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基于16S rRNA测序研究葛根芩连汤对菌群失调性腹泻大鼠肠道菌群结构的影响

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中国实验方剂学杂志 2021年第11期27卷 19-26页

作者：张庚鑫杜海洋王平杨光勇涂小华田维毅王文佳何光志贵州中医药大学基础医学院贵阳550025

目的:采用16S rRNA技术研究葛根芩连汤对菌群失调性腹泻大鼠肠道菌群结构的影响。方法:将60只健康SD大鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、葛根芩连汤高、中、低剂量组,丽珠肠乐组,每组10只。除正常组外,每日按头孢拉定178.6 mg·kg^(... 详细信息

目的:采用16S rRNA技术研究葛根芩连汤对菌群失调性腹泻大鼠肠道菌群结构的影响。方法:将60只健康SD大鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、葛根芩连汤高、中、低剂量组,丽珠肠乐组,每组10只。除正常组外,每日按头孢拉定178.6 mg·kg^(-1),硫酸庆大霉素31.25 mg·kg^(-1)混合抗生素进行灌胃造模,造模成功后,葛根芩连汤高、中、低剂量组灌胃葛根芩连汤(7.02,3.51,1.755 g·kg^(-1)),丽珠肠乐组按0.125 g·kg^(-1)灌胃,正常组与模型组给予无菌蒸馏水灌胃,体积分数均为10 mL·kg^(-1),连续给药7 d,将大鼠麻醉后取大鼠结肠内容物,提取粪便DNA后进行16S rRNA高通量测序并分析其结果。结果:葛根芩连汤明显调节菌群失调性腹泻模型大鼠的物种数量及Alpha与Beta多样性,提高菌群生物丰富度指数与多样性指数,正向调节菌群失调性腹泻模型大鼠的3种差异菌门(厚壁菌门、变形菌门、拟杆菌门)与14种差异菌属(拟杆菌属、狄氏副拟杆菌属、布劳特氏菌属等)。结论:葛根芩连汤对菌群失调性腹泻模型大鼠肠道菌群有调节作用,揭示了肠道菌群与菌群失调性腹泻之间的生理病理机制。

关键词： 16S rRNA 葛根芩连汤肠道菌群菌群结构菌群失调性腹泻

基于网络药理学及分子对接技术研究黄芪调控仔猪肠道菌群失调性腹泻的作用

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中国畜牧兽医 2022年第8期49卷 3200-3211页

作者：孙悦龙张梦洁豆佳红王小莹戴小枫李秀梅中国农业科学院饲料研究所农业农村部饲料生物技术重点实验室北京100081 天津科技大学生物工程学院天津300457

【目的】基于网络药理学及分子对接技术研究黄芪调控仔猪肠道菌群失调性腹泻的有效活性成分及其作用机制。【方法】从TCMSP数据库搜集黄芪中药化合物成分,并获取其潜在靶点。利用GeneCards和OMIM数据库搜集肠道菌群失调性腹泻(flora imb... 详细信息

【目的】基于网络药理学及分子对接技术研究黄芪调控仔猪肠道菌群失调性腹泻的有效活性成分及其作用机制。【方法】从TCMSP数据库搜集黄芪中药化合物成分,并获取其潜在靶点。利用GeneCards和OMIM数据库搜集肠道菌群失调性腹泻(flora imbalance diarrhea)的作用靶点,将两者预测的潜在作用靶点进行映射,获得共同作用靶点。运用STRING数据库构建靶点蛋白-蛋白相互作用(PPI)关系,用Cytoscape_3.8.0软件对其网络进行拓扑分析,用DAVID数据库对共同作用靶点进行富集分析,用AutoDuck_4.2.6软件对其核心成分与核心靶点进行分子对接。【结果】黄芪含有11个调控仔猪肠道菌群失调性腹泻核心成分,其对应靶点基因65个,疾病靶点854个,交集靶点25个。PPI网络中显示肿瘤坏死因子(TNF)、转录因子AP-1(JUN)、半胱氨酸蛋白酶-3(CASP3)、白细胞介素-6(IL6)、NF-κB抑制剂α(NFKBIA)、IL1B、IL10、细胞肿瘤抗原p53(TP53)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)、C-C基序趋化因子2(CCL2)为关键靶点。GO功能和KEGG通路富集分析发现,黄芪有效成分主要通过美国锥虫病、炎症性肠病、阿米巴病、细胞因子-细胞因子受体相互作用、A型流感、疟疾、T细胞受体信号通路、沙门菌感染等信号通路参与转录调控、免疫反应、细胞对脂多糖的反应等生物过程。分子对接结果显示,槲皮素、山奈酚、芒柄花素等核心成分与TNF、IL1B等关键靶点结合紧密,亲和力较好。【结论】黄芪可能通过槲皮素、山奈酚、芒柄花素等主要活性成分作用于TNF、IL1B等靶点,通过参与美国锥虫病、炎症性肠病、疟疾、T细胞受体信号通路、沙门菌感染等信号通路进而治疗仔猪肠道菌群失调性腹泻。

关键词：黄芪菌群失调性腹泻网络药理学分子对接有效活性成分作用机制

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葛根芩连汤对菌群失调性腹泻大鼠模型结肠组织PINK1/Parkin表达的影响

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时珍国医国药 2023年第4期34卷 857-861页

作者：张庚鑫杜海洋杨光勇苏钢田维毅涂小华何光志贵州中医药大学基础医学院贵州贵阳550025

目的通过观察葛根芩连汤(GQT)对菌群失调性腹泻大鼠模型动物结肠组织PINK1/Parkin表达水平的影响,探讨GQT治疗腹泻的作用机制。方法 180只SPF级SD大鼠(雌雄各半)随机分为空白组(30只)和造模组(150只),造模组采用复合抗生素灌胃法建立... 详细信息

目的通过观察葛根芩连汤(GQT)对菌群失调性腹泻大鼠模型动物结肠组织PINK1/Parkin表达水平的影响,探讨GQT治疗腹泻的作用机制。方法 180只SPF级SD大鼠(雌雄各半)随机分为空白组(30只)和造模组(150只),造模组采用复合抗生素灌胃法建立菌群失调性腹泻大鼠模型。模型成功后将造模组随机分为5组,即模型组、丽珠肠乐组、GQT高、中、低剂量组,30只/组。GQT高、中、低剂量组分别按7.02,3.51,1.755 g·kg^(-1),丽珠肠乐按0.125 g·kg^(-1)灌胃,1次/d,连续21 d,模型组和空白组给予蒸馏水灌服,各组灌胃体积均为10 mL/kg。分别在治疗后7、14、21 d进行样本采集。应用荧光定量PCR技术(RT-PCR)及免疫组化法(IHC)分析结肠组织PINK1/Parkin相对表达水平;应用免疫印迹法(WB)法检测P62、LC3Ⅰ和LC3Ⅱ蛋白表达。结果综合模型大鼠粪便、临床症状及电镜观察结果表明本次造模验证成功。RT-PCR分析PINK1和Parkin mRNA表达结果表明,模型组大鼠基因表达较空白组显著升高(P菌群失调来治疗腹泻。

关键词：菌群失调性腹泻 PINK1/Parkin 葛根芩连汤结肠组织

参苓白术散“异病同治”慢阻肺和菌群失调性腹泻作用机制的网络药理学分析

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特产研究 2024年第4期46卷 42-53页

作者：陈鑫遥陈耀鑫许银姬广州中医药大学第二临床医学院广东广州510400 广东省中医院广东广州510000

本研究基于网络药理学探讨参苓白术散“异病同治”慢阻肺和菌群失调性腹泻的主要活性成分、作用靶点及通路,明确其潜在作用机制。通过TCMSP或TCMID数据库筛选出参苓白术散的活性成分及作用靶点;运用GeneCards和OMIM-genemap获取与慢阻... 详细信息

本研究基于网络药理学探讨参苓白术散“异病同治”慢阻肺和菌群失调性腹泻的主要活性成分、作用靶点及通路,明确其潜在作用机制。通过TCMSP或TCMID数据库筛选出参苓白术散的活性成分及作用靶点;运用GeneCards和OMIM-genemap获取与慢阻肺与菌群失调性腹泻发生、发展相关的靶点,得到参苓白术散慢阻肺菌群失调性腹泻交集靶点;利用STRING数据库绘制蛋白相互作用网络并进行拓扑分析,对其进行GO功能及KEGG通路富集分析;利用Cytoscape 3.9.1软件构建药物活性成分疾病靶点通路作用网络。通过SYBYL等软件进行主要活性成分与关键靶点的分子对接,共获得参苓白术散组方靶点441个,慢阻肺与菌群失调性腹泻的共同靶标133个;药物与疾病交集靶点39个,获得了PTGS2、NOS2、JUN、RELA和TNF等关键靶点;富集分析结果显示,参苓白术散可能参与炎症反应、对外源性刺激的反应、对脂多糖的反应、对细菌来源分子的反应等生物学进程,调控AGE-RAGE信号通路和IL-17信号通路等,参与慢阻肺和菌群失调性腹泻的治疗过程。分子对接结果显示,关键靶点与相关活性成分之间具有较高的结合活性。参苓白术散对慢阻肺和菌群失调性腹泻作用具有多成分、多靶点、多通路的作用机制特点,可为参苓白术散的临床用药提供理论基础。

关键词：参苓白术散异病同治慢性阻塞性肺疾病菌群失调性腹泻网络药理学

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基于网络药理学对七味白术散治疗菌群失调性腹泻的作用机制研究

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世界中西医结合杂志 2021年第7期16卷 1251-1255,1264页

作者：王威王静天津中医药大学第一附属医院国家中医针灸临床医学研究中心天津300193

目的基于网络药理学的方法探讨七味白术散治疗菌群失调性腹泻(Flora imbalance diarrhea)的作用机制。方法通过中药系统药理学数据库(Traditional Chinese medicine system platform,TCMSP)获得七味白术散所含中药的主要化学成分,并收... 详细信息

目的基于网络药理学的方法探讨七味白术散治疗菌群失调性腹泻(Flora imbalance diarrhea)的作用机制。方法通过中药系统药理学数据库(Traditional Chinese medicine system platform,TCMSP)获得七味白术散所含中药的主要化学成分,并收集其潜在作用靶点;菌群失调性腹泻疾病靶点来源于GeneCards、DrugBank、Home-OMIM-NCBI数据库。通过UniProt数据库对药物靶基因与疾病靶基因校正,使用Draw Venn Diagrams工具获得交集基因。应用Cytoscape 3.7.1对所得的交集基因进行PPI分析、GO与KEGG通路富集分析。结果共获得七味白术散活性成分84个,药物作用靶点201个,疾病靶点177个,交集基因26个。PPI网络中,丝裂原活化蛋白激酶1(mitogen-activated protein kinase 1,MAPK1)、Jun原癌基因(Jun proto-oncogene)AP-1转录因子亚基(AP-1 transcription factor subunit,JUN)、雌激素受体1(Estrogen receptor 1,ESR1)、糖原合成酶激酶3β(Glycogen synthase kinase 3,GSK3B)为关键靶点,GO富集分析和KEGG通路富集分析发现,药物有效成分主要通过白细胞介素-17信号通路、AGE-RAGE信号通路以及C型凝聚素受体等信号通路参与了细胞因子产生的正调控、DNA结合转录因子活性的调节、对脂多糖的反应等生物学过程。结论本研究揭示了七味白术散治疗菌群失调性腹泻可能是多成分、多靶点、多途径的,且为进一步研究提供思路和参考。

关键词：七味白术散菌群失调性腹泻网络药理学靶点信号通路

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蒙脱石散治疗菌群失调性腹泻临床观察

中国实用医药 2009年第16期4卷 185-186页

作者：李淑君宋菊梅漯河市中医院儿科 462000 漯河市二院

蒙脱石散治疗秋季腹泻的疗效是明确的,已有人报道.现将2005年5月至2008年12月,对28例菌群失调性腹泻用蒙脱石散治疗并乳酶生片治疗菌群失调性腹泻24例进行对照,现将观察结果总结如下:

关键词：菌群失调性腹泻蒙脱石散治疗临床观察秋季腹泻乳酶生片

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抗生素相关菌群失调性腹泻的诊治规范

苏州医学 2011年第1期34卷 1-2页

作者：高楠陈卫昌苏州大学附属第一医院消化内科 215006

抗生素相关性腹泻（antibiotic—associated diarrhea，AAD）是指应用抗生素引起的腹泻，常与抗生素引起的肠道正常菌群失调有关，故又称抗生素相关菌群失调性腹泻。Bartlett将其定义为伴随着抗生素的使用而发生的无法用其他原因解释的... 详细信息

抗生素相关性腹泻（antibiotic—associated diarrhea，AAD）是指应用抗生素引起的腹泻，常与抗生素引起的肠道正常菌群失调有关，故又称抗生素相关菌群失调性腹泻。Bartlett将其定义为伴随着抗生素的使用而发生的无法用其他原因解释的腹泻。鉴于抗生素的应用现状，AAD的发生率可能有增加趋势，有报道约为5％-39％。

关键词：抗生素相关性腹泻菌群失调性腹泻 diarrhea 诊治发生率 AAD 应用

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小儿肠道菌群失调性腹泻临床分析

山西医药杂志（上半月） 2011年第11期40卷 1134-1134页

作者：巨爱萍左权县人民医院 032600

近年来,因菌群失调所致的小儿腹泻日益增多,临床上对此问题也越来越重视。现将我院2007年9月至2010年9月菌群失调引起的98例小儿腹泻标本分离,经大便细菌培养鉴定结果分析如下。1临床资料1.1一般资料：本组98例,男性46例,女性52例,

关键词：菌群失调性腹泻小儿腹泻临床分析肠道标本分离鉴定结果细菌培养临床资料

乌梅散的口服乳研制及其对肠道消化酶活性和菌群多样性影响的研究

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乌梅散的口服乳研制及其对肠道消化酶活性和菌群多样性影响的研究

作者：苗小雨天津中医药大学

学位级别：硕士

我国药食同源的历史源远流长,随着大众健康观念的增强,根植于传统中医药文化的药食同源理念受到了大量关注。中药复方乌梅散收载于《太平惠民和剂局方》,由乌梅、茯苓、木瓜、生姜组成,治小儿下痢后津液减少,脏腑虚燥,烦渴饮引,及治诸... 详细信息

我国药食同源的历史源远流长,随着大众健康观念的增强,根植于传统中医药文化的药食同源理念受到了大量关注。中药复方乌梅散收载于《太平惠民和剂局方》,由乌梅、茯苓、木瓜、生姜组成,治小儿下痢后津液减少,脏腑虚燥,烦渴饮引,及治诸病烦渴,引饮无度。组方中的乌梅、茯苓、木瓜、生姜均属于卫生部公布的药食同源物品,在临床多应用于预防、治疗多种腹泻及溃疡性结肠炎,将药食两用的中药复方乌梅散开发为食品,可以为更多的人群服务,守护更多人的肠道健康。由于儿童的胃肠道屏障功能不完善,更易受病毒、细菌及抗生素等的影响,从而引起肠道菌群失调以及腹泻、腹痛等消化系统疾病,将乌梅散开发为适合儿童的健康食品类型,对于调理儿童消化系统、促进儿童健康具有重要意义。以牛乳或乳制品为基质的口服乳剂在食品中称为含乳饮料,易于吞咽,能够协调风味,经调味后可以掩盖原方的不良口感,提高适口性,且能补充一定的营养成分,能很好满足儿童需求,因此,选择将乌梅散开发为美味、健康的乌梅散口服乳。此外,肠道菌群失调、消化酶活性变化均与腹泻互为因果,目前尚无乌梅散缓解腹泻机制及其对肠道菌群多样性、消化酶活性影响的报道,可以通过研究乌梅散对肠道菌群多样性、消化酶活性的影响探究其缓解腹泻机制,并研究乌梅散原剂型和口服乳的作用效果差异。课题通过优化乌梅散提取工艺,为其进一步研究和开发提供基础;研究乌梅散口服乳的最佳风味配方和稳定剂配方,以优化乌梅散口服乳的色泽、气味、口感,初步提高其稳定性;采用乌梅散口服乳最佳配方,进行工艺优化以提高其稳定性,并研究乌梅散口服乳在不同温度贮藏期的变化;探究乌梅散原剂型对正常小鼠肠道消化酶活性和菌群多样性的影响;探究乌梅散原剂型及口服乳对菌群失调性腹泻小鼠肠道酶活性和菌群多样性的影响,为乌梅散口服乳在调节肠道菌群、促进肠道健康等方面的应用提供一定科学依据。综上,本文主要包括以下五个方面:第一部分,乌梅散提取工艺研究。以绿原酸、咖啡酸、阿魏酸含量和出膏率为评价指标,采用层次分析法（Analytic Hierarchy Process,简称AHP）、CRITIC法及AHP-CRITIC混合加权法确定各指标的权重系数,结合正交试验结果优化乌梅散提取工艺参数。结果显示,AHP-CRITIC混合加权法较AHP法和CRITIC法更加科学合理,各因素对乌梅散提取工艺作用主次为提取时间>提取次数>加水量,最佳工艺为药材加8倍量水加热回流提取2次,每次1.0 h,验证试验表明该工艺稳定可行,重复性良好,可用于乌梅散的提取。第二部分,乌梅散口服乳配方研究。以感官评分为指标,采用单因素试验、响应面试验和模糊数学综合评价法优化风味配方;以离心沉淀率、稳定系数等为指标,采用单因素实验、D-最优混料实验、方差分析等对乌梅散口服乳中的稳定剂（增稠剂、乳化剂和螯合剂）进行研究,以获得乌梅散口服乳的最佳稳定剂配方。结果表明,乌梅散口服乳最佳风味配方为:乌梅散提取液19%,脱脂乳粉3%,白砂糖18%,食用盐0.37%;最佳稳定剂配方为:FH9羧甲基纤维素（Carboxymethyl Cellulose,简称CMC）0.13%、FL100 CMC 0.3%、高酯果胶（High Methoxyl Pectin,简称HMP）0.02%、单甘酯0.02%、蔗糖酯0.08%、六聚磷酸钠0.01%。第三部分,乌梅散口服乳制备工艺及贮藏稳定性研究。以离心沉淀率、稳定系数等为评价标准,通过单因素实验、方差分析等,对乌梅散口服乳的调配顺序、均质条件、杀菌条件进行研究,以获得乌梅散口服乳的最佳工艺参数及工艺流程;将乌梅散口服乳在不同温度（4、25、40℃）下避光贮藏35 d,每隔7 d对不同温度下乌梅散口服乳的总有机酸含量、感官评分、离心沉淀率、稳定系数、粒径、粘度、菌落总数和p H进行测定,监测乌梅散口服乳的贮藏稳定性。结果显示,最优调配顺序是以胶液为底料,加入乳液混合均匀后,再以滴加的方式将乌梅散提取液加入至二者混合溶液中,搅拌均匀;均质条件确定为乌梅散口服乳加热至60℃进料,于40 MPa压力下,均质2次;最佳的杀菌条件为85℃,加热杀菌20 min;随贮藏时间的增加,乌梅散口服乳的离心沉淀率、粒径均逐渐上升、增大,总有机酸含量、感官评分、稳定系数、粘度、p H均逐渐下降,贮藏温度越高,指标的升高或降低的变化速度越快,品质受贮藏温度影响;在35 d贮藏期内,不同温度贮藏的所有样品均满足要求,加速温度下仍保持了较好的体系稳定性、感官品质和微生物安全性。第四部分,乌梅散原剂型对正常小鼠肠道消化酶活性和菌群多样性的影响。将小鼠随机分成2组,分别为空白组、乌梅散给药组(5.98 g·kg·d),每组8只小鼠。乌梅散给药组按临床等效剂量给药7 d,空白组给予等量无菌水。记录小鼠体重、摄食量和饮水量变化,末次给药后收集粪便测

关键词：乌梅散口服乳剂 AHP-CRITIC权重分析法模糊数学综合评价法稳定性菌群失调性腹泻肠道消化酶肠道菌群