马铃薯不同生育时期的根系分泌物和除脯氨酸之外的其他4种氨基酸均对菌株QHZ3具有显著的正趋化作用,并以甘氨酸的作用最强,其趋化圈直径(6.40 cm)是对照(3.48 cm)的1.84倍;定量试验结果表明,根系分泌物(120μg·mL^(-1)和240μg·mL^(-1))、甘氨酸(10~50μmol·L^(-1))、天冬氨酸(50~75μmol·L^(-1))和苯丙氨酸(25~50μmol·L^(-1))均对菌株QHZ3有显著正趋化作用,尤其以25μmol·L^(-1)的甘氨酸趋化性指数最大,其毛细管中细菌数量(5.13×10^(5) CFU·mL^(-1))达到对照组(1.53×10^(5) CFU·mL^(-1))的3.3倍;结晶紫染色法显示,现蕾期和盛花期根系分泌物以及甘氨酸(25~100μmol·L^(-1))、脯氨酸(75~100μmol·L^(-1))和苯丙氨酸(25~100μmol·L^(-1))均对菌株QHZ3生物膜的形成有显著促进作用。根系分泌物和氨基酸均对菌株QHZ3在马铃薯根际趋化成膜具有促进作用,但5种氨基酸的作用各不相同,其中天冬氨酸和酪氨酸显著影响菌株的趋化作用,脯氨酸显著影响了菌株生物膜的形成,而甘氨酸和苯丙氨酸则对菌株的趋化和成膜兼具显著效果。

关键词：马铃薯萎缩芽孢杆菌根系分泌物氨基酸趋化成膜