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菜芙蓉多糖的表征与生物活性

精细化工 2020年第6期37卷 1204-1211页

作者：杜星芳贾艳丽仇燕河北科技大学生物科学与工程学院河北石家庄050018

以菜芙蓉花醇提后的残留物为原料,通过水提醇沉法提取菜芙蓉多糖,测定多糖总糖含量及得率。经DEAE-52柱层析分离纯化菜芙蓉多糖〔Abelmoschus manihot(L.)Medic polysaccharide,AMP〕,确定AMP单糖组成,考察AMP的体外抗氧化能力,并对AMP... 详细信息

以菜芙蓉花醇提后的残留物为原料,通过水提醇沉法提取菜芙蓉多糖,测定多糖总糖含量及得率。经DEAE-52柱层析分离纯化菜芙蓉多糖〔Abelmoschus manihot(L.)Medic polysaccharide,AMP〕,确定AMP单糖组成,考察AMP的体外抗氧化能力,并对AMP保护质粒DNA及抑制肝癌细胞Hep G2的增殖作用进行了考察。结果表明,菜芙蓉花多糖得率为13.47%,总糖含量为97.43%,AMP主要由鼠李糖、葡萄糖、阿拉伯糖、岩藻糖组成,其物质的量比为1.44∶5.44∶1.00∶5.37,体外清除自由基能力表现顺序为·O2^->ABTS^+·>DPPH·>·OH>NO·,8 g/L AMP抑制H2O2诱导的DNA氧化损伤效果最好,在0.1250~5.000 g/L范围内,随着AMP质量浓度的增加Hep G2细胞的增殖抑制率逐渐增大,说明AMP具有抗肿瘤活性。

关键词：菜芙蓉多糖生物活性中药现代化技术

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菜芙蓉花体外抗氧化活性部位的研究

精细化工 2016年第8期33卷 890-895,945页

作者：仇燕赵爽杜占强张军河北科技大学生物科学与工程学院河北石家庄050018

采用连续提取法对菜芙蓉花乙醇提取物进行分离,得到石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相和萃余水溶物4个不同极性部位。以还原力和清除羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2^-·)、DPPH自由基(DPPH·)能力为评价指标筛选其活性部位,并对活... 详细信息

采用连续提取法对菜芙蓉花乙醇提取物进行分离,得到石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相和萃余水溶物4个不同极性部位。以还原力和清除羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2^-·)、DPPH自由基(DPPH·)能力为评价指标筛选其活性部位,并对活性最强部位进行体外小鼠红细胞溶血、肝组织匀浆和肝线粒体丙二醛(malondialdehyde,MDA)生成量及其肿胀度的研究。结果表明:菜芙蓉花提取物不同极性部位对自由基的清除能力表现为DPPH·>O_2^-·>·OH,其中乙酸乙酯部位(Ethyl acetate Extract,EA)对三者清除能力最强,半清除浓度EC50分别为3.52、44.96、376.87μg/m L。在体外脂质过氧化抑制作用研究中,EA能够显著抑制小鼠红细胞溶血(p<0.05),在50~500μg/m L范围内能抑制肝组织匀浆和肝线粒体MDA的生成,并有效抑制小鼠肝线粒体的肿胀,具有量效关系。

关键词：菜芙蓉体外抗氧化自由基脂质过氧化中药现代化技术

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菜芙蓉总黄酮提取物抑菌作用及其稳定性研究

北方园艺 2016年第8期 150-153页

作者：仇燕王明珠赵紫华河北科技大学生物科学与工程学院河北石家庄050018

以菜芙蓉花为试材,采用乙醇回流法提取菜芙蓉总黄酮,并利用AB-8大孔树脂进行纯化,通过滤纸片扩散法研究了菜芙蓉总黄酮提取物的抑菌作用及温度、pH值和紫外光对抑菌活性的影响。结果表明:纯化后菜芙蓉的提取物中总黄酮含量达46.5%,菜芙... 详细信息

以菜芙蓉花为试材,采用乙醇回流法提取菜芙蓉总黄酮,并利用AB-8大孔树脂进行纯化,通过滤纸片扩散法研究了菜芙蓉总黄酮提取物的抑菌作用及温度、pH值和紫外光对抑菌活性的影响。结果表明:纯化后菜芙蓉的提取物中总黄酮含量达46.5%,菜芙蓉总黄酮提取物对细菌的抑制效果较强,对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)均为0.125mg/mL,提取物的抑菌活性具有很好的热稳定性和紫外光稳定性,随pH值升高抑菌效果大大降低。

关键词：菜芙蓉总黄酮抑菌稳定性

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菜芙蓉花总黄酮的提取与抗氧化活性研究

菜芙蓉花总黄酮的提取与抗氧化活性研究

作者：夏文宽江苏大学

学位级别：硕士

菜芙蓉(Hibiscus manihot L．)为锦葵科(Malvaceae)秋葵属一年生草本植物。菜芙蓉花中含有多种生物活性物质，其中生物黄酮的含量很高。黄酮类化合物具有很强的抗氧化活性，它在抗心脑缺血、缺氧，增进人体代谢中的抗氧化功能以及缓解... 详细信息

菜芙蓉(Hibiscus manihot L．)为锦葵科(Malvaceae)秋葵属一年生草本植物。菜芙蓉花中含有多种生物活性物质，其中生物黄酮的含量很高。黄酮类化合物具有很强的抗氧化活性，它在抗心脑缺血、缺氧，增进人体代谢中的抗氧化功能以及缓解抑郁紧张症状和增强肾功能等方面有显著效果。论文分析了菜芙蓉的组成成分，并对菜芙蓉花总黄酮的提取分离工艺及其抗氧化活性进行了研究。主要结论如下：1．新鲜菜芙蓉花的水分含量和粗灰分含量分别为92.27％和4.08％，蛋白质含量为7.32％，脂肪含量为2.88％;菜芙蓉花中Ca和Zn的含量较高，分别为56250μg／g和4130μg／g，Cu的含量较低。菜芙蓉根、茎、叶、花和籽中，花中总黄酮含量最高。2．对菜芙蓉花总黄酮提取工艺条件进行优化，结果表明：在温度为80℃、80％乙醇作提取溶剂、料液比为1：100(g／mL)、提取2次、每次提取2h、提取时pH值为10，菜芙蓉花总黄酮提取率最高，达到干重的7.48％。提取时的影响因素由主到次顺序为：提取溶剂、提取时间、提取温度、料液比、pH值和提取次数。3．考察了AB-8、DM130、DM301和X-5四种不同极性的大孔吸附树脂对菜芙蓉花总黄酮的静态吸附和动态吸附效果，得到AB-8大孔树脂对菜芙蓉花总黄酮的纯化效果最好。在静态吸附中，AB-8大孔吸附树脂对菜芙蓉花总黄酮的吸附率最高，为48.97％;而DM301型大孔吸附树脂的解吸率最高，达到87.36％。AB-8大孔吸附树脂纯化菜芙蓉花总黄酮的最优参数为：洗脱样液浓度6.0 mg／mL、pH值4.0，用60％乙醇作洗脱剂，洗脱流速4.0 mL／min。4．对菜芙蓉花总黄酮的粗提液和纯化液进行了抗氧化试验，菜芙蓉花总黄酮的纯化液比粗提液对DPPH·的清除能力要强。4.0mg／mL菜芙蓉花总黄酮粗提液对DPPH·的清除率为72.47％，而经AB-8大孔树脂纯化后的总黄酮提取液对DPPH·的清除率为84.80％。在油脂抗氧化试验中，复配抗氧化剂的抗氧化性优于单一提取物的抗氧化性，其中0.20％提取物和0.05％Vc复配抗氧化剂的抗氧化效果最好。

关键词：菜芙蓉黄酮火焰原子吸收光谱法分离提取大孔树脂纯化抗氧化

菜芙蓉乙酸乙酯部位黄酮抑菌作用与对HepG2细胞氧化损伤的保护作用研究

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菜芙蓉乙酸乙酯部位黄酮抑菌作用与对HepG2细胞氧化损伤的保护作...

作者：刘畅河北科技大学

学位级别：硕士

本实验以菜芙蓉花总黄酮提取物为原料,分离菜芙蓉花乙酸乙酯部位黄酮(EAF)分析了其含有的标志性黄酮物质,研究了EAF的抑菌活性,并对EAF在Hep G2细胞的抗氧化性进行了研究。本研究为菜芙蓉花乙酸乙酯部位黄酮在功能性食品、医药、保健品... 详细信息

本实验以菜芙蓉花总黄酮提取物为原料,分离菜芙蓉花乙酸乙酯部位黄酮(EAF)分析了其含有的标志性黄酮物质,研究了EAF的抑菌活性,并对EAF在Hep G2细胞的抗氧化性进行了研究。本研究为菜芙蓉花乙酸乙酯部位黄酮在功能性食品、医药、保健品、化妆品等领域的开发及应用研究奠定基础。主要内容和研究结果如下:采用连续提取法对菜芙蓉花总黄酮进行分级分离得到EAF,并利用HPLC分析了金丝桃苷、杨梅素、槲皮素3种标志性黄酮物质,结果表明金丝桃苷、杨梅素、槲皮素含量分别为116.19 mg/g,67.70 mg/g,29.13 mg/g。采用培养基稀释法测定EAF对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、啤酒酵母菌的抑菌能力及最小抑菌浓度(MIC)。实验结果表明,在10～120 mg/m L药物作用浓度范围内,EAF对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌均表现出了抑菌活性。当EAF作用浓度在120 mg/m L时抑菌圈直径最大,金黄色葡萄球菌抑菌圈直径为17.83 mm,枯草芽孢杆菌抑菌圈直径为14.00 mm,大肠杆菌抑菌圈直径为11.50 mm。金黄色葡萄球菌的MIC值为0.5 mg/m L,枯草芽孢杆菌的MIC为0.37mg/m L,大肠杆菌的MIC为0.75 mg/m L。EAF在实验选取的浓度范围内未发现对啤酒酵母菌的生长有抑制现象。采用MTT方法确立HO氧化损伤Hep G2细胞模型,筛选药物作用浓度范围,探究了EAF对HO氧化损伤Hep G2细胞内抗氧化酶及活性氧含量的影响。细胞毒性试验结果显示,EAF在浓度为10、125和250μg/m L时对细胞无毒性及增殖作用;以细胞活力为指标,采用HO构建氧化损伤模型,确定HO最佳造模条件为在浓度为1000μM诱导4h,细胞活力为44.10%。与模型组细胞相比,EAF处理组细胞SOD、GSH-Px、ROS水平升高而LDH释放量和MDA的含量降低,表明EAF能够保护细胞免受HO诱导的氧化损伤,提高抗氧化酶活力并保护细胞膜。采用Annexin V-FITC/PI双染法检测Hep G2细胞的凋亡率,测定了细胞凋亡相关蛋白Caspase-9和Caspase-3酶活力,并通过Hoechst33258染色法显示细胞中DNA。结果表明,随着EAF质量浓度的升高细胞凋亡率降低,在250μg/m L时细胞凋亡率最低达3.00%,与模型组相比,极显著降低了氧化损伤引发的细胞凋亡(P<0.01);与HO模型相比,EAF能有效抑制细胞凋亡相关蛋白Caspase-9和Caspase-3酶活力,随着EAF浓度的增加Caspase-9和Caspase-3酶活力降低;EAF对氧化损伤Hep G2细胞形态具有一定的修复效果;Hoechst33258染色结果显示,模型组细胞核内颗粒块状荧光强度增高,但随着EAF质量浓度的增大,颗粒块状荧光强度呈现减少的趋势,荧光强度与药物浓度呈剂量效应关系。充分说明EAF能够保护细胞DNA,降低Caspase-9和Caspase-3酶活力,进而有效抑制HO诱导的细胞凋亡。

关键词：菜芙蓉乙酸乙酯部位黄酮抑菌抗氧化 HepG2细胞

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菜芙蓉花总黄酮的提取分离及活性研究

菜芙蓉花总黄酮的提取分离及活性研究

作者：王明珠河北科技大学

学位级别：硕士

菜芙蓉(Hibiscus manihot L.),又名金花葵、黄蜀葵,为锦葵科(Malvaceae)秋葵属植物,国内栽培广泛,一年生或多年生植物,可全草入药。菜芙蓉的花中有多种生物活性物质,其中黄酮的含量高达6%。黄酮类化合物有很强的抗氧化活性,它在抗心脑... 详细信息

菜芙蓉(Hibiscus manihot L.),又名金花葵、黄蜀葵,为锦葵科(Malvaceae)秋葵属植物,国内栽培广泛,一年生或多年生植物,可全草入药。菜芙蓉的花中有多种生物活性物质,其中黄酮的含量高达6%。黄酮类化合物有很强的抗氧化活性,它在抗心脑缺血、缺氧,保护肝损伤以及增进人体代谢中的抗氧化功能等方面有显著效果,但迄今为止鲜见有关的菜芙蓉花黄酮活性的研究。本文以菜芙蓉花为原料,通过传统的有机溶剂提取法,用70%乙醇提取菜芙蓉花总黄酮;并以芦丁为标准品制作标准曲线,测定总黄酮的含量。用硅胶柱色谱对菜芙蓉花总黄酮进行分离,对菜芙蓉花提取物的抑菌活性及抗氧化活性进行研究。结果表明:以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠杆菌(Escherichia coli)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cercus)、啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为实验菌种,通过滤纸片法测定发现,菜芙蓉花总黄酮对所选细菌的抑菌效果明显强于70%乙醇,对酵母菌等真菌没有抑菌作用。对4种供试细菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)分别为:大肠杆菌0.25 mg/m L,蜡状芽孢杆菌0.25 mg/m L,金黄色葡萄球菌0.125 mg/m L,枯草芽孢杆菌0.125 mg/m L。以金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为指示菌,从热处理﹑p H﹑紫外光三个方面考察菜芙蓉花提取物活性成分的稳定性研究,发现菜芙蓉花提取物的抑菌活性具有较好的热稳定性,对紫外光也有极高的稳定性。菜芙蓉花提取物在酸性条件下抑菌活性强,在p H6-8之间变化最大,且p H>8之后只有微弱的抑菌活性。用70%乙醇为溶剂成功提取到菜芙蓉花总黄酮粗品,含量高达4.31%。以氯仿:甲醇(90:10-0:100)各1 L的洗脱液进行梯度洗脱将菜芙蓉花总黄酮分离,收集组分,根据黄酮化合物的紫外荧光显色反应,对收集组分用2%硝酸铝的醇溶液进行鉴别。结果表明:当洗脱剂为氯仿:甲醇80:20时,开始有黄酮类化合物洗出;当洗脱剂为氯仿:甲醇40:60时,洗出的黄酮类化合物逐渐减少。对菜芙蓉花乙醇提取物从清除羟自由基(·OH)、超氧自由基(O一·)、DPPH自由基体系,以及总还原能力方面四个方面进行抗氧化性研究。实验表明,洗脱剂为氯仿:甲醇70:30的分离流分对(·OH)和DPPH自由基的清除效果以及总还原能力最强,当溶液浓度到达180 mg/L时,对羟自由基(·OH)清除率能达到71.3%,对DPPH自由基的清除率高达82.6%。洗脱剂为氯仿:甲醇80:20的分离组分对超氧自由基(O一·)的清除作用尤其突出,当溶液浓度到达180 mg/L时,对超氧自由基(O·)的清除率达70.9%。

关键词：菜芙蓉黄酮提取分离抑菌活性抗氧化性

菜芙蓉多糖对秀丽隐杆线虫抗氧化和延缓衰老作用的研究

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菜芙蓉多糖对秀丽隐杆线虫抗氧化和延缓衰老作用的研究

作者：杜星芳河北科技大学

学位级别：硕士

本实验以菜芙蓉醇提黄酮后的残留物为原料,水提醇沉法提取菜芙蓉多糖并对其进行纯化与表征;考察了菜芙蓉多糖对DNA氧化损伤的保护作用;进一步对菜芙蓉多糖在秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,***简称秀丽线虫)抗氧化防衰老方面进行... 详细信息

本实验以菜芙蓉醇提黄酮后的残留物为原料,水提醇沉法提取菜芙蓉多糖并对其进行纯化与表征;考察了菜芙蓉多糖对DNA氧化损伤的保护作用;进一步对菜芙蓉多糖在秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,***简称秀丽线虫)抗氧化防衰老方面进行了研究。主要研究内容及结果如下:采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP)柱前衍生法对菜芙蓉多糖中单糖组成进行分析,结果表明菜芙蓉多糖含有鼠李糖14.85%、葡萄糖40.29%、阿拉伯糖7.11%、岩藻糖38.02%。采用傅立叶变换红外光谱检测结果表明其含有多糖特征吸收峰,使用高效液相凝胶渗透色谱法测定多糖的平均相对分子质量为17281 k Da。琼脂糖凝胶电泳结果表明,菜芙蓉多糖对HO氧化损伤的质粒DNA具有保护作用。本论文以0(空白对照组,ck)、低剂量组(25 mg/mL)、中剂量组(50 mg/m L)、高剂量组(100 mg/m L)菜芙蓉多糖喂养线虫,探究了菜芙蓉多糖对秀丽隐杆线虫正常培养条件下生理指标、生化指标及细胞凋亡的影响。结果表明,菜芙蓉多糖可以延长秀丽线虫的寿命及热应激条件下线虫的寿命,提高氧化应激条件下线虫存活率,提高线虫运动行为能力,降低线虫产卵率。菜芙蓉多糖可以提高线虫体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,降低丙二醛(MDA)含量,减少ROS积累量,降低细胞凋亡水平,其中中剂量组(50mg/m L)多糖效果最好。在胡桃醌组氧化应激条件下,用3种不同浓度的菜芙蓉多糖(25 mg/m L、50mg/m L、100 mg/m L)考察了菜芙蓉多糖对秀丽隐杆线虫生化指标及细胞凋亡的影响。结果表明,菜芙蓉多糖可提高胡桃醌组线虫SOD、CAT、GSH-Px活力,降低其丙二醛(MDA)含量,并可以减少ROS积累量,降低细胞凋亡水平,50 mg/mL多糖效果最好。

关键词：菜芙蓉多糖秀丽隐杆线虫抗氧化活性延长寿命

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菜芙蓉中黄酮的提取及检测方法的研究

菜芙蓉中黄酮的提取及检测方法的研究

作者：王安良大连工业大学

学位级别：硕士

菜芙蓉的花、茎、叶、种子中，都含有丰富的生物活性物质，本文主要对菜芙蓉种子、花以及茎中黄酮提取方法进行了研究并开发出了两种荧光分析方法和一种高效液相色谱分析方法，从而对菜芙蓉中黄酮的单体芦丁和槲皮素的含量进行了检测。... 详细信息

菜芙蓉的花、茎、叶、种子中，都含有丰富的生物活性物质，本文主要对菜芙蓉种子、花以及茎中黄酮提取方法进行了研究并开发出了两种荧光分析方法和一种高效液相色谱分析方法，从而对菜芙蓉中黄酮的单体芦丁和槲皮素的含量进行了检测。本文主要以菜芙蓉的种子、花、茎为原料，采用传统的乙醇浸提法，提取菜芙蓉中的总黄酮;并以芦丁为对照品制作标准曲线，运用硝酸铝比色法测定总黄酮的含量。通过单因素试验方法，确定乙醇浓度、浸提时间、浸提温度、液料比四种因素的提取条件;根据二次回归正交旋转组合设计原理，在单因素试验的基础上采用四因素五水平的响应曲面分析方法进行试验设计;同时通过响应曲面的回归分析方法，将因子（乙醇浓度、浸提时间、浸提温度、液料比）与响应值（提取率）的相互关系用多项式拟合，把因子和响应值的关系函数化，通过对函数的面进行分析，研究因子与响应值之间、因子与因子之间的相互关系，并进行优化，从而获得最优的工艺参数，提高了菜芙蓉样品中黄酮的提取率。最终利用模型的响应曲面图及其等高线图，得到的优化工艺参数为：乙醇浓度为53.9%、浸提时间为2.2h、浸提温度为76.9℃、液料比为22.3mL·g-1时提取效果最佳，黄酮提取率高达3.6%。鉴于植物体内含有丰富的芦丁和槲皮素物质，尤其这两种化合物在生物、医学领域的广泛运用，本文根据芦丁和槲皮素中特有的烯醇式的羟基或羧基结构能与金属离子形成π键共扼体系，形成具有灵敏度高、检测限低的具有很强的荧光性化合物的性质，分别研究了芦丁-铁氰化钾-硼砂体系和槲皮素-Al3+体系荧光光度法进行测定菜芙蓉中的芦丁或槲皮素的含量，分析各体系的荧光性质及影响因素，通过各体系的精密度和回收率试验，开发了关于菜芙蓉中的芦丁和槲皮素的荧光检测技术。为了进一步更准确地进行定性定量分析菜芙蓉中黄酮类物质，本文最后研究并开发了以芦丁和槲皮素为标准物，采用C18反相色谱柱，二极管阵列检测器高效液相色谱法分离分析菜芙蓉中的芦丁和槲皮素的色谱分析方法，检测结果进一步说明菜芙蓉中确实含有丰富的黄酮类物质，该资源值得开发和推广。

关键词：菜芙蓉黄酮响应曲面荧光色谱

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大孔吸附树脂纯化菜芙蓉黄酮工艺研究

食品研究与开发 2017年第2期38卷 66-69页

作者：巫玲丽张利四川理工学院化学与制药工程学院四川自贡643000

研究大孔吸附树脂分离纯化菜芙蓉黄酮的最佳工艺条件。以总黄酮吸附量和解吸量为指标,进行静态吸附和解吸试验对14种型号大孔树脂进行筛选,再通过动态吸附和解吸试验对纯化工艺参数进行优化。Z801大孔树脂对菜芙蓉总黄酮的吸附与解吸性... 详细信息

研究大孔吸附树脂分离纯化菜芙蓉黄酮的最佳工艺条件。以总黄酮吸附量和解吸量为指标,进行静态吸附和解吸试验对14种型号大孔树脂进行筛选,再通过动态吸附和解吸试验对纯化工艺参数进行优化。Z801大孔树脂对菜芙蓉总黄酮的吸附与解吸性能最佳。HZ801纯化菜芙蓉黄酮的最佳工艺条件为:上样浓度为1 mg/m L,上样流速2 m L/min,上样量为140 m L;依次用2 BV水洗脱,用70%乙醇以2 m L/min的速率洗脱2.2 BV。在优化工艺条件下,菜芙蓉黄酮的平均吸附率是95.03%,纯化倍数4.04。HZ801型大孔树脂富集黄酮的效果最佳,是一种较理想的分离纯化介质。

关键词：菜芙蓉大孔树脂总黄酮纯化