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荷那龙罗非鱼ghrelin cDNA的克隆及表达特征

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华中农业大学学报 2010年第6期29卷 752-757页

作者：高风英王欢卢迈新叶星黄樟翰朱华平杨丽萍中国水产科学研究院珠江水产研究所广州510380 广东海洋大学水产学院湛江524025

以荷那龙罗非鱼胃组织中提取的总RNA为模板,采用RT-PCR方法克隆出荷那龙罗非鱼ghrelin前体基因的cDNA全序列。所获得的ghrelin cDNA总长为833 bp,包括97 bp的5′非编码区,412 bp的3′非编码区和324 bp的开放阅读框,编码107个氨基酸残基... 详细信息

以荷那龙罗非鱼胃组织中提取的总RNA为模板,采用RT-PCR方法克隆出荷那龙罗非鱼ghrelin前体基因的cDNA全序列。所获得的ghrelin cDNA总长为833 bp,包括97 bp的5′非编码区,412 bp的3′非编码区和324 bp的开放阅读框,编码107个氨基酸残基。核苷酸序列同源性分析显示,荷那龙罗非鱼ghrelin与莫桑比克罗非鱼和尼罗罗非鱼ghrelin序列的相似性达99.0%以上。采用半定量RT-PCR方法检测雌、雄荷那龙罗非鱼胃、肌肉和垂体等多个组织中ghrelin基因的表达,结果显示,荷那龙罗非鱼ghrelin基因有广泛的组织分布,ghrelin基因在雌、雄鱼胃中的表达量均最高,在其他组织的表达量存在雌雄个体差异。雌鱼肌肉中ghrelin基因的表达量明显高于雄鱼,是雄鱼的132倍。试验鱼饥饿4周后,采用荧光定量RT-PCR方法检测胃中ghrelin基因表达量变化,结果表明:饥饿组较对照组ghrelin mRNA表达量有增加,饥饿组个体中ghrelin基因表达量最高的个体的表达量比对照组中表达量最低的个体增加了47.3倍。

关键词：荷那龙罗非鱼 ghrelin cDNA克隆组织表达饥饿调控

荷那龙罗非鱼、橙色莫桑比克罗非鱼及其杂交F1呼吸耗氧率的初步研究

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水利渔业 2006年第4期26卷 14-15,20页

作者：杨淞卢迈新黄樟翰高风英中国水产科学研究院珠江水产研究所

用呼吸室法对荷那龙罗非鱼、橙色莫桑比克罗非鱼及其杂交F1的呼吸耗氧率、窒息点进行了试验。试验结果表明：①水温为16～32℃时，平均体重为10，40～116．28g的荷那龙罗非鱼的耗氧率在0．07～0．6mg/g·h，平均体重为18．98～102．53g... 详细信息

用呼吸室法对荷那龙罗非鱼、橙色莫桑比克罗非鱼及其杂交F1的呼吸耗氧率、窒息点进行了试验。试验结果表明：①水温为16～32℃时，平均体重为10，40～116．28g的荷那龙罗非鱼的耗氧率在0．07～0．6mg/g·h，平均体重为18．98～102．53g的橙色莫桑比克罗非鱼的耗氧率范围是0．06～0．43mg/g·h，平均体重2．24～133．82g的杂交F1莫荷鱼的耗氧率范围是0．06～0．65mg/g·h；3种试验鱼的耗氧率随着温度的升高而增加；耗氧率与鱼体规格呈负相关。②3种实验鱼的耗氧率均为白天高于夜间。③水温24℃时，3种试验鱼的溶氧临界窒息点分别是：荷那龙罗非鱼0．33～0．55mg＊L，橙色莫桑比克罗非鱼0．24～0．31mg／L，莫荷鱼为0．38～0．43mg／L。

关键词：荷那龙罗非鱼橙色莫桑比克罗非鱼杂交F1 耗氧率窒息点

荷那龙罗非鱼和莫桑比克罗非鱼3种同工酶的分析

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大连水产学院学报 2006年第2期21卷 122-126页

作者：杨淞黄樟翰叶星卢迈新中国水产科学研究院珠江水产研究所

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳法分析了酯酶(EST)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)3种同工酶在荷那龙罗非鱼O reochrom is hornorum和莫桑比克罗非鱼O.m ossam bicus肝脏、心脏、肌肉、脑和肾脏5种器官组织中的表达情况。结果表明... 详细信息

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳法分析了酯酶(EST)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)3种同工酶在荷那龙罗非鱼O reochrom is hornorum和莫桑比克罗非鱼O.m ossam bicus肝脏、心脏、肌肉、脑和肾脏5种器官组织中的表达情况。结果表明,两种罗非鱼的这3种同工酶均具有明显的组织特异性。EST在两种罗非鱼的肝脏中表达最强,带型最复杂;EST还有种的特异性,如EST-7和EST-8仅分别存在于莫桑比克罗非鱼的心脏和脑器官中,可作为鉴别两种罗非鱼的标记;两种鱼的EST同工酶还具有多态现象。SOD和LDH在两种罗非鱼的酶谱表型、活性等方面非常相似。SOD在肌肉组织中的酶带条数最多,且多数酶带的表达量较高,而LDH在脑、肾脏中表达丰富。同工酶分析结果反映了两种罗非鱼具有较近的亲缘关系,是种间杂交的基础;同时说明两种罗非鱼含有供选择的等位基因,可用于良种选育。

关键词：荷那龙罗非鱼莫桑比克罗非鱼同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳

橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼的AFLP分析

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中国海洋大学学报（自然科学版） 2006年第6期36卷 937-940,980页

作者：杨淞叶星卢迈新黄樟翰白俊杰中国水产科学研究院珠江水产研究所

运用AFLP分子标记技术检测了橙色莫桑比克罗非鱼(Oreochromis mossambicus)和荷那龙罗非鱼(Oreochromishornorum)的种群遗传多样性。提取2种鱼的基因组DNA,经EcoRⅠ和MseⅠ限制性内切酶酶切并加接头,从16对选扩引物组合中选出3对扩增结... 详细信息

运用AFLP分子标记技术检测了橙色莫桑比克罗非鱼(Oreochromis mossambicus)和荷那龙罗非鱼(Oreochromishornorum)的种群遗传多样性。提取2种鱼的基因组DNA,经EcoRⅠ和MseⅠ限制性内切酶酶切并加接头,从16对选扩引物组合中选出3对扩增结果较好的引物进行PCR扩增。扩增产物经PAGE胶电泳、银染,检测其多态性。3对引物在2种罗非鱼的40个个体中共扩增出94条带,其中多态性条带76条,占总扩增条带的80.9%,2个群体的多态性条带比例分别为71.6%和52.4%。根据Nei氏(1978)统计分析得出橙色莫桑比克罗非鱼种群内遗传相似系数为0.765,荷那龙罗非鱼的为0.821,表明2个罗非鱼种群均具有较高的遗传多样性,橙色莫桑比克罗非鱼种群内遗传多样性相对更高些。2种罗非鱼的种间遗传距离为0.279,推测该杂交组合可能具有杂种优势。

关键词：橙色奠桑比克罗非鱼荷那龙罗非鱼 AFLP 遗传多样性

荷那龙罗非鱼两种GHSR基因的克隆与序列分析

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广东海洋大学学报 2011年第4期31卷 6-12页

作者：高风英王欢叶星卢迈新黄樟翰朱华平中国水产科学研究院珠江水产研究所广东广州510380 广东海洋大学水产学院广东湛江524025

用RT-PCR和RACE方法,从荷那龙罗非鱼(Oreochromis hornorum)垂体中克隆到生长激素促分泌素受体(GHSR)cDNA全序列。荷那龙罗非鱼GHSR基因具有GHSR-1a与GHSR-1b两个高度保守cDNA序列。GHSR-1a序列全长1 646 bp,包括225 bp的5′非编码区,266 bp的3′非编码区和1 155 bp的开放阅读框,编码384个氨基酸残基,具有7个跨膜结构域结构(transmembrane domains,TM);GHSR-1b序列全长1 877 bp,包括225 bp的5′非编码区,755 bp的3′非编码区和897 bp的开放阅读框,编码298个氨基酸残基,只具有前5个TM,在第6个TM的第4个氨基酸处开始缺失。将GHSR cDNA序列与基因组序列比较发现,这两种cDNA转录本来自同一个基因的不同变体。

关键词：荷那龙罗非鱼生长激素促分泌素受体(GHSR) 基因克隆基因序列

低温胁迫对荷那龙罗非鱼脂肪酸组成与含量的影响

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低温胁迫对荷那龙罗非鱼脂肪酸组成与含量的影响

作者：葛仲显广东海洋大学

学位级别：硕士

本论文以荷那龙罗非鱼为研究对象,采用不同的低温胁迫方法（不同低温胁迫、骤降低温胁迫）处理肥满度差异显著的两组实验对象,通过比较肌肉组成、形态学指标以及肠、肝胰脏、肌肉和脂肪组织的脂肪酸组成和含量的变化,分析低温胁迫对荷... 详细信息

本论文以荷那龙罗非鱼为研究对象,采用不同的低温胁迫方法（不同低温胁迫、骤降低温胁迫）处理肥满度差异显著的两组实验对象,通过比较肌肉组成、形态学指标以及肠、肝胰脏、肌肉和脂肪组织的脂肪酸组成和含量的变化,分析低温胁迫对荷那龙罗非鱼的影响。 1不同低温胁迫对荷那龙罗非鱼脂肪酸组成与含量的影响在室内循环水养殖系统内,肥满度差异显著的两组实验对象以水温1℃/天的速率从暂养水温25℃降至实验水温25℃、20℃、18℃、16℃、14℃后,持续养殖50d,结果表明: 肝体指数、脏体指数和肥满度都随着受试时间的延长而明显下降。随着低温处理时间的延长,鱼体水分含量显著上升,而粗脂肪含量显著下降,粗蛋白没有明显的变化。肥满度不同的两组鱼,各组织间脂肪酸组成和含量差异显著,同一组织脂肪酸组成也略有差异。脂肪酸组成方面:肥满度高的鱼体肌肉中含有更多的饱和脂肪酸（SFA）和单不饱和脂肪酸（MUFA）,而多不饱和脂肪酸（PUFA）较少。各组织中含量最高的脂肪酸有棕榈酸、油酸、亚油酸、亚麻酸,含有的重要多不饱和脂肪酸有亚麻酸、二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA）。这些脂肪酸含量在各组织间存在明显差异,特别是DHA含量从3.21%到10.42%。∑n-3/∑n-6在不同取样组织间差异显著,由高到低顺序依次是脂肪组织（3.09）、肠（2.54）、肝胰脏（1.66）、肌肉（1.25）。SFA在肠组织中的含量最高,其次是肌肉组织, MUFA在内脏脂肪组织中含量最高,而PUFA在肌肉组织中含量最高。肌肉、肝胰脏、肠及脂肪组织中SFA的含量分别是41.72±4.69%、39.38±6.58%、45.83±5.72%、32.51±1.81%;MUFA的含量分别是17.65±4.84%、29.77±6.49%、27.49±2.97%、37.89±4.69%;PUFA的含量分别是30.45±5.20%、22.99±4.05%、17.42±2.94%、20.14±2.89%。实验期间脂肪酸含量方面:肥满度不同的两组对象肌肉和脂肪组织的SFA和MUFA含量都随受试时间的延长而下降,PUFA含量随受试时间的延长而上升。两组肥满度不同的鱼体肌肉中SFA和MUFA含量均随着受试时间的延长而下降,两组肥满度不同的鱼体脂肪组织中SFA和MUFA含量随着受试时间的延长而下降。低肥满度实验对象的变化趋势更加明显。 2骤降温度对荷那龙罗非鱼脂肪酸组成与含量的影响在室内循环水养殖系统内,将实验鱼从25℃养殖水体中直接放入25℃、16℃、13℃三个预先设定的养殖水体中,取样时间分别是0h、6h、12h、24h、48h。结果表明:肝体指数、脏体指数及肥满度和肌肉组成在实验期间没有发生明显的变化;各组织的脂肪酸组成也没有发生明显的变化。各组织脂肪酸的含量无统一的变化规律,其中,肝胰脏脂肪酸含量变化最大。在对低温胁迫的适应能力方面,低肥满度的实验组对骤降温度的适应能力更好。

关键词：荷那龙罗非鱼低温胁迫脂肪酸组成与含量

低温胁迫对荷那龙罗非鱼血液生理生化指标的影响

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低温胁迫对荷那龙罗非鱼血液生理生化指标的影响

作者：陈智广东海洋大学

学位级别：硕士

本文在室内可控环境下确定了荷那龙罗非鱼的半致死低温,研究了低温胁迫对荷那龙罗非鱼行为、形态学指标和血液生理生化指标的影响;同时,在温度骤降的条件下,比较了不同肥满度荷那龙罗非鱼低温耐受力的差异,并初步探讨了荷那龙罗非鱼的... 详细信息

本文在室内可控环境下确定了荷那龙罗非鱼的半致死低温,研究了低温胁迫对荷那龙罗非鱼行为、形态学指标和血液生理生化指标的影响;同时,在温度骤降的条件下,比较了不同肥满度荷那龙罗非鱼低温耐受力的差异,并初步探讨了荷那龙罗非鱼的低温致死原因。 1.荷那龙罗非鱼的半致死低温的确定实验选取90尾体格健壮、平均体重105g的荷那龙罗非鱼为研究对象,随机分为3个平行组,每组30尾。以1℃/24h的速率从25℃开始降温直至荷那龙罗非鱼全部死亡,应用probit方法确定荷那龙罗非鱼的半致死低温。研究结果表明,荷那龙罗非鱼的半致死低温为10.78℃,低温死亡范围为13.7℃～8.6℃。 2.低温胁迫对荷那龙罗非鱼行为、形态学指标和血液生理生化指标的影响选取肥满度差异显著的两组荷那龙罗非鱼为研究对象,每组分别设置25℃、20℃、18℃、16℃、14℃5个温度梯度,每个梯度分为3个平行组,其中25℃为对照组。每组30尾实验鱼(不同肥满度实验鱼体重分别为113g和104g)。除对照组外,其它各组均从25℃开始以1℃/24h的速率降到相应的温度并维持此胁迫温度饲养50天。期间记录实验鱼摄食、游泳等行为变化;同时,每10天取样一次,测定实验鱼形态学及血液生理生化指标。研究结果如下: 随着温度的降低,荷那龙罗非鱼摄食减少、游动速度减慢,呼吸频率减小,对外界刺激的反应减弱;当温度低于16°C时实验鱼停止摄食;温度达到14°C时,随着胁迫时间延长实验鱼开始死亡。14°C胁迫时,高低肥满度实验鱼分别在在第31天和第22天全部死亡。低温胁迫期间,肥瘦荷那龙罗非鱼的肥满度、躯体肥满度、脂肪体系数、肝体系数和脏体系数呈现明显下降的趋势,其中以肝体系数下降幅度最大。荷那龙罗非鱼的红细胞、血红蛋白、白细胞和淋巴细胞随温度的降低而减少,并在不同的低温胁迫期间呈现波动变化。经30天胁迫实验后,各温度处理组实验鱼红细胞、血红蛋白、红细胞压积、白细胞和淋巴细胞均显著下降(p﹤0.05);此外,除16°C处理组的低肥满度实验鱼外,其它各组实验鱼的血液生理指标在实验结束时均恢复到初始水平。低温胁迫期间,实验鱼血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶含量呈现波动变化的规律。在20°C胁迫条件下两种酶含量逐渐下降,并在实验结束时显著低于初始水平(p﹤0.05);16°C、18°C时,两种酶含量在胁迫中期显著上升(p﹤0.05),而在胁迫后期逐渐下降并恢复到初始水平;而在14°C胁迫期间,两种酶含量持续上升,并在实验结束时显著高于对照组水平(p﹤0.05)。血清肌酸激酶方面,14°C胁迫期间,两组实验鱼酶含量均显著高于对照组水平(p﹤0.05);16°C时,低肥满度组实验鱼血清肌酸激酶含量呈现先上升后下降的趋势,而高肥满度组实验鱼酶含量显著上升(p﹤0.05),但胁迫后期没有下降恢复,且始终显著高于对照组水平(p﹤0.05);在18°C及20°C条件下,实验鱼血清肌酸激酶含量在胁迫前期显著上升(p﹤0.05),胁迫中后期逐渐降低恢复。除对照组外,各低温胁迫组实验鱼血清乳酸脱氢酶含量均在胁迫前10天显著上升(p﹤0.05),实验后期逐渐降低恢复,值得注意的是,14°C胁迫期间实验鱼血清乳酸脱氢酶含量峰值明显高于其它各实验组水平。实验开始前10天,20°C、18°C和16°C胁迫组实验鱼的血糖含量下降明显但不显著(p﹥0.05),而10至50天血糖含量基本稳定在同一水平上;14°C时,高肥满度实验鱼血糖含量分别在第10天和第30天时出现浓度峰值,而低肥满度实验鱼血糖含量在胁迫期间持续下降。血清总蛋白和白蛋白含量在20°C和18°C胁迫期间变化不明显,而在16°C和14°C胁迫期间呈现明显的下降趋势。血清总胆红素浓度在14°C胁迫期间显著上升(p﹤0.05),而其它各实验组呈现显著上升后下降恢复的趋势。各实验组鱼体血清总胆固醇和甘油三酯含量在胁迫期间不断下降,其中以14°C胁迫组下降最为明显。血清K浓度在各低温胁迫期间变化不明显;血清Na、Cl、Ca浓度在14°C胁迫期间显著(p﹤0.05)下降,而在其他温度胁迫期间变化不明显。 3.不同肥满度荷那龙罗非鱼对骤降低温耐受力的比较选取120尾肥满度差异显著的两组荷那龙罗非鱼为研究对象,平均体重分别为125g和115g。实验设置16℃、14℃、13℃、12℃共4个温度梯度,将在20℃水体中驯养的肥满度差异显著的两组实验鱼直接放入各温度梯度的水族箱中胁迫72 h,通过比较实验鱼在各温度胁迫下的T50值(死亡率达到50%时的胁迫时间)确定不同肥满度荷那龙罗非鱼对骤降低温耐受力的差异。研究结果如下: 16℃胁迫期间实验鱼没有出现死亡;在14℃、13℃和12℃胁迫条件下,低肥满度实验鱼的T50值明显高于高肥满度实验鱼;对不同肥满度实验鱼在不同低温胁迫条件下的

关键词：荷那龙罗非鱼低温胁迫半致死低温形态学指标血液生理生化指标低温耐受力

橙色莫桑比克罗非鱼(Oreochromis mossambicus)和荷那龙罗非鱼(O·hornorum)的选育效果评价

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南方水产 2008年第3期4卷 1-6页

作者：朱华平卢迈新黄樟翰高风英中国水产科学研究院珠江水产研究所广东广州510380

以橙色莫桑比克罗非鱼(Oreochromis mossambicus)和荷那龙罗非鱼(***)为基础群体,分别对其进行选育,并对产生的选育系F4代的选育效果进行了评价。经过4代的选育,橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼的日增重率分别比对照系提高了27.96%和3... 详细信息

以橙色莫桑比克罗非鱼(Oreochromis mossambicus)和荷那龙罗非鱼(***)为基础群体,分别对其进行选育,并对产生的选育系F4代的选育效果进行了评价。经过4代的选育,橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼的日增重率分别比对照系提高了27.96%和36.73%,差异显著(P罗非鱼的平均体重都比对照系增加2倍以上,其杂交子代的雄性率达到了99.4%。试验结果表明,橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼的选育效果明显,F4代的生长性能有了显著提高,个体之间的生长速度趋于一致;也说明这2种罗非鱼F代仍具有一定的选育潜力,对其继续进行选育是切实可行的。

关键词：橙色莫桑比克罗非鱼荷那龙罗非鱼选择育种生长速度选育效应

不同强度的低温胁迫对荷那龙罗非鱼肌肉脂肪酸变化的影响

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甘肃畜牧兽医 2015年第12期45卷 33-36页

作者：葛仲显陈彦君陈刚张健东甘肃省庆阳市水产工作站甘肃庆阳745000

实验以荷那龙罗非鱼(Oreochromis hornorum)为研究对象,在室内控温循环水族箱内,缓慢降温试验将荷那龙罗非鱼从暂养的25℃,按照1℃/天速度,分别降到25℃、20℃、18℃、16℃、14℃、13℃、12℃几个实验温度组,开始定期取样,取背侧肌来分... 详细信息

实验以荷那龙罗非鱼(Oreochromis hornorum)为研究对象,在室内控温循环水族箱内,缓慢降温试验将荷那龙罗非鱼从暂养的25℃,按照1℃/天速度,分别降到25℃、20℃、18℃、16℃、14℃、13℃、12℃几个实验温度组,开始定期取样,取背侧肌来分析低温胁迫对实验对象造成的影响。急速降温试验在25℃暂养后,直接放入到25℃、16℃、13℃三个温度组进行快速降温的低温胁迫实验,同样取背侧肌样来观察对荷那龙罗非鱼造成的影响。结果发现:在不同强度的低温胁迫下,实验对象的肌肉脂肪酸变化规律不一致。在缓慢降温的实验条件下,高肥满度的实验对象,存活率高;在快速降温的实验条件下,低肥满度的实验对象表现出更高的适应能力。

关键词：荷那龙罗非鱼低温胁迫气相色谱