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灵芝-黄芪药渣固体双向发酵工艺优化及菌质多糖对肠癌HCT116的抑制作用研究

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中国食品添加剂 2023年第11期34卷 110-118页

作者：杨英歌李荣宋凯王娟王丹徐州生物工程职业技术学院徐州221006 山东城市服务职业学院烟台264670

为了高值化利用黄芪药渣,通过单因素和响应面优化灵芝-黄芪药渣固体双向发酵生产多糖的工艺,最佳发酵工艺为料液比0.66 g/mL、装瓶量0.22 g/mL、接种量4.5%、发酵温度28℃、发酵时间16 d,菌质多糖平均产率达到(29.21±0.23)mg/g。HPLC... 详细信息

为了高值化利用黄芪药渣,通过单因素和响应面优化灵芝-黄芪药渣固体双向发酵生产多糖的工艺,最佳发酵工艺为料液比0.66 g/mL、装瓶量0.22 g/mL、接种量4.5%、发酵温度28℃、发酵时间16 d,菌质多糖平均产率达到(29.21±0.23)mg/g。HPLC分析菌质多糖的单糖组成,菌质多糖由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成。采用MTT法测定菌质多糖对人体肠癌HCT116细胞的体外抗肿瘤活性,当菌质多糖浓度超过40 mg/mL时,对人体肠癌HCT116细胞的体外抑制率超过85%。菌质多糖溶液经口灌胃,测定对移植于裸鼠的人体肠癌HCT116的抑制作用,剂量为25 mL/kg时,对移植于裸鼠的人体肠癌HCT116的抑瘤率为55.99%。

关键词：灵芝黄芪药渣菌质多糖抗肿瘤活性

Box-Behnken响应面设计法优化黑木耳菌质多糖提取工艺

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生物技术通报 2013年第6期29卷 188-193页

作者：赵超曾峰黄一帆刘斌福建农林大学食品科学学院福州350002 国家菌草工程技术研究中心福州350002 福建农林大学动物科学学院福州350002

为了优化黑木耳菌质多糖的提取工艺,采用Box-Behnken设计方法,研究水提温度、水提时间、液料比及其交互作用对黑木耳菌质多糖得率的影响。应用Design Expert软件和响应面分析相结合的方法,模拟得到回归方程的预测模型和可信度,分析得到... 详细信息

为了优化黑木耳菌质多糖的提取工艺,采用Box-Behnken设计方法,研究水提温度、水提时间、液料比及其交互作用对黑木耳菌质多糖得率的影响。应用Design Expert软件和响应面分析相结合的方法,模拟得到回归方程的预测模型和可信度,分析得到最佳的提取条件为:水提温度81.59℃,水提时间81.40 min,液料比36.42∶1。黑木耳菌质多糖得率的预测值为7.92 mg/g,采用上述最佳提取条件进行验证试验,测得菌质多糖得率为7.79 mg/g。采用响应法优化得到的黑木耳菌质多糖提取条件参数准确可靠,该研究为黑木耳菌质多糖的工业化生产提供了必要的技术支持。

关键词：黑木耳菌质多糖提取工艺 Box-Behnken设计响应面分析

桦褐孔菌菌质多糖改善HepG2细胞胰岛素抵抗作用的研究

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食用菌学报 2017年第4期24卷 39-43页

作者：龙凯李东文苏明声梁永红谢小梅江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室创新药物与高效节能降耗制药设备国家重点实验室江西中医药大学药学院江西南昌330004

通过胰岛素诱导法建立胰岛素抵抗HepG2(insulin-resistant HepG2,IR-HepG)细胞模型,探讨不同相对分子质量的桦褐孔菌(Inonotus obliquus)菌质多糖对IR-HepG2细胞的影响,同时与桦褐孔菌菌核多糖进行比较。结果表明:与模型组相比,相对分... 详细信息

通过胰岛素诱导法建立胰岛素抵抗HepG2(insulin-resistant HepG2,IR-HepG)细胞模型,探讨不同相对分子质量的桦褐孔菌(Inonotus obliquus)菌质多糖对IR-HepG2细胞的影响,同时与桦褐孔菌菌核多糖进行比较。结果表明:与模型组相比,相对分子质量(Mr)为1×10~4~3×10~4的菌质多糖和菌核多糖能显著增加IR-HepG2细胞对葡萄糖的消耗能力,改善胰岛素抵抗状态。

关键词：菌质多糖菌核多糖胰岛素抵抗葡萄糖消耗

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冬虫夏草固态发酵蕨渣生产菌质多糖

食品研究与开发 2010年第7期31卷 148-151页

作者：王祥诚余有贵程里周军燕邵阳学院生物与化学工程系湖南邵阳422000

探索冬虫夏草发酵蕨渣固态基质生产菌质多糖的条件,可为蕨渣的开发利用提供理论依据。以蕨渣为主要原料,采用正交试验设计法对生产菌质多糖的工艺条件(基质蕨渣比例、基质含水量和培养温度)进行了初步的优化。在本试验条件下,优化出冬... 详细信息

探索冬虫夏草发酵蕨渣固态基质生产菌质多糖的条件,可为蕨渣的开发利用提供理论依据。以蕨渣为主要原料,采用正交试验设计法对生产菌质多糖的工艺条件(基质蕨渣比例、基质含水量和培养温度)进行了初步的优化。在本试验条件下,优化出冬虫夏草菌发酵生产蕨渣菌质多糖的最佳工艺条件为:蕨渣比例85%、基质含水量60%、培养温度22℃。研究结果将为蕨渣进一步的开发研究奠定基础。

关键词：蕨渣冬虫夏草菌质多糖固态发酵正交试验设计

黑木耳菌质多糖分离纯化及其降血脂活性初步研究

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黑木耳菌质多糖分离纯化及其降血脂活性初步研究

作者：曾峰福建农林大学

学位级别：硕士

黑木耳(Auricularia auricula)是我国珍贵的食药用胶质真菌。黑木耳多糖是黑木耳的重要活性成分,其生物活性已成为研究热点。为开发具有潜在应用价值的功能性食品及药物先导化合物,本论文研究了黑木耳的液态发酵及固态发酵、黑木耳菌质... 详细信息

黑木耳(Auricularia auricula)是我国珍贵的食药用胶质真菌。黑木耳多糖是黑木耳的重要活性成分,其生物活性已成为研究热点。为开发具有潜在应用价值的功能性食品及药物先导化合物,本论文研究了黑木耳的液态发酵及固态发酵、黑木耳菌质多糖的提取,并以黑木耳菌质粗多糖为材料,对其进行了分离纯化、纯度与结构鉴定及体内降血脂活性研究。’得到以下主要结果：1.黑木耳液态发酵所需碳源和氮源,分别以葡萄糖和蛋白胨为最佳。正交试验表明,黑木耳液态发酵获得菌丝体的最优条件为：葡萄糖3%,马铃薯20%,蛋白胨0.2%, KH2PO4 0.1%, MgSO4·7H2O 0.05%, pH=5,摇瓶装液量120 mL,摇床转速160 r/min,发酵时间10 d。将黑木耳液态发酵所得菌丝体作为液体菌种应用于固态发酵,具有生长快,周期短的特点。2.正交试验表明,黑木耳固态发酵获得菌质多糖的最优发酵条件为：甘蔗渣：豆渣＝3：2,温度30℃,发酵时间28 d。3.利用软件Design Expert,采用B ox-Behnken Design建立了水提温度X1、水提时间X2、液料比(m/m)X3与黑木耳菌质多糖得率之间的二次多项数学模型,回归模型显著,拟合程度好;黑木耳菌质多糖的最优提取条件为：水提温度90℃,水提时间90 min,液料比27：1,黑木耳菌质多糖得率的预测值为7.86 mg/g,验证值为7.74 mg/g,误差为1.53%,证明此模型是合理可靠的,可用于实际预测。4.运用DEAE Sephadex A-50对黑木耳菌质多糖分级和纯化,得到三个主要的多糖组分,分别命名为AAP-Ⅰ、AAP-Ⅱ和AAP-Ⅲ。AAP-Ⅰ经Sephadex G-200层析进一步纯化,表明其为单一组分多糖。紫外光谱扫描结果显示AAP-Ⅰ不含核酸和蛋白,薄层层析图表明AAP-Ⅰ可能为纯品。采用红外光谱扫描、核磁共振氢谱研究了纯多糖AAP-Ⅰ的化学结构,表明AAP-Ⅰ具有多糖的特征。5.通过小鼠高脂血症模型,探讨了菌质多糖AAP-Ⅰ的体内降血脂活性,结果表明,与高脂模型组比较,菌质多糖AAP-Ⅰ具有显著的降血脂活性(P<0.05)。

关键词：黑木耳液态发酵固态发酵菌质多糖分离纯化降血脂

黑木耳菌质多糖提取纯化及其体外抗氧化作用研究

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黑木耳菌质多糖提取纯化及其体外抗氧化作用研究

作者：雷杨琼福建农林大学

学位级别：硕士

黑木耳营养丰富,味道脆嫩,有“素中之荤”的美誉。有大量研究表明,黑木耳具有“生物应答效应物”(Biological Response Modifier,简称BRM)之称,富含多种生理功能,本论文研究了黑木耳菌质多糖的优化提取工艺,并以黑木耳菌质粗多糖为材料... 详细信息

黑木耳营养丰富,味道脆嫩,有“素中之荤”的美誉。有大量研究表明,黑木耳具有“生物应答效应物”(Biological Response Modifier,简称BRM)之称,富含多种生理功能,本论文研究了黑木耳菌质多糖的优化提取工艺,并以黑木耳菌质粗多糖为材料,对其进行初步纯化,并研究其及体外抗氧化活性研究。主要得到以下结果：1.通过单因素以及正交实验,对影响热水浸提黑木耳菌质多糖得率的关键因子及其相互作用进行探讨,优化出菌质多糖的最佳提取工艺条件为A383C2,即水提温度90℃,水提时间90min,液料比35：1,菌质多糖得率为7.08mg/g。2.通过对水提所得黑木耳菌质粗多糖进行聚酰胺法脱蛋白法脱蛋白,经其处理后的粗多糖更利于进一步的分离纯化及功能性研究,经过对比实验得出,得到聚酰胺的最佳添加量以及处理时间。3.经过对比实验,分析了透析时间与多糖损失率之间关系,确定48h为适宜的透析时间。4.通过对黑木耳透析后多糖(TA)、黑木耳水提多糖(TB)、黑木耳醇沉多糖(TC)三个分级多糖的DPPH自由基、超氧自由基、羟基自由基、还原力4个指标研究,结果表明,黑木耳水提多糖(TB)在多数指标中都具有明显较强的作用,呈效量关系。黑木耳透析多糖(TA)和黑木耳醇沉多糖(TC)相对较弱。各分级多糖的抗氧化性都随着浓度的不断升高而升高。

关键词：黑木耳菌质多糖提取工艺纯化体外抗氧化

桑叶与桑黄共发酵菌质多糖的结构表征及其抗肿瘤和免疫调节活性研究

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桑叶与桑黄共发酵菌质多糖的结构表征及其抗肿瘤和免疫调节活性研...

作者：周琢艳浙江中医药大学

学位级别：硕士

目的本文以本实验室分离鉴定的一株桑黄菌为材料,以中药桑叶作为发酵基质,从发酵终点的菌质中提取分离得到多糖组分,研究其结构特征、抗肿瘤活性和免疫调节活性的分子机制。为中药多糖抗肿瘤、调节机体免疫力提供理论基础和实验依据,对... 详细信息

目的本文以本实验室分离鉴定的一株桑黄菌为材料,以中药桑叶作为发酵基质,从发酵终点的菌质中提取分离得到多糖组分,研究其结构特征、抗肿瘤活性和免疫调节活性的分子机制。为中药多糖抗肿瘤、调节机体免疫力提供理论基础和实验依据,对临床应用具有指导意义。方法采用水提醇沉、Sevag脱蛋白法得提取物,经AB-8型大孔树脂脱色处理,从桑叶与桑黄共发酵菌质中获得粗多糖。经DEAE-纤维素阴离子交换柱层析和Shephadex G-100凝胶柱层析分离得到均一多糖MPFP2-1;采用高效液相色谱法、傅里叶红外光谱法和核磁共振法对MPFP2-1进行结构表征;利用MTT法检测MPFP2-1对小鼠巨噬细胞RAW264.7的增殖作用,并采用Griess和ELISA分别检测MPFP2-1处理后细胞上清NO和TNF-α的含量,为进一步探讨其免疫调节机制,利用Western Blot法检测NF-κB通路相关蛋白的表达。此外,成功建立H22肝癌荷瘤小鼠模型,并随机分为模型组、阳性对照组和治疗组,灌胃给药,初步研究其体内抗肿瘤和免疫调节活性。结果均一多糖MPFP2-1的单糖组成和摩尔比为L-鼠李糖:D-葡萄糖=1.0:5.4;高效凝胶渗透色谱联用蒸发光检测器分析表明MPFP2-1的分子量为5.03×10Da;红外光谱结果显示MPFP2-1具有多糖的特征吸收峰,H-NMR和C-NMR核磁共振谱图表明两种糖以-β-1,6-糖苷键连接,且其结果与单糖组成结果吻合。MTT检测结果表明,MPFP2-1在25～200μg/m L浓度范围内对巨噬细胞生长无影响;Griess和ELISA结果表明MPFP2-1能显著促进巨噬细胞分泌NO和TNF-α,Western Blot结果进一步显示,MPFP2-1能显著提高NF-κB的磷酸化水平,其结果与ELISA结果一致。H22肝癌荷瘤小鼠实验结果显示MPFP2-1能提高H22荷瘤小鼠的免疫器官指数、血清中细胞因子含量,改变脾淋巴细胞中CD4+T/CD8+T比值,具有抑制肿瘤生长作用。结论桑叶与桑黄共发酵菌质多糖MPFP2-1是非淀粉类多糖,由L-鼠李糖和D-葡萄糖以-β-1,6-糖苷键连接构成分子量为5.03×10Da的均一多糖,MPFP2-1可通过NF-κB信号通路促进巨噬细胞分泌NO和TNF-α。此外,MPFP2-1还可提高H22荷瘤小鼠的免疫功能,从而抑制肿瘤生长,提高生活质量。

关键词：菌质多糖结构表征抗肿瘤免疫调节

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蛹虫草固体发酵工艺及其菌质多糖的研究

蛹虫草固体发酵工艺及其菌质多糖的研究

作者：高宇吉林农业大学

学位级别：硕士

固体发酵是解决目前蛹虫草资源短缺,缓解市场对蛹虫草需求不断增加的一种有效且可靠的方式。现今以大米为基质的固体培养已经大规模推广应用,为了丰富发酵基质的种类,寻找一种新的替代基质,同时缩短生产时间,获得新的发酵代谢产物,本文... 详细信息

固体发酵是解决目前蛹虫草资源短缺,缓解市场对蛹虫草需求不断增加的一种有效且可靠的方式。现今以大米为基质的固体培养已经大规模推广应用,为了丰富发酵基质的种类,寻找一种新的替代基质,同时缩短生产时间,获得新的发酵代谢产物,本文以发芽大豆为培养基质,采用固体发酵方式获取蛹虫草菌质,为蛹虫草发酵研究提供了一种新思路,本研究主要取得了以下几项结果：1.以多糖得率为指标,采用液体发酵方式筛选出多糖含量较高的蛹虫草菌株CM5。2.以发酵后的大豆为主要的培养基,经过一系列的处理,配以选定的液体种子液,在适宜的条件下培养,观察其生长状况,最后以多糖含量为指标筛选出的最适宜培养条件是：装样量为70g/500ml,加入营养液体积9ml/ml,pH为6.0。3.以发酵完全的菌质为原料,采用高效液相色谱法测定其腺苷含量,同时与常规的蛹虫草摇瓶培养菌丝、大米培养基固体发酵蛹虫草菌质作为对比。结果表明：以黄豆为培养基与以大米培养基菌质中的腺苷含量相差甚少,但二者均高于液体摇瓶菌丝的腺苷含量。液体摇瓶菌丝、黄豆培养基菌质、大米培养基菌质中腺苷含量分别为0.042%、0.2546%、0.3062%。4.采用正交试验对蛹虫草发酵菌质多糖进行提取工艺优化,探讨了料液比、回流提取时间和提取次数对多糖得率的影响,得到最优工艺条件为：80℃,料液比为l：30,回流提取时间为2h,提取次数为3次,此时多糖含量达到6.93%。5.为了检测蛹虫草菌质多糖的活性,对粗多糖和精多糖进行了清除DPPH的对照试验,结果表明：不去除蛋白的粗多糖对DPPH的清除率更高。对菌质粗多糖进行的其它抗氧化活性的测试,结果表明其抗氧化性较强。6.为了弄清粗多糖的结构特征,对菌质粗多糖进行了分离,结果分离出3个糖蛋白峰,采用苯酚一硫酸法检测也检测出三个相应的多糖峰。7.在此基础上,对分离出的三个糖蛋白中含量较高的多糖CM-Ⅱ进行了衍生化实验。

关键词：蛹虫草固体发酵菌质多糖抗氧化提取分离

黑木耳菌质多糖分离纯化及其降血脂活性初步研究

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黑木耳菌质多糖分离纯化及其降血脂活性初步研究