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苏云金芽胞杆菌中Cry51Aa1晶体形成特点及新杀虫基因cry65Aa1的克隆

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苏云金芽胞杆菌中Cry51Aa1晶体形成特点及新杀虫基因cry65Aa1的克...

作者：吴寒华中农业大学

学位级别：硕士

苏云金芽胞杆菌产生的杀虫晶体蛋白可以通过各种机制的调控从而高效表达,例如：形成伴胞晶体;并且因为其高产杀虫晶体蛋白,在农、林害虫防治上具有较高的应用价值。本研究围绕苏云金芽胞杆菌进行了两部分的工作,即：***51Aa1一级结构与... 详细信息

苏云金芽胞杆菌产生的杀虫晶体蛋白可以通过各种机制的调控从而高效表达,例如：形成伴胞晶体;并且因为其高产杀虫晶体蛋白,在农、林害虫防治上具有较高的应用价值。本研究围绕苏云金芽胞杆菌进行了两部分的工作,即：***51Aa1一级结构与晶体形成关系的研究。前期工作表明从菌株F14-1中克隆得到的Cry晶体蛋白Cry51Aal可以单独形成典型的菱形晶体,其在蛋白质大小和氨基酸组成上与普遍能形成菱形晶体的Cryl、3、5群晶体蛋白有很大的差异。本实验通过构建Cry51Aal蛋白基因两端截短突变体和两端丙氨酸扫描突变体,研究了Cry51Aal一级结构与晶体形成关系,发现其晶体的形成是一种新的菱形晶体形成模式。主要研究结果如下：1.1 Cry51Aa1 C-端和N-端分别截短10个氨基酸后不能形成晶体或包含体;1.2 Cry51Aal C-端截短5个氨基酸后可以形成菱形晶体,Cry51Aal N-端截短5个氨基酸后不能形成菱形晶体;1.3将Cry51Aal两端的位于2-7位氨基酸残基每3个突变为丙氨酸,突变体2I3L4D、5L6K7S形成不规则包含体,其晶体蛋白的表达量显著降低,说明位于4、6位的极性氨基酸可能形成分子间盐键,从而在其菱形晶体形成过程中起帮助蛋白分子间契合累积形成晶体的作用,突变掉之后,晶体形态明显改变,蛋白表达量明显下降;1.4将Cry51Aal两端的位于8-10和297-299位氨基酸残基每3个突变为丙氨酸,突变体8L9V10L和297A298P299T形成不规则包含体,其晶体蛋白的表达量基本不变,说明其氨基酸组成中的位于2、3、5、8、9、10位的脂肪族氨基酸残基由于影响蛋白分子自身的折叠,突变掉之后,晶体形态明显改变,但不影响其蛋白的表达量。2.新基因cry65Aal的克隆、表达和活性鉴定。Sbt003是一株有特点的苏云金芽胞杆菌菌株,在其进行了全基因组测序的基础上,通过生物信息学的方法,从中发现了一个与具有抗癌细胞晶体蛋白(Parasporin)具有少量相似性的新型晶体蛋白基因,并通过PCR的方法克隆得到,随后对其进行了异源表达和活性鉴定。并初步研究了ORF1对其晶体形成的影响。主要研究成果如下：2.1从菌株Sbt003中克隆得到新杀虫蛋白基因cry65Aal,其下游有一个基因orf1;Cry65Aa1(预测大小117 KDa)与Cry41Aal有28%的相似性,为三结构域Parasporin(PS)蛋白,Cry41Aal为Parasporin-3 (PS3);ORF1(预测大小58 KDa)与Cry21Bal C半段有98%相似性,Cry21Bal为杀线虫毒素;2.2 Cry65Aal与ORF1在无晶体突变株BMB171中异源共表达形成蛋白晶体,SDS-PAGE分析其蛋白晶体带大小分别为117-和58-kDa,与预测一致：2.3 Cry65Aa1单独表达不能形成晶体,其蛋白晶体的形成需要ORF1的帮助;2.4 Cry65Aa1对棉铃虫有低的生长抑制作用。

关键词：苏云金芽胞杆菌 Cry蛋白菱形晶体不规则内含体抗癌细胞晶体蛋白抑制生长活性

Ordered structures of rhombohedral system

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Chinese Science Bulletin 2008年第4期53卷 534-539页

作者： SONG QingGong JIANG EnYong Tianjin Key Laboratory of Low Dimensional Materials Physics and Preparing Technology and Institute of Advanced Materials Physics Faculty of Science Tianjin University Tianjin 300072 China Department of Materials Physics College of Science Civil Aviation University of China Tianjin 300300 China

Lattice gas model is presented for rhombohedral *** ordered structure types and four perfectly ordered structures are determined using concentration wave *** ordered structures of cation in corundum-type dimetal triox... 详细信息

关键词：斜方六面体结构菱形晶体刚玉规则结构

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SnO2单晶体式气敏传感器制作方法

计量技术 2009年第6期 70-72页

作者：王文娟吴能杨清风安徽立达信息技术研究所合肥230061

介绍一种改良的SnO2单晶体式气敏传感器制作方法，巧用加热老化工艺使传感器的气体灵敏度获得大幅提高，从而解决了一直存在的难题。此工艺不仅适用于氢、甲烷的检测，而且还同样适用于乙醇、丙烷、一氧化碳、氨气、氧气、水蒸汽等的检测。

关键词：气敏传感器气体灵敏度加热老化工艺须晶带状晶体菱形晶体

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SnO2单晶体式气敏传感器制作方法

传感器世界 2008年第12期14卷 31-32,37页

作者：王文娟吴能杨清风安徽立达信息技术研究所

介绍一种改良的SnO2单晶体式气敏传感器制作方法,巧用加热老化工艺使传感器的气体灵敏度获得大幅提高,从而解决了一直存在的难题,拓宽了应用。此工艺不仅适用于氢、甲烷的检测,而且还同样适用于乙醇、丙烷、一氧化碳、氨气、氧气、水蒸... 详细信息

介绍一种改良的SnO2单晶体式气敏传感器制作方法,巧用加热老化工艺使传感器的气体灵敏度获得大幅提高,从而解决了一直存在的难题,拓宽了应用。此工艺不仅适用于氢、甲烷的检测,而且还同样适用于乙醇、丙烷、一氧化碳、氨气、氧气、水蒸汽等的检测。

关键词：气敏传感器气体灵敏度加热老化工艺须晶带状晶体菱形晶体

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三种栎木属木材构造特征识别研究

绿色科技 2016年第18期18卷 132-133,137页

作者：张文强韩玉杰戚士龙徐峰木材节约发展中心北京100081 中国物流与采购联合会木材与木制品质量监督检验测试中心北京100834 广西大学林学院广西南宁530004

对美洲白栎(Quercus alba)、红栎(Quercus rubra),柞木(Quercus mongolica Fisch.)3种栎木属树种木材构造特征进行了比较研究。结果表明:三者在木材颜色、早晚材急变或渐变、管孔排序、侵填体与菱形晶体含量存在明显差异,可作为鉴别这3... 详细信息

对美洲白栎(Quercus alba)、红栎(Quercus rubra),柞木(Quercus mongolica Fisch.)3种栎木属树种木材构造特征进行了比较研究。结果表明:三者在木材颜色、早晚材急变或渐变、管孔排序、侵填体与菱形晶体含量存在明显差异,可作为鉴别这3种木材的重要依据。

关键词：材色渐变急变管孔排序侵填体菱形晶体白栎红栎

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3种栎木属木材构造特征识别

中国木材 2017年第1期 27-28页

作者：王春华

为了帮助消费者正确识别美洲白栎（拉丁学名：QuercusfabriHance）、红栎（拉丁学名：Quercus rubra L）、柞木（拉丁学名：Xylosmaracemosum（*** Zucc．）Miq．）3种栎木属树种的木材。对3种木材的构造特征进行了比较研究。结果表明... 详细信息

为了帮助消费者正确识别美洲白栎（拉丁学名：QuercusfabriHance）、红栎（拉丁学名：Quercus rubra L）、柞木（拉丁学名：Xylosmaracemosum（*** Zucc．）Miq．）3种栎木属树种的木材。对3种木材的构造特征进行了比较研究。结果表明：三者在木材颜色、早晚材变化情况、管孔排序、侵填体与菱形晶体含量等方面存在明显差异、

关键词：材色管孔排序侵填体菱形晶体

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问：辰砂是什么？

中国科教创新导刊 1995年第10期 63-63页

作者：迪谷陈敏

问：辰砂是什么？答：真正的辰砂是一种ｈｇＳ矿，即红色的硫化汞，这是唯一的一种重要的汞矿。辰砂还被称为朱砂、天然银、中国银、和水银银。自古以来它一直用作颜料。但是人们所熟悉的来自中国的铁锈红色“辰砂”雕刻装饰的珠子或盒... 详细信息

问：辰砂是什么？答：真正的辰砂是一种ｈｇＳ矿，即红色的硫化汞，这是唯一的一种重要的汞矿。辰砂还被称为朱砂、天然银、中国银、和水银银。自古以来它一直用作颜料。但是人们所熟悉的来自中国的铁锈红色“辰砂”雕刻装饰的珠子或盒子却不一定是用它上色，因为现在辰砂...

关键词：黑色硫化汞红色硫化汞晶体结构有机溶剂颗粒状物质六方晶体亲缘植物雕刻装饰保护剂菱形晶体