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莲雾（Syzygium samarangense）ISSR分子标记及其LFY同源基因DNA片段的克隆

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莲雾（Syzygium samarangense）ISSR分子标记及其LFY同源基因DNA...

作者：何桥西南农业大学

学位级别：硕士

莲雾(Syzygium samarangense(B1.)*** Perry)又称洋蒲桃、甜雾、爪哇蒲桃等,原产于马来半岛,安达曼群岛一带,其果实色泽艳丽、果形独特、风味清香,是热带、南亚热带地区近年新开发的珍稀果树之一。中国热带农业科学院南亚热带作物研究... 详细信息

莲雾(Syzygium samarangense(B1.)*** Perry)又称洋蒲桃、甜雾、爪哇蒲桃等,原产于马来半岛,安达曼群岛一带,其果实色泽艳丽、果形独特、风味清香,是热带、南亚热带地区近年新开发的珍稀果树之一。中国热带农业科学院南亚热带作物研究所目前收集了国内外性状优良的莲雾资源10余份,并开展了相关的一些基础性研究。但由于莲雾各品种(系)大多采取产地和果实性状复合命名的法则命名,因此,极有可能造成同物异名或是同名异物现象。另外,莲雾栽培中一个关键的技术就是进行产期调节,目前主要通过修剪、化学药剂处理结合加强栽培管理等措施来进行调控,其效果往往也不甚稳定。针对以上两个影响莲雾栽培推广的主要问题,本研究以“黑珍珠”莲雾为试材,对ISSR-PCR反应体系中儿个主要影响因子进行了优化筛选。结果表明:25μ1 ISSR-PCR反应体系各组分的最适浓度分别为,1×Buffer(不含Mg)、2.0mmol/LMg、0.2mmol/L dNTPs、Taq DNA聚合酶1.5U、引物0.2μmol/L、模板1.0ng/μl。此外,加入1.6%的甲酰胺有利于减轻背景噪音的干扰。利用优化的实验体系,首次对12份莲雾资源和2个莲雾近缘种(蒲桃(***)和马六甲蒲桃(***))进行了ISSR分子鉴别和亲缘关系分析。结果表明:18条引物共扩增出459个位点,其中多态性位点435个,多态位点百分率为94.8%。除了海引2号和海南淡红种之间的Dice相似性系数为0.882外,其它各供试材料之间的相似性系数都在0.347～0.811之间,表明供试材料不存在同物异名现象。通过UPGMA聚类分析发现蒲桃,马六甲蒲桃与莲雾分属于3个不同的组,第一组为蒲桃,第二组包括12份莲雾类型或品系,第三组是马六甲蒲桃。第二组又可以分成4个亚组,第一亚组包括澳洲淡红种;第二亚组包括黑珍珠、二十世纪、海引1号,其果实成熟期都在6月中旬,属于中熟类型;第三亚组有福建紫果种、文吕青皮种、广西深红种、海南火红种、福建青果种和白色棒状种,除白色棒状种莲雾果实在6月上旬成熟外,其余都在5月下旬,归属于早熟类型;第四亚组包括海引2号和海南淡红种,其果实成熟期都在6月下旬,为晚熟类型。这与传统分类学上按照果实成熟期的划分结果基本一致。

关键词：莲雾 ISSR 基因克隆 LFY同源基因

莲雾果实木质素合成相关MYB转录因子基因的克隆及分析

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莲雾果实木质素合成相关MYB转录因子基因的克隆及分析

作者：聂珂集美大学

学位级别：硕士

莲雾（Syzygium samarangenese[Blume]Merrill＆***）果实色泽艳丽,营养丰富,风味独特。但果实皮薄、组织疏松,采收后果实中心的絮状绵软逐渐向外部扩展,严重影响口感和风味。探究转录因子在莲雾果实木质素代谢中的作用,有助了解采后莲... 详细信息

莲雾（Syzygium samarangenese[Blume]Merrill＆***）果实色泽艳丽,营养丰富,风味独特。但果实皮薄、组织疏松,采收后果实中心的絮状绵软逐渐向外部扩展,严重影响口感和风味。探究转录因子在莲雾果实木质素代谢中的作用,有助了解采后莲雾果实絮状绵软劣变的调控机理,但目前相关研究报道较少。本研究以台湾“蜜风铃”莲雾果实为材料,研究了NO处理对采后莲雾果实生理品质及木质素合成的影响,从莲雾转录组数据库筛选得到20个NO处理后差异表达的木质素合成相关MYB转录因子,进行生物信息学分析,选择在莲雾果实贮藏期间表达差异最大的SsMYB1基因进行克隆和亚细胞定位分析。以阐释MYB转录因子对采后莲雾果实木质素代谢的影响。主要研究结果如下:1.采用10μL/L（处理组）NO熏蒸和0μL/L（对照组）处理采后莲雾果实,结果显示:在采后莲雾果实贮藏期间（0-12 d）,失重率和絮状绵软指数不断上升,果肉硬度逐渐下降,可溶性固形物含量和总糖含量呈现先增长后下降的趋势;木质素含量及木质素合成关键酶PAL、C4H、4CL、CAD和POD的活性呈上升趋势。与对照组相比,NO处理组减缓了果实失重率的增加、絮状绵软组织的扩大、果实硬度的下降、可溶性固形物及总糖含量的降低,抑制了木质素合成及关键酶活性的上升,从而延缓了果实木质化,维持较好的果实品质。2.从课题组前期建立的莲雾转录组数据库中筛选得到20个与木质素合成相关的MYB转录因子。根据物种同源性比对结果对SsMYBs家族成员进行命名,分别为:SsMYB1、SsMYB3、SsMYB4、SsMYB5、SsMYB6、SsMYB10、SsMYB20、SsMYB33、SsMYB39、SsMYB44、SsMYB48、SsMYB54、SsMYB77、SsMYB86、SsMYB108、SsMYB114、SsMYB306、SsMYB308、SsMYB330和SsMYBC1。对这20个MYB转录因子进行生物信息学分析。结果表明,20个莲雾木质素合成相关MYB蛋白由91-591个氨基酸组成,对应蛋白质的相对分子质量为9.98-64.91 k D,理论等电点（p I）为4.92-9.73,多为不稳定亲水性蛋白,无信号肽,亚细胞定位于细胞核上,无明显跨膜结构域,不属于分泌蛋白。经系统发育树分析,莲雾与番樱桃、巨桉、玫瑰木的亲缘性较高。表达分析结果表明,SsMYB1、SsMYB4、SsMYB20、SsMYB54、SsMYB77、SsMYB108、SsMYB114和SsMYB308在贮藏期间表达量总体呈上升趋势,NO处理减缓了该上升趋势,推测这些转录因子可能为转录激活子,促进木质素的合成;而SsMYB3、SsMYB5、SsMYB6、SsMYB10、SsMYB33、SsMYB39、SsMYB44、SsMYB48、SsMYB86、SsMYB306、SsMYB330和SsMYBC1在贮藏期间表达量不断下降,NO处理抑制了该下降趋势,推测它们可能为转录抑制子,延缓木质素的合成。此结果进一步说明所挑选的20个莲雾MYB转录因子对莲雾果实采后木质素合成起着调控作用。3.选择贮藏期间表达差异最为明显的SsMYB1基因进行克隆,其序列全长为1230 bp,并对SsMYB1基因进行亚细胞定位验证。通过融合基因定位法将植物表达载体p CAMBIA1301-35SN与绿色荧光蛋白（GFP）进行融合表达。构建重组表达质粒SsMYB1-EGFP-p CAMBIA1301-35SN,用农杆菌侵染法进行亚细胞定位,通过荧光显微镜观察重组质粒在洋葱表皮细胞中的分布以确定SsMYB1基因在细胞中的定位表达。研究结果表明,SsMYB1基因的重组表达载体定位在细胞核上,说明SsMYB1蛋白属于细胞核蛋白。

关键词：莲雾一氧化氮木质素木质素合成酶 MYB转录因子

NO处理对采后莲雾果实生理品质影响的代谢组学研究

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NO处理对采后莲雾果实生理品质影响的代谢组学研究

作者：李玉娇集美大学

学位级别：硕士

本文选用台湾“黑珍珠”莲雾(Syzygium samarangense *** Perry)果实为实验材料,研究一氧化氮(Nitric oxide,NO)处理对采后莲雾果实生理品质变化及糖代谢的影响,并比较甲醇-水和甲醇-氯仿-水这两种常用于植物代谢产物提取的方法,利用GC-... 详细信息

本文选用台湾“黑珍珠”莲雾(Syzygium samarangense *** Perry)果实为实验材料,研究一氧化氮(Nitric oxide,NO)处理对采后莲雾果实生理品质变化及糖代谢的影响,并比较甲醇-水和甲醇-氯仿-水这两种常用于植物代谢产物提取的方法,利用GC-TOF-MS技术分析莲雾果实代谢产物,从代谢组学的角度对采后莲雾果实低温贮藏下NO处理后代谢产物的变化规律进行研究,寻找与莲雾果实品质劣变相关的标志代谢产物和相关代谢途径,探究外源NO处理对采后莲雾果实生理品质影响的机理。研究结果如下:1.采用了 10μl/L和0μl/L(对照组)NO熏蒸处理采后莲雾果实,研究外源NO处理对采后莲雾果实失重率、硬度、絮状绵软指数、可溶性固形物含量和总糖含量的影响。结果表明:莲雾果实采后贮藏期间,果实失重率和絮状绵软指数逐渐上升,果实硬度逐渐下降,总糖和可溶性固形物含量均先升高后降低。NO处理能抑制果实失重率和絮状绵软指数增加,减缓可溶性固形物含量和总糖含量的降低,抑制莲雾果实生理品质劣变,延缓果实成熟衰老。2.研究10μl/LNO处理对采后莲雾果实糖代谢的影响。结果表明:采后莲雾果实在贮藏过程中,葡萄糖和果糖含量先升高后降低,蔗糖含量逐渐降低,蔗糖的含量低于葡萄糖和果糖。蔗糖代谢相关酶中,酸性转化酶(AI)、中性转化酶(NI)和蔗糖合成酶(SS)分解方向酶活性升高会催化莲雾果实中蔗糖的分解,加快果实的衰老。NO处理能抑制莲雾果实AI、NI和SS分解方向酶活性,减缓果实中蔗糖转化,提高SPS和SS合成方向的酶活性,促进蔗糖的合成,减缓莲雾果实的衰老进程。3.对比甲醇-水提取和甲醇-氯仿-水两种提取溶剂对莲雾果实代谢组学研究的影响,发现甲醇-水提取更适合用于莲雾果实代谢产物提取。利用GC-TOF-MS技术分别检测NO处理组莲雾和对照组莲雾果实在贮藏第0、4、8和12天4个贮藏时间点的代谢产物,研究采后莲雾果实成熟衰老过程中代谢产物的变化,筛选差异代谢产物,寻找与莲雾果实成熟衰老相关的代谢产物和代谢途径。结果表明:对照组在贮藏过程中的代谢产物鉴定出52个显著差异的代谢物,NO处理组鉴定出26个,NO处理组与对照组果实对比,共发现40个差异代谢产物,说明NO处理能减少莲雾果实贮藏过程中代谢产物的变化。对差异代谢产物代谢途径途径分析,共显著富集了 24个代谢通路,其中精氨酸和脯氨酸代谢、乙醛酸和二羧酸代谢、柠檬酸循环(TCA循环)等代谢途经富集显著程度较高。参与代谢通路的柠檬酸、脯氨酸、N-乙酰丙氨酸、甘氨酸、木糖、葡萄糖、亮氨酸、尿素、蛋氨酸、硬脂酸、黄嘌呤核苷等14个差异代谢物质可能是与采后莲雾果实品质劣变相关的关键代谢物质。

关键词：莲雾 NO 生理品质蔗糖代谢植物代谢组学

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莲雾对遮荫和氯吡硫磷处理的生理响应研究

莲雾对遮荫和氯吡硫磷处理的生理响应研究

作者：魏冬华南农业大学

学位级别：硕士

莲雾(Syzygium samarangense)是桃金娘科常绿果树,因为独特的口感和较高的营养价值深受消费者喜爱。生产上常使用产期调节来提高莲雾的市场竞争力,遮荫和药剂催花是产期调节的关键技术,但遮荫对莲雾生长发育的影响仍有待深入研究,遮荫... 详细信息

莲雾(Syzygium samarangense)是桃金娘科常绿果树,因为独特的口感和较高的营养价值深受消费者喜爱。生产上常使用产期调节来提高莲雾的市场竞争力,遮荫和药剂催花是产期调节的关键技术,但遮荫对莲雾生长发育的影响仍有待深入研究,遮荫对莲雾光合特性的影响和药剂催花对莲雾的产生的伤害作用也未见相关报道。本试验以‘印度红’莲雾为试验材料,分两部分进行试验:(1)于2017年3月和2017年4月用不同进行药剂的催花处理,统计成花率和整株花穗数,分析不同药剂的催花效果;2017年4月喷施氯吡硫磷,进行氯吡硫磷对莲雾抗氧化系统的影响的研究;(2)2017年9月进行70%遮荫处理,定期统计新梢抽生率和新梢长度,并定期测定叶片的净光合速率、环境温度和叶片温度、气孔导度、蒸腾速率、胞间二氧化碳浓度,研究遮荫对莲雾营养生长以及对莲雾光合特性的影响。主要研究结果如下:(1)氯吡硫磷为乐斯本药剂催花的有效催花成分。(2)氯吡硫磷在催花过程中对‘印度红’莲雾产生药害,喷施氯吡硫磷后莲雾叶片中超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性增强,抗坏血酸(AsA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、可溶性蛋白含量上升。(3)用70%遮荫率的遮阳网对‘印度红’莲雾进行遮荫处理显著减少了莲雾新梢的长度和抽生率;遮荫对不同末梢状态的莲雾新梢率和新梢长度的影响不同。(4)用70%遮荫率的遮阳网遮荫能在一定范围内控制‘印度红’莲雾植株的环境温度和叶片温度;70%遮荫使莲雾植株的光合有效辐射减少,抑制了莲雾叶片蒸腾速率和净光合速率,并且减小叶片气孔导度、降低胞间二氧化碳浓度。

关键词：莲雾遮荫光合特性抗氧化系统

芸苔素和植物油混合喷施对低温下荔枝和莲雾光合作用影响

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中国南方果树 2023年第6期52卷 76-84页

作者：张晓婷庄赟董家辉易晨歆周碧燕欧阳建忠华南农业大学园艺学院广州510642 农业农村部华南地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室广州510642 广州市从化区华隆荔枝产业研究院广州510925

探讨芸苔素和植物油混合处理对低温胁迫下荔枝和莲雾叶片光合系统的影响,从而为生产上制订荔枝和莲雾抗寒性相关措施提供参考,对华南农业大学园艺学院试验园9年生“糯米糍”“井岗红糯”荔枝植株于低温胁迫前(2021年12月24日)分别喷施2 ... 详细信息

探讨芸苔素和植物油混合处理对低温胁迫下荔枝和莲雾叶片光合系统的影响,从而为生产上制订荔枝和莲雾抗寒性相关措施提供参考,对华南农业大学园艺学院试验园9年生“糯米糍”“井岗红糯”荔枝植株于低温胁迫前(2021年12月24日)分别喷施2 mg/L芸苔素+植物油150倍液、2 mg/L芸苔素+植物油300倍液,以分别喷施2 mg/L芸苔素、清水为对照,在低温胁迫前(2021年12月24日)和低温胁迫后(2022年1月1日)分别测定各处理叶片PSⅡ最大光化学量子产量(Fv/Fm)。然后对同一试验园“糯米糍”“怀枝”荔枝,“黑糖芭比”“印度红”莲雾分别于低温胁迫前(2022年2月17日)喷施2 mg/L芸苔素+植物油150倍液,以喷施清水为对照,在低温胁迫后(2022年2月25日)及气温回升后(2022年3月5日)测定各处理叶片Fv/Fm、相对电导率、脯氨酸含量和光合作用参数等,并调查叶片数量。结果表明,芸苔素+植物油混合处理的植株叶片Fv/Fm在低温胁迫后(2022年2月25日)均较高,荔枝叶片卷曲程度较低,莲雾叶片脱落数量较少,该处理植株叶片受低温伤害较对照(清水)轻。同时,在气温回升后(2022年3月5日),芸苔素+植物油150倍液处理的植株叶片的Fv/Fm、脯氨酸含量、净光合速率、蒸腾速率和气孔导度均高于对照(清水),相对电导率、胞间CO_(2)浓度显著低于对照(清水)。说明2 mg/L芸苔素+植物油150倍液处理可以有效维持或提升荔枝和莲雾植物叶片光合作用,从而提高其抗寒性。

关键词：荔枝莲雾植物油乳剂芸苔素光合作用

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香芹酚包合物对莲雾采后保鲜效果的研究

食品工业 2016年第7期37卷 47-50页

作者：杨波王卉孙宏元薛长风琼州学院食品科学与工程系三亚572022

莲雾在采后贮藏期间易腐烂变质,试验将香芹酚环糊精包合物应用于莲雾包装中,研究不同量的包合物对莲雾在贮藏过程中的微生物总数和品质的影响。结果表明,香芹酚包合物对莲雾微生物生长有抑制作用,约0.5 kg的莲雾果实在贮藏12 d后,包合... 详细信息

莲雾在采后贮藏期间易腐烂变质,试验将香芹酚环糊精包合物应用于莲雾包装中,研究不同量的包合物对莲雾在贮藏过程中的微生物总数和品质的影响。结果表明,香芹酚包合物对莲雾微生物生长有抑制作用,约0.5 kg的莲雾果实在贮藏12 d后,包合物组的菌落总数都处于10-6数量级内,且包合物量越多,菌落总数的上升幅度越小;0.5g包合物对莲雾保鲜效果最好,该组的失重率比对照组降低了4.3%,并且在减少莲雾可溶性固含量的损失,维持较高的过氧化氢酶的活性和总酚含量方面表现明显,而1 g包合物会对莲雾产生一定的药害,导致莲雾品质下降。适量的香芹酚包合物对莲雾有较好的防腐保鲜效果。

关键词：莲雾香芹酚包合物保鲜

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设施栽培与露地栽培对莲雾品质及环境的影响

广东农业科学 2012年第18期39卷 50-52,57页

作者：杨小锋李劲松杨沐黄植杨光华曹明三亚市南繁科学技术研究院/海南省热带设施农业工程技术研究中心海南三亚572000

以黑金刚莲雾品种为试验材料,采用设施、露地栽培模式,对莲雾的果实质量、品质、裂果率、病虫害发生及环境因子进行比较研究。结果表明:较之露地栽培模式,设施栽培显著提高了果实质量,降低了裂果率,同时改善了果实品质,防止了害虫侵入,... 详细信息

以黑金刚莲雾品种为试验材料,采用设施、露地栽培模式,对莲雾的果实质量、品质、裂果率、病虫害发生及环境因子进行比较研究。结果表明:较之露地栽培模式,设施栽培显著提高了果实质量,降低了裂果率,同时改善了果实品质,防止了害虫侵入,减少了藻斑病和果腐病的发生,调节了设施温度、相对湿度和光环境,促进了莲雾植株生长。这对优化莲雾的丰产优质高效生产模式具有重要意义。

关键词：莲雾设施栽培露地栽培

HPLC测定采后莲雾果实中可溶性糖含量及在贮藏期的变化

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食品与机械 2012年第6期28卷 103-105页

作者：陈静吴光斌陈发河集美大学生物工程学院福建厦门361021

建立高效液相色谱法测定台湾"黑珍珠"莲雾果实中的果糖、蔗糖和葡萄糖等可溶性糖含量的方法,并测定采后贮期莲雾果实中可溶性糖含量的变化。色谱条件:采用Waters Carbohydrate柱(4.0μm,4.6mm×250mm),流动相为乙腈/水=90/10(V/V),流速1... 详细信息

建立高效液相色谱法测定台湾"黑珍珠"莲雾果实中的果糖、蔗糖和葡萄糖等可溶性糖含量的方法,并测定采后贮期莲雾果实中可溶性糖含量的变化。色谱条件:采用Waters Carbohydrate柱(4.0μm,4.6mm×250mm),流动相为乙腈/水=90/10(V/V),流速1.5mL/min,柱温45℃。结果表明:利用该法进行色谱分析,各组分能达到较好的分离,在0.625～20mg/mL的糖质量浓度范围内呈现良好的线性关系,相关系数在0.999 8(n=6)以上,3种糖的加标回收率为99.05%～106.39%;精密度试验表明,各组分峰面积RSD为2.55%～3.98%(n=6)。该方法具有较高的灵敏度与精密度,可用于测定采后莲雾果实中的可溶性糖含量及贮藏期间可溶性糖的变化。

关键词：高效液相色谱莲雾可溶性糖贮藏

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不同防寒措施对莲雾抗寒性的影响

中国南方果树 2019年第5期48卷 24-27页

作者：章希娟许玲魏秀清陈志峰余东许家辉福建省农业科学院果树研究所

以6年生'紫红'莲雾为试材,比较了喷施水杨酸50 mg/L+壳聚糖1 000 mg/L混配剂,喷施海藻肥1 000倍液+磷肥750倍液混配剂,覆盖遮阳网,覆盖塑料大棚等4种防寒措施在田间自然降温过程中对莲雾抗寒性的影响。结果表明,4种田间防寒措施能显著... 详细信息

以6年生'紫红'莲雾为试材,比较了喷施水杨酸50 mg/L+壳聚糖1 000 mg/L混配剂,喷施海藻肥1 000倍液+磷肥750倍液混配剂,覆盖遮阳网,覆盖塑料大棚等4种防寒措施在田间自然降温过程中对莲雾抗寒性的影响。结果表明,4种田间防寒措施能显著降低莲雾在低温胁迫下的MDA积累,增加脯氨酸和可溶性糖含量;覆盖遮阳网和塑料大棚在降低MDA含量上优于化学防寒,化学防寒则在增加细胞保护性物质(脯氨酸)上效果较好。应用在露地栽培的3种防寒措施未明显提高保护酶系统活性;覆盖塑料大棚处理的叶片SOD活性显著高于对照,CAT、POD活性显著低于露地上的处理。

关键词：莲雾防寒抗寒性